• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    一測多評(píng)法同時(shí)測定百合固金片中9種成分含量

    2020-04-07 07:04:54陳海燕劉華東李冰覃佩莉
    醫(yī)藥導(dǎo)報(bào) 2020年3期
    關(guān)鍵詞:梓醇毛蕊花哈巴

    陳海燕,劉華東,李冰,覃佩莉

    (1.廣西衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院,南寧 530023;2.廣西白云山盈康藥業(yè)有限公司,南寧 530023)

    百合固金片由玄參、地黃、熟地黃、白芍、百合等10味中藥材按處方工藝加工而成,具有養(yǎng)陰潤肺、化痰止咳功效,主要用于肺腎陰虛、燥咳少痰、痰中帶血、咽干喉痛等癥的治療。現(xiàn)代研究表明,百合固金制劑治療特發(fā)性肺纖維化療效明顯[1],對肺癌具有減輕臨床癥狀、提高化療效果、減輕化療毒副作用、增加化療敏感性、改善生活質(zhì)量等特點(diǎn)[2],該藥聯(lián)合左氧氟沙星治療社區(qū)獲得性肺炎不僅可以改善臨床癥狀,還可降低機(jī)體炎癥反應(yīng)[3];聯(lián)合N-乙酰半胱氨酸能改善慢性阻塞性肺疾病穩(wěn)定期患者臨床癥狀及肺功能[4]。百合固金片收載于《中華人民共和國藥典》2015年版一部[5],標(biāo)準(zhǔn)中僅對佐藥白芍所含芍藥苷的含量進(jìn)行了測定,筆者僅檢索到對該制劑所含芍藥苷進(jìn)行檢測的文獻(xiàn)[6]。單一成分難以有效控制中成藥復(fù)方制劑質(zhì)量均一性,多指標(biāo)評(píng)價(jià)模式已廣泛應(yīng)用于中成藥復(fù)方制劑的質(zhì)量控制,但普通的多指標(biāo)評(píng)價(jià)模式在實(shí)驗(yàn)過程中所用對照品用量大,部分對照品存在不穩(wěn)定、價(jià)格昂貴等因素;一測多評(píng)法(quantitative analysis of multi-components by single-marker,QAMS)利用百合固金片所測各成分間內(nèi)在函數(shù)關(guān)系和比例關(guān)系,建立各成分間的相對校正因子,通過測定一個(gè)易得、價(jià)格低廉成分的對照品實(shí)現(xiàn)多個(gè)成分的同步測定。筆者在本實(shí)驗(yàn)采用一測多評(píng)法,以芍藥苷為參照,建立其與哈巴苷、哈巴俄苷、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黃苯乙醇苷B1、氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷的相對校正因子,同步測定君藥地黃和熟地黃3種成分梓醇、毛蕊花糖苷和焦地黃苯乙醇苷B1,臣藥玄參2種成分哈巴苷和哈巴俄苷,佐藥白芍4種成分氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷和苯甲酰芍藥苷含量,并與外標(biāo)法進(jìn)行對比,較全面地控制百合固金片質(zhì)量,以期為提高百合固金片質(zhì)量控制方法提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

    1 儀器與試藥

    1.1儀器 Agilent 1100型高效液相色譜儀,配備G1314A 可變波長檢測器(美國安捷倫公司),Waters E2695型高效液相色譜儀,配備2998可變波長檢測器(美國Waters公司);色譜柱:Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm) 、Waters Sunfire C18(250 mm×4.6 mm,5 μm) 和Agilent Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);BP211D型電子天平(德國Sartorius公司,感量:0.1 mg);SB52000型超聲波清洗器(寧波新芝生物科技有限公司)。

    1.2試藥 哈巴苷對照品(批號(hào):111729-201707,含量:96.8%)、哈巴俄苷對照品(批號(hào):111730-201709,含量:95.9%)、梓醇對照品(批號(hào):110808-201711,含量:99.6%)、毛蕊花糖苷對照品(批號(hào):111530-201713,含量:92.5%)和芍藥苷對照品(批號(hào):110736-201842,含量:97.4%)均來源于中國食品藥品檢定研究院;焦地黃苯乙醇苷B1對照品(批號(hào):120406-37-3,含量:98.0%)來源于成都普瑞法科技開發(fā)有限公司;氧化芍藥苷對照品(批號(hào):39011-91-1,含量:98.0%)來源于成都曼思特生物科技有限公司;芍藥內(nèi)酯苷對照品(批號(hào):39011-90-0,含量:98.0%)和苯甲酰芍藥苷對照品(批號(hào):38642-49-8,含量:98.0%)來源于上海純優(yōu)生物科技有限公司;乙腈為色譜純,其他試劑為分析純;百合固金片(規(guī)格:每片0.45 g,批號(hào):180102,180301,180402)來源于廣東萬方制藥有限公司。

    2 方法與結(jié)果

    2.1色譜條件 采用Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色譜柱;流動(dòng)相A:乙腈,流動(dòng)相B:0.2%磷酸溶液,梯度洗脫(0~15.0 min,19.0%A;>15.0~24.0 min,19.0%A→25.0%A;>24.0~37.0 min,25.0%A→29.0%A;>37.0~53.0 min,29.0%A→41.0%A;>53.0~60.0 min,41.0%A→19.0%A);0~29.0 min時(shí)在210 nm[5,7-12]波長下檢測哈巴苷、哈巴俄苷和梓醇,29.0~37.0 min在330 nm[10-11]波長下檢測毛蕊花糖苷和焦地黃苯乙醇苷B1,37.0~60.0 min時(shí)在230 nm[5-6,13-16]波長下檢測氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷;流量0.9 mL·min-1;柱溫25 ℃;進(jìn)樣量10 μL。在上述色譜條件下,理論板數(shù)按所測各色譜峰計(jì)均大于3 500,9種成分與相鄰峰分離度均>1.5。

    2.2混合對照品溶液的制備 分別精密稱取哈巴苷、哈巴俄苷、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黃苯乙醇苷B1、氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷對照品適量,用稀乙醇分別制成9種單成分對照品儲(chǔ)備液(哈巴苷0.858 mg·mL-1、哈巴俄苷0.294 mg·mL-1、梓醇3.792 mg·mL-1、毛蕊花糖苷1.936 mg·mL-1、焦地黃苯乙醇苷B10.712 mg·mL-1、氧化芍藥苷0.376 mg·mL-1、芍藥內(nèi)酯苷1.318 mg·mL-1、芍藥苷2.552 mg·mL-1、苯甲酰芍藥苷0.214 mg·mL-1);再依次精密吸取單成分對照品儲(chǔ)備液各適量,用稀乙醇制成每毫升含哈巴苷0.042 9 mg、哈巴俄苷0.014 7 mg、梓醇0.189 6 mg、毛蕊花糖苷0.096 8 mg、焦地黃苯乙醇苷B10.035 6 mg、氧化芍藥苷0.018 8 mg、芍藥內(nèi)酯苷0.065 9 mg、芍藥苷0.127 6 mg、苯甲酰芍藥苷 0.010 7 mg混合對照品溶液。

    2.3百合固金片供試品溶液的制備 取百合固金片適量,除去薄膜衣,研成細(xì)粉,取約2.0 g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入稀乙醇25 mL[5-6],稱定質(zhì)量,SB52000型超聲波清洗器超聲(功率:200 W,頻率:40 kHz)提取30 min,放冷,用稀乙醇補(bǔ)足損失質(zhì)量,搖勻,濾過,續(xù)濾液即得百合固金片供試品溶液。

    2.4陰性樣品溶液的制備 按照《中華人民共和國藥典》2015年版一部百合固金片的處方和制備工藝,分別制備不含地黃和熟地黃的陰性樣品、不含玄參的陰性樣品、不含白芍的陰性樣品,再按照“2.3”項(xiàng)方法分別制備3種陰性樣品溶液。

    2.5專屬性考察 取混合對照品溶液、百合固金片供試品溶液、地黃和熟地黃陰性樣品溶液、玄參陰性樣品溶液和白芍陰性樣品溶液適量,在上述色譜條件下進(jìn)樣測定,記錄色譜圖,見圖1。由圖1可知,百合固金片供試品溶液所測成分哈巴苷、哈巴俄苷、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黃苯乙醇苷B1、氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷色譜峰保留時(shí)間和對照品溶液中所測各成分的保留時(shí)間一致,其他成分對測定無干擾,陰性樣品對測定無干擾。

    2.6線性范圍實(shí)驗(yàn) 分別精密吸取“2.2”項(xiàng)哈巴苷、哈巴俄苷、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黃苯乙醇苷B1、氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷9種單成分對照品儲(chǔ)備液各2.0 mL,置于同一20 mL量瓶,采用稀乙醇稀釋至刻度,搖勻,作為混合標(biāo)液Ⅰ;再精密吸取混合標(biāo)液Ⅰ各適量,依次用稀乙醇稀釋2,4,8,16,20倍,制成混合標(biāo)液Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ。依次精密吸取混合標(biāo)液Ⅵ、Ⅴ、Ⅳ、Ⅲ、Ⅱ和Ⅰ各適量,進(jìn)樣檢測,記錄哈巴苷、哈巴俄苷、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黃苯乙醇苷B1、氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷9種成分色譜峰的峰面積,以哈巴苷、哈巴俄苷、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黃苯乙醇苷B1、氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷質(zhì)量濃度(C)為橫坐標(biāo),峰面積(A)為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得哈巴苷、哈巴俄苷、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黃苯乙醇苷B1、氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷9種單成分的回歸方程,結(jié)果見表1。

    2.7精密度實(shí)驗(yàn) 取“2.2”項(xiàng)混合對照品溶液進(jìn)行測定,連續(xù)進(jìn)樣6次,記錄哈巴苷、哈巴俄苷、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黃苯乙醇苷B1、氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷的峰面積,結(jié)果所測各成分峰面積的RSD分別為0.83%,1.07%,0.51%,0.34%,0.75%,0.91%,0.65%,0.60%和1.18%(n=6)。

    2.8重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 取同一批次百合固金片適量,按照“2.3”項(xiàng)百合固金片供試品溶液制備方法制備供試品溶液6份,進(jìn)樣測定,記錄哈巴苷、哈巴俄苷、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黃苯乙醇苷B1、氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷的峰面積,計(jì)算所測各成分的含量,結(jié)果所測9種成分含量的RSD分別為1.54%,0.71%,0.87%,0.96%,1.39%,1.67%,0.25%,1.06%和0.89%(n=6)。

    2.9穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取同一批次百合固金片的同一份供試品溶液,室溫下放置,在上述色譜條件下0,2,4,8,16,24 h分別進(jìn)樣檢測,記錄哈巴苷、哈巴俄苷、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黃苯乙醇苷B1、氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷的峰面積,結(jié)果百合固金片供試品溶液室溫下24 h內(nèi)穩(wěn)定,所測各成分峰面積的RSD分別為0.77%,1.06%,0.53%,0.61%,0.78%,1.03%,0.62%,0.58%和1.14%(n=6)。

    2.10加樣回收率實(shí)驗(yàn) 取已知含量的同一批次百合固金片6份,研成細(xì)粉,每份約1.0 g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,分別精密加入另行配制的0.639 mg·mL-1哈巴苷對照品溶液、0.198 mg·mL-1哈巴俄苷對照品溶液、2.195 mg·mL-1梓醇對照品溶液、1.317 mg·mL-1毛蕊花糖苷對照品溶液、0.552 mg·mL-1焦地黃苯乙醇苷B1對照品溶液、0.261 mg·mL-1氧化芍藥苷對照品溶液、0.969 mg·mL-1芍藥內(nèi)酯苷對照品溶液、1.937 mg·mL-1芍藥苷對照品溶液和0.141 mg·mL-1苯甲酰芍藥苷對照品溶液各1.0 mL,精密加入稀乙醇16 mL,按照“2.3”項(xiàng)方法制備加樣供試品溶液,依次進(jìn)樣測定,結(jié)果所測成分哈巴苷、哈巴俄苷、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黃苯乙醇苷B1、氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷的平均加樣回收率分別為98.92%,97.96%,99.73%,99.03%,97.78%,97.29%,98.69%,100.12%和96.94%,RSD分別為0.97%,1.30%,1.11%,0.85%,1.25%,1.02%,0.98%,0.78%和1.51%(n=6)。

    A.混合對照品;B.百合固金片供試品;C.玄參陰性樣品;D.地黃熟地黃陰性樣品;E.白芍陰性樣品;1.哈巴苷;2.哈巴俄苷;3.梓醇;4.毛蕊花糖苷;5.焦地黃苯乙醇苷B1;6.氧化芍藥苷;7.芍藥內(nèi)酯苷;8.芍藥苷;9.苯甲酰芍藥苷。

    圖1 5種樣品的HPLC色譜圖

    A.mixed reference substance;B.sample ofBaiheGujinTablet;C.negative sample ofScrophulariaeRadix;D.negative sample ofRehmanniaeRadixandRehmanniaeRadixPraeparata;E.negative sample ofPaeoniaeRadixAlba;1.harpagide; 2.harpagoside;3.catalpol;4.verbascoside;5.jionoside B1;6.oxypaeoniflorin; 7.albiflorin;8.paeoniflorin;9.benzoylpaeoniflorin.

    Fig.1HPLCchromatogramoffivekindsofsample

    表1 百合固金片中9種成分的線性關(guān)系

    Table.1LinearrelationshipofninecomponentsinBaiheGujinTablet

    成分線性方程線性范圍/(μg·mL-1)r哈巴苷A=7.239 1×105C-919.34.29~85.800.999 3哈巴俄苷A=8.991 4×105C+453.01.47~29.400.999 2梓醇A=1.000 6×106C-829.718.96~379.200.999 5毛蕊花糖苷A=1.124 2×106C+317.09.68~193.600.999 3焦地黃苯乙醇苷B1A=6.864 9×105C+724.83.56~71.200.999 1氧化芍藥苷A=1.011 0×106C-350.41.88~37.600.999 6芍藥內(nèi)酯苷A=5.911 9×105C+148.66.59~131.800.999 4芍藥苷A=1.303 4×106C-869.312.76~255.200.999 1苯甲酰芍藥苷A=9.220 5×105C+413.41.07~21.400.999 3

    2.11相對校正因子的計(jì)算 相對校正因子的計(jì)算公式k/s=(CkAs)/(CsAk)(式中C為所測各成分質(zhì)量濃度,A為所測各成分峰面積,k為其他成分,s為參照成分)。精密吸取“2.6”項(xiàng)混合標(biāo)液Ⅵ、Ⅴ、Ⅳ、Ⅲ、Ⅱ和Ⅰ,依法進(jìn)樣檢測,記錄各成分色譜峰峰面積,以芍藥苷為參照,分別計(jì)算哈巴苷、哈巴俄苷、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黃苯乙醇苷B1、氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷和苯甲酰芍藥苷的相對校正因子,結(jié)果見表2。

    2.12待測成分相對校正因子耐用性考察 在Agilent 1100型高效液相色譜儀、Waters E2695型高效液相色譜儀2種高效液相色譜儀上,分別考察本色譜條件在Diamonsil C18(250 mm× 4.6 mm,5 μm)、Waters Sunfire C18(250 mm× 4.6 mm,5 μm)和Agilent Eclipse XDB-C18(250 mm× 4.6 mm,5 μm)3種色譜柱上的相對校正因子值,結(jié)果見表3。

    表2 以芍藥苷為參照的相對校正因子

    表3 不同色譜柱對相對校正因子的影響

    2.13待測成分色譜峰的定位 采用相對保留值法對所測各成分色譜峰進(jìn)行定位,以芍藥苷為參照,考察所測成分哈巴苷、哈巴俄苷、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黃苯乙醇苷B1、氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷和苯甲酰芍藥苷在2種高效液相色譜儀(Agilent 1100型高效液相色譜儀、Waters E2695型高效液相色譜儀)和3種不同品牌色譜柱(Diamonsil C18柱、Waters Sunfire C18柱和Agilent Eclipse XDB-C18柱)條件下與參照成分芍藥苷的相對保留值,結(jié)果見表4。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明2種高效液相色譜儀和不同品牌色譜柱條件下所測成分相對保留值無明顯差異。

    2.14外標(biāo)法與一測多評(píng)法測定結(jié)果比較 取3批百合固金片樣品(批號(hào):180102,180301,180402)適量,按照“2.3”項(xiàng)方法制備供試品溶液,依法進(jìn)樣測定哈巴苷、哈巴俄苷、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黃苯乙醇苷B1、氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷的峰面積,分別采用外標(biāo)法和一測多評(píng)法計(jì)算哈巴苷、哈巴俄苷、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黃苯乙醇苷B1、氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷的含量,結(jié)果見表5。

    3 討論

    3.1指標(biāo)成分的選擇 百合固金片由玄參、地黃、熟地黃、白芍、百合等10味中藥材加工而成,方中地黃、熟地黃滋陰養(yǎng)血、清熱涼血,百合甘苦微寒、滋陰清熱、潤肺止咳,三藥共為君藥;方中玄參咸寒,助二地滋陰壯水,以清虛火,麥冬甘寒,助君藥滋陰清熱、潤肺止咳,共為臣藥;方中當(dāng)歸、白芍養(yǎng)血和血,川貝母潤肺止咳化痰,桔梗載藥上行、清利咽喉、化痰散結(jié),共為佐藥;方中甘草調(diào)和諸藥,為使藥。筆者選取百合固金片君藥地黃和熟地黃所含主要成分梓醇、毛蕊花糖苷和焦地黃苯乙醇苷B1,臣藥玄參所含特征成分哈巴苷和哈巴俄苷,佐藥白芍所含主要成分氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷和苯甲酰芍藥苷為考察指標(biāo),采用QAMS建立百合固金片的含量測定方法,從而更加全面科學(xué)地控制百合固金片的質(zhì)量。

    3.2流動(dòng)相的考察 筆者在本實(shí)驗(yàn)中考察了不同流動(dòng)相體系(甲醇-水、乙腈-水、甲醇-0.1%磷酸溶液[9]、乙腈-0.1%磷酸溶液[5,10,13,15]、乙腈-0.2%磷酸溶液[11,14])對所測定成分哈巴苷、哈巴俄苷、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黃苯乙醇苷B1、氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷峰形、出峰時(shí)間、分離度等指標(biāo)的影響,通過摸索,最終采用乙腈(A)-0.2%磷酸溶液(B)作為流動(dòng)相按照文中的梯度洗脫比例,對百合固金片所含哈巴苷、哈巴俄苷、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黃苯乙醇苷B1、氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷進(jìn)行同時(shí)測定。

    表4 不同色譜柱對相對保留值的影響

    表5 百合固金片中9種成分含量測定結(jié)果

    Table.5ResultsofcontentdeterminationonninecomponentsinBaiheGujinTabletmg·g-1

    批號(hào)芍藥苷外標(biāo)法哈巴苷外標(biāo)法QAMS哈巴俄苷外標(biāo)法QAMS梓醇外標(biāo)法QAMS毛蕊花糖苷外標(biāo)法QAMS1801021.9420.6410.6380.2020.2042.2162.2231.3221.3171803011.7490.6720.6660.2310.2291.9982.0051.1911.1961804022.2220.5500.5540.1740.1762.3202.3131.5181.513批號(hào)焦地黃苯乙醇苷B1外標(biāo)法QAMS氧化芍藥苷外標(biāo)法QAMS芍藥內(nèi)酯苷外標(biāo)法QAMS苯甲酰芍藥苷外標(biāo)法QAMS1801020.5490.5550.2570.2600.9740.9790.1430.1451803010.4690.4720.2910.2940.8790.8830.1230.1201804020.6270.6240.2200.2221.1141.1090.1620.163

    筆者在本實(shí)驗(yàn)建立的QAMS同時(shí)測定百合固金片中哈巴苷、哈巴俄苷、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黃苯乙醇苷B1、氧化芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷的含量,方法便捷、準(zhǔn)確度好、精密度高,可作為該制劑的有效質(zhì)量控制方法。

    猜你喜歡
    梓醇毛蕊花哈巴
    梓醇對IL-1β誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞損傷的保護(hù)機(jī)制研究
    靳叔家的哈巴
    百花園(2022年6期)2022-12-28 04:49:34
    不同因素對地黃毛蕊花糖苷含量的影響*
    梓醇防治骨質(zhì)疏松癥的研究進(jìn)展
    15 個(gè)產(chǎn)地玄參中哈巴苷與哈巴俄苷含量測定
    毛蕊花糖苷的藥理作用及作用機(jī)制研究進(jìn)展
    中成藥(2020年8期)2020-09-15 03:17:50
    地黃單體梓醇促成骨細(xì)胞分化的活性研究*
    哈巴雪山的太陽
    民族音樂(2018年2期)2018-05-26 03:04:34
    梓醇對糖尿病大鼠胰島細(xì)胞Insulin表達(dá)的影響
    毛蕊花苷對遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)小鼠骨骼肌損傷的保護(hù)作用
    丝袜美腿在线中文| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 精品乱码久久久久久99久播| 精品久久久久久久末码| 亚洲第一电影网av| 在线观看免费视频日本深夜| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 极品教师在线免费播放| 国产精品亚洲av一区麻豆| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 日韩欧美国产在线观看| 国产精品1区2区在线观看.| 丁香欧美五月| 51午夜福利影视在线观看| 三级毛片av免费| 亚洲avbb在线观看| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 久久国产乱子伦精品免费另类| 久久久久久大精品| 亚洲人成伊人成综合网2020| 成人永久免费在线观看视频| 美女免费视频网站| 日韩av在线大香蕉| 欧美高清性xxxxhd video| 内射极品少妇av片p| 中文字幕av成人在线电影| 亚州av有码| 久久久久国内视频| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 精品人妻视频免费看| 国产精品爽爽va在线观看网站| 久久久国产成人免费| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 999久久久精品免费观看国产| 国产精品一及| 一本一本综合久久| 国产伦精品一区二区三区四那| 国内精品美女久久久久久| 国产精品一及| 成年人黄色毛片网站| 精品久久久久久成人av| 在线观看免费视频日本深夜| 长腿黑丝高跟| 亚洲欧美日韩高清专用| 少妇的逼水好多| 日韩欧美 国产精品| 亚洲自偷自拍三级| 欧美日韩福利视频一区二区| 在线播放无遮挡| 久久热精品热| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 国产日本99.免费观看| 中文字幕高清在线视频| 亚洲自拍偷在线| 深爱激情五月婷婷| 成人鲁丝片一二三区免费| 在线播放无遮挡| 日本与韩国留学比较| 乱人视频在线观看| 欧美丝袜亚洲另类 | 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 一级毛片久久久久久久久女| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 少妇高潮的动态图| 88av欧美| 少妇人妻精品综合一区二区 | 丰满人妻一区二区三区视频av| 18美女黄网站色大片免费观看| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 亚洲国产精品合色在线| 欧美在线黄色| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 精品日产1卡2卡| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 美女大奶头视频| 51午夜福利影视在线观看| 99久国产av精品| 亚洲欧美日韩东京热| 色噜噜av男人的天堂激情| 91久久精品国产一区二区成人| 日韩欧美在线二视频| 99久久九九国产精品国产免费| 国内揄拍国产精品人妻在线| a在线观看视频网站| 乱码一卡2卡4卡精品| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲片人在线观看| 青草久久国产| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 神马国产精品三级电影在线观看| 亚州av有码| 国产淫片久久久久久久久 | 国产精品一及| 国产麻豆成人av免费视频| 赤兔流量卡办理| 婷婷精品国产亚洲av在线| 乱人视频在线观看| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 亚洲av二区三区四区| 99久久精品热视频| 国产真实乱freesex| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产野战对白在线观看| 免费人成视频x8x8入口观看| 精品久久久久久久久久久久久| 久久香蕉精品热| 亚洲av美国av| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 真人做人爱边吃奶动态| 久久欧美精品欧美久久欧美| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产成人a区在线观看| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 国产亚洲欧美在线一区二区| 色av中文字幕| 亚洲一区二区三区色噜噜| 国产成人福利小说| 老司机福利观看| 国产黄片美女视频| 国产精品一区二区三区四区久久| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 香蕉av资源在线| 欧美成狂野欧美在线观看| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 波多野结衣高清无吗| 极品教师在线免费播放| 午夜久久久久精精品| 日本黄大片高清| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 成人亚洲精品av一区二区| 在线a可以看的网站| 99热只有精品国产| 最新在线观看一区二区三区| 亚洲国产精品合色在线| 少妇的逼好多水| 很黄的视频免费| 天天一区二区日本电影三级| 精品午夜福利在线看| 可以在线观看的亚洲视频| 久久人人精品亚洲av| 日日干狠狠操夜夜爽| 级片在线观看| 波多野结衣高清无吗| 最近中文字幕高清免费大全6 | 啦啦啦韩国在线观看视频| 此物有八面人人有两片| 国产伦人伦偷精品视频| 久久久久久久亚洲中文字幕 | 免费黄网站久久成人精品 | 老司机午夜十八禁免费视频| 一级黄色大片毛片| 欧美午夜高清在线| xxxwww97欧美| 九九在线视频观看精品| 舔av片在线| 色av中文字幕| 欧美+亚洲+日韩+国产| 日本免费a在线| 亚洲美女搞黄在线观看 | 亚洲av五月六月丁香网| 亚洲精品粉嫩美女一区| 老司机福利观看| 欧美三级亚洲精品| 69人妻影院| 乱码一卡2卡4卡精品| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 欧美另类亚洲清纯唯美| 欧美一区二区精品小视频在线| 观看美女的网站| 国产av一区在线观看免费| 国产精品综合久久久久久久免费| 一夜夜www| 级片在线观看| 亚洲国产精品999在线| 欧美在线一区亚洲| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 精品一区二区三区视频在线| 国产精品国产高清国产av| 国产精品一区二区三区四区久久| 中文字幕免费在线视频6| 成人特级黄色片久久久久久久| 久久久久久久午夜电影| 直男gayav资源| 日韩欧美 国产精品| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 久久热精品热| 高清毛片免费观看视频网站| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 麻豆国产97在线/欧美| 久久久国产成人精品二区| 麻豆成人av在线观看| 丰满乱子伦码专区| 最近最新中文字幕大全电影3| 婷婷精品国产亚洲av在线| 中亚洲国语对白在线视频| 国产av麻豆久久久久久久| 亚洲精品日韩av片在线观看| 可以在线观看的亚洲视频| 99久久九九国产精品国产免费| 国产av不卡久久| 欧美中文日本在线观看视频| 午夜福利高清视频| 一边摸一边抽搐一进一小说| 国产在线男女| 亚洲自偷自拍三级| 亚洲不卡免费看| 又粗又爽又猛毛片免费看| 久久久久久久精品吃奶| 亚洲三级黄色毛片| 久久精品国产自在天天线| av女优亚洲男人天堂| 成人国产综合亚洲| 国产三级黄色录像| 十八禁国产超污无遮挡网站| 国产不卡一卡二| 一级作爱视频免费观看| 免费av不卡在线播放| 久久久久久久午夜电影| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 村上凉子中文字幕在线| 精品熟女少妇八av免费久了| 99视频精品全部免费 在线| av在线天堂中文字幕| 中文在线观看免费www的网站| 人人妻人人澡欧美一区二区| 99在线视频只有这里精品首页| 免费看光身美女| 天堂√8在线中文| 精品日产1卡2卡| 国产精品综合久久久久久久免费| 男插女下体视频免费在线播放| 国产成+人综合+亚洲专区| 国产91精品成人一区二区三区| 最新在线观看一区二区三区| 大型黄色视频在线免费观看| 久久午夜亚洲精品久久| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 欧美日韩乱码在线| 赤兔流量卡办理| 国产精品av视频在线免费观看| 三级毛片av免费| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 两个人视频免费观看高清| 99精品在免费线老司机午夜| 久久精品国产清高在天天线| 校园春色视频在线观看| 村上凉子中文字幕在线| 99在线视频只有这里精品首页| 免费无遮挡裸体视频| 国产精品三级大全| 久久久精品大字幕| 丰满的人妻完整版| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 极品教师在线免费播放| 久久久精品大字幕| 国产伦精品一区二区三区视频9| 色播亚洲综合网| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 国产成人福利小说| 午夜精品一区二区三区免费看| avwww免费| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 在线观看午夜福利视频| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 听说在线观看完整版免费高清| 久久国产精品人妻蜜桃| 久久99热这里只有精品18| 夜夜夜夜夜久久久久| 999久久久精品免费观看国产| 欧美在线一区亚洲| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 成人特级av手机在线观看| 国产大屁股一区二区在线视频| 成人三级黄色视频| 夜夜夜夜夜久久久久| 亚洲成人久久性| 精品久久久久久久末码| 看十八女毛片水多多多| 99国产精品一区二区蜜桃av| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 国产色爽女视频免费观看| 少妇被粗大猛烈的视频| 91麻豆av在线| 亚洲成人精品中文字幕电影| 99久久精品国产亚洲精品| 日本黄大片高清| 午夜福利在线观看吧| 国产精品99久久久久久久久| 嫩草影院精品99| 久久久精品大字幕| 88av欧美| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 首页视频小说图片口味搜索| 波多野结衣高清无吗| 1024手机看黄色片| 身体一侧抽搐| 国产亚洲精品久久久com| 亚洲av五月六月丁香网| 91久久精品国产一区二区成人| 亚洲一区二区三区不卡视频| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲人成网站高清观看| 亚洲av美国av| 精品久久久久久久久久免费视频| 亚洲,欧美精品.| 欧美国产日韩亚洲一区| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 老司机午夜福利在线观看视频| 成人国产一区最新在线观看| 熟女人妻精品中文字幕| 欧美一区二区精品小视频在线| 亚洲成av人片免费观看| 国产极品精品免费视频能看的| 毛片一级片免费看久久久久 | 国产精品98久久久久久宅男小说| 99国产精品一区二区蜜桃av| 黄色配什么色好看| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 国产欧美日韩精品亚洲av| 午夜久久久久精精品| 亚洲片人在线观看| 久久精品国产亚洲av天美| 精品久久久久久久久亚洲 | 99国产精品一区二区三区| 亚洲性夜色夜夜综合| 成人一区二区视频在线观看| 哪里可以看免费的av片| 脱女人内裤的视频| 精品久久久久久久久av| 亚洲在线观看片| 香蕉av资源在线| 直男gayav资源| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 少妇熟女aⅴ在线视频| 乱人视频在线观看| 成人永久免费在线观看视频| 一个人免费在线观看电影| 亚洲无线观看免费| 免费大片18禁| 国产精品乱码一区二三区的特点| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 亚洲色图av天堂| 亚洲七黄色美女视频| 欧美乱色亚洲激情| 男女之事视频高清在线观看| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 日韩欧美免费精品| 757午夜福利合集在线观看| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 91九色精品人成在线观看| 久久久久久大精品| 日韩欧美在线乱码| 我要搜黄色片| 国内精品一区二区在线观看| 亚洲黑人精品在线| 精品久久久久久,| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 黄色日韩在线| 嫩草影院入口| 九九在线视频观看精品| 给我免费播放毛片高清在线观看| 国产一级毛片七仙女欲春2| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 亚洲成av人片免费观看| 国产精品一区二区性色av| 午夜福利视频1000在线观看| 亚洲精品在线美女| 精品熟女少妇八av免费久了| 波多野结衣高清无吗| 国内精品久久久久久久电影| 嫩草影视91久久| 国产真实乱freesex| 久久久久久久久久成人| 亚洲自拍偷在线| 女人被狂操c到高潮| 精品久久久久久,| 国产成人欧美在线观看| 少妇被粗大猛烈的视频| www.熟女人妻精品国产| 国产私拍福利视频在线观看| 怎么达到女性高潮| 国产精品三级大全| 国产精品不卡视频一区二区 | 欧美高清成人免费视频www| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 51午夜福利影视在线观看| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 久久久久久久精品吃奶| 欧美区成人在线视频| 午夜福利视频1000在线观看| 麻豆久久精品国产亚洲av| 欧美色视频一区免费| 成人毛片a级毛片在线播放| 国产麻豆成人av免费视频| 男人舔奶头视频| 国产日本99.免费观看| 亚洲美女黄片视频| 亚洲男人的天堂狠狠| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 淫妇啪啪啪对白视频| 欧美精品国产亚洲| 国产探花在线观看一区二区| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲最大成人中文| 97热精品久久久久久| 久久香蕉精品热| 在现免费观看毛片| 此物有八面人人有两片| 精品无人区乱码1区二区| 99国产极品粉嫩在线观看| 又爽又黄无遮挡网站| 精华霜和精华液先用哪个| 亚洲久久久久久中文字幕| 国产欧美日韩一区二区三| 九色国产91popny在线| 久久人人爽人人爽人人片va | 黄片小视频在线播放| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 亚洲激情在线av| 国产色爽女视频免费观看| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 真人做人爱边吃奶动态| 国产黄色小视频在线观看| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 日韩高清综合在线| 成人毛片a级毛片在线播放| 国内精品久久久久久久电影| 欧美+日韩+精品| 国产伦人伦偷精品视频| 婷婷精品国产亚洲av| 久久久久国内视频| 成人毛片a级毛片在线播放| 一级黄片播放器| 搡老岳熟女国产| 麻豆av噜噜一区二区三区| 少妇被粗大猛烈的视频| 久久国产精品人妻蜜桃| 九九热线精品视视频播放| 国产精品99久久久久久久久| 国产精品久久视频播放| 九九在线视频观看精品| 亚洲成人久久爱视频| 亚洲美女黄片视频| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 日本精品一区二区三区蜜桃| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 亚洲av日韩精品久久久久久密| 亚洲一区二区三区不卡视频| 中亚洲国语对白在线视频| 国产一区二区三区视频了| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 91av网一区二区| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 亚洲精品粉嫩美女一区| 99国产精品一区二区三区| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 不卡一级毛片| 桃色一区二区三区在线观看| 3wmmmm亚洲av在线观看| 99热这里只有是精品50| 听说在线观看完整版免费高清| 黄色一级大片看看| 欧美乱妇无乱码| av天堂在线播放| 亚洲avbb在线观看| 长腿黑丝高跟| 老司机深夜福利视频在线观看| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 免费在线观看影片大全网站| 51国产日韩欧美| 欧美+亚洲+日韩+国产| 特大巨黑吊av在线直播| 亚洲自偷自拍三级| 久久久久免费精品人妻一区二区| 午夜福利在线观看吧| 日韩欧美 国产精品| 性欧美人与动物交配| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 99热精品在线国产| 天美传媒精品一区二区| 午夜两性在线视频| aaaaa片日本免费| 一a级毛片在线观看| 国产在线精品亚洲第一网站| 18禁在线播放成人免费| 女同久久另类99精品国产91| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 最新中文字幕久久久久| 99热精品在线国产| 日日干狠狠操夜夜爽| 动漫黄色视频在线观看| 麻豆av噜噜一区二区三区| 久久99热这里只有精品18| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 观看美女的网站| 在线天堂最新版资源| 三级毛片av免费| 精品国产三级普通话版| 看免费av毛片| 亚洲七黄色美女视频| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 欧美一级a爱片免费观看看| 舔av片在线| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 日韩亚洲欧美综合| 美女大奶头视频| 国产在线精品亚洲第一网站| 一级毛片久久久久久久久女| 一区二区三区激情视频| 色视频www国产| 免费电影在线观看免费观看| 在线播放无遮挡| 国模一区二区三区四区视频| 国产精品影院久久| 高清在线国产一区| 午夜福利免费观看在线| 亚洲av二区三区四区| 亚洲人与动物交配视频| 搡老岳熟女国产| 欧美一级a爱片免费观看看| 亚洲av一区综合| 成人特级黄色片久久久久久久| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 一进一出好大好爽视频| 中文资源天堂在线| 嫁个100分男人电影在线观看| 欧美又色又爽又黄视频| 色尼玛亚洲综合影院| 午夜福利免费观看在线| 欧美日韩综合久久久久久 | 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 丰满乱子伦码专区| av天堂中文字幕网| 在线免费观看不下载黄p国产 | 性色avwww在线观看| 国产av在哪里看| 老女人水多毛片| 超碰av人人做人人爽久久| h日本视频在线播放| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 国产午夜福利久久久久久| 夜夜夜夜夜久久久久| 99热只有精品国产| 真人做人爱边吃奶动态| 日韩欧美免费精品| 精品福利观看| 在线免费观看不下载黄p国产 | 国产亚洲av嫩草精品影院| 2021天堂中文幕一二区在线观| 国产在视频线在精品| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 欧美日韩黄片免| 老司机福利观看| 国产精品日韩av在线免费观看| 看十八女毛片水多多多| 国产中年淑女户外野战色| 91麻豆精品激情在线观看国产| 欧美日韩国产亚洲二区| 久久性视频一级片| 亚洲欧美日韩无卡精品| 精品国内亚洲2022精品成人| 男女视频在线观看网站免费| 欧美+亚洲+日韩+国产| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 免费看美女性在线毛片视频| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 老司机午夜福利在线观看视频| 亚洲熟妇熟女久久| .国产精品久久| 夜夜夜夜夜久久久久| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 欧美不卡视频在线免费观看| 三级毛片av免费| 美女黄网站色视频| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 99精品久久久久人妻精品| 国内揄拍国产精品人妻在线| 9191精品国产免费久久| 给我免费播放毛片高清在线观看| 午夜福利欧美成人| 中文字幕av在线有码专区| 一边摸一边抽搐一进一小说| 日韩成人在线观看一区二区三区| 99热精品在线国产| 久久午夜福利片| 无遮挡黄片免费观看| 免费人成在线观看视频色| 最近最新免费中文字幕在线| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 亚洲av免费在线观看| 亚洲,欧美,日韩| 久久久色成人| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 在线观看舔阴道视频| 国产欧美日韩一区二区精品| 99久久精品热视频| 国产精品99久久久久久久久| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 欧美午夜高清在线| 亚洲最大成人中文| 能在线免费观看的黄片| 久久精品国产清高在天天线| 欧美精品啪啪一区二区三区| bbb黄色大片| 色吧在线观看|