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    水產(chǎn)品真?zhèn)舞b別與產(chǎn)地溯源檢測(cè)研究進(jìn)展

    2020-03-19 10:00:06陳柔含古淑青鄧曉軍
    分析測(cè)試學(xué)報(bào) 2020年2期
    關(guān)鍵詞:物種檢測(cè)方法

    陳柔含,古淑青,鈕 冰,鄧曉軍

    (1.上海大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院 食品工程系,上海 200444;2.上海海關(guān)動(dòng)植物與食品檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心,上海 200135)

    水產(chǎn)品是世界上貿(mào)易最多的食品,隨著人類對(duì)食物質(zhì)量要求的日益增高,大西洋鮭魚、鱈魚等高值水產(chǎn)品的消費(fèi)量逐年增大,在水產(chǎn)品的種類、來源、養(yǎng)殖方式、運(yùn)輸、加工、包裝、標(biāo)簽等各個(gè)環(huán)節(jié)發(fā)生食品欺詐的概率也越來越高[1]。低值水產(chǎn)品冒充高值水產(chǎn)品,錯(cuò)誤標(biāo)簽原產(chǎn)地,錯(cuò)誤標(biāo)記成分及成分比例等時(shí)有發(fā)生,不僅影響了消費(fèi)者安全和權(quán)益,而且影響了整個(gè)食品工業(yè)發(fā)展。目前各個(gè)國家和國際組織已經(jīng)制定了許多法規(guī)來防止摻假和食品標(biāo)簽的錯(cuò)誤標(biāo)識(shí),水產(chǎn)品必須有“可追溯標(biāo)簽”,不得誤標(biāo)物種信息[2]。

    圖1 水產(chǎn)品真?zhèn)舞b別和溯源檢測(cè)的分析方法

    準(zhǔn)確、可靠的分析方法是確定食品標(biāo)識(shí)是否真實(shí)的前提。傳統(tǒng)方法主要通過形態(tài)學(xué)方法判別新鮮或者未經(jīng)加工的冷凍水產(chǎn)品,但無法辨認(rèn)相似水產(chǎn)品及精加工制品,這就需要更加準(zhǔn)確可靠的分析方法對(duì)食品真實(shí)性進(jìn)行監(jiān)測(cè)和控制。目前水產(chǎn)品真?zhèn)舞b別與溯源檢測(cè)的常用方法主要有光譜、核磁共振(NMR)、酶聯(lián)免疫(ELISA)、核酸檢測(cè)、電泳、色譜及質(zhì)譜等技術(shù)(如圖1所示)。光譜技術(shù)能夠快速、環(huán)保、無創(chuàng)地對(duì)肉制品進(jìn)行光譜和空間成像,但受限于光譜范圍和水分含量,且成本較高[3]。ELISA法可針對(duì)抗原抗體特異性結(jié)合并發(fā)生顯色反應(yīng),但無法高通量檢測(cè),且假陽性概率高。核酸檢測(cè)技術(shù)能直接從基因?qū)用骅b別,但加工過程易使DNA變性損失。電泳法可對(duì)樣品進(jìn)行分離純化和鑒定,但重現(xiàn)性較差。色譜法定性分析較弱。而質(zhì)譜(MS)法可給出化合物的分子結(jié)構(gòu)信息,在食品檢測(cè)中的應(yīng)用越來越普及,已成為當(dāng)前國際檢測(cè)領(lǐng)域中通用的“金標(biāo)準(zhǔn)”。目前,基于質(zhì)譜的水產(chǎn)品鑒偽和溯源已有較多研究,主要利用同位素比值差異、小分子物質(zhì)結(jié)構(gòu)和含量差異以及蛋白質(zhì)差異進(jìn)行檢測(cè)分析[4-6]。其中,基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)是近年來廣泛關(guān)注的研究熱點(diǎn),通過高效液相色譜、毛細(xì)管電泳等分離手段結(jié)合電噴霧(ESI)、基質(zhì)輔助激光解析(MALDI)等不同類型的離子化技術(shù)檢測(cè),在蛋白水平上進(jìn)行物種鑒別和產(chǎn)地溯源。本文將就水產(chǎn)品鑒偽及溯源的最新研究進(jìn)展進(jìn)行論述。

    1 水產(chǎn)品摻偽與溯源概況

    摻偽主要包括摻假、摻雜和偽造。水產(chǎn)品摻偽主要指人為向水產(chǎn)品中非法摻入外觀、物理性狀或形態(tài)相似的物質(zhì)以增加其重量或體積,或采用低值魚代替高值魚,如黑線鱈代替真鱈,虹鱒魚代替三文魚,巴沙魚標(biāo)榜為龍利魚,從而降低成本獲取利潤[7]。長時(shí)間冷凍而皺縮的烏賊用水浸泡后恢復(fù)“新鮮”且有增重效果,小黃魚放置過久變暗,用黃鱔血或黃粉涂抹改善色澤等行為,通過故意摻水或添加非法添加劑進(jìn)行摻偽。

    溯源是水產(chǎn)品安全管理的一個(gè)重要手段,產(chǎn)地溯源是其重要組成部分,有利于保護(hù)消費(fèi)者權(quán)益,保護(hù)地區(qū)特色產(chǎn)品,確保公平競(jìng)爭,并且能夠在突發(fā)環(huán)境污染、疫病疫情等食品安全事件時(shí),有效召回產(chǎn)品[8]。比如新西蘭南岸沿海和南極圈之間鱈魚資源豐富,生長環(huán)境好,因此該地產(chǎn)出的鱈魚純正、營養(yǎng)最佳,時(shí)有其他地區(qū)鱈魚冒充新西蘭鱈魚進(jìn)行銷售,欺騙消費(fèi)者。“陽澄湖大閘蟹”、“波士頓龍蝦”、“阿拉斯加帝王蟹”等均屬于地域特色性水產(chǎn)。溯源技術(shù)的出現(xiàn)使得產(chǎn)品得到監(jiān)管和保障,許多國家已經(jīng)建立了相關(guān)可追溯體系及法律法規(guī)。

    2 水產(chǎn)品真?zhèn)舞b別與溯源檢測(cè)方法

    現(xiàn)代分析方法已經(jīng)廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)品的真?zhèn)舞b別與溯源檢測(cè)方面,光譜法、ELISA及核酸檢測(cè)通過靶標(biāo)物質(zhì)鑒別真?zhèn)?,電泳、色譜和質(zhì)譜等方法具有強(qiáng)大的分離分析能力,在摻假檢測(cè)基礎(chǔ)上可進(jìn)一步定量,而核磁共振及同位素質(zhì)譜技術(shù)對(duì)水產(chǎn)品溯源具有很大幫助。

    2.1 光譜法

    基于振動(dòng)光譜學(xué)的近紅外(NIR)和拉曼光譜(Raman spectroscopy)分別通過電磁輻射吸收和拉曼散射測(cè)定分子振動(dòng)信息得到光譜圖,結(jié)合高光譜(HSI)成像技術(shù)可以得到空間圖像信息,具有無損、快速和準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn),通常用于食品認(rèn)證和質(zhì)量控制[9]。Alamprese等[10]用NIR法根據(jù)不同魚種的紅外吸收峰不同,準(zhǔn)確鑒別了兩對(duì)相似的魚種,鯔魚和紅鰹、鰈和偏口魚。NIR結(jié)合HIS可用來區(qū)別新鮮和冷凍鱈魚片,但靈敏度較低,不適合做痕量分析[11]。Hikima等[12]開發(fā)了一種拉曼光譜法用于檢測(cè)鮭魚片中的蝦青素含量,通過計(jì)算蝦青素/(蛋白質(zhì)和脂肪)的相對(duì)強(qiáng)度比值能有效區(qū)分大西洋鮭、銀鮭和紅鮭。拉曼與近紅外光譜互為補(bǔ)充,可以鑒別特殊結(jié)構(gòu)或特征基團(tuán),但在定性的準(zhǔn)確性和定量的靈敏度方面有待于進(jìn)一步提高。

    熒光光譜是通過熒光標(biāo)記氨基酸、核酸、NDAH和一些氧化產(chǎn)物,根據(jù)物種、地理來源和加工條件來評(píng)估魚類的新鮮度及類別[13]。

    2.2 核磁共振波譜法

    核磁共振波譜(NMR)法是將核磁共振現(xiàn)象應(yīng)用于分子結(jié)構(gòu)的測(cè)定,其原理是微觀粒子吸收不同能量的電磁波后可在不同能級(jí)上躍遷,從而表現(xiàn)出核磁共振譜圖的吸收峰位置、強(qiáng)度和精細(xì)結(jié)構(gòu)不同。近年來高分辨核磁共振波譜儀的出現(xiàn)為食品中的代謝物提供了高通量光譜/結(jié)構(gòu)信息。NMR法可借助分析有機(jī)物中13C、1H等元素來區(qū)分野生和養(yǎng)殖魚類,從而進(jìn)行地理溯源[14-17]。法國阿基坦魚子醬久負(fù)盛名,常被其它產(chǎn)地的魚子醬冒用,Heude等[18]通過1H NMR對(duì)代謝物進(jìn)行光譜分析,運(yùn)用多變量統(tǒng)計(jì)模型對(duì)阿基坦魚子醬和意大利、中國、烏拉圭地區(qū)的魚子醬進(jìn)行了區(qū)分。NMR法的最大優(yōu)勢(shì)是能通過同分異構(gòu)體得到物質(zhì)結(jié)構(gòu)式,且提供的原子層面信息遠(yuǎn)大于紅外光譜,但該方法儀器價(jià)格昂貴,靈敏度較低。

    2.3 酶聯(lián)免疫法

    酶聯(lián)免疫(ELISA)法是通過將抗原或抗體固定化和酶標(biāo)記,根據(jù)顏色反應(yīng)來判定的分析方法。東大西洋石斑魚和多鋸鱸為兩種高值魚,Asensio等[19]采用間接法對(duì)餐館中的44個(gè)魚粉樣品進(jìn)行ELISA檢測(cè),發(fā)現(xiàn)29份樣品為假冒產(chǎn)品。Santaclara等[20]建立了多重PCR-ELISA方法,DIG標(biāo)記后的PCR產(chǎn)物用于ELISA測(cè)定,出現(xiàn)藍(lán)綠色則為金槍魚,能有效將金槍魚與代替物種區(qū)分開來。此外,ELISA和電泳等方法可結(jié)合使用,Liang等[21]將ELISA和SDS-PAGE結(jié)合統(tǒng)計(jì)得出小清蛋白免疫反應(yīng)強(qiáng)烈程度與其含量之間的相關(guān)性,并通過不同的小清蛋白特異性抗體來鑒別南半球魚的物種。

    目前ELISA法已經(jīng)發(fā)展成為商業(yè)試劑盒,具有很強(qiáng)的專一性,但無法進(jìn)行高通量檢測(cè),穩(wěn)定性和重復(fù)性也較差,易發(fā)生交叉反應(yīng)。

    2.4 核酸檢測(cè)技術(shù)

    DNA含生物體所有遺傳信息,基于核酸的分析技術(shù)能最本源地區(qū)分相似水產(chǎn)品。細(xì)胞色素C氧化酶I(COI)在不同魚種具有特異性,通過基因條碼COI建立可靠的DNA指紋圖譜可用于快速鑒偽[22-25]。Taboada等[26]開發(fā)雙重PCR-ELISA方法可正確鑒別3種不同類型鱈魚(Molvamolva、Gadusmorhua、Gaduschalcogrammus)。Molkentin等[27]用等電聚焦分離鮭魚水溶性蛋白質(zhì),PCR擴(kuò)增分析有機(jī)、養(yǎng)殖和野生型鮭魚。Fernández-Pérez等[28]開發(fā)了基于5S rDNA和ITS區(qū)域的PCR-RFLP法鑒別4種歐洲斧蛤,方法高效、快速、簡單,對(duì)溯源具有一定參考價(jià)值。轉(zhuǎn)基因水產(chǎn)品也是摻假的一種,實(shí)時(shí)熒光定量PCR設(shè)計(jì)內(nèi)源基因靶標(biāo)來檢測(cè)DNA,而非轉(zhuǎn)基因樣品無檢測(cè)信號(hào),從而做出可靠判斷[29]??梢曅酒且环N利用特異探針雜交產(chǎn)生可見信號(hào)的基因芯片技術(shù),韓建勛等[30]采用該技術(shù)建立了一種常見魚源性成分的高通量快檢方法,為標(biāo)簽認(rèn)證和魚肉溯源提供了快速、有效的技術(shù)支持。Rasal等[31]基于單核苷酸多態(tài)性(SNP)建立了二代測(cè)序高通量測(cè)序技術(shù),得到22種魚類的遺傳差異并對(duì)其進(jìn)行了準(zhǔn)確分類。

    核酸檢測(cè)技術(shù)關(guān)鍵是分析具有種間差異的可靠核酸片段,但高溫烹飪及干燥等加工過程會(huì)對(duì)DNA造成一定損失,需進(jìn)一步探索。

    2.5 電泳技術(shù)

    電泳作為近現(xiàn)代高分辨分離技術(shù),利用帶電粒子在電場(chǎng)中分離的原理,隨著基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)的發(fā)展,凝膠電泳、雙向電泳、毛細(xì)管電泳技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生,尤其是毛細(xì)管電泳已成為分離DNA片段的重要工具和首選方法[32]。毛細(xì)管電泳以毛細(xì)管為分離通道進(jìn)行快速分配,其分析效率高,在蛋白分析中得到廣泛應(yīng)用[33]。但毛細(xì)管電泳法的進(jìn)樣量少、檢測(cè)光程短,可通過結(jié)合化學(xué)發(fā)光檢測(cè)提高方法的靈敏度[34-35]。Walker等[36]基于芯片的微流體電泳分析魚類肌肉蛋白并分類,能顯著區(qū)分鯰魚、鯛魚、石斑魚以及非法替代品,靈敏度、特異性和準(zhǔn)確度均大于98%。

    2.6 色譜技術(shù)

    色譜主要是將各種化合物分離后進(jìn)行定性、定量分析,常見的色譜技術(shù)包括氣相色譜(GC)和液相色譜(LC)技術(shù)。水產(chǎn)品中通常含有大量脂質(zhì)、脂肪酸(如ω-3脂肪酸、甘油三酯(TG)),常用反向高效液相色譜(RP-HPLC)來鑒別真?zhèn)蝃37]。油魚(Ruvettuspretiosus)油脂含量極高,且不被人體消化,不法商販用其替代鱈魚被消費(fèi)者食用后易出現(xiàn)腹瀉等癥狀,Nichols等[38]采用氣相色譜和薄層色譜法對(duì)富含油脂魚類進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)其含有大量非皂化性脂質(zhì),對(duì)人體健康存在威脅。將色譜與質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)一步聯(lián)用可提高靈敏度和準(zhǔn)確性,從而實(shí)現(xiàn)精確定量。

    2.7 質(zhì)譜技術(shù)

    2.7.1 基于同位素的質(zhì)譜技術(shù)不同種類及來源的水產(chǎn)品同位素比值(δ)因受氣候、環(huán)境、生物代謝等因素影響而存在差異,因此,可借助同位素組成來鑒定水產(chǎn)品真?zhèn)闻c溯源。Carrera等[39]測(cè)定了13種主要商業(yè)鱈魚δ13C和δ15N,結(jié)果表明不同地理位置,其同位素比值存在差異。Gopi等[40-41]通過連續(xù)流質(zhì)譜(CF-IRMS)得到δ13C和δ15N,可區(qū)分盲曹魚、斑節(jié)對(duì)蝦的產(chǎn)地來源,結(jié)合Itrax XRF區(qū)分養(yǎng)殖和野生捕獲的斑節(jié)對(duì)蝦,其準(zhǔn)確度可達(dá)90%和95%。地理位置結(jié)合飼料喂養(yǎng)差異性也能精確溯源,Camin等[42]測(cè)定虹鱒魚中H、C、N、O和S同位素比值,量化地理和營養(yǎng)物質(zhì)關(guān)系,可有效評(píng)估地理來源。由于各養(yǎng)殖場(chǎng)飼料組成不同,結(jié)合脂肪酸和同位素可以精確溯源[43]。Zhang等[44]采用同位素比質(zhì)譜(IRMS)結(jié)合脂肪酸組成對(duì)不同采樣點(diǎn)的野生海參進(jìn)行差異分析,以實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確分類與溯源。將元素標(biāo)記電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(FI-ICP-MS)用于檢測(cè)樣品中的蛋白質(zhì)、多肽和脂肪酸,具有高靈敏度和選擇性,對(duì)保護(hù)地域特色物種具有重大參考價(jià)值[45-46]。

    2.7.2 基于脂肪酸的質(zhì)譜技術(shù)水產(chǎn)品中的脂肪含量很高且不盡相同。液相色譜-電噴霧串聯(lián)離子阱質(zhì)譜法(LC-ESI-MS/MS)已廣泛應(yīng)用于植物油中TG的結(jié)構(gòu)解析,2010年有研究者[47]將該法應(yīng)用于鱈魚肝油的鑒偽,通過TG分子基本結(jié)構(gòu)特征及其碎裂機(jī)制來判別產(chǎn)品真?zhèn)?。Black等[48]用快速蒸發(fā)離子化質(zhì)譜(REIMS)實(shí)時(shí)檢測(cè)魚類的脂肪種類和含量確定物種,但儀器成本較高。GC-MS仍然是迄今為止用于分析脂肪酸的最常用和最可靠的方法,但由于脂肪酸的低揮發(fā)性易導(dǎo)致難以定量或靈敏度較差,需衍生為脂肪酸甲酯以便色譜分離。Borden等[49]用凝相薄膜導(dǎo)入質(zhì)譜法(CP-MIMS)直接表征鮭魚組織中的脂肪酸,并添加了甲醇改性劑以提高對(duì)較長鏈脂肪酸的分析性能,對(duì)食品認(rèn)證和營養(yǎng)分析具有重大意義。

    圖2 LC-MS/MS(A)及MALDI-TOF MS(B)法檢測(cè)水產(chǎn)品真?zhèn)?/p>

    2.7.3 基于蛋白質(zhì)的質(zhì)譜技術(shù)基于蛋白質(zhì)組學(xué)的質(zhì)譜技術(shù)已被廣泛用于食品質(zhì)量認(rèn)證,具有高通量、高靈敏度且不易受生產(chǎn)加工影響的優(yōu)勢(shì),按技術(shù)路線可分為“Bottom up”和“Top down”兩種?!癇ottom up”也稱“鳥槍法”,其工作流程通常是胰蛋白酶酶解出特征肽段進(jìn)入質(zhì)譜分析[50-51]。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)為常用分析方法,其步驟如圖2A所示,小清蛋白(RPVB)[52-54]、精氨酸激酶(Arginine kinase,AK)[55]以及特異性蛋白[56-57]均可用作標(biāo)記物來鑒別魚類和蝦類?!癟op down”的蛋白質(zhì)組學(xué)工作流程是將蛋白質(zhì)提取物直接進(jìn)行基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF MS)分析,產(chǎn)生的高豐度蛋白質(zhì)指紋通過與數(shù)據(jù)庫比對(duì)來鑒定屬和種,高效簡單,其原理如圖2B所示[58]。2013年,商業(yè)用MALDI-TOF MS在物種水平上對(duì)72個(gè)蝦樣本進(jìn)行鑒定,準(zhǔn)確率達(dá)到97%[59]。MALDI-TOF MS和PCR方法同時(shí)鑒定扇貝,兩者結(jié)果一致,但前者更高效、快速和準(zhǔn)確,具有強(qiáng)大的發(fā)展前景[60]。MALDI-TOF MS還可根據(jù)魚眼玻璃體液[61]和肌肉組織[62]分析魚體新鮮度及加工方式。MALDI-TOF MS作為非選擇性檢測(cè)方法,可為每個(gè)樣品創(chuàng)建指紋和建立物種鑒別數(shù)據(jù)庫,有望能取代DNA測(cè)序成為最佳的物種鑒別方法[63]。

    蛋白質(zhì)定性有助于鑒定和表征樣品中全套蛋白質(zhì)從而達(dá)到鑒別真?zhèn)蔚哪康?。食品加工和?chǔ)存過程造成蛋白質(zhì)翻譯后修飾會(huì)影響其活性和穩(wěn)定性[55],如羰基化、美拉德反應(yīng)、縮合反應(yīng)等,具備特異性。兩種常見的蛋白質(zhì)定性方法是肽質(zhì)量指紋圖譜(PMF)和肽片段化指紋圖譜(PFF),前者通過純化蛋白進(jìn)入MS/MS檢測(cè)后產(chǎn)生的一種或多種肽段進(jìn)行鑒定,而PFF則采用2-DE分離出未知蛋白質(zhì),酶解后進(jìn)入質(zhì)譜分析[64]。Barik等[65]通過2-DE結(jié)合 MALDI-TOF MS研究月尾鳠(Sperata seenghala)和劍鳠(Sperata aor)兩種相近諾鲿的肌漿肽差異,結(jié)果表明磷酸丙糖異構(gòu)酶在兩種諾鲿中具有特異性,從而進(jìn)行鑒別。Gerbig等[66]用解吸電噴霧電離質(zhì)譜法(DESI-MS)分析歐洲5種常見錯(cuò)誤標(biāo)識(shí)魚(鱈魚、鮭魚等)的非揮發(fā)性代謝物并正確鑒別真?zhèn)?。Nessen等[67]分析5種不同比目魚肌肉組織的酶解肽段碎片譜圖,并通過對(duì)比物種譜庫完成了物種鑒定。食品加工業(yè)中物種數(shù)據(jù)庫缺少,導(dǎo)致食物摻假事件發(fā)生,這就需要完善已有的數(shù)據(jù)庫。目前水產(chǎn)品相關(guān)數(shù)據(jù)庫主要有GPM、Uniprot、PRIDE、華大基因、Matrix Science、NCBI等。

    蛋白質(zhì)組學(xué)質(zhì)譜法還可用來定量分析,篩選物種特征肽段在多反應(yīng)監(jiān)測(cè)掃描(MRM)模式下的量化摻假。Marchis等[68]通過選擇特征肽,建立LC-ESI-MS/MS方法在MRM下分析牛、豬、水產(chǎn)品和乳制品加工產(chǎn)品,可有效監(jiān)測(cè)肉制品摻雜,最低檢測(cè)限為1 nmol/L。Hu等[69]則針對(duì)日本、中國和凡納濱產(chǎn)地對(duì)蝦,采用超高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜法(UPLC-Q-TOF MS)選出3種蝦的特征肽作為定量肽段,其特征肽大多來自肌球蛋白、精氨酸激酶和血藍(lán)蛋白。Sun等[70]建立LC-MRM-MS/MS方法分析小清蛋白,發(fā)現(xiàn)了比目魚的小清蛋白特征肽段,據(jù)此可檢測(cè)不同食品基質(zhì)中比目魚的含量,最低檢測(cè)限為0.02 μg/g,定量限為0.10 μg/g。

    2.8 其他方法

    傳感器作為水產(chǎn)品質(zhì)量和真實(shí)性評(píng)估的新興方法,具有廣大的應(yīng)用前景[71]。Handy等[72]結(jié)合DNA微陣列與中紅外成像,觀察雜交斑點(diǎn)并用拉曼光譜進(jìn)一步表征,可正確識(shí)別7種鯰魚及其代替物種。Ulrich等[73]基于實(shí)時(shí)核酸序列依賴性擴(kuò)增技術(shù)(RT-NASBA)設(shè)計(jì)手持傳感器,以線粒體16S rDNA基因區(qū)域來區(qū)分石斑魚和替代魚類,方法快速便捷。

    表1~2分別列出了部分方法在水產(chǎn)品的真?zhèn)舞b別與溯源檢測(cè)方面的應(yīng)用。

    表1 水產(chǎn)品真?zhèn)舞b別方法

    COI:cytochrome oxidase I,DIG:digoxin,PCR:polymerase chain reaction,RFLP:restriction fragment length polymorphism analysis,DESI:desorption electrospray ionization

    表2 水產(chǎn)品溯源檢測(cè)的方法

    PCA:principal component analysis;OPLS-DA:orthogonal projection on latent structure-discriminant analysis;ANOVA:analysis of the variance;δ13C:stable isotope ratios of C;FA:formic acid;LFQ:label-free quantitation;IRMS:isotope ratio mass spectrometer;CF-IRMS:continuous-flow isotope ratio mass spectrometer;PLS-DA:partial least squares-discriminant analysis;LDA:linear discriminant analysis;ICP-MS:inductively coupled plasma mass spectrometer;SVM:support vector machine

    3 結(jié)論與展望

    分析技術(shù)的發(fā)展促進(jìn)了水產(chǎn)品真?zhèn)舞b別與溯源檢測(cè)技術(shù)的創(chuàng)新,保證水產(chǎn)品質(zhì)量安全的需求也正成為分析方法提升的強(qiáng)大動(dòng)力。色譜-質(zhì)譜技術(shù)具有高穩(wěn)定性、高靈敏度以及高通量的特點(diǎn),能夠?qū)μ卣鹘M分進(jìn)行準(zhǔn)確鑒別和精確定量,日益成為水產(chǎn)品真?zhèn)舞b別和溯源檢測(cè)的核心,同其它分析技術(shù)相互補(bǔ)充,有力保障了水產(chǎn)品質(zhì)量安全。但基于色譜-質(zhì)譜技術(shù)的真?zhèn)舞b別和溯源研究也存在以下局限性,如:一般需要較為復(fù)雜的前處理過程以提純靶標(biāo)物質(zhì)使其適于色譜-質(zhì)譜檢測(cè);確證相近物種或產(chǎn)地來源的特征組分較為困難,需要大量真實(shí)樣本以保證所建方法的準(zhǔn)確性。綜上,后續(xù)研究的重點(diǎn)將會(huì)聚焦于:①建立快速、自動(dòng)化、高通量的樣品前處理方法;②結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)建立水產(chǎn)品真?zhèn)舞b別和溯源檢測(cè)模型,以進(jìn)行非靶標(biāo)模式判別;③建立動(dòng)態(tài)化真實(shí)樣本數(shù)據(jù)庫和判別規(guī)則,以實(shí)現(xiàn)水產(chǎn)品真?zhèn)魏彤a(chǎn)地的智能識(shí)別。

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