探討低離子強度鹽溶液在輸血相容性檢測的應用和影響

劉丹妮

（四川省簡陽市人民醫(yī)院輸血科，四川 簡陽 641400）

輸血是將血液或血液的某種成分輸給患者的一種補充治療，可治療許多疾病，是搶救危重患者的一種重要手段。遠在1667年人類就開始嘗試輸血治療，但直到1900年Landsteiner發(fā)現ABO血型系統(tǒng)，才為常規(guī)血型鑒定方法的建立奠定了基礎[1]。在輸血前做供血者與受血者的血型鑒定、不規(guī)則抗體篩查、直（間）接抗人球蛋白實驗和交叉配血實驗，目的在于能有效降低臨床輸血的高風險型性和增高其有效性。微柱凝膠法屬于免疫學檢驗法范疇。近些年國內已運用起來，我院也在使用當中。由于影響實驗結果的因素繁多，加低離子強度鹽溶液或者加生理鹽水也是影響因素之一。我科就此問題展開探討。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將我院2019年8月1日-9月9日收集的血型鑒定、不規(guī)則抗體篩查、間接抗人球蛋白試驗、交叉配血等3012例標本作為討論對象，受血者標本為輸血前3天內收集。

1.2 方法 輸血相容性檢測儀由美國強生公司提供；微柱凝膠卡由美國強生公司提供，包括血型鑒定卡和IgG檢驗卡；低離子強度鹽溶液由英國奧森多臨床診斷有限責任公司提供；A1BO試劑紅細胞懸液和不規(guī)則抗體篩查細胞由上海血液生物有限責任公司提供；生理鹽水由四川科倫藥業(yè)股份有限公司提供。將2-3 mL EDTA-K2抗凝血置于中佳低速離心機3000 r/5 min分離血漿；將收集的標本用NS配制成3%-5%的紅細胞懸液。血型鑒定時，將3%-5%紅細胞懸液10 μL加入血型正定型試劑卡1-4孔，將3%-5%的試劑細胞10 μL和病人血漿40 μL加入血型反定型試劑卡5-6孔；其他實驗時，將40 μL血漿和3-5%的各試劑細胞加入IgG檢驗卡中；以上兩種檢測再分別不加和加低離子強度鹽溶液50 μL，記錄兩種方法的結果統(tǒng)計記錄。

1.3 統(tǒng)計學方法 兩種實驗中產生的數據，通過SPSS 16.0統(tǒng)計學軟件進行比較，計數資料采用發(fā)生率進行比較，以%表示，檢驗方式為χ2，當結果顯示P＜0.05時，證明組間差距顯著，具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

在所有血液樣本中，血型鑒定時，加NS的實驗中有3例表現出正反定型不一致，陽性率為0.10%，加入低離子強度鹽溶液的實驗中，有33例表現正反定型不一致，陽性率為1.10%。做不規(guī)則抗體篩查試驗時，加NS的實驗中有4例表現為陽性反應，陽性率為0.13%，加入低離子強度鹽溶液的實驗中，有42例表現為陽性反應，陽性率為1.39%。在直（間）接抗人球蛋白實驗中，加入NS的實驗中有5例表現為陽性反應，陽性率為1.00%，加入低離子強度鹽溶液的實驗中有17例表現為陽性反應，陽性率有3.40%。在交叉配血實驗中，加入NS實驗中主次側陽性反應的分別有2、47例，主次側陰性反應的有367例；加入低離子強度鹽溶液實驗中主次側分別陽性的有6、68例，主次側陰性反應的有342例。組間差異顯著，具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

3 討論

低離子強度鹽溶液的成分由葡萄糖、氯化鈉、抗凝劑、抗菌藥和防腐劑等組成，因低離子強度鹽溶液的離子強度可有效降低介子的離子強度，減少紅細胞附近的電子云，為實驗尋找有效的離子強度，提高抗原抗體與抗體之間存在的引力，使抗原抗體之間的反應更加強烈，從而產生凝集作用。相比NS法，提高了檢測結果的準確性，降低了病人的輸血風險。之所以低離子強度鹽溶液陽性率更高，和病人的紅細胞被自身抗體致敏，導致直接抗人球蛋白試驗陽性有關；或者存在不規(guī)則抗體[3]或者一些常見疾病也有可能導致，如：多發(fā)性骨髓瘤、PNH、MDS、自身免疫性溶血性疾病等等。

綜上可見，低離子強度鹽溶液在輸血相容性檢測的應用之廣，影響之大，遠遠優(yōu)于NS試驗。糾其優(yōu)勢如下：（1）使用低離子強度鹽溶液，能增強抗原抗體的結合，縮短孵育時間，提升試驗效率。（2）提高不規(guī)則抗體的檢出率，尤其是弱抗體或者低濃度抗體的檢出率，提升患者輸血安全性。（3）提升交叉配血試驗[3]的敏感性和準確性，結果可靠穩(wěn)定。（4）在新生兒血型鑒定、新生兒溶血病實驗等方面也有很好效果。在實際的臨床輸血過程中，影響因素繁多且無法規(guī)避。我們應該嚴格按照SOP和試劑說明書操作、判定結果、保存試劑，保證實驗結果的準確性和可靠性，同時運用多種方法復核試驗結果，盡量將風險降至最低。