芍藥苷提取及純化制備方法研究進(jìn)展*

張騰騰，王婉婷，居 正，朱 蝶，張夢(mèng)嬌，姬雨思，張小倩

(亳州學(xué)院中藥學(xué)院，安徽 亳州 236800)

白芍亦別名為芍藥，其名最早見(jiàn)于《詩(shī)經(jīng)·鄭風(fēng)》中[1]，是毛茛科草本植物芍藥PaeonialactifloraPall.干燥的根，廣泛栽培于安徽、四川、浙江和山東等地。一般于夏、秋季采挖，洗凈并去除須根等，沸水煮至透心并曬干后用于治療血虛萎黃和月經(jīng)不調(diào)等癥狀[2]。

白芍中所含的化學(xué)物質(zhì)有揮發(fā)油類、單萜類、三萜類及黃酮類等[3]。在 1963年的時(shí)候，芍藥苷(paeoniflorin)第一次從白芍中被純化提取出來(lái)[4]。近些年通過(guò)對(duì)白芍的研究發(fā)現(xiàn)，芍藥苷是其化學(xué)成分中總苷的主要活性成分，具有鎮(zhèn)靜、護(hù)肝和抗炎等多種藥理作用[5]。得到高純度的芍藥苷單體可為進(jìn)一步研究芍藥苷的藥理作用奠定基礎(chǔ)?；诖耍疚膶?duì)芍藥苷的提取方式和純化制備方法進(jìn)行了集中地概述和總結(jié)，為更好的研究芍藥苷的臨床作用打下基礎(chǔ)。

1 提取方法

1.1 回流提取法

劉芳等[6]在探索芍藥苷的提取方法時(shí)，發(fā)現(xiàn)采用不同的提取方式會(huì)對(duì)芍藥苷的提取率有影響。研究結(jié)果表明提取溶劑選擇80%乙醇并采用回流提取方法時(shí)，芍藥苷的提取率最高。吳悟賢等[7]研究白芍中芍藥苷的提取率時(shí)發(fā)現(xiàn)在酸堿度為6～7時(shí)，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%的乙醇溶液進(jìn)行回流提取，芍藥苷純度高于40%。侯繼秋等[8]通過(guò)試驗(yàn)探究了從白芍中提取芍藥苷的最佳條件，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明用體積分?jǐn)?shù)為80%乙醇作為提取溶劑，回流提取兩次(首次使用8倍量乙醇，第2次則用首次減兩倍量的乙醇溶液)，1 h/次為最佳工藝。而劉春亮等[9]的研究表明，用8倍量的80%乙醇回流提取三次，每次各2 h為最佳方法。蘇婷等[10]則得出利用12倍量的50%乙醇回流提取兩次，每1 h一次為最佳工藝。

1.2 水煎煮法

湯羽等[11]利用正交試驗(yàn)，對(duì)提取次數(shù)、加水量和煎煮時(shí)間這三個(gè)因素考察，發(fā)現(xiàn)每次加入8倍量的水，每次提取2個(gè)小時(shí)，總共煎煮3次為最佳的提取工藝。陳赟則探究了煎煮法中溶劑的濃度、提取溫度及次數(shù)等因素對(duì)芍藥苷提取率的影響。結(jié)果顯示在80 ℃下用40%乙醇每2 h提取1次，共提取3次為芍藥苷的最優(yōu)煎煮工藝，提取率可達(dá)35.4 mg/g[12]。

1.3 酶 法

張瑜用白芍根粉為原材料，選用平行實(shí)驗(yàn)比較不同提取方式對(duì)芍藥苷提取率的影響。得出添加420 U/g的纖維酶時(shí)芍藥苷提取率高達(dá)2.76%；當(dāng)添加4400 U/g的果膠酶時(shí)，芍藥的提取率較加入纖維酶時(shí)提取率稍低[13]。

1.4 滲漉法

有學(xué)者在研究芍藥苷提取方法時(shí)則采用了滲漉法，通過(guò)單因素考察滲漉法中滲漉的體積、溶劑的濃度以及時(shí)間三個(gè)影響因素對(duì)白芍中芍藥苷提取率的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)用15倍量的70%的乙醇滲流浸漬24 h的方式可以大幅度提高芍藥苷的提取率[14]。

1.5 索氏提取

吳巧鳳等[15]在研究白芍中芍藥苷的提取方式時(shí)得出采用索氏提取，加入12倍量的80%乙醇為芍藥苷最佳提取方法。

1.6 超聲提取法

于定榮等對(duì)比水提取、乙醇回流提取、乙醇超聲提取和乙醇索氏提取四種不同提取方法對(duì)芍藥苷含量的影響。結(jié)果表明：最佳提取方式為采用50%的乙醇溶液進(jìn)行超聲提取[16]。 陳建平等[17]研究了超聲時(shí)間、料液比和溶劑濃度等對(duì)芍藥苷提取率的影響，結(jié)果顯示當(dāng)溫度設(shè)為60 ℃時(shí)，采用60%乙醇、1 g：15 mL的料液比以及75 W的功率，20 min的超聲時(shí)間是最優(yōu)的提取方式。秦亞?wèn)|等[18]采用硫酸-苯酚顯色法和 HPLC相結(jié)合的方法測(cè)定超聲波提取法對(duì)芍藥苷提取的影響，結(jié)果表明超聲提取法對(duì)芍藥苷溶出較為有利。張娟等[19]的研究則表明選用70%的乙醇作為提取溶劑時(shí)進(jìn)行超聲提取處理，獲得的芍藥苷含量較其他方法高些。

1.7 微孔精密過(guò)濾方法

吳俊等[20]對(duì)含有芍藥苷的流浸膏采用普通和微孔精密兩種過(guò)濾方式處理，對(duì)比不同過(guò)濾方式對(duì)芍藥苷含量的影響，發(fā)現(xiàn)微孔精密過(guò)濾會(huì)顯著降低芍藥苷的含量。

1.8 微波提取法

張輕輕等[21]探討了微波提取中功率、粒徑和時(shí)間等因素對(duì)芍藥苷提取率的影響，結(jié)果在最優(yōu)提取條件下，芍藥苷的平均提取率最高可達(dá)到2.23%。黃天輝[22]在探究微波提取法中提取時(shí)間、料液比、功率和溶劑濃度四大因素對(duì)芍藥苷提取率的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)最優(yōu)提取方法為：850 W微波功率、90%的乙醇溶液為提取溶劑、1：1的料液比，25 min的提取時(shí)間。

1.9 閃式提取

王玥等[23]采用閃式提取法，以芍藥苷的提取率為考察指標(biāo)，考察溶劑濃度和時(shí)間等因素對(duì)提取率的影響。最后通過(guò)查閱文獻(xiàn)資料和試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)以20倍量40%乙醇溶液作為溶劑，閃式提取1 min可以獲得較高的芍藥苷提取率。謝仲德[24]在研究芍藥苷的提取方式時(shí)，同樣也采用了閃式提取法。實(shí)驗(yàn)中探究了提取時(shí)間、溶劑用量對(duì)提取率的影響，得到最優(yōu)工藝是用質(zhì)量分?jǐn)?shù)70%的乙醇和1：12的料液閃式提取1 min。

1.10 超臨界流體提取

湯磊[25]采用超臨界流體提取芍藥苷，采用響應(yīng)曲面法(RSM)優(yōu)化提取條件(如甲醇濃度、萃取的壓力、時(shí)間和溫度)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)在59.9 ℃的條件下，夾帶劑甲醇濃度為68.5%、萃取壓力為18.9 MPa時(shí)萃取60 min理論上可得到芍藥苷提取率為7. 9 mg/g。

1.11 溫浸提取法

馬冰[26]對(duì)比研究了五種提取方式對(duì)芍藥苷含量的影響，經(jīng)綜合評(píng)估之后得出溫浸提取法提取效果較好，芍藥苷含量較高。

2 芍藥苷純化制備方法

2.1 大孔樹(shù)脂純化法

樊燕等[27]在探尋大孔樹(shù)脂分離提純芍藥苷的最佳條件時(shí)，得出純化效果最好的是D101型大孔樹(shù)脂。同時(shí)作者還發(fā)現(xiàn)在最佳工藝下，芍藥苷的純度高達(dá)90%以上。張亞軍等[28]在探究型號(hào)為HPD100的大孔樹(shù)脂的吸附性能以及洗脫參數(shù)時(shí)得出該型號(hào)樹(shù)脂對(duì)芍藥苷有較好的吸附分離性能且經(jīng)所確定的工藝條件進(jìn)行純化后，芍藥苷的純度高達(dá)30%以上。

2.2 高速逆流色譜法

黃天輝等[29]首先采用微波方式對(duì)芍藥苷進(jìn)行提取，然后選擇高速逆流色譜進(jìn)行純化，經(jīng)純化后芍藥苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)由10.62%提高到了98.8%。劉浩等[30]在采用高速逆流色譜法提純白芍中的芍藥苷成分時(shí)，用乙酸乙酯、5%硫酸鈉和正丁醇為兩相溶劑體系，在設(shè)定的分離條件下，經(jīng)純化后芍藥苷的純度高達(dá)98%。

2.3 動(dòng)態(tài)軸向壓縮色譜法

羅霖筠等[31]采用動(dòng)態(tài)軸向壓縮色譜法純化芍藥苷時(shí)，試驗(yàn)中首先對(duì)白芍的提取物進(jìn)行富集，再以甲醇和水系統(tǒng)為洗脫劑，經(jīng)純化后，測(cè)得芍藥苷純度高達(dá)96.14%。

3 結(jié) 語(yǔ)

芍藥苷作為白芍中的主要有效成分，目前有許多學(xué)者正在逐步深入研究其各方面性質(zhì)。芍藥苷的提取方法及純化制備方法多樣，就提取來(lái)講，采用醇溶液通過(guò)超聲提取應(yīng)用較為廣泛,該方法簡(jiǎn)便，提取率高，價(jià)格低廉。2015年版《中國(guó)藥典》在提取白芍中芍藥苷時(shí)也采用該方法[2]。就純化來(lái)講，大孔樹(shù)脂純化成本低，但純化效果不如色譜法。研究者應(yīng)根據(jù)研究目的選擇合適的提取純化方式。隨著現(xiàn)代各項(xiàng)技術(shù)的提高，得到高純度的芍藥苷單體將很快實(shí)現(xiàn)，這將為今后更好地研究其藥效及劑型提供有力幫助。