家禽胚蛋注射技術(shù)的應(yīng)用研究(綜述)——肉堿、肌酸和植物提取物篇

賈良梁 譯自，97(2018)：2334～2335

張配配 校

1 L-肉堿

Zhai等于孵化第17天或第18天用配置長(zhǎng)度為3.81 cm的21-G針頭的注射器手工將100 μL含0.05 μmol、0.5 μmol、5 μmol或10 μmol L-肉堿的溶液注入白來(lái)杭雞種蛋胚胎中。L-肉堿所有注射劑量無(wú)論是在孵化第17天或第18天時(shí)注射均不會(huì)影響種蛋的孵化率、卵黃囊的絕對(duì)重量或相對(duì)重量以及雛雞出殼時(shí)的體重?？梢哉J(rèn)為L(zhǎng)-肉堿的注射劑量大于10 μmol時(shí)可以用于提高種蛋孵化率或雛雞出殼時(shí)的體重，因?yàn)樵谑褂眠@一注射劑量時(shí)研究人員并沒(méi)有檢測(cè)到肉堿的毒性反應(yīng)。

Keralapurath等探討了用胚蛋自動(dòng)注射機(jī)給“羅斯×羅斯”308肉雞的入孵種蛋胚胎注射3種不同劑量的L-肉堿對(duì)所孵出雛雞的組織營(yíng)養(yǎng)水平的影響。他們于孵化第18天將100 μL含0.5 mg、2.0 mg或8.0 mg L-肉堿的商用稀釋液注入入孵種蛋胚胎的羊膜腔中，隨后在所孵出雛雞出殼后48 d中的不同時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)：⑴ 肝臟和卵黃囊的相對(duì)重量；⑵ 肝臟、卵黃囊、胸肌、大腿肌、腓腸肌和啄殼肌的含水量；⑶ 肝臟、胸肌、大腿肌和啄殼肌的糖原、葡萄糖、蛋白質(zhì)和脂肪的含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與僅注射空白(即不添加L-肉堿)商用稀釋液的對(duì)照組種蛋所孵出的雛雞相比，入孵種蛋注射添加了L-肉堿的商用稀釋液后，所孵出雛雞出殼當(dāng)日的肝臟葡糖糖含量下降，3日齡時(shí)啄殼肌的含水量提高，因而它們的水平與未注射的對(duì)照組種蛋所孵出雛雞的一致。這些研究人員總結(jié)道：L-肉堿通過(guò)使正處于商用稀釋液注射應(yīng)激下的雛雞的肝臟葡萄糖水平和啄殼肌含水量標(biāo)準(zhǔn)化來(lái)影響組織的能量水平和含水量。

Keralapurath等在一項(xiàng)姐妹研究中進(jìn)一步探討了給入孵種蛋的胚胎注射L-肉堿對(duì)孵化率、“羅斯×羅斯”308肉雞的生產(chǎn)性能(死亡率、增重、采食量和飼料轉(zhuǎn)化率)以及屠宰性能(活重、胴體重、腹部脂肪墊重以及所有重要食用部分的總重)的影響。所有入孵種蛋的胚胎按Keralapurath等報(bào)道的方法在相同時(shí)間點(diǎn)用胚蛋自動(dòng)注射機(jī)注射相同劑量的L-肉堿。然而，盡管Keralapurath等觀察到L-肉堿會(huì)影響所孵出雛雞生命早期的肝臟和啄殼肌，但不同注射劑量對(duì)所有生產(chǎn)性能和屠宰性能指標(biāo)的影響均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著差異。這些研究人員指出，雖然注射的劑量對(duì)所孵出雛雞的生長(zhǎng)速度和屠宰性能無(wú)顯著的影響，但是注射高于本研究使用水平的L-肉堿具有延長(zhǎng)孵化期和提高孵化率的潛力。

Dooley等在孵化第18天用商用多蛋自動(dòng)注射機(jī)向入孵的肉雞種蛋胚胎羊膜腔或胚體中注射100 μL含8 mg～32 mg L-肉堿的商用稀釋液。與上述研究結(jié)果相反，Dooley等發(fā)現(xiàn)給入孵種蛋胚胎注射L-肉堿不會(huì)影響肉雞種蛋的孵化率和所孵出雛雞的存活率。同樣，當(dāng)L-肉堿通過(guò)入孵種蛋胚胎注射與加入飼料中同時(shí)供應(yīng)時(shí)，所孵出雛雞21日齡和45日齡時(shí)的存活率未受到影響；然而，這種提供方法會(huì)導(dǎo)致雛雞采食量下降以及體重和胸肌重量減小。與Zhai等的發(fā)現(xiàn)進(jìn)一步對(duì)比后，Dooley等認(rèn)為在給入孵種蛋胚胎注射8 mg、16 mg或32 mg L-肉堿的同時(shí)，再按50 mg/kg的水平在飼料中添加L-肉堿可能會(huì)對(duì)肉雞產(chǎn)生毒性。

2 肌酸

Zhao等研究了利用胚蛋注射技術(shù)給愛(ài)拔益加肉雞的入孵種蛋胚胎注射丙酮酸肌酸鹽對(duì)胚胎胸肌中的能量?jī)?chǔ)備量、生肌基因表達(dá)水平和衛(wèi)星細(xì)胞有絲分裂活性的影響。Zhao等以生理鹽水(0.75%)為載體，用配置21-G針頭的注射器將12 mg丙酮酸肌酸鹽注射到孵化第17.5天的種蛋胚胎的羊膜內(nèi)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，種蛋胚胎注射丙酮酸肌酸鹽后，孵化第19天的種蛋胚胎肌肉組織中磷酸肌酸和肌酸的含量以及所孵出雛雞出殼當(dāng)日和出殼后第3天的肌酸含量均得到了提高。Zhao等還發(fā)現(xiàn)，注射丙酮酸肌酸鹽的肉雞種蛋胚胎在孵化第19天以及所孵出雛雞在出殼當(dāng)日、出殼后第3天和第7天的胸肌總重量和胸肌相對(duì)重量均大于未注射丙酮酸肌酸鹽和僅注射生理鹽水的對(duì)照組種蛋胚胎的和所孵出雛雞的。此外，與未注射組和注射生理鹽水組的種蛋所孵出雛雞相比，注射丙酮酸肌酸鹽的入孵種蛋所孵出雛雞3日齡和7日齡時(shí)肌纖維的直徑和橫斷面積更大。該研究還指出，肉雞入孵種蛋胚胎和新生雛雞的能量?jī)?chǔ)備量和衛(wèi)星細(xì)胞有絲分裂活性因相對(duì)應(yīng)的成肌分化-1(Myogenic Differentiation 1)、肌細(xì)胞生成素和配對(duì)框-7的mRNA表達(dá)水平上調(diào)并輔以肌抑素(myostatin)mRNA表達(dá)水平下調(diào)而提高。因此，在孵化第17.5天向入孵的肉雞種蛋胚胎注射丙酮酸肌酸鹽可作為促進(jìn)肉雞種蛋孵化后期的胚胎和所孵出雛雞剛出殼階段肌肉生長(zhǎng)的潛在手段。

3 植物提取物

多項(xiàng)研究探索了給入孵禽蛋的胚胎注射含百里香或香芹提取物以及蜂膠等多種植物提取物后的作用。研究人員于孵化第5天 將1.0 mL含75 mg或100 mg百里香或含75 mg香芹提取物的0.9%生理鹽水從入孵的羅曼肉雞種蛋的小頭端手工注入種蛋中；他們還在孵化第14天用配置26-G針頭的注射器手工將0.2 mL蜂膠浸出液注入入孵的日本鵪鶉種蛋胚胎的羊膜內(nèi)，隨后用蠟密封注射孔。結(jié)果表明，給入孵的日本鵪鶉種蛋注射蜂膠浸出液后未取得預(yù)期的效果，因?yàn)殡m然注射1%的蜂膠浸出液不會(huì)影響種蛋的孵化率或胚胎死亡率，但注射2%或3%的蜂膠浸出液會(huì)對(duì)上述兩項(xiàng)指標(biāo)產(chǎn)生不良的影響。此外，蜂膠浸出液的三種注射劑量均不會(huì)顯著影響所孵出雛雞的增重、采食量、飼料轉(zhuǎn)化率或存活率。相反，給入孵的肉雞種蛋胚胎注射百里香或香芹的提取物可以提高所孵出雛雞的體液免疫力，而種蛋孵化率、雛雞淋巴器官重量以及14日齡和21日齡時(shí)的生長(zhǎng)速度未受到顯著影響。上述結(jié)果表明，向肉雞的入孵種蛋胚胎羊膜腔中注射草藥香料如百里香或香芹可有效提高所孵出雛雞的免疫力。