哮喘急性發(fā)作期患者外周血細(xì)胞參數(shù)對不同氣道炎癥表型的預(yù)測價值分析

古力鮮·馬合木提， 任莉莉， 汪文娟

(新疆醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科， 新疆 烏魯木齊 830063)

支氣管哮喘(哮喘)是呼吸內(nèi)科常見病，在我國發(fā)病率在1%～4%，患者臨床表現(xiàn)為氣喘、咳嗽、咳痰等，可嚴(yán)重影響其健康及正常生活[1]。哮喘患者可在感染、過敏原接觸、冷空氣刺激、情緒變化等因素誘發(fā)下急性發(fā)作，導(dǎo)致病情急性惡化，增加致死、致殘率[2]。氣道炎癥是哮喘主要病理特征，其表型與氣道內(nèi)浸潤的炎癥細(xì)胞種類直接相關(guān)，且在急性發(fā)作時可發(fā)生變化，影響患者臨床特征及治療反應(yīng)性[3]。誘導(dǎo)痰法是臨床明確氣道炎癥表型的金標(biāo)準(zhǔn)，但其臨床應(yīng)用存在一定禁忌癥，且有并發(fā)癥風(fēng)險，加之其處理過程復(fù)雜、技術(shù)及實驗室要求高，臨床有時需更簡便、可行手段去評估[4]。外周血細(xì)胞計數(shù)操作方便、可行性好，既往有研究報道顯示外周炎癥細(xì)胞或炎癥因子水平與誘導(dǎo)痰中水平存在一定相關(guān)性。本研究通過檢測哮喘急性發(fā)作期患者外周血細(xì)胞參數(shù)，旨在分析其對患者氣道炎癥表型的預(yù)測價值。

1 資料與方法

1.1一般資料：收集2017年5月至2019年5月104例支氣管哮喘患者臨床資料，納入標(biāo)準(zhǔn)：符合指南中[5]哮喘診斷及急性發(fā)作分期，年齡18～70歲，經(jīng)誘導(dǎo)痰檢測明確氣道炎癥表型，入組前1個月內(nèi)無感染發(fā)生、抗生素應(yīng)用，臨床資料完整；排除標(biāo)準(zhǔn)：存在慢性支氣管炎、肺結(jié)核、慢阻肺、肺栓塞、呼吸衰竭、氣胸等其他呼吸系統(tǒng)診斷，伴急慢性感染、心腦血管疾病、惡性腫瘤、肝腎功能不全等其他疾病，長期吸煙，臨床資料不全。104例患者中，男性69例，女性35例，年齡18～70歲，平均(44.32±8.51)歲，哮喘病程1～32年，平均(7.54±3.16)年，體重指數(shù)19～30(25.36±3.41)kg/m2，經(jīng)誘導(dǎo)痰細(xì)胞氣道炎癥表型：嗜酸性細(xì)胞哮喘49例(47.12%)，中性粒細(xì)胞性哮喘30例(28.85%)，混合粒細(xì)胞性哮喘14例(13.46%)，寡粒細(xì)胞性哮喘11例(10.58%)。

1.2治療方法

1.2.1誘導(dǎo)痰及痰液處理：操作前先向患者解釋，取得配合；誘導(dǎo)前10min給予沙丁胺醇吸入(4噴，400ug)，測定1s用力呼氣量(FEV1)；給予清水漱口后，霧化吸入3%高滲鹽水共15min，收集痰液，若痰液量不足，繼續(xù)換4%高滲鹽水、5%高滲鹽水依次霧化吸入7min，期間密切觀察患者癥狀、反應(yīng)，并注意監(jiān)測FEV1；選取痰液密度較高的部分，稱重，選擇其體積4倍的0.1%二硫蘇糖醇溶劑與之充分混合，在37℃下恒溫震蕩15min；經(jīng)200目尼龍網(wǎng)過濾，倒入清潔燒杯，將黏液和碎片清除，取10μL痰液，離心(離心半徑13.5cm，1500r/min，10min)后分離上清液、涂片，經(jīng)瑞氏吉姆薩染液處理后，行400個非鱗狀上皮細(xì)胞計數(shù)分類(光鏡下)，計算嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)、中性粒細(xì)胞(NE)、淋巴細(xì)胞(LY)、巨噬細(xì)胞(mμ)計數(shù)及百分比。

1.2.2外周血標(biāo)本采集：于患者確診次日清晨，采集空腹靜脈血2mL，乙二胺四乙酸二鉀二水合物抗凝管收集，采用血細(xì)胞分析儀檢測EOS、NE、LY、m計數(shù)及百分比。

1.3氣道炎癥表型分類標(biāo)準(zhǔn)：痰EOS百分比≧3%或NE百分比≧61%分別為嗜酸性粒細(xì)胞性哮喘或中性粒細(xì)胞哮喘，兩種細(xì)胞百分比同時高于界值為混合性粒細(xì)胞性哮喘，兩種細(xì)胞百分比正常視為寡粒細(xì)胞性哮喘。

2 結(jié) 果

2.1不同氣道炎癥表型誘導(dǎo)痰細(xì)胞參數(shù)比較：不同氣道炎癥表型痰EOS、NE參數(shù)比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，且嗜酸性粒細(xì)胞哮喘組EOS計數(shù)及百分比顯著高于混合性粒細(xì)胞哮喘組、中性粒細(xì)胞哮喘組、寡粒性細(xì)胞哮喘組(P<0.05)，中性粒細(xì)胞性哮喘組NE計數(shù)及百分比顯著高于混合性粒細(xì)胞哮喘組、嗜酸性粒細(xì)胞哮喘組、寡粒性細(xì)胞哮喘組(P<0.05)；四種氣道炎癥表型患者LY計數(shù)及百分比比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，寡粒細(xì)胞性哮喘m百分比顯著高于寡粒性細(xì)胞哮喘組、中性粒細(xì)胞哮喘組、混合性粒細(xì)胞哮喘組(P<0.05)，見表1。

表1 不同氣道炎癥表型誘導(dǎo)痰細(xì)胞參數(shù)比較

2.2不同氣道炎癥表型外周血細(xì)胞參數(shù)比較：不同氣道炎癥表型外周血EOS、NE參數(shù)比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，且嗜酸性粒細(xì)胞哮喘組外周血EOS計數(shù)及百分比均顯著高于中性粒細(xì)胞性哮喘、寡粒細(xì)胞性哮喘(P<0.05)，與混合粒細(xì)胞性哮喘比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，中性粒細(xì)胞性哮喘組外周血NE計數(shù)及百分比顯著高于嗜酸性粒細(xì)胞組、混合粒細(xì)胞組及寡粒細(xì)胞組(P<0.05)；四組外周血LY計數(shù)及百分比、m細(xì)胞計數(shù)及百分比比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

表2 不同氣道炎癥表型外周血細(xì)胞參數(shù)比較

2.3外周血細(xì)胞參數(shù)與痰細(xì)胞參數(shù)相關(guān)性：外周血EOS計數(shù)及百分比均與痰EOS百分比呈強(qiáng)正相關(guān)(P<0.05)，外周血NE計數(shù)及百分比與痰NE百分比呈弱正相關(guān)(P<0.05)；外周血LY、m細(xì)胞計數(shù)及百分比與痰LY百分比、m百分比無相關(guān)關(guān)系(P>0.05)，見表3。

表3 外周血細(xì)胞與痰細(xì)胞相關(guān)性(r)

表4 外周血EOS預(yù)測嗜酸性粒細(xì)胞哮喘 NE預(yù)測中性粒細(xì)胞哮喘的診斷效能

圖1 外周血EOS預(yù)測痰EOS≧3%的ROC曲線

圖2 外周血NE預(yù)測痰NE≧61%的ROC曲線

2.4外周血細(xì)胞參數(shù)預(yù)測嗜酸性粒細(xì)胞哮喘和中性粒細(xì)胞哮喘的ROC曲線：外周血EOS計數(shù)預(yù)測痰EOS≧3%的ROC曲線下面積為0.931，約登指數(shù)最大值為0.712，對應(yīng)最佳截斷值為0.29(×106/mL)，此時靈敏度、特異度分別為0.857、0.855；外周血EOS百分比預(yù)測痰EOS≧3%的ROC曲線下面積為0.801，約登指數(shù)最大值為0.465，對應(yīng)最佳截斷值為5.82%，此時靈敏度、特異度分別為0.592、0.873，見圖1。外周血NE計數(shù)預(yù)測痰NE≧61%的ROC曲線下面積為0.651，約登指數(shù)最大值為0.302，對應(yīng)最佳截斷值為4.67(×106/mL)，此時靈敏度、特異度分別為0.667、0.635；外周血NE百分比預(yù)測痰NE≧61%的ROC曲線下面積為0.706，約登指數(shù)最大值為0.403，對應(yīng)最佳截斷值為65.28%，此時靈敏度、特異度分別為0.633、0.770，見圖2。外周血EOS預(yù)測嗜酸性粒細(xì)胞哮喘,NE預(yù)測中性粒細(xì)胞哮喘的診斷效能，見表4。

3 討 論

氣道炎癥表型是一種用于哮喘分類、治療反應(yīng)性評估、預(yù)后判斷的重要方法，其根據(jù)患者氣道內(nèi)浸潤炎癥細(xì)胞差異可分為嗜酸性粒細(xì)胞性、中性粒細(xì)胞性、混合粒細(xì)胞性、寡粒細(xì)胞性4種類型，不同表型臨床表現(xiàn)及治療敏感性有一定差異，且當(dāng)哮喘急性發(fā)作，氣道炎癥表型可發(fā)生變化，因此臨床需要通過判斷患者氣道炎癥表型來制定個性化治療方案，以更好控制患者癥狀、改善其生存質(zhì)量[6]。嗜酸性粒細(xì)胞性哮喘是經(jīng)典氣道炎癥表型，以氣道內(nèi)較多EOS浸潤為基本特征，其發(fā)生機(jī)制可能與Th2細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)有關(guān)，尤其是與白細(xì)胞介素-4、白細(xì)胞介素-5、白細(xì)胞介素-13等關(guān)聯(lián)密切，患者具有早發(fā)、存在家族史、伴過敏性鼻炎等特征，相比其他表型哮喘，該表型哮喘患者對激素治療敏感性較高，急性發(fā)作時控制效果更好[7]。中性粒細(xì)胞性哮喘在哮喘急性發(fā)作中也較為常見，以氣道內(nèi)中性粒細(xì)胞浸潤為特點(diǎn)，其發(fā)生機(jī)制尚不明確，有研究認(rèn)為其發(fā)生可能和白細(xì)胞介素-8、白細(xì)胞介素-17關(guān)聯(lián)密切，既往有研究指出，急性發(fā)作中性粒細(xì)胞型哮喘患者在吸入激素使用量和時間方面均大于嗜酸性粒細(xì)胞性哮喘，提示該表型哮喘對激素反應(yīng)性更差[8]?；旌狭＜?xì)胞型哮喘氣道內(nèi)EOS、NE水平均較高，其發(fā)生機(jī)制尚不明確，或因Th2、Th17免疫相互交叉所致，該表型往往治療效果不佳、預(yù)后差，寡粒細(xì)胞性哮喘患者氣道內(nèi)無典型EOS、NE等浸潤，急性發(fā)作患者具有癥狀多、激素治療反應(yīng)性差特征。

誘導(dǎo)痰技術(shù)是當(dāng)前分辨氣道炎癥表型主要手段，在臨床已有廣泛應(yīng)用，但考慮到該技術(shù)費(fèi)時、費(fèi)力、技術(shù)要求高，且存在一定使用禁忌和潛在并發(fā)癥風(fēng)險，并不適用于每位哮喘患者，臨床也需要一些操作簡便、可行性更高方式去預(yù)測。外周血細(xì)胞參數(shù)分析操作簡便易行，且已有研究發(fā)現(xiàn)外周血EOS與誘導(dǎo)痰EOS參數(shù)存在相關(guān)性，檢測外周血細(xì)胞參數(shù)或可以預(yù)測氣道炎癥表型。本研究經(jīng)相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，外周血EOS計數(shù)及百分比均與痰EOS百分比呈強(qiáng)正相關(guān)，外周血NE計數(shù)及百分比與痰NE百分比呈弱正相關(guān)，提示檢測外周血EOS、NE可一定程度上反映患者痰相關(guān)細(xì)胞水平。進(jìn)一步行ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，外周血EOS計數(shù)、百分比預(yù)測痰EOS≧3%的ROC曲線下面積分別為0.931、0.801，外周血NE計數(shù)、百分比預(yù)測痰NE≧61%的ROC曲線下面積分別為0.651、0.706，提示外周血EOS參數(shù)、外周血NE參數(shù)能一定程度上預(yù)測患者氣道炎癥表型，且以外周血EOS參數(shù)預(yù)測嗜酸性粒細(xì)胞哮喘價值更好。白雪等[9]曾以外周血EOS百分比診斷嗜酸性粒細(xì)胞哮喘，發(fā)現(xiàn)其ROC曲線下面積為0.784，診斷價值較患者呼出氣一氧化氮、血清總免疫球蛋白E水平更高。。

綜上所述，哮喘急性發(fā)作期患者外周血EOS和NE參數(shù)對氣道炎癥表型均有一定預(yù)測價值，臨床或可以以此作為氣道炎癥表型的簡便、快速判斷方式，用于一些誘導(dǎo)痰檢測使用禁忌、依從性差等患者中，以更好指導(dǎo)患者診療及預(yù)后評估。