頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管超聲造影分級(jí)與炎癥反應(yīng)的相關(guān)性研究

譚玉婷 朱陽(yáng)陽(yáng) 王隴利 王彥清 聶 芳

動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中易損斑塊的破裂是心腦血管疾病發(fā)生的一個(gè)重要的病理基礎(chǔ)，易造成腦梗死［1］。既往研究［2-3］表明，斑塊內(nèi)炎癥反應(yīng)和新生血管是斑塊易損的兩大重要標(biāo)志。超聲造影可顯示頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)的細(xì)小血流，半定量地可視化斑塊內(nèi)新生血管并評(píng)估其易損性［4］。中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)比值（neutrophil/lymphocyte ratio，NLR）是反映全身炎癥情況的一個(gè)可靠指標(biāo)，其變化水平與動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展有一定的相關(guān)性［5］。本研究應(yīng)用超聲造影半定量評(píng)估頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管并進(jìn)行視覺(jué)分級(jí)，分析其與NLR 的相關(guān)性，旨在探究NLR 對(duì)斑塊內(nèi)新生血管及斑塊易損性影響。

資料與方法

一、研究對(duì)象

選取2018 年9 月至2019 年6 月于我院超聲醫(yī)學(xué)中心行頸動(dòng)脈斑塊超聲造影檢查的受試者132 例，其中男109 例，女23 例，年齡42～87 歲，平均（64.85±10.27）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①雙側(cè)頸動(dòng)脈的二維超聲至少有一側(cè)頸動(dòng)脈存在厚度＞1.5 mm 的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊；②無(wú)惡病質(zhì)的腫瘤、血液系統(tǒng)疾病等影響血循環(huán)白細(xì)胞及各亞型水平的疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：①斑塊內(nèi)有顆粒狀的鈣化影；②有嚴(yán)重的心肺功能障礙；③對(duì)超聲造影劑過(guò)敏，不能耐受超聲造影檢查。依據(jù)超聲造影評(píng)估斑塊內(nèi)新生血管的分級(jí)［6］進(jìn)行分組：1～2級(jí)60例（A 組）、3 級(jí)44 例（B 組）和4 級(jí)28 例（C 組）。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委會(huì)批準(zhǔn)，受試者均簽署知情同意書。

二、儀器與方法

1.一般資料獲?。核惺茉囌邫z查前24 h 禁止吸煙、飲酒或咖啡，當(dāng)天停服降壓藥、降糖藥，記錄性別、年齡、收縮壓、舒張壓及病史。

2.超聲造影檢查：使用Philips iU 22 彩色多普勒超聲診斷儀，L9-3 探頭，頻率為5～9 MHz，內(nèi)置造影技術(shù)軟件。造影劑使用SonoVue（意大利Bracco 公司）。使用前與5.0 ml 生理鹽水充分混合搖勻制成白色微泡混懸液備用。受試者取仰臥位，首先按照頸總、頸內(nèi)外動(dòng)脈的縱切面和橫切面的順序，行雙側(cè)頸部動(dòng)脈標(biāo)準(zhǔn)掃查，記錄頸動(dòng)脈斑塊個(gè)數(shù)及分布情況，評(píng)估頸動(dòng)脈狹窄程度。選取最大的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊行超聲造影檢查。將配置好的造影劑混懸液經(jīng)肘靜脈團(tuán)注2.4 ml，隨后推注5.0 ml 生理鹽水，推進(jìn)造影劑同時(shí)啟動(dòng)造影模式，在雙屏對(duì)比模式下完成檢查，連續(xù)錄制采集感興趣區(qū)域的圖像約90 s，存儲(chǔ)供后期分析。

3.頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管的超聲造影分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：依據(jù)文獻(xiàn)［6］，將斑塊內(nèi)新生血管分為4 級(jí)：1 級(jí)，斑塊內(nèi)及斑塊的基底部均未見(jiàn)超聲造影劑增強(qiáng)影；2 級(jí)，斑塊的基底部即動(dòng)脈壁的滋養(yǎng)血管，可見(jiàn)超聲造影劑增強(qiáng)影；3 級(jí)，斑塊的肩部及基底部即動(dòng)脈壁的滋養(yǎng)血管，均可見(jiàn)超聲造影劑增強(qiáng)影；4 級(jí)，斑塊內(nèi)各部位均可見(jiàn)彌散的超聲造影劑增強(qiáng)影。

三、循環(huán)血中白細(xì)胞及各亞型的計(jì)數(shù)和NLR 的計(jì)算

行超聲造影前，受試者在空腹?fàn)顟B(tài)下采集靜脈血約5.0 ml，應(yīng)用Sysmex-1000i 全自動(dòng)血液分析儀器計(jì)數(shù) 白 細(xì) 胞（white blood cell，WBC）、中 性 粒 細(xì) 胞（neutrophil，NE）和淋巴細(xì)胞（lymphocytes，LY），并計(jì)算NLR。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以xˉ±s表示，多組間比較行Kruskal-Wallis 檢驗(yàn)，兩兩比較行Mann-Whitney U 檢驗(yàn)。相關(guān)性分析采用Spearman 相關(guān)分析法。Logistic 回歸分析影響頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

超聲造影評(píng)估斑塊內(nèi)新生血管的分級(jí)見(jiàn)圖1。

一、各組一般資料比較

A、B、C 組在性別比、年齡、收縮壓、舒張壓、高血壓病和糖尿病構(gòu)成比等比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表1；C 組腦梗死構(gòu)成比最高，與A、B 組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。

二、血WBC、NE、LY及NLR比較

與A 組比較，C 組循環(huán)血WBC 計(jì)數(shù)明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。NE 計(jì)數(shù)在A、B、C 組依次增高，而LY 計(jì)數(shù)依次減低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.01）。A 組NLR 最小，C 組NLR 最大，各組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.01）。見(jiàn)表2。

三、相關(guān)性分析

斑塊內(nèi)新生血管分級(jí)與循環(huán)血中WBC、NE、NLR均呈正相關(guān)（r=0.30、0.59、0.77，均P＜0.01），與LY 呈負(fù)相關(guān)（r=-0.50，P＜0.01），見(jiàn)圖2。Logistic 回歸分析發(fā)現(xiàn)，NLR 是斑塊內(nèi)新生血管的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。標(biāo)準(zhǔn)回歸系數(shù)提示，循環(huán)血中NLR 每增加1.08，斑塊內(nèi)新生血管分級(jí)增加一級(jí)。見(jiàn)表3。

圖1 斑塊內(nèi)新生血管分級(jí)的超聲造影圖

表1 各組一般資料比較

表2 各組循環(huán)血中WBC、NE、LY、NLR比較（±s）

表2 各組循環(huán)血中WBC、NE、LY、NLR比較（±s）

與A 組比較，#P＜0.01；與B 組比較，△P＜0.01。WBC：白細(xì)胞計(jì)數(shù)；NE：中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)；LY：淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)；NLR：中性粒細(xì)胞與淋巴性細(xì)胞計(jì)數(shù)比值

項(xiàng)目A組B組C組χ2值 P WBC（×109/L）6.3±1.9 6.7±1.9 7.8±2.2#9.0＜0.01 NE（×109/L）3.4±1.5 4.5±1.3#5.9±2.1#39.2＜0.01 LY（×109/L）2.2±1.0 1.6±0.6 1.2±0.4#△34.3＜0.01 NLR 1.7±1.0 3.1±1.2#5.6±3.3#△75.1＜0.01

圖2 斑塊的超聲造影分級(jí)與NLR的相關(guān)性散點(diǎn)圖

表3 循環(huán)血WBC、NE、LY及NLR對(duì)斑塊超聲造影分級(jí)的影響

討 論

動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的易損斑塊是心腦血管事件發(fā)生的重要致病因素之一［7］。既往研究［8］表明，斑塊內(nèi)炎性反應(yīng)和斑塊內(nèi)新生血管形成是其易損性的重要病理學(xué)特征。斑塊內(nèi)炎性反應(yīng)可反映全身炎性狀態(tài)［5］。因此，探討反映全身炎癥狀態(tài)的指標(biāo)NLR 與斑塊易損性的關(guān)系，對(duì)預(yù)警心腦血管事件意義重大。本研究旨在探討超聲造影半定量評(píng)估頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管與循環(huán)血中NLR的相關(guān)性。

超聲造影作為無(wú)創(chuàng)檢測(cè)斑塊內(nèi)新生血管的重要手段之一，可提示并評(píng)估斑塊的易損性［4］。Schmidt等［3］應(yīng)用頸動(dòng)脈斑塊超聲造影與頸動(dòng)脈內(nèi)膜剝脫術(shù)所剝脫的斑塊免疫組化染色進(jìn)行對(duì)比研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)斑塊內(nèi)超聲造影顯影增強(qiáng)位置與免疫組化染色顯示的新生血管位置呈正相關(guān)。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，C 組28 例受試者中，有16 例為腦梗死患者，其腦梗死比例高于A 組和B 組，提示斑塊內(nèi)新生血管分級(jí)越高，斑塊易損性越大，則腦血管事件發(fā)生率越高。這可能是因?yàn)榘邏K內(nèi)新生血管發(fā)育不成熟，當(dāng)機(jī)體處于炎性狀態(tài)時(shí)，循環(huán)血中的炎癥、免疫細(xì)胞等可通過(guò)新生血管的運(yùn)輸作用，進(jìn)入到斑塊內(nèi)部，產(chǎn)生炎癥、免疫反應(yīng)，進(jìn)而促使斑塊內(nèi)新生血管形成，增加其易損性［9］。

循環(huán)血中的WBC、NE、LY 及NLR 等指標(biāo)在一定程度上可反映全身及斑塊局部炎癥的狀態(tài)。NLR 作為一種敏感性較高的炎癥指標(biāo)，在腫瘤、心血管、類風(fēng)濕性疾病等的診斷中廣泛應(yīng)用［10］。本研究結(jié)果表明，當(dāng)頸動(dòng)脈斑塊超聲造影的新生血管分級(jí)越高，其循環(huán)血中的WBC、NE 和NLR 越高，而LY 越低，提示受試者機(jī)體炎癥狀態(tài)與斑塊易損性密切相關(guān)。分析原因：一方面可能是NE 在被激活后可以釋放如基質(zhì)金屬蛋白酶、髓過(guò)氧化物酶及彈性蛋白酶等，這些酶可溶解斑塊的纖維帽，使斑塊易損破裂［11-12］；另一方面，NE具有腎上腺素受體效能，受相應(yīng)的交感神經(jīng)調(diào)節(jié)其數(shù)量及功能［13］，而LY 具有膽堿能受體效能，受相應(yīng)的副交感神經(jīng)調(diào)節(jié)其數(shù)量及功能［5］。因此，NLR 可反映自主神經(jīng)系統(tǒng)平衡狀態(tài)，若自主神經(jīng)系統(tǒng)失衡可加速動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展［14］。本研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，NLR 可作為影響頸動(dòng)脈斑塊超聲造影新生血管分級(jí)的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，進(jìn)而影響斑塊的易損性，這與Li 等［15］研究結(jié)果一致。值得一提的是，本研究還發(fā)現(xiàn)NLR 每增加1.08，斑塊內(nèi)新生血管分級(jí)增加一級(jí)，提示應(yīng)用超聲造影半定量視覺(jué)評(píng)估斑塊內(nèi)新生血管時(shí)，應(yīng)結(jié)合NLR 對(duì)斑塊內(nèi)新生血管分級(jí)進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。

本研究的不足：①納入研究的樣本量有限，可能對(duì)研究結(jié)果造成一定的影響；②頸動(dòng)脈斑塊的超聲造影半定量視覺(jué)分級(jí)存在一定的主觀性，可能使研究結(jié)果有一定的偏差；③研究未深入分析受試者的腦梗死分型及身高、體質(zhì)量，以及服用降壓、降糖等藥物等對(duì)斑塊超聲造影分級(jí)或NLR的影響。

綜上所述，NLR 是影響頸動(dòng)脈斑塊超聲造影分級(jí)的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。應(yīng)用超聲造影技術(shù)對(duì)頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管的進(jìn)行半定量分析，評(píng)估斑塊的易損性時(shí)，結(jié)合血NLR 變化水平，可以更加準(zhǔn)確評(píng)價(jià)識(shí)別易損斑塊，具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。