覆盆子及其制劑的質(zhì)量控制研究進(jìn)展*

李熠雯，周燕霞

(1 上饒市人民醫(yī)院，江西 上饒 334000；2 江西醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，江西 上饒 334000)

覆盆子，又稱掌葉覆盆子，為薔薇科(Rosaceae)懸鉤子屬(Rubus)植物，主要指華東覆盆子(RubuschingiiHu)未成熟的果實(shí)，是臨床疾病治療中常用的一種中藥材之一。研究表明，中藥材覆盆子及其制劑通常用來治療遺尿尿頻、陽痿早泄、遺精滑精、目暗昏花等疾病[1]。近年來，隨著覆盆子藥材及其制劑的廣泛使用，不少學(xué)者逐漸加深對覆盆子及其制劑的質(zhì)量控制研究，包括建立了以椴樹苷、鞣花酸、蘆丁、金絲桃苷、異槲皮苷、山柰酚-3-O-蕓香糖苷等為指標(biāo)成分的含量測定方法，各研究者也多采用HPLC對覆盆子制劑進(jìn)行質(zhì)量控制研究。本文對近年來覆盆子及其制劑的質(zhì)量分析研究成果進(jìn)行綜述，為為覆盆子藥材的資源開發(fā)利用、為覆盆子及其制劑質(zhì)量控制方法的進(jìn)一步建立和完善提供依據(jù)。

1 覆盆子藥材質(zhì)量控制方法

1.1 性狀鑒別

2015版《中國藥典》中對覆盆子進(jìn)行了性狀鑒別，規(guī)定：覆盆子粉末為棕黃色。非腺毛單細(xì)胞，長60～450 μm，直徑12～20 μm，壁甚厚，木化，大多數(shù)具雙螺紋，有的體部易脫落，足部殘留而埋于表皮層，表面觀圓多角形或長圓形，直徑約至23 μm，胞腔分枝，似石細(xì)胞狀。草酸鈣簇晶較多見，直徑18～50 μm。果皮纖維黃色，上下層縱橫或斜向交錯排列[2]。

1.2 薄層色譜法

薄層色譜法(TLC)是對藥材定性鑒別的常用方法之一，其簡便、快速，專屬和重現(xiàn)性好。2015版《中國藥典》中對覆盆子增加了覆盆子TLC定性鑒別。以椴樹苷為對照品，以乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸(90:4:4:0.5)為展開劑，噴以三氯化鋁試液，在紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)[2]。

1.3 分光光度法

分光光度法已廣泛應(yīng)用中藥質(zhì)量控制中，其不僅可用于物質(zhì)的鑒定及結(jié)構(gòu)分析，而且還可用于某些含量的測定[3]。郭宣宣等[4]以齊墩果酸為對照品，香草醛-冰醋酸-高氯酸為顯色體系，采用可見分光光度法在480 nm處測定了15批不同產(chǎn)地野生及栽培覆盆子中總?cè)频暮俊?/p>

1.4 比色法

比色法作為一種定量分析的方法，也常用于中藥有效成分含量比較和測定。余麗焓等[5]以沒食子酸為對照品，采用Folin-Ciocaileu比色法對不同產(chǎn)地覆盆子中的總酚含量進(jìn)行比較。孫萍等[6]以蘆丁為對照品，采用比色法對覆盆子果總黃酮進(jìn)行了微波提取及含量測定研究。

1.5 色譜法

色譜法具有快速、靈敏的有點(diǎn)，是中藥質(zhì)量控制中最常見方法。主要包括HPLC法、LC-MS法、MIPs-HPLC法等。2015版《中國藥典》[2]中對覆盆子以鞣花酸和山柰酚-3-O-蕓香糖苷為指標(biāo)成分，進(jìn)行HPLC含量測定。其中，鞣花酸以乙腈-0.2%磷酸溶液(15:85)為流動相，檢測波長為254 nm，含量按干燥品計算，含鞣花酸不得少于0.02%；山柰酚-3-O-蕓香糖苷以乙腈-0.2%磷酸溶液(15:85)為流動相，檢測波長為344 nm，含量按干燥品計算，含山柰酚-3-O-蕓香糖苷不得少于0.03%。Zeng等[7]建立了不同產(chǎn)地覆盆子的HPLC指紋圖譜及總黃酮的含量測定方法；有學(xué)者以鞣花酸和5種黃酮成分(蘆丁、金絲桃苷、異槲皮苷、山柰酚-3-O-蕓香糖苷、椴樹苷)為指標(biāo)成分，建立了以乙腈(A) -0.2%磷酸溶液(B)為流動相，360 nm為檢測波長的HPLC含量測定方法，對17批不同產(chǎn)地的覆盆子進(jìn)行了含量測定[8]。馬亞娟等[9]以紫云英苷、椴樹苷、槲皮素、山柰酚為指標(biāo)性成分，以乙腈-0.1%甲酸為流動相，266 nm為檢測波長，建立了覆盆子中4種黃酮的MIPs-HPLC含量測定方法。曹富等[10]以乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B)為流動相，205 nm為檢測波長，建立了覆盆子中山楂酸、科羅索酸和齊墩果酸3種三萜酸的HPLC含量測定方法。陳曉紅等[11]以甲醇-0.5%磷酸水溶液為流動相，以360 nm為檢測波長，通過聚類分析和主成分分析對15批浙產(chǎn)覆盆子進(jìn)行了HPLC指紋圖譜研究。毛菊華等[12]采用HPLC法，用三個色譜系統(tǒng)分別對華東覆盆子不同藥用部位果實(shí)(覆盆子)和根及殘莖(擱公扭根)中黃酮類、三萜類和鞣質(zhì)類成分進(jìn)行測定。平欲暉等[13]以甲醇-0.1%磷酸水為流動相，以366 nm為檢測波長，建立了覆盆子中椴樹苷和山奈酚的HPLC含量測定方法。鐘瑞建等[14]以乙腈-0.2%磷酸溶液為流動相，在344 nm檢測波長下建立了覆盆子中山柰酚-3-O-蕓香糖苷和山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷HPLC。Zhang等[15]建立了未熟覆盆子中多糖、黃酮、皂苷和生物堿4種成分的含量測定方法并進(jìn)行了含量測定。Zan等[16]通過大鼠灌胃覆盆子提取物實(shí)驗(yàn)，建立了同時測定大鼠血漿中isoquercitrin, kaempferol-3-O-rutinoside和tiliroside 3種成分的LC-MS/MS方法。Chai等[17]通過多波長切換法建立了覆盆子中adenosine, gallic acid, brevifolin carboxylic acid, ethyl gallate, ellagic acid, kaempferol-3-O-rutinoside, kaempferol-3O-β-D-glucopyranoside和tiliroside 8個成分的UPLC同時測定方法。何建明等[18]以乙腈-水為流動相，以265 nm為檢測波長，建立了覆盆子藥材中鞣花酸、異槲皮苷、山柰酚-3-O-β-D-蕓香糖苷、椴樹苷和山柰酚的HPLC-UV和覆盆子苷-F5的HPLC-ELSD含量測定方法。

此外，還有學(xué)者建立了覆盆子中5種有機(jī)酸(草酸、酒石酸、抗壞血酸、蘋果酸、枸椽酸)的HPLC含量測定方法；覆盆子黃酮類化合物含量的三波長紫外分光光度法；浙產(chǎn)覆盆子藥材的HPLC指紋圖譜以及覆盆子中鐵、鎂、鈉、鋅4種金屬元素的原子吸收光譜法含量測定方法[19-20]。

2 成方制劑的質(zhì)量分析

關(guān)于覆盆子成方制劑質(zhì)量分析的報道不多。郭豐[21]以鞣花酸為指標(biāo)成分建立了人參地黃桑椹片中覆盆子鑒別的HPLC含量測定方法，并暫定了人參地黃桑椹片中含覆盆子以鞣花酸計算，含量不得少于 0.15 mg/片。鐘宇富等[22]建立以椴樹苷和鞣花酸為指標(biāo)成分分別建立了好要湯(由覆盆子、黃精、玉竹、酸棗仁等中藥組成)中覆盆子的TCL鑒別和HPLC含量測定方法，結(jié)果不同批次好要湯中鞣花酸含量為0. 698±0.013 mg·g-1；陳亞龍等[23]以椴樹苷為對照品建立了益視口服液(由黨參、當(dāng)歸、覆盆子、山藥、制何首烏等十四味中藥組成)中的覆盆子TCL鑒別方法，要求在對照品色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。董秋菊等[24]建立五子衍宗方(由枸杞子、炒菟絲子、覆盆子、鹽車前子和蒸五味子組成)制劑的HPLC指紋圖譜，要求供試品特征圖譜中應(yīng)呈現(xiàn)5個特征峰，其中4個峰應(yīng)分別與相應(yīng)的對照品參照物溶液的保留時間一致，峰1應(yīng)與對照藥材參照物溶液主峰的保留時間一致。周建良等[25]采用組合對照藥材隨行對照，基于組合對照藥材的高效液相色譜特征圖譜對五子衍宗方制劑中覆盆子藥材進(jìn)行了表征。

3 結(jié) 語

覆盆子作為藥食兩用的傳統(tǒng)中藥，在我國已有幾千年的使用歷史，常單用或者作為中藥成方制劑的組成藥。我國覆盆子資源分布較廣，為滿足需求，已逐步從野生狀態(tài)開始向培育種植轉(zhuǎn)變，但仍然存在品種選育工作力度不夠，人工栽培面積偏少，質(zhì)量參差不齊等問題。因此，有必要進(jìn)一步加大覆盆子及其制劑質(zhì)量控制的研究力度，以進(jìn)一步完善覆盆子的質(zhì)量控制方法，保障覆盆子及其制劑的質(zhì)量和療效。