超聲彈性成像參數(shù)聯(lián)合血清MMP-9、HMGB-1、TG診斷甲狀腺癌臨床價(jià)值及與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系

韓路,徐家慧,俞秋雨,劉亞,方開峰

甲狀腺癌為一種內(nèi)分泌系統(tǒng)常見惡性腫瘤，約占全身惡性腫瘤的1%，易發(fā)生頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，嚴(yán)重威脅患者生命健康[1-3]。尋找疾病早期診斷及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移判定的有效方法對(duì)指導(dǎo)臨床及時(shí)合理治療、改善患者預(yù)后尤為重要。超聲檢查是一種甲狀腺定性檢查主要手段，隨著近年來超聲技術(shù)不斷進(jìn)步，超聲彈性成像技術(shù)在多個(gè)組織臟器腫瘤早期篩查及定性診斷中應(yīng)用逐漸增多，其可反映組織的形變能力，客觀、真實(shí)且量化地反映病灶與附近組織彈性硬度差別，能為甲狀腺病變定性診斷提供一定依據(jù)[4-5]。血清學(xué)指標(biāo)在惡性腫瘤診斷、監(jiān)測(cè)中也具有重要地位，基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)可降解細(xì)胞外基質(zhì)成分，損害基底膜，對(duì)腫瘤血管形成、腫瘤細(xì)胞侵襲及轉(zhuǎn)移能起到積極促進(jìn)作用[6]。高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)高表達(dá)與腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)、遷移、凋亡、增殖及周圍血管形成密切相關(guān)[7]。甲狀腺球蛋白(TG)是甲狀腺組織所特有的生化標(biāo)志物之一，近年來研究發(fā)現(xiàn)，TG表達(dá)在甲狀腺疾病定性診斷中具有重要作用[8]。本研究選取甲狀腺癌患者與甲狀腺良性結(jié)節(jié)患者各126例，觀察超聲彈性成像參數(shù)聯(lián)合血清基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、HMGB-1、TG在甲狀腺癌臨床診斷中的價(jià)值及與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2017年1月—2019年1月皖北煤電集團(tuán)總醫(yī)院超聲科診斷甲狀腺癌患者126例作為甲狀腺癌組(腺癌組)，甲狀腺良性結(jié)節(jié)患者126例作為甲狀腺良性結(jié)節(jié)組(結(jié)節(jié)組)。 2組年齡、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、腫瘤直徑、合并癥等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，腺癌組女性人數(shù)比例高于結(jié)節(jié)組(P<0.05)。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)，患者及家屬知情同意并簽署知情同意書。

表1 2組患者臨床資料比較

1.2 選擇標(biāo)準(zhǔn) (1)納入標(biāo)準(zhǔn)：腺癌組經(jīng)超聲檢查、術(shù)后病理檢查確診為甲狀腺癌；結(jié)節(jié)組經(jīng)超聲檢查、術(shù)后病理檢查證實(shí)為甲狀腺良性結(jié)節(jié)；2組均首次接受甲狀腺手術(shù)，臨床資料完整。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重糖尿病、高血壓、感染者；合并腎、心、肝、肺等臟器功能嚴(yán)重障礙者；合并其他類型惡性腫瘤疾病者；合并神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、血液系統(tǒng)疾病者；結(jié)節(jié)過大或位置特殊無法取得良好彈性圖像或彈性比值者。

1.3 觀測(cè)指標(biāo)與方法

1.3.1 血清學(xué)指標(biāo)檢測(cè)：受檢者于清晨空腹采集肘靜脈血4 ml，離心取上層血清，-80 ℃冰箱內(nèi)儲(chǔ)存待檢；以酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清MMP-9、HMGB-1水平，電化學(xué)發(fā)光免疫法測(cè)定血清TG水平，檢測(cè)試劑盒均由武漢博士德生物有限公司提供，有關(guān)操作嚴(yán)格按試劑盒說明書由醫(yī)院專業(yè)檢測(cè)人員完成。

1.3.2 超聲彈性成像參數(shù)檢測(cè)：應(yīng)用彩色多普勒超聲診斷儀(西門子，ACUSON S3000)實(shí)施檢查，9L4線陣高頻探頭，檢查時(shí)受檢者取仰臥位，頭部略向后仰，顯露頸部；先實(shí)施灰階與彩色多普勒超聲檢查，確定甲狀腺結(jié)節(jié)位置、數(shù)量、大小、囊實(shí)性質(zhì)、形態(tài)、邊界、血流分布、內(nèi)部回聲等情況；而后啟動(dòng)施壓式應(yīng)變彈性成像(EI)，探頭輕觸皮表，取樣框內(nèi)包含結(jié)節(jié)最大切面與其周圍部分腺體，穩(wěn)定探頭，QF值穩(wěn)定在60以上，當(dāng)彈性圖上清晰顯示結(jié)節(jié)輪廓時(shí)凍結(jié)，調(diào)節(jié)至彩色模式保存圖像；最后啟動(dòng)聲觸診彈性成像定量技術(shù)(VTIQ)，穩(wěn)定探頭，囑咐患者屏住呼吸，取樣框內(nèi)包含結(jié)節(jié)全部與其附近部分腺體，調(diào)節(jié)閾值，直到結(jié)節(jié)內(nèi)出現(xiàn)紅色區(qū)域，保存圖像。腺癌組和結(jié)節(jié)組典型病例超聲彈性成像檢查圖像，見圖1A、B。由2位資深影像學(xué)醫(yī)師施行圖像分析，觀點(diǎn)不一致通過協(xié)商解決。(1)藍(lán)色面積比值：沿著結(jié)節(jié)邊緣及其內(nèi)的藍(lán)色區(qū)域邊緣分別勾畫輪廓測(cè)量面積，計(jì)算全部藍(lán)色面積占據(jù)結(jié)節(jié)面積比值，其可反映病灶惡性浸潤(rùn)程度，比值越高病灶惡性浸潤(rùn)程度越高。(2)彈性比值：于剪切波質(zhì)控圖引導(dǎo)下測(cè)量結(jié)節(jié)內(nèi)部及周圍實(shí)質(zhì)不同位置各5個(gè)剪切波速度，分別取平均值Vs1與Vs2，計(jì)算剪切波速度比值Vs1/Vs2。彈性比值可反映病變區(qū)域和正常組織間相對(duì)硬度，比值越高病變區(qū)域組織硬度越高[9]。

2 結(jié) 果

2.1 2組血清指標(biāo)及超聲彈性成像參數(shù)比較 腺癌組血清MMP-9、HMGB-1、TG 及藍(lán)色面積比值、彈性比值均高于結(jié)節(jié)組(P<0.01)，見表2。

2.2 有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者各指標(biāo)比較 腺癌組有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血清MMP-9、HMGB-1、TG水平與藍(lán)色面積比值、彈性比值高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.05)，見表3。

2.3 甲狀腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)相關(guān)因素分析 Spearman相關(guān)性分析可知，血清MMP-9、HMGB-1、TG水平及藍(lán)色面積比值、彈性比值與甲狀腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈顯著正相關(guān)(r=0.624、0.728、0.709、0.661、0.687，P<0.01)。

2.4 超聲彈性成像參數(shù)及血清各指標(biāo)診斷甲狀腺癌的ROC曲線分析 超聲彈性成像參數(shù)及血清指標(biāo)聯(lián)合診斷甲狀腺癌的AUC為0.919，高于單一指標(biāo)診斷，其診斷甲狀腺癌的敏感度為90.48%，特異度為86.51%,約登指數(shù)為0.770，見表4、圖2～4。

表2 2組血清指標(biāo)及超聲彈性成像參數(shù)比較

表3 有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者各指標(biāo)水平比較

2.5 甲狀腺癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素多元Logistic回歸分析 以是否發(fā)生甲狀腺癌為因變量，將患者性別與血清MMP-9、HMGB-1、TG、藍(lán)色面積比值、彈性比值作為自變量實(shí)施Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，血清MMP-9、HMGB-1、TG、藍(lán)色面積比值、彈性比值均為甲狀腺癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素(P<0.05)，見表5。

3 討 論

甲狀腺癌發(fā)病早期常缺乏明顯臨床癥狀，漏診及誤診率較高，易延誤最佳治療時(shí)機(jī)，影響患者預(yù)后[10-11]。超聲檢查為甲狀腺病變定性診斷的重要工具，具有無創(chuàng)、經(jīng)濟(jì)、診斷準(zhǔn)確率較高等優(yōu)勢(shì)，但因甲狀腺結(jié)節(jié)存在多源性特點(diǎn)，其超聲圖像亦存在多樣性，良惡性病變的超聲圖像常存在重疊現(xiàn)象，存在一定漏診及誤診幾率[12]。

表4 超聲彈性成像參數(shù)及血清各指標(biāo)診斷甲狀腺癌的ROC曲線分析

表5 甲狀腺癌發(fā)生相關(guān)危險(xiǎn)因素的多元Logistic回歸分析結(jié)果

隨影像學(xué)技術(shù)不斷進(jìn)步，超聲彈性成像技術(shù)在甲狀腺病變定性診斷中應(yīng)用不斷增多，其可依據(jù)各組織之間彈性系數(shù)差別，以灰階或彩色編碼成像，利用圖像客觀、準(zhǔn)確反映被測(cè)組織硬度，彌補(bǔ)常規(guī)超聲的缺陷，提升診斷準(zhǔn)確率[13-14]。本研究中，超聲彈性成像參數(shù)(藍(lán)色面積比值、彈性比值)在甲狀腺癌患者中產(chǎn)生顯著變化。病理學(xué)研究顯示，某些疾病可致使病變組織硬度產(chǎn)生改變[15]。劉一穎等[16]研究指出，于甲狀腺結(jié)節(jié)方面，與良性結(jié)節(jié)比較，惡性結(jié)節(jié)組織硬度更高，且結(jié)節(jié)組織硬度同其惡性風(fēng)險(xiǎn)呈顯著正相關(guān)。超聲彈性成像技術(shù)可檢測(cè)出組織彈性、硬度特征，彈性比值、藍(lán)色面積比值均為超聲彈性成像技術(shù)的量化指標(biāo)，其中前者可反映病變區(qū)域和正常組織間相對(duì)硬度，后者可反映病灶惡性浸潤(rùn)程度，可據(jù)此為甲狀腺良惡性診斷提供依據(jù)。另由本研究可知，超聲彈性成像參數(shù)(藍(lán)色面積比值、彈性比值)與甲狀腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。組織的硬度取決于其分子及微觀結(jié)構(gòu)，特異性、穩(wěn)定性高，而超聲彈性成像參數(shù)藍(lán)色面積比值、彈性比值可靈敏反映組織硬度，其值增高與組織惡性及轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)密切相關(guān)。

隨腫瘤分子生物學(xué)研究不斷發(fā)展，發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展與多種細(xì)胞因子密切相關(guān)。MMP-9為MMPs家族成員之一，主要由結(jié)締組織分泌，可參與細(xì)胞外基質(zhì)降解，本研究中，MMP-9與甲狀腺癌發(fā)病、進(jìn)展及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有密切關(guān)系。何穎等[17]研究亦顯示，甲狀腺癌患者血清MMP-9表達(dá)可顯著增高。劉詠等[18]研究指出，細(xì)胞外基質(zhì)為抑制腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的重要屏障，腫瘤細(xì)胞突破周圍基底膜，侵入細(xì)胞外基質(zhì)，才能進(jìn)入宿主微環(huán)境進(jìn)行浸潤(rùn)及擴(kuò)散。而MMP-9可參與細(xì)胞外基質(zhì)降解，降解多糖之外的全部細(xì)胞外基質(zhì)成分，進(jìn)而加速腫瘤浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移[19]。HMGB-1在HMGB蛋白中所占比例最高，在多種惡性腫瘤中均呈高表達(dá)，由本研究可知，血清HMGB-1與甲狀腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。韓璐榮等[20]研究亦報(bào)道，甲狀腺癌患者血清HMGB-1水平顯著高于甲狀腺良性結(jié)節(jié)患者。HMGB-1釋放后可同晚期糖基化終末產(chǎn)物受體相結(jié)合，二者所構(gòu)成的信號(hào)通路和新生血管形成、內(nèi)皮細(xì)胞移動(dòng)密切相關(guān)，HMGB-1可對(duì)該通路起調(diào)控作用，進(jìn)而加速腫瘤細(xì)胞增殖及轉(zhuǎn)移；同時(shí)，HMGB-1可與纖溶酶原系統(tǒng)結(jié)合，提升MMPs活性，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)降解，加速腫瘤浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移[21]。TG是碘在甲狀腺中的主要儲(chǔ)存形式，本研究中，TG與甲狀腺癌發(fā)病、進(jìn)展及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。林婉媚等[22]研究指出，TG作為甲狀腺癌診斷及預(yù)后判定的重要指標(biāo)。甲狀腺為TG分泌的惟一來源，正常人血清TG處于低表達(dá)狀態(tài)，在甲狀腺腫、高功能腺瘤、甲狀腺癌等甲狀腺異常疾病中其表達(dá)可不同程度增高，且甲狀腺惡性病變患者甲狀腺組織破壞更為嚴(yán)重，TG增高幅度更高[23]。 另由本研究可知，超聲彈性成像參數(shù)及血清指標(biāo)聯(lián)合診斷甲狀腺癌的AUC最大，為0.919，高于單一指標(biāo)診斷，且診斷敏感度達(dá)90.48%，特異度達(dá)86.51%。提示聯(lián)合應(yīng)用超聲彈性成像參數(shù)及血清指標(biāo)可提升診斷敏感度、特異度，為疾病診斷提供更多信息。

綜上，超聲彈性成像參數(shù)及血清MMP-9、HMGB-1、TG與甲狀腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，應(yīng)用其檢測(cè)可為臨床診斷提供一定參考。

利益沖突：所有作者聲明無利益沖突

作者貢獻(xiàn)聲明

韓路：設(shè)計(jì)研究方案，實(shí)施研究過程，論文撰寫；徐家慧：設(shè)計(jì)研究思路，分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)，論文審核；俞秋雨、方開峰：課題設(shè)計(jì)，實(shí)施研究過程，資料搜集整理，論文撰寫和修改；劉亞：進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析