Cr6+暴露對(duì)紅樹蜆卵巢中氧化應(yīng)激和生殖基因表達(dá)的影響

程 遂，逯 峰，黃 勃①，郭云鵬

(1.海南大學(xué)海洋學(xué)院，海南 ?？?570228；2.南海海洋資源利用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，海南 ?？?570228；3.教育部熱帶生物資源重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，海南 ?？?570228)

紅樹蜆(Polymesodaerosa)隸屬于軟體動(dòng)物門(Mollusca)雙殼綱(Bivalvia)簾蛤目(Veneroida)蜆科(Corbiculidae)紅樹蜆屬(Polymesoda)，廣泛分布于熱帶、亞熱帶紅樹林和灘涂，是紅樹林生態(tài)系統(tǒng)中特有的雙殼貝類，在我國(guó)海南、廣西、廣東和臺(tái)灣等主要紅樹林區(qū)均有分布[1]。紅樹蜆體型較大，生長(zhǎng)快，是紅樹林周邊居民采集的主要經(jīng)濟(jì)貝。臺(tái)灣地區(qū)自20世紀(jì)末開展紅樹蜆養(yǎng)殖，現(xiàn)已初具規(guī)模，而廣東和廣西地區(qū)也已開始小規(guī)模養(yǎng)殖[2]。由于紅樹蜆分布地域特殊，對(duì)紅樹蜆的研究主要集中在生態(tài)學(xué)方面，如棲息環(huán)境、生活習(xí)性、生長(zhǎng)繁殖和種群結(jié)構(gòu)等[3-4]。

當(dāng)前，我國(guó)海洋污染狀況嚴(yán)重，由于雙殼貝類種群數(shù)量大，分布范圍廣，移動(dòng)性差，營(yíng)濾食生活，對(duì)重金屬和有機(jī)物的富集能力比其他生物更強(qiáng)，其作為指示物種已被廣泛用于海洋環(huán)境污染的生物監(jiān)測(cè)[5]，目前關(guān)于重金屬富集對(duì)雙殼貝類的影響研究主要集中在牡蠣、扇貝等經(jīng)濟(jì)貝類[6-7]，而對(duì)紅樹蜆的相關(guān)研究則較少[8]。

重金屬Cr是造成海洋環(huán)境污染的重要原因之一，Cr6+在參與生物體氧化還原反應(yīng)時(shí)可以產(chǎn)生活性氧自由基(ROS)，造成氧化脅迫，而水生生物體內(nèi)含有大量多元不飽和脂肪酸，對(duì)氧化反應(yīng)十分敏感[9]，因此其體內(nèi)Cr6+富集易造成過氧化代謝產(chǎn)物積累，從而對(duì)各器官產(chǎn)生毒性效應(yīng)[10]。卵黃蛋白的合成與否表示卵母細(xì)胞的發(fā)育是否完善[11]，而雙殼貝類卵黃蛋白原由雌激素受體er基因和特異存在于成熟雌性動(dòng)物體中卵黃蛋白原vtg基因進(jìn)行調(diào)控[12]，因此這2種基因表達(dá)量在一定程度上能夠說明紅樹蜆卵巢發(fā)育的健康和成熟情況。通過分析不同劑量Cr6+暴露下紅樹蜆卵巢性腺指數(shù)(GSI)和2種氧化逆境標(biāo)志物活性及其介導(dǎo)基因表達(dá)量的變化情況，研究Cr6+暴露對(duì)紅樹蜆的生殖毒性效應(yīng)，可為探究重金屬對(duì)紅樹蜆生殖毒性機(jī)制、保護(hù)貝類種質(zhì)資源和開展海洋生態(tài)環(huán)境監(jiān)測(cè)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

于2019年7月，紅樹蜆繁殖旺季，在海南省文昌市八門灣海區(qū)霞場(chǎng)村附近海域(19°37′28.02″ N、110°47′38.84″ E)采集紅樹蜆。經(jīng)形態(tài)判別后挑選大小相近的紅樹蜆300個(gè)用于試驗(yàn)并測(cè)量生物學(xué)性狀，樣本平均殼長(zhǎng)為(49.85±3.42) mm，平均殼寬為(26.74±1.58) mm，平均殼高為(45.83±3.57) mm，平均濕重為(35.62±4.31) g。運(yùn)回試驗(yàn)室后用自來水刷洗貝殼表面游泥后，擦干表面水分，并在5個(gè)100 cm×80 cm×90 cm的養(yǎng)殖箱中培養(yǎng)5 d，養(yǎng)殖條件：海水鹽度為30‰，溫度為(27±1) ℃，pH值為8.0。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1暴露試驗(yàn)方法

配制5組不同質(zhì)量濃度Cr6+溶液：0(對(duì)照)、0.25(低濃度)、1(中濃度)、4(較高濃度)和8 mg·L-1(高濃度)。將300個(gè)紅樹蜆隨機(jī)分為5組，每組60個(gè)。試驗(yàn)期間，每組持續(xù)充氧，每天將養(yǎng)殖用水全部更換一次，早、晚各投喂足量螺旋藻粉。每組分別于暴露試驗(yàn)0、5、10和15 d時(shí)隨機(jī)取樣，挑選并解剖5個(gè)雌性紅樹蜆用于指標(biāo)測(cè)定。

1.2.2雌性紅樹蜆性腺指數(shù)的測(cè)定

稱量各雌性紅樹蜆軟體部質(zhì)量，然后分離性腺，將其用生理鹽水沖洗后用濾紙吸去水分，GSI為生物性腺濕重與軟體部濕重的比值[13]。

1.2.3氧化逆境標(biāo)志物的提取與酶活性的測(cè)定

切取部分性腺組織用于制備酶液。每1 g組織樣品用預(yù)冷雙蒸水3 mL混合，勻漿5 min，外置冰塊降低溫度。然后將勻漿液倒入離心管中，在0 ℃條件下按20 000 r·min-1(離心半徑為10 cm)離心20 min，取上清液測(cè)定紅樹蜆性腺組織抗氧化酶活性，重復(fù)3次。抗氧化功能測(cè)定指標(biāo)選擇過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(GST)和過氧化代謝產(chǎn)物丙二醛(MDA)。各項(xiàng)指標(biāo)均使用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的相應(yīng)試劑盒進(jìn)行測(cè)定，具體操作參見產(chǎn)品說明書。

1.2.4基因表達(dá)的分析

為了研究高濃度與低濃度Cr6+對(duì)紅樹蜆卵巢中過氧化氫酶基因cat、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶基因gst、雌激素受體基因er和卵黃蛋白原基因vtg表達(dá)量影響的差異，除對(duì)照外，另外選取低濃度處理(0.25 mg·L-1)與高濃度處理(8 mg·L-1)進(jìn)行測(cè)定。

基因表達(dá)量采用熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qPCR)方法進(jìn)行檢測(cè)。使用Eastep?Super總RNA提取試劑盒(上海普洛麥格生物產(chǎn)品有限公司)從樣品中提取總RNA，具體操作參見產(chǎn)品說明書。經(jīng)分光光度計(jì)(島津 UV-2450)檢測(cè)總RNA純度(OD260/OD280)后，取1 μg總RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。從紅樹蜆轉(zhuǎn)錄組文庫[14]中經(jīng)功能注釋后挑選目的基因序列，并使用Primer 5軟件設(shè)計(jì)引物序列(表1)，合成操作由生工生物工程(上海)股份有限公司完成。

表1 qPCR引物序列

Table 1 Primers used for qPCR

基因名稱引物序列產(chǎn)物大小/bpcatF:5′-CTCAGCCGGGCCAAAAATCGGCTAG-3′,R:5′-CTAGCCGATTTTTGGCCCGGCTGAG-3′783gstF:5′-ATGCCCGAGTTAGGCTACTGGAAAA -3′,R:5′-TTTTCCAGTAGCCTAACTCGGGCAT -3′852erF:5′-AGGGATGACCTAGAAGCAATATGGA -3′,R:5′-TCCATATTGCTTCTAGGTCATCCCT-3′324vtgF:5′-ATGCCCAGCTGTGCTAAAAGAAGTT-3′,R:5′-AACTTCTTTTAGCACAGCTGGGCAT -3′487β-actinF:5′-ACAGGGAAGCCAAGATGGAA-3′,R:5′-TTGCCGACAGAATGCAGAAG-3′132

qPCR反應(yīng)體系為10 μL，包含SYBR Premix Ex TaqTM5 μL，10 μmol·L-1正反向引物各0.4 μL，10倍稀釋的cDNA 模板1 μL，RNasefree H2O 3.2 μL。qPCR擴(kuò)增條件為：95 ℃預(yù)變性30 s，95 ℃變性5 s，60 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，40個(gè)循環(huán)。選取β-actin作為內(nèi)參基因[15]，試驗(yàn)樣本與對(duì)照樣本目標(biāo)基因的相對(duì)表達(dá)水平采用2-ΔΔCt(Livak)法計(jì)算，并繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度Cr6+脅迫下雌性紅樹蜆性腺指數(shù)

GSI值越大，說明紅樹蜆性腺發(fā)育越好。不同濃度Cr6+對(duì)紅樹蜆卵巢性腺指數(shù)的影響見圖1。由對(duì)照組紅樹蜆卵巢GSI變化趨勢(shì)可知，試驗(yàn)所用紅樹蜆處于成熟期后期。在Cr6+脅迫下，隨暴露時(shí)間和暴露濃度的增加，各濃度處理紅樹蜆GSI均呈下降趨勢(shì)，且暴露時(shí)間越長(zhǎng)，下降程度越明顯。試驗(yàn)前、中期(5和10 d)，低濃度處理(0.25 mg·L-1)紅樹蜆GSI與對(duì)照相比無顯著差異(P>0.05)；在整個(gè)試驗(yàn)期，較高和高濃度處理(4和8 mg·L-1)GSI顯著小于低、中濃度處理(0.25和1 mg·L-1)(P<0.05)；8 mg·L-1處理暴露15 d時(shí)GSI最小，比對(duì)照0 d時(shí)下降64%。

直方柱上方英文小寫字母不同表示同一暴露時(shí)間不同處理間性腺指數(shù)差異顯著(P<0.05)。

2.2 卵巢氧化逆境標(biāo)志物活性、含量和基因表達(dá)水平變化

2.2.1卵巢CAT和GST活性變化

不同濃度Cr6+脅迫后，紅樹蜆卵巢CAT和GST活性變化見圖2。如圖2所示，中、低濃度處理紅樹蜆卵巢CAT活性在試驗(yàn)前期(5 d時(shí))即受到誘導(dǎo)，且誘導(dǎo)效果顯著(P<0.05)，但在10 d后其與對(duì)照相比無顯著差異(P>0.05)。除8 mg·L-1處理外，其他處理CAT活性在試驗(yàn)前期(5 d時(shí))達(dá)到最大值后，隨暴露時(shí)間增加呈下降趨勢(shì)。Cr6+濃度越高，紅樹蜆卵巢CAT活性恢復(fù)越難，兩者呈負(fù)相關(guān)。

同一分圖中，直方柱上方英文小寫字母不同表示同一暴露時(shí)間不同處理間某種酶活性差異顯著(P<0.05)。

如圖2所示，試驗(yàn)過程中，對(duì)照處理紅樹蜆卵巢GST活性變化不顯著，表明沒有Cr6+干擾條件下，紅樹蜆性腺GST活性相對(duì)穩(wěn)定。各脅迫組GST活性均隨暴露時(shí)間的增加呈先上升后下降趨勢(shì)。在試驗(yàn)前期(5 d時(shí))，除0.25 mg·L-1處理外，其他處理GST活性均比對(duì)照顯著升高(P<0.05)，其中8 mg·L-1處理GST活性為對(duì)照的2.2倍。與對(duì)照相比，除8 mg·L-1處理外，其他處理GST活性在試驗(yàn)中期(10 d時(shí))均顯著受到誘導(dǎo)(P<0.05)。8 mg·L-1處理GST活性在試驗(yàn)前期(5 d時(shí))上升最明顯，但隨后迅速降低，15 d時(shí)顯著小于對(duì)照(P<0.05)。

2.2.2卵巢過氧化氫酶基因cat和谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶基因gst表達(dá)量變化

紅樹蜆卵巢cat和gst基因表達(dá)水平見圖3。如圖3所示，紅樹蜆卵巢cat基因表達(dá)量受到顯著誘導(dǎo)出現(xiàn)在試驗(yàn)前、中期(5和10 d時(shí))。與高濃度處理相比，低濃度處理更容易促進(jìn)紅樹蜆性腺cat基因的表達(dá)，在5 d時(shí)上調(diào)幅度顯著(P<0.05)，為對(duì)照的5.9倍，隨后cat基因表達(dá)量逐漸降低，15 d時(shí)恢復(fù)至正常水平(P>0.05)。在試驗(yàn)前、中期(5和10 d時(shí))，高濃度處理會(huì)顯著抑制cat基因的表達(dá)(P<0.05)，15 d時(shí)高濃度處理cat表達(dá)量?jī)H為對(duì)照的30%。

如圖3所示，3個(gè)處理紅樹蜆卵巢gst基因表達(dá)量都呈先升高后降低趨勢(shì)。5 d時(shí)，與同時(shí)期對(duì)照相比，8 mg·L-1處理gst表達(dá)量顯著上升7.6倍(P<0.05)，隨后急劇降低。0.25 mg·L-1處理gst基因表達(dá)量變化趨勢(shì)則較為平緩，其最大值僅為對(duì)照的3.2倍。

同一分圖中，直方柱上方英文小寫字母不同表示同一暴露時(shí)間不同處理間某種基因相對(duì)表達(dá)量差異顯著(P<0.05)。

2.2.3卵巢MDA含量變化

不同濃度Cr6+脅迫后，紅樹蜆性腺M(fèi)DA含量隨時(shí)間變化見圖4。

直方柱上方英文小寫字母不同表示同一處理不同暴露時(shí)間之間MDA含量差異顯著(P<0.05)。

如圖4所示，對(duì)照處理紅樹蜆性腺M(fèi)DA含量相對(duì)穩(wěn)定。除0.25 mg·L-1處理外，其他處理MDA含量在前期(5 d時(shí))均受到顯著誘導(dǎo)(P<0.05)，其中4和8 mg·L-1處理誘導(dǎo)程度更為強(qiáng)烈，與對(duì)照相比，其MDA含量增加1.7～3.1倍。隨著暴露時(shí)間增加，0.25 mg·L-1處理MDA含量逐漸恢復(fù)至對(duì)照水平，而1、4和8 mg·L-1處理紅樹蜆性腺M(fèi)DA含量恢復(fù)能力則與Cr6+脅迫濃度呈負(fù)相關(guān)。

2.3 卵巢雌激素受體er基因和卵黃蛋白原vtg基因表達(dá)量變化

紅樹蜆卵巢er和vtg基因表達(dá)水平見圖5。在試驗(yàn)期間，各處理紅樹蜆er和vtg基因表達(dá)量總體呈先升高后降低趨勢(shì)。對(duì)照er和vtg基因表達(dá)量在試驗(yàn)前期(5 d時(shí))均出現(xiàn)明顯上調(diào)，分別為0 d時(shí)的3.5和2.8倍，這表明紅樹蜆正處于成熟期后期。不同濃度Cr6+脅迫處理均顯著抑制2個(gè)基因的表達(dá)(P<0.05)，0.25 mg·L-1處理er和vtg基因表達(dá)量峰值分別為0 d時(shí)的3.2和1.9倍；而8 mg·L-1處理er和vtg基因表達(dá)量峰值則僅為0 d時(shí)的1.2倍和90%。在試驗(yàn)中、后期(10、15 d時(shí))，8 mg·L-1處理2個(gè)基因表達(dá)量均顯著低于對(duì)照(P<0.05)，這說明Cr6+濃度越高，其對(duì)er和vtg基因表達(dá)的抑制作用越明顯。

同一分圖中，直方柱上方英文小寫字母不同表示同一暴露時(shí)間不同處理間某種基因相對(duì)表達(dá)量差異顯著(P<0.05)。

3 討論

近年來我國(guó)海洋環(huán)境污染日益嚴(yán)重，尤以重金屬污染問題較為突出，而海洋貝類屬于濾食性生物，其生活習(xí)性和生理特點(diǎn)決定貝類易于累積重金屬[16]。部分海域一些貝類Cd和As污染的健康風(fēng)險(xiǎn)超出可接受水平[17]；廈門養(yǎng)殖貝類中，只有牡蠣沒有受到污染，縊蟶、毛蚶、文蛤和花蛤均受到輕度Pb、Hg和Cu污染以及嚴(yán)重As污染，花蛤和文蛤還受到輕度Cr污染[18]。

性腺指數(shù)GSI又稱生殖腺指數(shù)，是反映性成熟度的一個(gè)指標(biāo)，常用來表示卵巢發(fā)育或睪丸發(fā)育來衡量動(dòng)物的性成熟程度[19]。筆者研究發(fā)現(xiàn)，Cr6+暴露會(huì)對(duì)紅樹蜆性腺發(fā)育和功能產(chǎn)生一定干擾，不同濃度Cr6+脅迫對(duì)紅樹蜆性腺指數(shù)產(chǎn)生影響的程度不同，其中，較高和高濃度(4和8 mg·L-1)Cr6+脅迫對(duì)紅樹蜆GSI造成的影響更為顯著(P<0.05)。各處理GSI均隨試驗(yàn)時(shí)間的增加而逐漸降低，這表明Cr6+在性腺中的累積可能影響紅樹蜆卵巢發(fā)育，并損傷其正常組織。

CAT和GST活性以及MDA含量是研究生物對(duì)各種脅迫影響效應(yīng)中受到密切關(guān)注的生理指標(biāo)[20]?？寡趸窩AT可以清除氧自由基保護(hù)機(jī)體，能間接反映生物體內(nèi)自由基含量變化，GST具有解毒和抑制脂質(zhì)過氧化作用[21]。筆者研究發(fā)現(xiàn)，0.25和1 mg·L-1處理紅樹蜆性腺CAT活性在Cr6+暴露前期(5 d時(shí))達(dá)到最大值，且較0 d時(shí)顯著上升(P<0.05)，而4和8 mg·L-1處理對(duì)CAT活性的誘導(dǎo)作用有限，甚至隨著試驗(yàn)時(shí)間的增長(zhǎng)而產(chǎn)生抑制作用。隨著暴露時(shí)間的增長(zhǎng)，低濃度Cr6+處理酶活性比高濃度處理更快恢復(fù)到對(duì)照水平。Cr6+脅迫濃度越高，紅樹蜆卵巢CAT活性恢復(fù)就越困難，Cr6+脅迫濃度與CAT活性恢復(fù)力呈負(fù)相關(guān)。在試驗(yàn)前、中期(5和10 d時(shí))，0.25 mg·L-1處理卵巢cat基因表達(dá)水平比對(duì)照顯著提高(P<0.05)，隨后恢復(fù)至對(duì)照水平，但Cr6+脅迫濃度越高，其表達(dá)水平就越難恢復(fù)。紅樹蜆卵巢GST活性變化較CAT有一定滯后性，0.25 mg·L-1處理GST活性在試驗(yàn)前期(5 d時(shí))無明顯變化，而除8 mg·L-1處理外，其他處理GST活性在試驗(yàn)中期皆受到顯著誘導(dǎo)(P<0.05)，且最大值出現(xiàn)在4 mg·L-1處理的試驗(yàn)中期(10 d時(shí))。當(dāng)紅樹蜆卵巢GST活性較低時(shí)，CAT會(huì)表現(xiàn)出一定活性，以維持產(chǎn)生氧自由基與保護(hù)抗氧化防御系統(tǒng)之間的平衡，此與賴廷和等[8]研究結(jié)果相似。有研究[22]認(rèn)為超氧化物歧化酶(SOD)催化O2-的歧化反應(yīng)不是CAT底物H2O2的唯一來源，H2O2也可能來自氨基酸或細(xì)胞色素P450氧化酶的激活，這可能是初期CAT活性較高的原因。在筆者試驗(yàn)后期，8 mg·L-1處理CAT和GST活性受到顯著抑制(P<0.05)，而同時(shí)卵巢cat和gst基因表達(dá)水平與對(duì)照相比顯著降低(P<0.05)，這可能是由于高濃度Cr6+暴露下，紅樹蜆卵巢內(nèi)產(chǎn)生過多H2O2，超出了機(jī)體清除能力，從而抑制了相關(guān)基因的表達(dá)，這表明性腺組織已受到Cr6+的嚴(yán)重破壞。

MDA是脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物，對(duì)細(xì)胞膜有很強(qiáng)的破壞作用，其含量可反映機(jī)體內(nèi)自由基產(chǎn)生量及對(duì)機(jī)體的影響程度。BEBIANNO等[23]提出高M(jìn)DA含量是抗氧化防御機(jī)能喪失的結(jié)果。生物體在Cr6+脅迫后會(huì)導(dǎo)致組織MDA含量增加，進(jìn)而造成肝臟和腎臟硫代巴比妥酸反應(yīng)產(chǎn)物(TBARS)水平升高，損傷肝、腎功能[24]。筆者試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與其他處理不同，8 mg·L-1處理紅樹蜆卵巢gst基因表達(dá)量最大值出現(xiàn)在試驗(yàn)前期(5 d時(shí))，且此時(shí)GST活性也顯著高于對(duì)照(P<0.05)，這表明機(jī)體可能通過加強(qiáng)gst基因表達(dá)產(chǎn)生更多GST，以便清除迅速積累的自由基和脂質(zhì)過氧化產(chǎn)生的有毒物質(zhì)，此與ZHANG等[25]的研究結(jié)果相似。MDA含量峰值出現(xiàn)在8 mg·L-1處理15 d時(shí)，并且在整個(gè)試驗(yàn)過程中，高濃度Cr6+處理MDA含量顯著高于低濃度處理，這表明過高濃度的Cr6+已破壞生物體抗氧化系統(tǒng)，導(dǎo)致機(jī)體活性氧迅速累積，從而加劇膜脂過氧化作用。另外，受到Cr6+脅迫后，紅樹蜆卵巢MDA含量無法恢復(fù)至最初水平，說明Cr6+對(duì)紅樹蜆MDA含量產(chǎn)生不可逆影響。

卵黃蛋白原(VTG)常被用作檢測(cè)內(nèi)分泌干擾物的生物標(biāo)志物[26]。OSADA等[12]研究發(fā)現(xiàn)雙殼貝類VTG在卵巢中合成并且在er和vtg基因的介導(dǎo)下由雌二醇(E2)調(diào)控，因此er和vtg基因表達(dá)量在生物體生殖發(fā)育中發(fā)揮重要作用。筆者試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，對(duì)照er和vtg基因表達(dá)量在試驗(yàn)初期(5 d時(shí))均出現(xiàn)明顯上調(diào)，分別為0 d時(shí)的3.5和2.8倍，這表明紅樹蜆正處于成熟期后期，er基因表達(dá)量變化與性腺發(fā)育相吻合，這與MATSUMOTO等[27]對(duì)牡蠣和扇貝卵巢的研究結(jié)果相似。在整個(gè)試驗(yàn)中，8 mg·L-1處理vtg和er基因表達(dá)量顯著低于0.25 mg·L-1和對(duì)照處理。這可能是由于高濃度Cr6+進(jìn)入紅樹蜆體內(nèi)后，能夠通過影響性腺激素含量進(jìn)而影響激素調(diào)控的er和vtg等相關(guān)基因的表達(dá)，而er基因含量的變化又會(huì)導(dǎo)致依賴er基因介導(dǎo)的一系列基因的表達(dá)發(fā)生變化，最終對(duì)紅樹蜆產(chǎn)生明顯生殖毒性效應(yīng)。

4 結(jié)論

以紅樹蜆為試驗(yàn)對(duì)象，研究了不同濃度Cr6+暴露下紅樹蜆卵巢中氧化逆境標(biāo)志物及生殖基因表達(dá)的變化。研究結(jié)果表明，Cr6+對(duì)紅樹蜆卵巢具有組織損傷和代謝干擾效應(yīng)，并且高濃度Cr6+能對(duì)紅樹蜆造成明顯生殖毒害作用。紅樹蜆由于其分布地域的特殊性，目前對(duì)該物種的研究與其他雙殼貝類相比還較少，該研究可為進(jìn)一步研究Cr6+對(duì)紅樹蜆生殖毒性機(jī)制提供科學(xué)數(shù)據(jù)。下一步將開展Cr6+暴露對(duì)雄性紅樹蜆性腺的影響研究。