浙江地區(qū)金線蓮種質(zhì)資源調(diào)查與產(chǎn)業(yè)保護(hù)現(xiàn)狀

吳梅，孔向軍，凌丹燕，馬巧群，毛碧增

(1.浙江大學(xué) 生物技術(shù)研究所，浙江 杭州 310058； 2.金華市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院 花卉苗木研究所，浙江 金華 321000;3.金華市荊龍生物科技有限公司，浙江 金華 321000)

金線蓮(Anoectochilusroxburghii)又稱金線蘭，為蘭科開唇蘭屬多年生植物，全草在民間被入藥，為珍貴中藥材，具有適應(yīng)環(huán)境狹窄、自然生長(zhǎng)緩慢、天然繁殖率低等特點(diǎn)，有清熱涼血、除濕解毒等功效，一般用于治療急慢性肝炎、糖尿病等癥，享有“藥王”的美稱。《瀕危野生動(dòng)植物種國(guó)際貿(mào)易公約》(CITES)將其列入附錄Ⅱ的保護(hù)物種，《國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)野生植物名錄》(第二批)也將其列為二級(jí)保護(hù)植物，在臺(tái)灣地區(qū)每千克售價(jià)達(dá)5 000～6 000新臺(tái)幣，被譽(yù)為比人參還貴的農(nóng)作物[1-3]。

近幾年隨著金線蓮產(chǎn)業(yè)化發(fā)展，組培繁育主要集中在以臺(tái)灣和福建省等地，與全國(guó)其他產(chǎn)區(qū)相比，僅在《浙江植物志》《浙南本草新編》《福建植物志》中看到有關(guān)浙江金線蓮的藥用價(jià)值報(bào)道，浙江省市場(chǎng)內(nèi)流通的栽培種多為省外引入種(如福建金線蓮和臺(tái)灣金線蓮)[4-5]，全省種質(zhì)資源分布尚未見系統(tǒng)報(bào)道。

浙江省淺山產(chǎn)地已經(jīng)難覓野生金線蓮的蹤跡，經(jīng)民間尋訪考證得知，在麗水、金華、杭州、寧波等地均有發(fā)現(xiàn)金線蓮野生資源，由于自然環(huán)境的破環(huán)，現(xiàn)存資源越加稀少，一旦物種消失，將不可挽回，野生馴化家種研究迫在眉睫[6]。因此，對(duì)浙江省現(xiàn)有野生金線蓮資源進(jìn)行調(diào)查和保護(hù)利用已經(jīng)刻不容緩。

為更好地保護(hù)與開發(fā)利用浙江地域特色物種，浙江省《浙江省人民政府辦公廳關(guān)于加快推進(jìn)中醫(yī)藥健康服務(wù)發(fā)展的意見》(浙政辦發(fā)〔2015〕103號(hào))提出建立浙產(chǎn)特色中藥材與藥用資源的種質(zhì)資源圃，大力實(shí)施中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范，促進(jìn)中藥材種植業(yè)綠色發(fā)展，加快推動(dòng)中藥材優(yōu)良品種選育和無公害規(guī)范種植?！墩憬≈兴幉谋Ｗo(hù)和發(fā)展規(guī)劃(2015—2020年)》(浙政辦發(fā)〔2015〕117號(hào))提出加快瀕危稀缺中藥材種植養(yǎng)殖基地建設(shè)，降低對(duì)野生中藥材資源的依賴程度，加強(qiáng)中藥材良種繁育基地建設(shè)，建立完善中藥材良種繁育基地，保障藥材基源安全。本文首先對(duì)藥農(nóng)提供的浙江地區(qū)金線蓮的野生種質(zhì)進(jìn)行實(shí)地踏勘調(diào)查，開展金線蓮本草考證和生態(tài)生物學(xué)基礎(chǔ)研究，為服務(wù)地方經(jīng)濟(jì)和保護(hù)浙江省中藥資源及其利用奠定基礎(chǔ)。

1 調(diào)查區(qū)域與方法

1.1 調(diào)查區(qū)域概況

浙江林地資源豐富，屬中低海拔、陰濕常綠闊葉林區(qū)，西南、西北部地區(qū)群山峻嶺，中部、東南地區(qū)以丘陵和盆地為主，東北地區(qū)地勢(shì)較低，以平原為主；受東亞季風(fēng)影響，浙江冬夏盛行風(fēng)向有顯著變化，降水有明顯的季節(jié)變化。由于浙江位于中、低緯度的沿海過渡地帶，加之地形起伏較大，氣候特點(diǎn)是：季風(fēng)顯著，四季分明，年氣溫適中，光照較多，雨量豐沛，空氣濕潤(rùn)，雨熱季節(jié)變化同步，氣候資源配置多樣。年平均氣溫15～18 ℃，極端最高氣溫33～43 ℃，極端最低氣溫-2.2～17.4 ℃；年平均雨量為980～2 000 mm，年平均日照時(shí)長(zhǎng)1 710～2 100 h。

1.2 方法

通過市場(chǎng)收集企業(yè)組培苗、野外跟蹤調(diào)查、實(shí)地調(diào)研，全面地了解浙江省各地區(qū)的野生和栽培金線蓮資源狀況，并根據(jù)金線蓮在浙江的分布情況，選擇有代表性的地點(diǎn)進(jìn)行調(diào)查。從2018年3月開始至2019年2月，共收集福建、浙江、廣東等地企業(yè)生產(chǎn)的組培無菌苗16份，溫州、金華、杭州、寧波、麗水等地野生資源12份。通過維普科技期刊數(shù)據(jù)庫(kù)、中國(guó)知網(wǎng)、萬方數(shù)據(jù)知識(shí)服務(wù)平臺(tái)等數(shù)據(jù)庫(kù)查閱文獻(xiàn)，與文獻(xiàn)的文字描述、插圖做比較，為浙江省金線蓮野生資源馴化栽培提供技術(shù)支撐。

檢測(cè)土壤采樣于金華安地、蘭溪、箬陽(yáng)等地，喬木層主要建群物種有殼斗科、樟科、大戟科、?？?、棕櫚科等，林下灌木層和草本層植物多為耐陰植物。采樣方法為對(duì)角線采樣法，按LY/T 1237—1999《森林土壤有機(jī)質(zhì)的測(cè)定及碳氮比的計(jì)算》、LY/Y1228—2015《森林土壤氮的測(cè)定》、LY/T1234—2015《森林土壤鉀的測(cè)定》、LY/T1232—2015《森林土壤磷的測(cè)定》、LY/T1239—1999《森林土壤pH的測(cè)定》等方法測(cè)定土壤有機(jī)質(zhì)、氮、磷、鉀含量和pH。

2 結(jié)果與分析

2.1 金線蓮主產(chǎn)區(qū)種質(zhì)資源生物學(xué)特性

從福建、江西、廣東、浙江等地搜集金線蓮組培無菌種苗資源16份，進(jìn)行種質(zhì)資源編號(hào)。接種培養(yǎng)5個(gè)月后，存放于金華市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院溫室內(nèi)，每份金線蓮資源隨機(jī)選取30株鮮樣，進(jìn)行形態(tài)指標(biāo)測(cè)定，結(jié)果如表1所示。

表1 金線蓮主產(chǎn)區(qū)種質(zhì)資源生物學(xué)特性

2.2 人工栽培金線蓮的主要類型

市場(chǎng)上大部分人工栽培的金線蓮來自于野生資源，品系混雜，產(chǎn)量與內(nèi)在品質(zhì)不穩(wěn)定，嚴(yán)重影響藥材的質(zhì)量。經(jīng)過長(zhǎng)期不斷的人工選擇，選育出產(chǎn)量高、質(zhì)量穩(wěn)定、適應(yīng)性強(qiáng)的優(yōu)良品種是發(fā)展金線蓮產(chǎn)業(yè)的重要基礎(chǔ)[7]。目前，根據(jù)葉片形狀和莖稈顏色，將人工栽培的金線蓮分為3個(gè)主要類型，分別為尖葉金線蓮、臺(tái)灣銀線蓮、圓葉金線蓮。

尖葉金線蓮(A.roxburghii)葉片卵圓形或卵形，長(zhǎng)1.3～3.5 cm，寬0.8～3.0 cm，上面暗紫色或黑紫色，具金紅色帶有絹絲光澤的美麗網(wǎng)脈，背面淡紫紅色，先端近急尖或稍鈍；莖直立，肉質(zhì)，圓柱形；花苞片淡紅色，卵狀披針形或披針形；花色白或淡紅，不倒置，花瓣質(zhì)地薄，近鐮刀狀，花期8(9)—11(12)月；生于海拔50～1 600 m的常綠闊葉林下或溝谷陰濕處。

臺(tái)灣銀線蓮(A.formosanus)葉片卵狀長(zhǎng)圓形或卵形，長(zhǎng)4～6 cm，寬2.5～3.0 cm，綠色，具白色、光澤美麗的網(wǎng)脈，先端漸尖，基部圓或鈍；莖圓柱形，直立，肉質(zhì)；子房圓柱形，扭轉(zhuǎn)，被毛；花不甚張開，倒置；花瓣白色，花期10—11月；生于海拔500～1 600 m的陰濕森林或竹林內(nèi)。

圓葉金線蓮(A.chapaensis)植株高9～15 cm，葉片卵形，背面淺紅色，長(zhǎng)2～5 cm，寬1.5～3.5 cm，先端急尖，基部圓鈍，兩側(cè)不等寬；節(jié)上生根；莖上升或直立，圓柱形，無毛；花白色，不倒置；花瓣斜歪的半卵形，花期7—8月；生于海拔1 300 m山坡密林的陰濕地。

2.3 浙江省野生金線蓮學(xué)名考證

金線蓮是浙、閩、臺(tái)等省的民間珍稀草藥，歷代本草古籍雖未見記載，但在浙江平陽(yáng)、建德、淳安、金華婺城區(qū)等地也均有民間使用習(xí)慣。目前，現(xiàn)有文獻(xiàn)中對(duì)金線蓮名稱記載較為混亂，異名繁多。收集的植物種源經(jīng)分類鑒定，浙江省藥用野生金線蓮共有3種(標(biāo)樣保存于金華國(guó)家農(nóng)業(yè)科技園區(qū)金華市荊龍生物科技有限公司)，形態(tài)特征主要如下：

2.3.1 金線蓮

植物學(xué)名為金線蘭，葉片為卵圓或卵形，主要特征葉上面暗紫色，具有明顯金紅色帶有絹絲光澤的網(wǎng)脈，總狀花序。

2.3.2 浙江金線蘭

植株高8～16 cm，具匍匐狀根莖，莖肉質(zhì)，淡紅褐色，被柔毛，下部集生葉2～6枚，中、上部具鱗片狀葉1～2枚。葉片稍肥厚，寬卵形至卵圓形，長(zhǎng)0.7～2.0 cm，寬0.6～2.1 cm，先端急尖，基部圓形，邊緣微波狀，全緣，上面呈天鵝絨狀綠紫色，具絹絲狀光澤；具脈5～7條，脈紋金黃色，下面略帶淡紫紅色，兩面均無毛；葉柄長(zhǎng)約6 mm，基部擴(kuò)大抱莖?？偁罨ㄐ蚓呋?～3條，花序軸被柔毛；花苞片膜質(zhì)，卵狀披針形，長(zhǎng)約6.5 mm，寬3.5 mm，先端漸尖，外面被柔毛；花瓣白色，與花苞片近等長(zhǎng)或稍短，被白花期8月[8]。標(biāo)本采自金華箬陽(yáng)，生于溪邊巖石上，海拔600～1 000 m，浙江金線蘭與金線蓮葉片相似，但花唇瓣的裂片較寬，倒斜三角形，爪部?jī)蓚?cè)具2～5枚小齒，和金線蓮相比，其花瓣非長(zhǎng)流蘇狀，兩者較易區(qū)別。

2.3.3 無線金線蓮

無線金線蓮和金線蓮常以伴生形式生長(zhǎng)于浙江海拔400～700 m的竹林下，據(jù)民間習(xí)慣稱葉面具明顯金黃色網(wǎng)脈的為金線蓮母(金線蓮)，葉面葉脈不明顯或無脈的為金線蓮公(或無線金線蓮)。胡珊梅等[9]運(yùn)用RAPD技術(shù)，對(duì)同一采集地具有不同葉面特征的有線金線蓮和無線金線蓮進(jìn)行了DNA指紋鑒定，結(jié)果表明，二者具有部分共同的譜帶，但又有各自的特征性譜帶，說明二者具有較大的遺傳變異。筆者將采收到的金線蓮種子進(jìn)行組織培養(yǎng)后，發(fā)現(xiàn)種子苗也有無紋和有紋同時(shí)存在，對(duì)其花器解剖觀察后初步認(rèn)為兩者屬同種植物。

2.4 浙江省野生金線蓮的分布

根據(jù)長(zhǎng)期對(duì)野外金線蓮考察的記錄資料和民間走訪結(jié)果，選擇具有代表性的泰順、文成、平陽(yáng)等地，于2013年10月—2017年10月進(jìn)行采樣，發(fā)現(xiàn)野生金線蓮在浙江省林下山凹面比凸面多，山的下半部比上部多，這說明金線蓮生長(zhǎng)需要蔭濕條件好的生態(tài)環(huán)境。植株成點(diǎn)狀分布，植株間距離有近有遠(yuǎn)，獨(dú)立生長(zhǎng)，相互之間沒有黏連，據(jù)此初步判斷金線蓮在野外以種子繁殖為主(表2)。

表2 浙江野生資源分布概況

金線蓮花期為8—11月，結(jié)果期為11月中旬至12月上旬，海拔高處比海拔低處晚開花。在12個(gè)樣地共勘查1 876 m2，共獲得384株金線蓮(無線金線蓮29株)。金線蓮居群發(fā)育較為完整，株高為3.5～11.7 cm。各樣地中金線蓮為不連續(xù)的散點(diǎn)狀分布，資源存量極為稀少，處于瀕危狀態(tài)，生存形勢(shì)十分嚴(yán)峻，雖然未達(dá)到極危等級(jí)，但部分居群僅有5株植株的存量。

2.5 野生金線蓮?fù)寥郎程攸c(diǎn)

由表3可以看出，4個(gè)采樣地浙江野生金線蓮生長(zhǎng)土壤pH為5.25～5.90，有機(jī)質(zhì)含量為17.8～28.7 mg·kg-1，水解性氮含量為43～92 mg·kg-1，速效磷含量為36.0～67.4 mg·kg-1，速效鉀含量為87.0～143.2 mg·kg-1，說明金線蓮對(duì)土壤性狀要求較高，喜歡疏松、通氣、透水的腐殖土和經(jīng)風(fēng)化的微酸性土壤。在物種豐富的常綠闊葉林下，生長(zhǎng)在2～3 cm的土表層。成片的金線蓮大都分布在團(tuán)粒結(jié)構(gòu)好，速效磷、速效鉀、水解性氮含量高的區(qū)域。生長(zhǎng)在石巖和苔蘚上的金線蓮?fù)阈欠植?，植株矮小，生長(zhǎng)發(fā)育不良，可能是土層肥力不足、水氣環(huán)境不良所致。

表3 野生金線蓮?fù)寥婪治?/p>

3 野生金線蓮資源瀕危原因

海拔影響植物種類的分布和蘊(yùn)藏量，金線蓮主要分布海拔為200～1 200 m。低海拔常分布在山澗溪流兩側(cè)，高海拔一般為針闊葉混交林下陰濕、肥沃的環(huán)境，表明金線蓮在不同海拔的垂直分布幅度較廣，為該資源的合理利用提供了開發(fā)空間[10]。但目前浙江金華、溫州、麗水等地區(qū)金線蓮面臨著日趨嚴(yán)峻的生存問題，主要原因分析如下：(1)金線蓮種子只含有未分化完全的胚，在野外萌發(fā)所需的自然條件苛刻，自然繁殖率低；(2)金線蓮的根狀莖和氣生根易外露，天敵較多，鳥類和鼠類等動(dòng)物喜食，加之生境的易碎性對(duì)其生存產(chǎn)生很大壓力；(3)在經(jīng)濟(jì)利益驅(qū)使下，當(dāng)?shù)鼐用駚y采濫挖，導(dǎo)致野生金線蓮種質(zhì)遭到嚴(yán)重破壞甚至局部性的滅絕。

4 浙江金線蓮保護(hù)利用建議

通過對(duì)林下種植和大棚栽培技術(shù)的研究和推廣，建立浙江優(yōu)良金線蓮品種仿野生體系，可以促進(jìn)浙江金線蓮特色資源可持續(xù)利用和產(chǎn)業(yè)化發(fā)展，更好地為人民造福，讓人民受益。

在收集野生金線蓮資源過程中，通過眼觀、手摸等方法，發(fā)現(xiàn)葉片的紋路密集程度、外觀形狀特征明顯不一致(圖1)，需要進(jìn)一步查閱相關(guān)文獻(xiàn)和應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)進(jìn)行分類。筆者認(rèn)為浙江省應(yīng)加強(qiáng)金線蓮資源圃建設(shè)，考證其基源和品種，建立金線蓮資源圃，進(jìn)行專業(yè)評(píng)價(jià)鑒定。

圖1 不同金線蓮資源的葉片特征

5 小結(jié)

結(jié)合金線蓮淺根性生長(zhǎng)特性，種植時(shí)建議選擇保濕性好、有少量枯枝覆蓋物、腐殖土較多、通氣性和持水性相互協(xié)調(diào)的常綠闊葉林下仿野生栽種。如有機(jī)質(zhì)在15 mg·kg-1以下、綜合肥力較低、團(tuán)性結(jié)構(gòu)性差的土壤，需要進(jìn)行土壤改良。我們除利用宣傳途徑，加強(qiáng)金線蓮分布點(diǎn)的管護(hù)力度，增強(qiáng)分布區(qū)內(nèi)居民對(duì)金線蓮種質(zhì)及其生境的保護(hù)意識(shí)外，還應(yīng)該盡快開展和完善金線蓮的保護(hù)措施，通過科研院校等機(jī)構(gòu)引種進(jìn)行遷地保護(hù)，促進(jìn)浙江金線蓮瀕危機(jī)制、繁殖策略和技術(shù)的研究，開展浙江金線蓮人工仿野生林下栽培，從根本上緩解民眾對(duì)野生資源的需求，使該珍稀藥用植物得到合理的開發(fā)利用，助力浙中藥材金線蓮資源的可持續(xù)發(fā)展。