UGT1A1 基因多態(tài)性與伊立替康所致不良反應(yīng)的相關(guān)性分析*

吳燕子，陳曉燚，薛 源，初亞男,黃曉暉

中國人民解放軍東部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院 藥理科，南京210002

伊立替康是一種水溶性喜樹堿類似物，通過干擾哺乳動物DNA 拓?fù)洚悩?gòu)酶I 而發(fā)揮抗癌活性，目前已廣泛用于結(jié)直腸癌、肺癌、胃癌、婦科腫瘤等實體腫瘤的治療[1]。在實際應(yīng)用中，伊立替康的療效存在較大的個體差異。伊立替康引起的嚴(yán)重不良反應(yīng)、尤其是中性粒細(xì)胞減少和遲發(fā)性腹瀉在一定程度上限制了其臨床應(yīng)用[2]。隨著精準(zhǔn)化和個體化給藥研究的深入發(fā)展，伊立替康產(chǎn)生毒性的原因之一被認(rèn)為與人體內(nèi)尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶（uridine-5’-diphosphate glucuronosyl，UGT)的活性下降有關(guān)。

伊立替康是一種前體藥物，在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為活性代謝物SN-38，其對腫瘤的抑制活性是伊立替康的100～1000 倍[3]。SN-38 經(jīng)UGT1A1 代謝而失活，當(dāng)編碼UGT1A1 的基因發(fā)生突變、UGT1A1 活性降低時，SN-38 在體內(nèi)蓄積，這與伊立替康誘導(dǎo)的毒性反應(yīng)密切相關(guān)[4]。UGT1A1可有多種突變位點，其中UGT1A1*28 和UGT1A1*6 的遺傳多樣性對伊立替康的毒性影響更為顯著。UGT1A1*28 和UGT1A1*6 的突變頻率在不同種族人群中存在差異：UGT1A1*28在高加索人中的突變頻率高達(dá)30%～45%，在亞洲人群中僅10%～20%；而UGT1A1*6 則在亞洲人群中具有較高的突變頻率，可達(dá)16%～40%[5，6]。因此，研究UGT1A1*28 和UGT1A1*6 的基因多態(tài)性對預(yù)測伊立替康的毒性具有重要意義。本研究對我院2016～2018 年使用伊立替康并送檢的腫瘤患者血液樣本UGT1A1*28 和UGT1A1*6 基因多態(tài)性進(jìn)行分析，并探討其與伊立替康不良反應(yīng)的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

本研究為回顧性研究，對象為2016 年至2018年就診于我院并接受伊立替康為基礎(chǔ)治療方案的腫瘤患者。入選標(biāo)準(zhǔn)：①組織學(xué)或病理學(xué)確診為惡性腫瘤；②既往未接受伊立替康治療；③治療前行UGT1A1 基因檢測；④有完整隨訪資料。收集伊立替康所致不良反應(yīng)情況，并將不良反應(yīng)按美國國立癌癥研究所 《常見不良反應(yīng)事件評價標(biāo)準(zhǔn)》（CTCAE 4.0 版）分為Ⅰ～Ⅳ度。

1.2 治療方法

本研究共納入76 例患者，為消化道腫瘤、婦科腫瘤等多種腫瘤患者，其使用伊立替康化療共計265 個療程。采用聯(lián)合給藥方案，伊立替康每三周給藥1 次，劑量為65～180 mg·m-2。根據(jù)患者UGT1A1基因多態(tài)性和不良反應(yīng)耐受性調(diào)整伊立替康后續(xù)療程的給藥劑量。

1.3 統(tǒng)計方法

采用SPSS 20.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，組間基線特征比較、UGT1A1 基因多態(tài)性與不良反應(yīng)相關(guān)性分析均采用卡方檢驗，P＜0.05 為差異具有顯著性。在計算危險比（OR）和95%置信區(qū)間（CI）時，如分母頻數(shù)出現(xiàn)0，則對該組數(shù)據(jù)所有頻數(shù)加0.5 處理，再采用卡方檢驗進(jìn)行計算[7]。

2 結(jié)果

2.1 UGT1A1 基因多態(tài)性與患者臨床基礎(chǔ)資料

76 例患者檢測了UGT1A1*28 基因多態(tài)性，其中有45 例患者同時檢測UGT1A1*6 基因多態(tài)性。UGT1A1*28 基因多態(tài)性分為野生型（TA6/6）、雜合突變型（TA6/7）、純合突變型（TA7/7）；UGT1A1*6基因多態(tài)性分為野生型（G/G）、雜合突變型（G/A）、純合突變型（A/A）。不同基因型患者臨床基礎(chǔ)資料比較均無顯著差異（P＞0.05），見表1。

表1 UGT1A1 基因多態(tài)性與患者的臨床基礎(chǔ)資料

2.2 UGT1A1 基因多態(tài)性分布情況

76 例患者UGT1A1*28 基因多態(tài)性分布情況為：TA6/6、TA6/7 和TA7/7 型分別為58 例、17 例和1例，雜合突變比率為22.37%，純合突變比率為1.32%；在45 例進(jìn)行UGT1A1*6 基因多態(tài)性檢測患者中，G/G、G/A 和A/A 型分別為34 例、10 例和1 例，雜合突變比率為22.22%，純合突變比率為2.22%。在45 例同時檢測兩種基因多態(tài)性的患者中，兩種基因均為野生型的有24 例，存在一種雜合突變的有18例，且UGT1A1*28 與UGT1A1*6 突變頻率相同，各有9 例。另外，1 例患者同時存在兩種雜合突變，1 例患者UGT1A1*28 純合突變，1 例患者UGT1A1*6 純合突變，未檢測到兩種純合性突變同時存在，見表2。

表2 UGT1A1*28 和UGT1A1*6 基因多態(tài)性分布情況（n=45 例）

2.3 UGT1A1 基因多態(tài)性與伊立替康誘導(dǎo)的不良反應(yīng)分析

分別統(tǒng)計UGT1A1*28 和UGT1A1*6 不同基因型患者發(fā)生各類不良反應(yīng)的頻次（單個化療周期中出現(xiàn)某不良反應(yīng)記為1 次），發(fā)生率高且對臨床治療影響較大的不良反應(yīng)按照嚴(yán)重程度進(jìn)行分級，見表3。采用卡方檢驗分析基因型與不良反應(yīng)的相關(guān)性，結(jié)果顯示，UGT1A1*28 基因的TA6/7 和TA7/7突變型患者發(fā)生白細(xì)胞減少的風(fēng)險較TA6/6 野生型有顯著統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.028），其他不良反應(yīng)發(fā)生率無顯著差異（P＞0.05）。UGT1A1*6 基因的G/A 和A/A 突變型患者不良反應(yīng)與G/G 野生型無顯著差異（P＞0.05）。對各基因型患者發(fā)生的Ⅲ-Ⅳ級不良反應(yīng)進(jìn)行統(tǒng)計分析表明，UGT1A1*28 基因突變患者發(fā)生Ⅲ～Ⅳ級白細(xì)胞減少的風(fēng)險顯著高于野生型（OR=10.79，95%CI：1.24～93.86，P=0.016），見表4。其他Ⅲ～Ⅳ級不良反應(yīng)未顯示出與基因型的顯著相關(guān)性。Ⅲ～Ⅳ級的惡心、嘔吐、腹痛等未出現(xiàn)。

表3 UGT1A1 基因多態(tài)性與不良反應(yīng)相關(guān)性分析（次）

3 討論

UGT1A1 基因多態(tài)性分布有著明顯的種族差異，Etienne-Grimaldi MC 等[8]研究表明，在美洲和歐洲高加索人種中，UGT1A1*28 突變率高,分別為38%～45%和29%～39%；而在亞裔人種中UGT1A1*28 突變率為15%～18%，純合突變約為3%。馬東等[9]、王日銘等[10]研究發(fā)現(xiàn)，雜合突變型TA6/7 分別占15%～25%和17.92%，純合突變型TA7/7 分別為低于5%、3.91%。在本研究中，UGT1A1*28 基因多態(tài)性分布情況與上述文獻(xiàn)報道基本一致，雜合突變型TA6/7 型17 例（占22.37%），純合突變型TA7/7 型1 例（占1.32%）。UGT1A1*6 基因多態(tài)性為亞裔人群特有的突變類型，Teh LK 等[11]報道，亞裔人群有13%～23%會發(fā)生單位點突變，約1%會發(fā)生雙位點突變。在王日銘等[10]的研究中，UGT1A1*6 雜合突變型G/A 占35.09%，純合突變型A/A 占3.51%。在張春玲等[12]研究中，納入167 例中國漢族患者，UGT1A1*6 基因雜合突變型G/A 占33.53%，純合突變型A/A 占3.59%。在本研究中，有45 例患者進(jìn)行了UGT1A1*6基因多態(tài)性檢測，G/G 型34 例（占75.56%），G/A 型10 例（占22.22%），A/A 型1 例（占2.22%），突變比率低于國內(nèi)文獻(xiàn)報道，可能的原因：一是樣本量少帶來的偏差；二是地域之間存在差異。

表4 UGT1A1 基因多態(tài)性與Ⅲ～Ⅳ級不良反應(yīng)相關(guān)性分析

UGT1A1 基因多態(tài)性導(dǎo)致伊立替康的活性代謝物SN-38 失活減慢，使中性粒細(xì)胞減少、白細(xì)胞減少、血小板減少、腹瀉等的發(fā)生率增加。多項薈萃分析研究表明[13，14]，UGT1A1*28 或UGT1A1*6 突變的患者發(fā)生嚴(yán)重中性粒細(xì)胞或嚴(yán)重腹瀉的風(fēng)險顯著高于野生型患者，尤其純合突變型患者，風(fēng)險可呈多倍增加，如亞裔人群UGT1A1*6 基因A/A 型患者發(fā)生嚴(yán)重腹瀉的風(fēng)險可能是G/G 型患者的10 倍以上。本研究結(jié)果表明，UGT1A1*28 基因突變患者發(fā)生Ⅲ～Ⅳ級白細(xì)胞減少的風(fēng)險顯著高于野生型（OR=10.79，95%CI：1.24～93.86，P=0.016）。本研究中出現(xiàn)1 例嚴(yán)重腹瀉，發(fā)生于UGT1A1*6 基因雜合突變的患者，提示UGT1A1*6 基因突變可能增加Ⅲ～Ⅳ級腹瀉的風(fēng)險。在伊立替康應(yīng)用中，導(dǎo)致的肝損傷發(fā)生率也較高，但未發(fā)現(xiàn)與UGT1A1 基因多態(tài)性有顯著相關(guān)性（P＞0.05）。因此，在臨床應(yīng)用伊立替康時，應(yīng)充分考慮患者UGT1A1 基因多態(tài)性情況，對可能發(fā)生的不良反應(yīng)風(fēng)險進(jìn)行預(yù)測，由此調(diào)整伊立替康的給藥劑量，以達(dá)到個體化治療的目的。由于納入研究的樣本量少，未對伊立替康的劑量分組，也未對腫瘤類型分組，因此本研究存在一定的局限性。