PCR技術(shù)在兒科支原體肺炎診斷中的應(yīng)用

楊俠

（河北省唐山市遷西縣計(jì)劃生育技術(shù)服務(wù)站，河北 唐山 064300）

肺炎支原體是小兒肺炎的主要原因，也是非典型肺炎的主要病原體。MP肺炎作為非典型肺炎的一種，可導(dǎo)致多種并發(fā)癥，且無(wú)主要癥狀，給鑒別診斷帶來(lái)極大困難。因此，MP肺炎的早期診斷和治療，應(yīng)重點(diǎn)引起醫(yī)務(wù)工作者的重視。隨著技術(shù)的發(fā)展更新，近年來(lái)多種多樣的檢驗(yàn)方法出現(xiàn)在我們的視野，如分離培養(yǎng)法等各種方法。目前PCR技術(shù)檢測(cè)MP DNA已趨近成熟。我們對(duì)836例肺炎患兒采用咽拭子標(biāo)本法進(jìn)行MP DNA檢測(cè)，同時(shí)用間接血凝實(shí)驗(yàn)（IHA）檢測(cè)血清抗MP-IgM。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院836例門(mén)診肺炎患兒，年齡分布如下：1-2歲233例，2-3歲212例，3-4歲225例，4歲以上166例。其中，400例為男性，436例為女性。正常對(duì)照組為300例。

1.2 方法

1.2.1 PCR 設(shè)置陰性組、陽(yáng)性組兩組對(duì)照組。操作嚴(yán)格依照說(shuō)明書(shū)指示。實(shí)驗(yàn)中在紫外透射反射儀下觀察擴(kuò)增產(chǎn)物電泳后反應(yīng)，以144 bp處出現(xiàn)橙黃色帶或標(biāo)本擴(kuò)增帶與陽(yáng)性對(duì)照擴(kuò)增帶在同一水平位置判斷為陽(yáng)性。反之則為陰性。記錄兩組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1.2.2 IHA法 滴度≥1:32判斷為陽(yáng)性。

2 結(jié)果

2.1 正常對(duì)照組 300例健康嬰幼兒中5例血清抗MP-IgM結(jié)果為陽(yáng)性，陽(yáng)性率2.5%。50例血清抗MP-IgM陰性患者取咽拭子痰液樣本測(cè)MP DNA，結(jié)果亦均為陰性。

2.2 檢測(cè)結(jié)果 見(jiàn)表1。

2.3 陽(yáng)性病例相關(guān)資料

2.3.1 一般資料 共選取43例，其中男性20例，女性23例。同時(shí)，22例來(lái)自城市，其他來(lái)自農(nóng)村。在PCR法MPDNA陽(yáng)性和抗MP-IgM陽(yáng)性者均診斷為MP肺炎，占同期肺炎住院病例的5.1%。其中4歲以上15例，占1.8%；2-3歲的占比3.35%，為28例；1-2歲的占比1.4%，為12例。

2.3.2 起病時(shí)間與檢測(cè)結(jié)果關(guān)系 研究發(fā)現(xiàn)：PCR法能測(cè)定1周內(nèi)起病的病例，且效果顯著。

2.3.3 病程與預(yù)后 本組病例預(yù)后良好，平均輸液天數(shù)為10d，僅5例治療周期時(shí)間超過(guò)2周以上。

表1 PCR法MP DNA與IHA血清抗MP-IgM結(jié)果對(duì)比

3 討論

隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)的迅速發(fā)展，二胎政策的全面開(kāi)放，嬰幼兒的增多為無(wú)數(shù)家庭帶去了歡樂(lè)，但同時(shí)帶來(lái)的龐大醫(yī)療壓力也不可忽視。近年來(lái)，兒童疾病感染數(shù)量不斷增加，在這之中，肺炎支原體是學(xué)齡兒童呼吸道感染的重要病原體之一，而且危害較大，嚴(yán)重威脅嬰幼兒的健康。對(duì)于此類(lèi)疾病，能夠盡早進(jìn)行診斷和治療是醫(yī)務(wù)工作者義不容辭的使命。但目前，限于技術(shù)的普及和局限，支原體肺炎未能得到早且有效的治療。

MP的培養(yǎng)過(guò)程缺點(diǎn)極多，性?xún)r(jià)比低。IHA法檢測(cè)抗體雖方法簡(jiǎn)便，但敏感性不夠，在臨床上應(yīng)用領(lǐng)域終究有限。以上種種問(wèn)題不能得到有效解決，以致其作為感染的早期診斷不夠使人滿(mǎn)意。在此之際，我們發(fā)現(xiàn)PCR技術(shù)具有強(qiáng)大的擴(kuò)增能力，有靈敏度高，特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。國(guó)內(nèi)外大量資料表明，利用PCR技術(shù)對(duì)MP DNA進(jìn)行檢測(cè)是MP感染的早期實(shí)驗(yàn)診斷的重要手段。

通過(guò)本文的研究發(fā)現(xiàn)PCR技術(shù)確實(shí)是一種早期診斷的有效檢測(cè)方法，同時(shí)陽(yáng)性發(fā)現(xiàn)的時(shí)間差也向我們提示對(duì)于感染病程超過(guò)一周的患兒PCR并不是唯一選擇，但是病程一周內(nèi)的幼兒，PCR技術(shù)是最佳選擇。同時(shí)，對(duì)于幼小嬰兒和免疫力低下的患兒，由于抗體不足，PCR法應(yīng)為首選最佳。本研究發(fā)現(xiàn)本市兒童支原體肺炎的感染狀況，占小兒肺炎的31.7%，而發(fā)病年齡趨向于嬰幼兒，3歲以下高達(dá)84%，需要得到重視和有效控制。

研究中通過(guò)對(duì)結(jié)果分析，我們認(rèn)為兩種方法同時(shí)使用檢測(cè)精度更高，同時(shí)在健康幼兒的對(duì)照組中，MP的陽(yáng)性率也高達(dá)2.5%，表明健康兒童中也不乏有隱性感染的患兒。以上問(wèn)題，仍需我們繼續(xù)進(jìn)行研究、探索。