系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者免疫功能與自身抗體的關(guān)系研究

何媛，周小娟，方歡歡*，熊靜潔

(1.九江學(xué)院附屬醫(yī)院，江西 九江 332000；2.九江學(xué)院臨床學(xué)院，江西 九江 332000)

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是一種可能致命的慢性自身免疫性疾病，易累及皮膚、心臟、大腦、腎臟等多系統(tǒng)器官[1]，隨著疾病的進(jìn)展可使多器官受損。其發(fā)病機制至今未明，有研究認(rèn)為是由于自身抗體的產(chǎn)生導(dǎo)致循環(huán)免疫復(fù)合物在血管內(nèi)沉積，產(chǎn)生炎癥或者通過啟動固有免疫產(chǎn)生細(xì)胞因子[2-3]，進(jìn)而使組織破壞。補體系統(tǒng)作為固有免疫系統(tǒng)的重要組成部分，在SLE患者中可下降[4]。目前，一些免疫功能指標(biāo)如免疫球蛋白IgG、補體C3，C4和自身免疫學(xué)檢測指標(biāo)如抗核抗體(ANA)，抗SmD1抗體、抗dsDNA抗體等被廣泛應(yīng)用于SLE的檢測中。由于這些檢測指標(biāo)的敏感性和特異性不一樣，給臨床醫(yī)生在診斷SLE和評估預(yù)后方面帶來一定的困難。本研究欲通過探討免疫功能和自身抗體檢測指標(biāo)之間的關(guān)系，以幫助臨床醫(yī)生對SLE進(jìn)行早期診斷、治療監(jiān)測和預(yù)后判斷。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015年1月—2018年12月在我院風(fēng)濕免疫科住院的SLE患者94 例，其中男9 例，女85 例，年齡(38±14.6) 歲，均符合2009年美國風(fēng)濕病學(xué)會修訂的SLE分類標(biāo)準(zhǔn)[5]。排除其他免疫系統(tǒng)疾病的患者?；颊呒膊』顒有灾笜?biāo)用SLE疾病活動指數(shù)(SLEDAI)評分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行衡量，以SLEDAI評分≥10 分作為判定疾病活動的標(biāo)準(zhǔn)。非SLE疾病組患者81 例[包括血小板減少性紫癜(ITP)9 例、硬化癥(Scl)15 例、干燥綜合征(SS)21 例、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)36 例]，其中男14 例，女67 例，年齡(35±11.2) 歲。健康對照組為我院同期體檢者66 例，其中男8 例，女58 例，年齡(37±13.5) 歲，經(jīng)體檢排除心、腎、肺、肝等器質(zhì)性疾病和糖尿病、高血壓病、各種腫瘤、炎癥和自身免疫性疾病等。各組年齡、性別等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集

所有待測者清晨空腹抽靜脈血5 mL，血液凝固后離心5 min，離心轉(zhuǎn)速3 000 r/min。

1.2.2 檢測方法

免疫球蛋白IgG、補體C3，C4檢測采用免疫速率散射比濁法測定，儀器為美國貝克曼公司IMMAGE-800特定蛋白分析儀，使用配套原裝試劑，按照儀器操作說明書進(jìn)行操作。自身抗體的檢測采用免疫印跡法檢測抗核抗體譜IgG，試劑購自胡曼(德國)診斷有限公司，采用德國胡曼公司CycleBolt48全自動免疫印跡儀，按照操作說明進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 三組自身抗體檢測指標(biāo)陽性率比較

自身抗體各檢測指標(biāo)除抗Jo-1抗體外，SLE組、非SLE疾病組其余指標(biāo)陽性率均高于健康對照組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；SLE組中AnuA、抗dsDNA抗體、AHA、抗SmD1抗體、抗Rib-P抗體陽性率均高于非SLE疾病組，兩組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而抗U1-snRNP抗體、抗SS-A/Ro 60kD抗體、抗SS-A/Ro 52kD抗體、抗SS-B/La抗體、抗Scl 70抗體、抗著絲點B抗體、抗Jo-1抗體等七項檢測指標(biāo)和非SLE疾病組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)(見表1)。

2.2 SLE患者疾病活動期組、穩(wěn)定期組與健康對照組免疫功能比較

SLE活動期組血清免疫球蛋白IgG水平高于SLE穩(wěn)定期組和健康對照組，而血清補體C3，C4水平低于SLE穩(wěn)定期組和健康對照組(均P<0.05)，SLE穩(wěn)定期組血清C3，C4，IgG水平和健康對照組相比，血清補體C3，C4水平更低，IgG水平則要高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)(見表2)。

2.3 SLE組免疫功能檢測指標(biāo)與抗SmD1的關(guān)系

SLE患者中，將抗SmD1陽性組與抗SmD1陰性組免疫功能進(jìn)行比較后發(fā)現(xiàn)，抗SmD1陽性組血清補體C3，C4水平低于抗SmD1陰性組，兩組比較，差異有統(tǒng)計性意義(P<0.05)(見表3)。

2.4 SLE組免疫功能檢測指標(biāo)與抗dsDNA抗體關(guān)系

SLE患者中，按照抗dsDNA陰陽性進(jìn)行分組比較免疫功能后發(fā)現(xiàn)，抗dsDNA陽性組血清補體C3，C4水平低于抗dsDNA陰性組(均P<0.05)，而IgG水平兩組變化無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)(見表4)。

表1 三組自身抗體檢測指標(biāo)陽性率比較 例(%)

表2 SLE活動期組、穩(wěn)定期組與健康對照組免疫功能檢測指標(biāo)比較

表3 SLE組免疫功能檢測指標(biāo)與抗SmD1關(guān)系

表4 SLE組免疫功能檢測指標(biāo)與抗dsDNA抗體關(guān)系

3 討 論

SLE屬于全身性、系統(tǒng)性疾病，臨床表現(xiàn)不一。有研究認(rèn)為其發(fā)病機制在遺傳、免疫環(huán)境等因素作用下，SLE體內(nèi)B細(xì)胞產(chǎn)生了針對自身反應(yīng)性T細(xì)胞抗原成分相應(yīng)的自身抗體[6]，形成抗原抗體免疫復(fù)合物，這些免疫復(fù)合物沉積在體內(nèi)，導(dǎo)致免疫調(diào)節(jié)系統(tǒng)異常，進(jìn)而產(chǎn)生炎癥，使組織壞死[7]。故實驗室指標(biāo)如自身抗體、免疫功能等項目檢查對SLE的診斷和監(jiān)測顯得尤為重要。SLE患者體內(nèi)可產(chǎn)生各種自身抗體，如抗SmD1抗體、AnuA、抗dsDNA抗體、AHA、抗Rib-P抗體、抗SSA抗體、抗SSB核體、抗U1-SnRNP抗體等。在本研究中，SLE組AnuA、抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體、抗SmD1抗體、抗dsDNA抗體陽性率分別為11.7%，36.1%，13.8%，39.4%，22.3%，比非SLE疾病組和健康對照組高，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)，說明這些檢測指標(biāo)可幫助鑒別SLE和其他自身免疫性疾病。其他的自身抗體指標(biāo)抗U1-snRNP抗體、抗SS-A/Ro 60kD抗體、抗SS-A/Ro 52kD抗體、抗SS-B/La抗體、抗Scl 70抗體、抗著絲點B抗體、抗Jo-1抗體，和非SLE疾病組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。盡管抗SS-A/Ro 60kD抗體、抗SS-A/Ro 52kD抗體兩個檢測指標(biāo)在SLE組很高，陽性率甚至超過了30%，但抗SS-A/Ro 60kD抗體、抗SS-A/Ro 52kD抗體、抗SS-B/La抗體可出現(xiàn)在多種自身免疫性疾病中，沒有診斷特異性，更多時候作為干燥綜合征的標(biāo)志性抗體，并且抗SS-A/Ro 60kD抗體、抗SS-A/Ro 52kD抗體敏感度更高，抗SS-B/La抗體特異性稍強[8]。本研究中非SLE疾病組抗SS-A/Ro 60kD抗體、抗SS-A/Ro 52kD抗體抗體，抗SS-B/La抗體出現(xiàn)的陽性率和SLE疾病組差不多，這和張紅等[6]的研究相符。

本研究將SLE按照SLEDAI評分分成活動期組和穩(wěn)定期組，并和健康對照組比較，分析血清免疫功能相關(guān)指標(biāo)補體C3，C4，gG。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，補體C3，C4的水平變化為活動期組<穩(wěn)定期組<健康對照組，而免疫球蛋白IgG的水平變化為活動期組>穩(wěn)定期組>健康對照組，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)。說明SLE患者免疫功能與疾病活動性相關(guān)。SLE患者補體C3，C4減少的原因可能為SLE患者體內(nèi)產(chǎn)生大量且多樣的自身抗體，并和體內(nèi)可溶性抗原形成免疫復(fù)合物，這些復(fù)合物可激活補體系統(tǒng)。激活的補體系統(tǒng)既可幫助清除免疫復(fù)合物，又可造成病理損害。因此，消耗補體過多，補體水平下降。SLE患者免疫球蛋白IgG水平與疾病程度正相關(guān)，其可能為SLE患者體內(nèi)的自身抗體主要是IgG型。有報道說SLE患者自身抗體篩查指標(biāo)抗核抗體滴度越高，IgG水平越高，病情越重[9]。本研究也發(fā)現(xiàn)SLE活動期IgG水平比穩(wěn)定期水平要高。SLE患者免疫球蛋白IgG水平與疾病程度呈正相關(guān)，綜合推測可能原因為SLE患者體內(nèi)的自身抗體主要是IgG型。

抗Sm抗體是目前公認(rèn)的診斷SLE的標(biāo)志性特異性抗體之一。Sm抗原是由U-RNA，B′，B，N，D1，D2，D3，E，F(xiàn)和G等多種蛋白質(zhì)組成，其中D1是Sm的主要抗原之一。本研究采用的試劑檢測的是抗SmD1抗體，已有報道說其檢測的敏感性高于抗Sm抗體[10-11]。本研究中，抗SmD1抗體的敏感性為39.4%，可能由于標(biāo)本量較少的原因，這一結(jié)果比詹文麗等[11]報道的略低。此外，本研究還比較了SLE患者中抗SmD1抗體陽性組與抗SmD1抗體陰性組免疫功能情況，發(fā)現(xiàn)除IgG差異無統(tǒng)計學(xué)意義外，抗SmD1抗體陽性組C3，C4水平比抗SmD1抗體陰性組低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)。也有研究[6]報道抗Sm抗體陽性組C3，C4水平低于抗SmD1抗體陰性組。這些提示抗Sm陽性與補體C3，C4水平負(fù)相關(guān)。

抗dsDNA抗體是診斷SLE另一標(biāo)志性抗體，可在SLE早期出現(xiàn)且其滴度高低與疾病的活動性及預(yù)后密切相關(guān)[12]，在SLE疾病靜止期或治療后可出現(xiàn)陰性。補體C3，C4是補體系統(tǒng)的重要組成部分，在激活補體、參與免疫活動和維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定方面具有重要作用[13]。本研究同時比較了抗dsDNA抗體陽性組與抗dsDNA抗體陰性組的免疫功能情況。結(jié)果抗dsDNA抗體陽性組C3，C4水平比抗dsDNA抗體陰性組低(均P<0.05)。王峰來等[14]研究也表明補體C3，C4水平和抗dsDNA抗體定量負(fù)相關(guān)。

綜上所述，聯(lián)合檢測自身抗體及補體C3，C4，免疫球蛋白IgG可提高SLE的檢出率，具有互補作用，此外在評估SLE的病情和治療監(jiān)測方面也具有重要的臨床價值。