miRNAs及其靶基因在子宮內(nèi)膜容受性中的作用

梁曉 馬天仲

摘要：子宮內(nèi)膜容受性（ER）是指子宮內(nèi)膜接受胚胎的能力，即允許受精卵定位、黏附、侵入并使內(nèi)膜間質(zhì)發(fā)生改變從而植入子宮內(nèi)膜的一種能力。子宮內(nèi)膜的“種植窗”期也稱為容受期，需要由黃體分泌的雌、孕激素的支持，同時(shí)也受多種基因、蛋白質(zhì)、細(xì)胞因子和粘附分子的影響，其中miRNA及其靶基因?qū)ψ訉m內(nèi)膜容受性的具有一定的調(diào)節(jié)作用。miRNAs在女性生殖系統(tǒng)疾病中的作用是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)，如子宮內(nèi)膜異位癥、輸卵管積水、多囊卵巢綜合征、子宮內(nèi)膜癌等疾病中都存在miRNAs的差異化表達(dá)。miRNAs及其靶基因在子宮內(nèi)膜容受性中的作用也引起學(xué)者的重視，多項(xiàng)研究表明，子宮內(nèi)膜容受性缺陷者存在miRNAs及其靶基因的差異表達(dá)，本文將對(duì)miRNAs及其靶基因在子宮內(nèi)膜容受性中的研究作一綜述。

關(guān)鍵詞：子宮內(nèi)膜容受性;微小RNA;子宮內(nèi)膜

中圖分類號(hào)：R711.74? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.02.008

文章編號(hào)：1006-1959（2020）02-0025-06

Abstract：Endometrial receptivity （ER） refers to the ability of the endometrium to accept embryos， that is， the ability to allow the fertilized egg to locate， adhere， invade， and change the endometrial interstitial material to implant the endometrium. The "implant window" period of the endometrium is also called the receptive period. It needs the support of estrogen and progesterone secreted by the corpus luteum.Among them， miRNA and its target genes have a certain regulatory effect on endometrial receptivity.The role of miRNAs in female reproductive system diseases is currently the focus of research. Differential expression of miRNAs exists in diseases such as endometriosis， hydrosalpinx， polycystic ovary syndrome， and endometrial cancer.The role of miRNAs and their target genes in endometrial receptivity has also attracted scholars' attention. A number of studies have shown that miRNAs and their target genes are differentially expressed in patients with endometrial receptive defects.This article reviews the research on miRNAs and its target genes in endometrial receptivity.

Key words：Endometrial receptivity;microRNA;Endometrium

容受性的子宮內(nèi)膜在胚胎植入中發(fā)揮著極其重要的作用。有研究表明[1]，2/3的反復(fù)種植失敗的是由于子宮內(nèi)膜容受性不足引起的。近年來(lái)，子宮內(nèi)膜容受性的研究越來(lái)越備受關(guān)注，關(guān)于微小RNA （miRNAs）在子宮內(nèi)膜容受性中的作用研究更是引起了生殖臨床工作者的注意，miRNAs是一類可以在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)因子，通過(guò)多種途徑影響著子宮內(nèi)膜的容受性。miRNAs在子宮內(nèi)膜容受性中的重要作用不能被忽視，深入研究miRNAs與子宮內(nèi)膜容受性的相互作用機(jī)制將為生殖臨床工作者創(chuàng)造更多檢測(cè)子宮內(nèi)膜容受性的手段，找到治療子宮內(nèi)膜容受性不足的方法，為廣大的不孕患者帶來(lái)福音。本文主要對(duì)微小RNA及其靶基因在子宮內(nèi)膜容受性的研究作一綜述，旨在為相關(guān)的科研及臨床工作者提供參考。

1子宮內(nèi)膜容受性

子宮內(nèi)膜容受性是指子宮內(nèi)膜接受胚胎的能力，即允許受精卵定位、黏附、侵入并使內(nèi)膜間質(zhì)發(fā)生改變從而植入子宮內(nèi)膜的一種能力。子宮內(nèi)膜容受性有一定的時(shí)間限制，這段時(shí)間被稱為“種植窗”期（WOI）?！胺N植窗”期也稱為容受期，一般出現(xiàn)在排卵后的6～8 d或受精后的5～7 d，需要由黃體分泌的雌、孕激素的支持，同時(shí)也受多種基因、蛋白質(zhì)、細(xì)胞因子和粘附分子的影響，是胚泡黏附并植入容受性子宮內(nèi)膜的重要時(shí)間段[2]。胚胎植入與種植窗口開(kāi)放的同步化，是著床成功的必要條件。2/3的反復(fù)種植失敗的是由于子宮內(nèi)膜容受性不足引起，因此良好的子宮內(nèi)膜容受性是成功的胚胎植入必備條件[1]。

大量研究表明，子宮內(nèi)膜容受性和多個(gè)基因（如同源框基因A10、同源框基因C8、半乳糖凝集素-3、單外顯子基因叉頭框 L2、人類與果蠅 ems的同源結(jié)構(gòu)域基因Emx2等）、蛋白（如IV型膠原蛋白、妊娠相關(guān)蛋白、雌激素受體、孕激素受體、骨橋蛋白、整合素等）、細(xì)胞因子（如LIF 、IGF1、白細(xì)胞介素Ⅰ、集落刺激因子Ⅰ、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子等）、卵巢甾體激素等有關(guān)。

miRNA是一種非編碼RNA，高度保守，長(zhǎng)度約 18～22 核苷酸，通過(guò)靶向mRNA進(jìn)行切割或轉(zhuǎn)錄抑制來(lái)調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄后水平的基因表達(dá)。miRNA廣泛存在于細(xì)胞和組織中，參與多種生物過(guò)程。已有研究表明miRNA的調(diào)節(jié)與生殖障礙有關(guān)，如多囊卵巢綜合征、子宮內(nèi)膜異位癥、子宮內(nèi)膜息肉、輸卵管積水等。

2 miRNA及其靶基因與子宮內(nèi)膜容受性

2.1 miRNA-223與LIF? 白血病抑制因子（LIF）是屬于白細(xì)胞介素-6（IL-6）超家族的一員，是一種分泌性的糖蛋白，可通過(guò)多種途徑調(diào)節(jié)各種細(xì)胞的增值、分化和表型以調(diào)節(jié)各種重要的生命活動(dòng)。LIF可由子宮內(nèi)膜細(xì)胞分泌并與多種生殖系統(tǒng)疾病的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，如多囊卵巢綜合癥、反復(fù)種植失敗、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)、原發(fā)性不孕等。近年來(lái)，多項(xiàng)研究表明[3，4]，LIF mRNA在子宮內(nèi)膜細(xì)胞中的表達(dá)隨月經(jīng)周期的變化而變化，在分泌中晚期的表達(dá)量明顯高于增值期，與容受期時(shí)間一致。LIF在原發(fā)性不孕及反復(fù)種植失敗患者的種植期子宮內(nèi)膜上低表達(dá)[5，6]，也有研究表明LIF在復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者的子宮內(nèi)膜上低表達(dá)[7]。這些研究結(jié)果均提示LIF與子宮內(nèi)膜容受性有著緊密的聯(lián)系。miR-223定位在 X 染色體 q12 上，受多個(gè)轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控并可靶向調(diào)控多個(gè)基因，參與細(xì)胞周期、細(xì)胞增殖、凋亡、侵襲、遷移、轉(zhuǎn)移等生命活動(dòng)。胡丹[8]利用基因芯片分析了著床窗口期子宮內(nèi)膜的miRNAs表達(dá)譜，發(fā)現(xiàn)miR-223表達(dá)顯著下調(diào)，隨后黃凱[9]結(jié)合在線服務(wù)器MMIA和Talbi等獲得的著床前后mRNA的表達(dá)譜構(gòu)建了著床窗期miRNA調(diào)控胚胎著床的生物信息學(xué)模型并預(yù)測(cè)了LIF為miR-223的靶基因。在后續(xù)的實(shí)驗(yàn)中，黃凱[10]發(fā)現(xiàn)了miRNA-223可能通過(guò)負(fù)向調(diào)控LIF的表達(dá)進(jìn)而控制胚胎的著床，miRNA-223可直接作用于LIF并下調(diào)其蛋白表達(dá)，破壞子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞胞飲突的形成，使子宮內(nèi)膜容受性受損，從而抑制胚胎植入。近期的研究[11，12]發(fā)現(xiàn)，地塞米松可通過(guò)抑制ERK1/2-mTOR途徑，上調(diào)miRNA223-3p的表達(dá)和下調(diào)LIF的表達(dá)，從而降低了子宮內(nèi)膜容受性，而弗可的松在這方面的作用剛好相反。以上研究表明miR-223與LIF之間存在著緊密的聯(lián)系并在子宮內(nèi)膜容受性的調(diào)控中發(fā)揮著重要的作用，其具體的相互作用機(jī)制仍需要進(jìn)一步研究。

2.2 miR-449a與LGR4? miR-449a在多種腫瘤如卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、前列腺癌中低表達(dá)，具有抑制腫瘤細(xì)胞增殖并促進(jìn)凋亡的作用，并且與腫瘤的預(yù)后息息相關(guān)。有研究表明[13]，miR-449可調(diào)節(jié)子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞的VEGF并促進(jìn)其增殖，有助于調(diào)節(jié)子宮內(nèi)膜容受性的發(fā)展。Song Y等[14]的研究表明，與接受前子宮內(nèi)膜相比，miRNA-449a是在接受性子宮內(nèi)膜上差異表達(dá)最明顯的microRNA。G蛋白偶聯(lián)受體4（LGR4）屬于GPCR家族，又名GPR48，富含亮氨酸重復(fù)序列，在生殖系統(tǒng)的發(fā)育、子宮內(nèi)膜蛻膜化、胚胎著床等生命活動(dòng)中發(fā)揮著重要的作用。An X等[15]應(yīng)用TargetScan預(yù)測(cè)LGR4為miR-449a的靶基因之一，并且miR-449a負(fù)向調(diào)控LGR4的表達(dá)，miR-449a在接受性子宮內(nèi)膜中高表達(dá)，調(diào)節(jié)接受性子宮內(nèi)膜細(xì)胞的程序性死亡，誘導(dǎo)內(nèi)膜蛻膜化，增強(qiáng)子宮內(nèi)膜容受性。說(shuō)明miRNA-449a與子宮內(nèi)膜容受性密切相關(guān)，miR-449與LGR4的相互作用機(jī)制仍需進(jìn)一步探究。

2.3 miR-182與HOXA10? miR-182是miR-183家族的一員，定位于7號(hào)染色體上，與細(xì)胞的增殖、凋亡、侵襲及遷移等密切相關(guān)。近年來(lái)，miR-182在婦科腫瘤中的研究越來(lái)越受歡迎。許多研究表明，miR-182在宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌等腫瘤組織中差異表達(dá)，起著抑癌基因或癌基因的作用，這可能與其下游作用的靶基因不同有關(guān)[16，17]。miR-182被證明在子宮內(nèi)膜異位癥、子宮腺肌癥、子癇前期、早產(chǎn)等發(fā)病機(jī)制中起著一定的作用。Song Y 等[14]研究發(fā)現(xiàn)，與接受前子宮內(nèi)膜相比，miR-182在接受期子宮內(nèi)膜中上調(diào)了15.55倍。同源框基因10（HOXA10）在子宮內(nèi)膜容受性的建立中起著重要的作用，與胚胎的黏附、植入等密切相關(guān)。眾所周知，HOXA10在子宮內(nèi)膜異位癥、反復(fù)種植失敗、不孕不育等患者的子宮內(nèi)膜組織中低表達(dá)，均表明其在子宮內(nèi)膜容受性的建立中是不可或缺的。Zhang L等[18]使用microRNA.org預(yù)測(cè)miR-182的靶基因是HOXA10，并發(fā)現(xiàn)在山羊的子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞中，miR-182和HOXA10均差異表達(dá)，并且存在著一定相互調(diào)節(jié)關(guān)系，共同參與子宮內(nèi)膜容受性的形成，具體的機(jī)制仍需進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)。

2.4 miR-30d與子宮內(nèi)膜容受性? 有研究利用高通量測(cè)序技術(shù)比較了人類自然周期子宮內(nèi)膜種植前期和種植窗期miRNA 表達(dá)譜的差異，鑒定了20個(gè)在種植窗期差異表達(dá)的miRNA，其中 miR-30d和 miR-30b在種植窗期分別上調(diào)了6.69倍和2.99倍[19]。Kuokkanen S等[20]利用微陣列技術(shù)分析增生晚期和分泌中期子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞的miRNA 表達(dá)譜變化情況，與增生晚期相比，在分泌中期，mir-30d 和 mir-30b 分別上調(diào)了 2.2和2.6倍。Altm？覿e S等[21]的研究也發(fā)現(xiàn)，在接受性子宮內(nèi)膜上，miRNA-30b和miRNA-30d表達(dá)顯著上調(diào)，而miRNA-494和miRNA-923表達(dá)被下調(diào)。Vilella F等[22]研究發(fā)現(xiàn)，miR-30d在植入窗口期的表達(dá)明顯上調(diào)，并且通過(guò)外泌體并被胚胎內(nèi)化的形式調(diào)控胚胎的黏附，說(shuō)明miR-30b和miR-30d與子宮內(nèi)膜容受性的發(fā)展息息相關(guān)。Moreno-Moya JM等[23]研究發(fā)現(xiàn)，在種植窗口期，相比子宮內(nèi)膜間質(zhì)，miR-30d在上皮中的表達(dá)增加了（2.65±0.69）倍。miR-30d瞬時(shí)轉(zhuǎn)染可誘導(dǎo)H19和N-甲基轉(zhuǎn)移酶（NNMT）等基因的下調(diào)和DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNMT）1蛋白的上調(diào)，DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1蛋白參與DNA甲基化的維持，可能表明誘導(dǎo)了表觀遺傳改變，支持miR-30d的表觀遺傳學(xué)作用。Balaguer N等[24]通過(guò)對(duì)miR-30d WT和KO小鼠的胚胎研究發(fā)現(xiàn)，敲除hnRNPC1會(huì)影響整個(gè)胚胎結(jié)構(gòu)中miR-30d-CY3信號(hào)在植入粘附和侵襲兩個(gè)主要階段中的檢測(cè)。無(wú)論胚胎是WT還是KO，miR-30d的水平都顯著降低。Ishikawa細(xì)胞中hnRNPC1的沉默導(dǎo)致上皮樣細(xì)胞和外來(lái)體中miR-30d水平的急劇下降，表明其在miR-30d生物發(fā)生和轉(zhuǎn)移中的潛在作用。數(shù)據(jù)顯示hnRNPC1可能參與外泌體內(nèi)miR-30d的內(nèi)化，子宮內(nèi)膜上皮樣細(xì)胞中胚胎粘附率的下降與sihnRNPC1瞬時(shí)沉默的證據(jù)表明hnRNPC1可能是植入早期建立的母體-胚胎通訊中的重要參與者。Balaguer N等[25]應(yīng)用miR-30d敲除小鼠模型研究子宮內(nèi)膜容受性標(biāo)志物如環(huán)氧合酶-2（Cox2），LIF，Msh同源框1（Msx1），Msh同源框2（Msx2），雌激素受體（Esr）和假妊娠第0、4和5 d小鼠子宮內(nèi)膜中的孕酮受體（Pgr）的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)母體miR-30d缺乏誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜容受性標(biāo)志物的顯著下調(diào)，在野生型受體中，miR-30d敲除胚胎的植入率比野生型胚胎差。在miR-30d敲除受體中，與野生型胚胎相比，轉(zhuǎn)移敲除胚胎時(shí)觀察到最低的植入率。此外，miR-30d敲除母親的妊娠過(guò)程受到損害，其具有較小的植入部位，較高的再吸收率，以及具有較小冠臀長(zhǎng)度和胎兒/胎盤重量比的胎兒。這些研究表明，miR-30d對(duì)于子宮內(nèi)膜容受性的建立是至關(guān)重要的，盡管有一些作用機(jī)制已被發(fā)現(xiàn)，但因其復(fù)雜的分子機(jī)制及生物學(xué)功能，對(duì)于miR-30d在子宮內(nèi)膜容受性中的研究尚未成熟，仍需更深入的研究。

2.5 miR-27a與IGF-1? miR-27a在胚胎黏附、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)、多囊卵巢綜合征等與子宮內(nèi)膜容受性相關(guān)的疾病中差異表達(dá)。Wang M等[26]研究發(fā)現(xiàn)在多囊卵巢綜合癥患者的卵巢顆粒細(xì)胞中miR-27a表達(dá)上調(diào)，這可能與胰島素抵抗引起的。Wessels JM等[27]發(fā)現(xiàn)miR-27a參與母嬰界面上的母胎對(duì)話并且與早期的妊娠丟失有關(guān)。miR-27a的多態(tài)性與血漿葉酸水平及特發(fā)性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)有密切的關(guān)系[28]。復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者的絨毛及血漿中miR-27a的表達(dá)上調(diào)，可能成為RM的潛在診斷生物標(biāo)志物，為IVF-ET的結(jié)果提供了有希望的預(yù)測(cè)指標(biāo)[29]。胰島素樣生長(zhǎng)因子1（IGF1）與子宮內(nèi)膜容受性的維持息息相關(guān)，參與胚胎的黏附、子宮內(nèi)膜的蛻膜化等的調(diào)節(jié)。IGF1可通過(guò)增加胚泡上的頂端纖連蛋白而增加囊胚的粘附能力從而增加對(duì)子宮內(nèi)膜上皮的附著力[30]。Kang YJ等[31]研究發(fā)現(xiàn)在反復(fù)種植失敗患者子宮內(nèi)膜上，miR-145通過(guò)下調(diào)IGF1的表達(dá)降低胚胎的黏附率。IGF1與子宮內(nèi)膜細(xì)胞的蛻膜化有關(guān)，是蛻膜化的主要標(biāo)志物之一[32，33]。Di Pietor C等[34]發(fā)現(xiàn)，IGF1在慢性子宮內(nèi)膜炎患者的植入窗口期表達(dá)下調(diào)，提示IGF1在子宮內(nèi)膜容受性的受損中起著重要的作用。隨后，Di Pietor C等[35]進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，在慢性子宮內(nèi)膜炎患者子宮內(nèi)膜和血清中，miR-27a均表達(dá)上調(diào)，IGF-1表達(dá)下調(diào)，miR-27a可負(fù)向調(diào)控著IGF-1的表達(dá)，表明miR-27a與IGF1在子宮內(nèi)膜炎的發(fā)病中起著重要的作用，可影響子宮內(nèi)膜容受性的建立和維持，也可能在一定的程度上導(dǎo)致復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生。未來(lái)miR-27a可做為評(píng)價(jià)IVF的子宮內(nèi)膜質(zhì)量的非侵入性指標(biāo)。

2.6 miR-148-3p與HOXC8? miR-148在多種婦產(chǎn)科疾病中存在差異表達(dá)，如在妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥（ICP）患者的胎盤組織中，miR-148可能通過(guò)負(fù)向調(diào)控HLA-G而促進(jìn)ICP的發(fā)病[36]。但是關(guān)于miR-148在子宮內(nèi)膜容受性中的研究較少，Hoxc8是同源盒基因家族的成員，是一種轉(zhuǎn)錄因子，對(duì)于生長(zhǎng)和分化至關(guān)重要，已被認(rèn)為是幾種腫瘤中潛在的致癌基因驅(qū)動(dòng)因子，并參與許多癌癥相關(guān)蛋白的調(diào)控，在卵巢癌、宮頸癌等的發(fā)生發(fā)展中起著一定的作用[37，38]。HOXC8在細(xì)胞黏附中發(fā)揮一定的作用，從功能上來(lái)看，越來(lái)越多的證據(jù)表明Hox基因留給了細(xì)胞粘附分子、Ncam、Cdh11和Opn等可作為Hoxc8的直接靶基因，調(diào)控細(xì)胞間的黏附[39]。Ruthala K等[40]的研究表明Hoxc8通過(guò)直接結(jié)合到啟動(dòng)子區(qū)域下調(diào)Mgl1表達(dá)，從而減少細(xì)胞粘附和伴隨的細(xì)胞遷移。張倩[41]研究發(fā)現(xiàn)，miR-148-3p在RIF患者著床期子宮內(nèi)膜組織中表達(dá)顯著上調(diào)，基質(zhì)細(xì)胞中過(guò)表達(dá)的miR-148-3p可與其靶基因HOXC8 3'UTR區(qū)域結(jié)合并降調(diào)HOXC8，抑制基質(zhì)細(xì)胞分化。這些研究表明RIF患者著床期子宮內(nèi)膜組織中顯著上調(diào)的miR-148-3p可能通過(guò)降調(diào)HOXC8基因而抑制基質(zhì)細(xì)胞分化，阻礙蛻膜化進(jìn)程，從而影響胚胎植入，導(dǎo)致胚胎種植失敗的發(fā)生。目前關(guān)于miR-148與HOXC8的相互作用機(jī)制研究甚少，需要在其他影響子宮內(nèi)膜容受性的疾病中對(duì)其進(jìn)一步檢測(cè)研究。

2.7 miR-543與子宮內(nèi)膜容受性? miR-543與宮腔粘連、子宮內(nèi)膜異位癥、子宮內(nèi)膜容受性等婦產(chǎn)科疾病的發(fā)病有關(guān)。嚴(yán)重的宮腔粘連（IUA）可導(dǎo)致子宮內(nèi)膜容受性的受損甚至不孕癥的發(fā)生，Liu X等[42]研究發(fā)現(xiàn)，在嚴(yán)重的IUA患者的子宮內(nèi)膜組織中，miR-543表達(dá)下調(diào)，而其靶基因CDH2（N-鈣黏著蛋白）和COL16A1（膠原16A1）表達(dá)上調(diào)，表明miR-543及其靶基因在嚴(yán)重的宮腔粘連和子宮內(nèi)膜容受性中發(fā)揮著一定的作用，更加具體的作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)。Yang P等[43]研究發(fā)現(xiàn)，在無(wú)病個(gè)體中，與子宮內(nèi)膜增生期相比，miR-543在圍著床期顯著上調(diào)，而子宮內(nèi)膜異位癥患者miR-543的表達(dá)水平顯著降低，特別是在植入期窗口下調(diào)，表明miR-543在胚胎著床過(guò)程中起重要作用，并與子宮內(nèi)膜容受性有關(guān)。miR-543的下調(diào)可能影響胚胎植入，導(dǎo)致子宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)的不孕癥的發(fā)生。

2.8二甲雙胍與miR-491-3p 和miR-1910-3p? 眾所周知，二甲雙胍是治療2型糖尿病的一線藥物，也被證明是無(wú)排卵性多囊卵巢綜合癥的有效治療藥物，起到誘導(dǎo)排卵，升高妊娠率并且降低流產(chǎn)率的作用。二甲雙胍可以改善PCOS患者的子宮內(nèi)膜血管化指數(shù)，從而改善子宮內(nèi)膜的容受性[44，45]。二甲雙胍能夠阻礙雌激素依賴性的子宮內(nèi)膜增生，在肥胖相關(guān)的子宮內(nèi)膜增生和單純性子宮內(nèi)膜增生的治療中其重要作用，對(duì)預(yù)防和治療子宮內(nèi)膜癌這方面可能也起著一定的作用[46，47]。二甲雙胍還可以影響子宮內(nèi)膜細(xì)胞的蛻膜化進(jìn)程，體外實(shí)驗(yàn)證明，二甲雙胍以劑量依賴性方式減少子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的蛻膜化及增值[48]。Dragamestianos? C等[49]的研究表明，二甲雙胍會(huì)延遲PCOS婦女子宮內(nèi)膜腺體的成熟，但不影響其子宮內(nèi)膜容受性相關(guān)標(biāo)志物的表達(dá)，提示二甲雙胍對(duì)PCOS患者的子宮內(nèi)膜的功能有一定的影響。Xiong? F等[50]的研究發(fā)現(xiàn)，二甲雙胍通過(guò)激活p38-MAPK信號(hào)傳導(dǎo)改變多種細(xì)胞因子，如MMP-2，MMP-9的表達(dá)并降低PCOS患者子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞的孕酮受體表達(dá)來(lái)減弱雌二醇（E2）和孕酮（P4）誘導(dǎo)的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞的蛻膜化。Zhai J等[51]應(yīng)用miRDB和Target Scan數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)二甲雙胍治療組（二甲雙胍治療的PCOS患者）和對(duì)照組（非甲雙胍治療的PCOS患者）的子宮內(nèi)膜進(jìn)行差異表達(dá)miRNA的預(yù)測(cè)和篩選，發(fā)現(xiàn)在兩組之間存在40種差異表達(dá)的miRNA。其中，miR-1910-3p和miR-491-3p是2種顯著下調(diào)的miRNA。生物信息學(xué)預(yù)測(cè)表明HOXA10和ITGB3是miR-1910-3p和miR-491-3p的潛在靶基因。二甲雙胍能誘導(dǎo)HOXA10和ITGB3的顯著上調(diào)，并成劑量依賴性。在轉(zhuǎn)染miR-491-3p模擬物的Ishikawa細(xì)胞中，HOXA10和ITGB3在信使RNA（mRNA）和蛋白水平上的表達(dá)均低于對(duì)照組。這表明通過(guò)下調(diào)miR-491-3p和miR-1910-3p的表達(dá)，二甲雙胍可能改善子宮內(nèi)膜容受性，從而增加PCOS女性子宮內(nèi)膜HOXA10和ITGB3的表達(dá)。

2.9 miR-29c與COL4A1? 近年來(lái)，許多的研究發(fā)現(xiàn)miR-29c與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。子宮內(nèi)膜異位癥是婦產(chǎn)科臨床上常見(jiàn)的疾病，常常導(dǎo)致無(wú)法解釋的不孕癥的發(fā)生，這可能與其導(dǎo)致的子宮內(nèi)膜容受性的受損有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)[52，53]，miR-29c在異位子宮內(nèi)膜組織中表達(dá)上調(diào)，并可能通過(guò)靶向膠原蛋白COL1A1和COL1A2或者COL7A1調(diào)控子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展。在Long M等[54]的研究中，miR-29c在異位子宮內(nèi)膜組織中表達(dá)下調(diào)，并可通過(guò)抑制C-Jun的表達(dá)抑制細(xì)胞的增殖和侵襲以及促進(jìn)細(xì)胞凋亡而發(fā)揮其對(duì)子宮內(nèi)膜細(xì)胞的作用。研究表明[55，56]，在狒狒和人的異位子宮內(nèi)膜中，miR-29c表達(dá)增加，計(jì)算機(jī)分析顯示，F(xiàn)K506結(jié)合蛋白4（FKBP4）基因的30-UTR中有一個(gè)miR-29c共有結(jié)合位點(diǎn)，該位點(diǎn)影響胚胎著床和蛻膜化，miR-29c可通過(guò)降低FKBP4的水平導(dǎo)致孕激素反應(yīng)受損，這些結(jié)果表明不孕的子宮內(nèi)膜異位癥婦女的不孕可能至少部分是由于缺乏FKBP4導(dǎo)致的孕激素信號(hào)減少導(dǎo)致的內(nèi)膜蛻膜化缺陷所致。Cai H等[57]進(jìn)一步的研究結(jié)果表明，miR-29c在子宮內(nèi)膜異位癥小鼠的子宮內(nèi)膜組織中表達(dá)下調(diào)，而雌激素受體（ER）和孕激素受體（PR）在小鼠異位子宮內(nèi)膜組織中差異表達(dá)，表明miR-29c可能通過(guò)影響ER和PR的表達(dá)進(jìn)而影響子宮內(nèi)膜異位癥患者內(nèi)膜容受性的建立。膠原蛋白IV是細(xì)胞粘附所必需的，并通過(guò)與細(xì)胞表面受體（主要是整聯(lián)蛋白β1）結(jié)合而發(fā)揮作用[58]。COL4A1是胚胎的黏附[59]、植入點(diǎn)子宮內(nèi)膜的蛻膜化[60，61]所必需的。自然流產(chǎn)的發(fā)生或不明原因的不孕也與蛻膜組織或子宮內(nèi)膜組織中COL4A1的表達(dá)下調(diào)有關(guān)。在Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中，miR-29c的表達(dá)水平下調(diào)，在HEC1A細(xì)胞中抑制miR-29c可增加增殖和Ⅳ型膠原α1鏈表達(dá)，表明COL4A1可能是miR-29c的靶基因之一[62]。Grifths M等[63]研究表明，miR-29c在早期和中期分泌期不育的人子宮內(nèi)膜中表達(dá)升高，并且定位于子宮內(nèi)膜上皮。miR-29c負(fù)向調(diào)節(jié)預(yù)測(cè)的靶基因COL4A1，過(guò)度表達(dá)的miR-29c會(huì)下調(diào)子宮內(nèi)膜上皮中COL4A1的表達(dá)，進(jìn)而損害子宮內(nèi)膜的粘附能力，使子宮內(nèi)膜容受性受損，導(dǎo)致植入失敗和不育。

3總結(jié)

在子宮內(nèi)膜容受性的調(diào)節(jié)中，miRNAs在子宮內(nèi)膜異位癥、早期妊娠丟失、反復(fù)種植失敗、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)及原發(fā)性不孕等患者的子宮內(nèi)膜或血清中差異化表達(dá)，通過(guò)多種途徑在轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)各種靶基因的表達(dá)來(lái)促進(jìn)或減弱子宮內(nèi)膜容受性，影響著胚胎黏附、植入、子宮內(nèi)膜蛻膜化等多種與子宮內(nèi)膜容受性緊密相關(guān)的重要的生命活動(dòng)過(guò)程?；谧訉m內(nèi)膜容受性的建立和維持在成功的胚胎植入和發(fā)育中的重要作用，約2/3的種植失敗的原因源自于子宮內(nèi)膜容受性的受損，而且miRNAs廣泛存在于女性的生殖系統(tǒng)中，這迫切要求臨床加快對(duì)影響子宮內(nèi)膜容受性的miRNAs的研究，深入了解其作用機(jī)制，為受孕困難的患者及相關(guān)的研究工作者提供參考。

參考文獻(xiàn)：

[1]張琦華.分泌期uNK細(xì)胞及其相關(guān)因子高表達(dá)與胚胎反復(fù)種植失敗的相關(guān)性研究[D].鄭州大學(xué)，2017.

[2]蔣亞玲，李冰，邢福祺，等.內(nèi)異癥不孕患者種植窗期子宮內(nèi)膜組織中差異蛋白的表達(dá)及其與子宮內(nèi)膜容受性的關(guān)系[J].中華婦產(chǎn)科雜志，2012，47（5）：324-327.

[3]Hasegawa E，Ito H，Hasegawa F，et al.Expression of leukemia inhibitory factor in the endometrium in abnormal uterine cavities during the implantation window[J].Fertil Steril，2012，97（4）：953-958.

[4]Dimitriadis E，White CA，Jones RL，et al.Cytokines，chemokines and growth factors in endometrium related to implantation[J].Hum Reprod Update，2005，11（6）：613-630.

[5]王原媛，李莉，劉方方.白血病抑制因子及其受體在原發(fā)性不孕癥患者子宮內(nèi)膜中的表達(dá)分析[J].臨床輸血與檢驗(yàn)，2019，21（2）：166-169.

[6]鈕怡超，張婷，童婧.子宮內(nèi)膜容受性標(biāo)志物與反復(fù)種植失敗的相關(guān)性研究[J].中國(guó)計(jì)劃生育和婦產(chǎn)科，2019（7）：12-16.

[7]Fawzy M，AbdelRahman MY，Zidan MH，et al.Humid versus dry incubator：a prospective，randomized， controlled trial[J].Fertil Steril，2017，108（2）：277-283.

[8]胡丹.MicroRNA表達(dá)譜和計(jì)算機(jī)分析人類子宮內(nèi)膜著床窗期基因表達(dá)[D].華中科技大學(xué)，2011.

[9]黃凱.Hsa-miR-223在人類圍著床窗期子宮內(nèi)膜的表達(dá)及調(diào)控機(jī)制[D].華中科技大學(xué)，2013.

[10]黃凱.MicroRNA-223調(diào)控胚胎著床的機(jī)制研究[D].華中科技大學(xué)，2015.

[11]Shariati MBH，Niknafs B，Seghinsara AM，et al.Administration of dexamethasone disrupts endometrial receptivity by alteration of expression of miRNA 223，200a，LIF，Muc1，SGK1，and ENaC via the ERK1/2-mTOR pathway[J].J Cell Physiol，2019，234（11）：19629-19639.

[12]Hesam Shariati MB，Seghinsara AM，Shokrzadeh N，et al.The effect of fludrocortisone on the uterine receptivity partially mediated by ERK1/2-mTOR pathway[J].J Cell Physiol，2019，234（11）：20098-20110.

[13]Liu X，Zhang L，Liu Y，et al.Circ-8073 regulates CEP55 by sponging miR-449a to promote caprine endometrial epithelial cells proliferation via the PI3K/AKT/mTOR pathway[J].Biochim Biophys Acta Mol Cell Res，2018，1865（8）：1130-1147.

[14]Song Y，An X，Zhang L，et al.Identification and profiling of microRNAs in goat endometrium during embryo implantation[J].PLoS One，2015，10（4）：e0122202.

[15]An X，Liu X，Zhang L，et al.MiR-449a regulates caprine endometrial stromal cell apoptosis and endometrial receptivity[J].Sci Rep，2017，7（1）：12248.

[16]Javadi H，Lotfi AS，Hosseinkhani S，et al.The combinational effect of E6/E7 siRNA and anti-miR-182 on apoptosis induction in HPV16-positive cervical cells[J].Artif Cells Nanomed Biotechnol，2018，46（sup2）：727-736.

[17]姚紅梅，孔凡榮，周燁.miR-182在子宮內(nèi)膜癌中表達(dá)及其對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J].東南大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2018（4）：653-659.

[18]Zhang L，Liu XR，Liu JZ，et al.miR-182 selectively targets HOXA10 in goat endometrial epithelium cells in vitro[J].Reprod Domest Anim，2017，52（6）：1081-1092.

[19]Sha AG，Liu JL，Jiang XM，et al.Genome-wide identification of micro-ribonucleic acids associated with human endometrial receptivity in natural and stimulated cycles by deep sequencing[J].Fertil Steril，2011，96（1）：150-155.

[20]Kuokkanen S，Chen B，Ojalvo L，et al.Genomic profiling of microRNAs and messenger RNAs reveals hormonal regulation in microRNA expression in human endometrium[J].Biol Reprod，2010，82（4）：791-801.

[21]Altm？覿e S，Martinez-Conejero JA，Esteban FJ，et al.MicroRNAs miR-30b，miR-30d，and miR-494 regulate human endometrial receptivity[J].Reprod Sci，2013，20（3）：308-317.

[22]Vilella F，Moreno-Moya JM，Balaguer N，et al.Hsa-miR-30d，secreted by the human endometrium， is taken up by the pre-implantation embryo and might modify its transcriptome[J].Development，2015，142（18）：3210-3221.

[23]Moreno-Moya JM，Vilella F，Martínez S，et al.The transcriptomic and proteomic effects of ectopic overexpression of miR-30d in human endometrial epithelial cells[J].Mol Hum Reprod，2014，20（6）：550-566.

[24]Balaguer N，Moreno I，Herrero M，et al.Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein C1 may control miR-30d levels in endometrial exosomes affecting early embryo implantation[J].Mol Hum Reprod，2018，24（8）：411-425.

[25]Balaguer N，Moreno I，Herrero M，et al.MicroRNA-30d deficiency during preconception affects endometrial receptivity by decreasing implantation rates and impairing fetal growth[J].Am J Obstet Gynecol，2019，221（1）：46.e1-46.e16.

[26]Wang M，Sun J，Xu B，et al.Functional Characterization of MicroRNA-27a-3p Expression in Human Polycystic Ovary Syndrome[J].Endocrinology，2018，159（1）：297-309.

[27]Wessels JM，Edwards AK，Khalaj K，et al.The microRNAome of pregnancy：deciphering miRNA networks at the maternal-fetal interface[J].PLoS One，2013，8（11）：e72264.

[28]Rah H，Chung KW，Ko KH，et al.miR-27a and miR-449b polymorphisms associated with a risk of idiopathic recurrent pregnancy loss[J].PLoS One，2017，12（5）：e0177160.

[29]Yang Q，Gu WW，Gu Y，et al.Association of the peripheral blood levels of circulating microRNAs with both recurrent miscarriage and the outcomes of embryo transfer in an in vitro fertilization process[J].J Transl Med，2018，16（1）：186.

[30]Green CJ，F(xiàn)raser ST，Day ML.Insulin-like growth factor 1 increases apical fibronectin in blastocysts to increase blastocyst attachment to endometrial epithelial cells in vitro[J].Hum Reprod，2015，30（2）：284-298.

[31]Kang YJ，Lees M，Matthews LC，et al.MiR-145 suppresses embryo-epithelial juxtacrine communication at implantation by modulating maternal IGF1R[J].J Cell Sci，2015，128（4）：804-814.

[32]Graubner FR，Reichler IM，Rahman NA，et al.Decidualization of the canine uterus： From early until late gestational in vivo morphological observations，and functional characterization of immortalized canine uterine stromal cell lines[J].Reprod Domest Anim，2017（52Suppl2）：137-147.

[33]Kautz E，de Carvalho Papa P，Reichler IM，et al.In vitro decidualisation of canine uterine stromal cells[J].Reprod Biol Endocrinol，2015（13）：85.

[34]Di Pietro C，Cicinelli E，Guglielmino MR，et al.Altered transcriptional regulation of cytokines， growth factors，and apoptotic proteins in the endometrium of infertile women with chronic endometritis[J].Am J Reprod Immunol，2013，69（5）：509-517.

[35]Di Pietro C，Caruso S，Battaglia R，et al.MiR-27a-3p and miR-124-3p，upregulated in endometrium and serum from women affected by Chronic Endometritis，are new potential molecular markers of endometrial receptivity[J].Am J Reprod Immunol，2018，80（3）：e12858.

[36]Zhang X，Yu L，Ding Y.Human leukocyte antigen G and miR-148a are associated with the pathogenesis of intrahepatic cholestasis of pregnancy[J].Exp Ther Med，2014，8（6）：1701-1706.

[37]Shu C，Yan D，Chen C，et al.Metformin exhibits its therapeutic effect in the treatment of pre-eclampsia via modulating the Met/H19/miR-148a-5p/P28 and Met/H19/miR-216-3p/EBI3 signaling pathways[J].Int Immunopharmacol，2019（74）：105693.

[38]Lu S，Liu R，Su M，et al.Overexpression of HOXC8 is Associated With Poor Prognosis in Epithelial Ovarian Cancer[J].Reprod Sci，2016，23（7）：944-954.

[39]Lei H，Juan AH，Kim MS，et al.Identification of a Hoxc8-regulated transcriptional network in mouse embryo fibroblast cells[J].Proc Natl Acad Sci USA，2006，103（27）：10305-10309.

[40]Ruthala K，Gadi J，Lee JY，et al.Hoxc8 downregulates Mgl1 tumor suppressor gene expression and reduces its concomitant function on cell adhesion[J].Mol Cells，2011，32（3）：273-279.

[41]張倩.非編碼RNAs miR-148a-3p、lincARDD1在反復(fù)胚胎種植失敗蛻膜化中的作用及機(jī)制研究[D].山東大學(xué)，2018.

[42]Liu X，Duan H，Zhang HH，et al.Integrated Data Set of microRNAs and mRNAs Involved in Severe Intrauterine Adhesion[J].Reprod Sci，2016，23（10）：1340-1347.

[43]Yang P，Wu Z，Ma C，et al.Endometrial miR-543 Is Downregulated During the Implantation Window in Women With Endometriosis-Related Infertility[J].Reprod Sci，2019，26（7）：900-908.

[44]Mohsen IA，Elkattan E，Nabil H，et al.Effect of metformin treatment on endometrial vascular indices in anovulatory obese/overweight women with polycystic ovarian syndrome using three-dimensional power doppler ultrasonography[J].J Clin Ultrasound，2013，41（5）：275-282.

[45]Palomba S，Russo T，Orio F Jr，et al.Uterine effects of metformin administration in anovulatory women with polycystic ovary syndrome[J].Hum Reprod，2006，21（2）：457-465.

[46]Sharifzadeh F，Aminimoghaddam S，Kashanian M，et al.A comparison between the effects of metformin and megestrol on simple endometrial hyperplasia[J].Gynecol Endocrinol，2017，33（2）：152-155.

[47]Zhang Q，Celestino J，Schmandt R，et al.Chemopreventive effects of metformin on obesity-associated endometrial proliferation[J].Am J Obstet Gynecol，2013，209（1）：24.e1-24.e12.

[48]Jung ML，Renke T，Nowak O，et al.Modulation of the IGF system and proliferation in human endometrial stromal cells by metformin：a dose-dependent effect[J].Arch Gynecol Obstet，2015，292（2）：465-472.

[49]Dragamestianos C，Messini CI，Antonakis PT，et al.The Effect of Metformin on the Endometrium of Women with Polycystic Ovary Syndrome[J].Gynecol Obstet Invest，2019，84（1）：35-44.

[50]Xiong F，Xiao J，Bai Y，et al.Metformin inhibits estradiol and progesterone-induced decidualization of endometrial stromal cells by regulating expression of progesterone receptor， cytokines and matrix metalloproteinases[J].Biomed Pharmacother，2019（109）：1578-1585.

[51]Zhai J，Yao GD，Wang JY，et al.Metformin Regulates Key MicroRNAs to Improve Endometrial Receptivity Through Increasing Implantation Marker Gene Expression in Patients with PCOS Undergoing IVF/ICSI[J].Reprod Sci，2019，26（11）：1439-1448.

[52]Hawkins SM，Creighton CJ，Han DY，et al.Functional microRNA involved in endometriosis[J].Mol Endocrinol，2011，25（5）：821-832.

[53]Ohlsson Teague EM，Van der Hoek KH，Van der Hoek MB，et al.MicroRNA-regulated pathways associated with endometriosis[J].Mol Endocrinol，2009，23（2）：265-275.

[54]Long M，Wan X，La X，et al.miR-29c is downregulated in the ectopic endometrium and exerts its effects on endometrial cell proliferation，apoptosis and invasion by targeting c-Jun[J].Int J Mol Med，2015，35（4）：1119-1125.

[55]Tranguch S，Smith DF，Dey SK.Progesterone receptor requires a co-chaperone for signalling in uterine biology and implantation[J].Reprod Biomed Online，2007：39-48.

[56]Yoo JY，Kim TH，Lee JH，et al.Mig-6 regulates endometrial genes involved in cell cycle and progesterone signaling[J].Biochem Biophys Res Commun，2015，462（4）：409-414.

[57]Cai H，Zhu XX，Li ZF，et al.MicroRNA Dysregulation and Steroid Hormone Receptor Expression in Uterine Tissues of Rats with Endometriosis during the Implantation Window[J].Chin Med J （Engl），2018，131（18）：2193-2204.

[58]Van Agtmael T，Bruckner-Tuderman L.Basement membranes and human disease[J].Cell Tissue Res，2010，339（1）：167-188.

[59]Yang YJ，Cao YJ，Bo SM，et al.Leptin-directed embryo implantation： leptin regulates adhesion and outgrowth of mouse blastocysts and receptivity of endometrial epithelial cells[J].Anim Reprod Sci，2006，92（1-2）：155-167.

[60]Blankenship TN，Given RL.Loss of laminin and type IV collagen in uterine luminal epithelial basement membranes during blastocyst implantation in the mouse[J].Anat Rec，1995，243（1）：27-36.

[61]Jones-Paris CR，Paria S，Berg T，et al.Embryo implantation triggers dynamic spatiotemporal expression of the basement membrane toolkit during uterine reprogramming[J].Matrix Biol，2017（57-58）：347-365.

[62]Van Sinderen M，Griffiths M，Menkhorst E，et al.Restoration of microRNA-29c in type I endometrioid cancer reduced endometrial cancer cell growth[J].Oncol Lett，2019，18（3）：2684-2693.

[63]Griffiths M.miR-29c overexpression and COL4A1 downregulation in infertile human endometrium reduces endometrial epithelial cell adhesive capacity in vitro implying roles in receptivity[J].Sci Rep，2019，9（1）：8644.

收稿日期：2019-11-06;修回日期：2019-11-16

編輯/成森