非編碼RNA調(diào)控人牙周膜干細(xì)胞成骨向分化的研究進(jìn)展

王潤(rùn)婷 房付春

1.南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院口腔科 廣州 510515；

2.南方醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院 廣州 510515

牙周炎是一種復(fù)雜的口腔慢性疾病，它破壞了牙周支持組織的結(jié)構(gòu)完整性，包括牙齦、牙槽骨、牙周膜及牙骨質(zhì)[1]。第四次全國(guó)口腔健康流行病學(xué)調(diào)查顯示，我國(guó)35～44歲年齡組的牙周健康率為9.1%，65～74歲年齡組為9.3%，牙周炎是造成我國(guó)成人牙齒喪失的首要原因[2]。牙周治療的基本目標(biāo)是控制牙周組織炎癥，并在局部受損的牙周組織中形成再生。目前臨床上常用的幾種治療方法，例如引導(dǎo)性組織再生、骨及生物活性物質(zhì)移植術(shù)等，不能達(dá)到完全牙周組織再生的目的[3]。

針對(duì)牙周炎最理想的治療是牙周再生，牙周組織工程技術(shù)為牙周再生開辟了新路徑[4]。牙周組織工程是指在體外用理想的種子細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)建具有功能性的三維組織復(fù)合體，以植入牙周缺損部位，對(duì)缺損部位進(jìn)行結(jié)構(gòu)功能性重建，選擇合適的種子細(xì)胞并提供適當(dāng)?shù)奈h(huán)境是其成功的基礎(chǔ)[5]。牙周膜是存在于牙槽骨和牙骨質(zhì)之間的結(jié)締組織，是牙周組織修復(fù)、牙周營(yíng)養(yǎng)和血管平衡的重要組成部分。人牙周膜干細(xì)胞（periodontal ligament stem cell）屬于間充質(zhì)來源的成體干細(xì)胞，其具有多向分化能力，在生命體內(nèi)能夠增殖并形成組織，從而維持自身的數(shù)量，在體外可以克隆性生長(zhǎng)并自我更新，是牙周再生的重要種子細(xì)胞[6-7]。因此，研究牙周膜干細(xì)胞成骨向分化的機(jī)制可為牙周再生和成骨組織工程的實(shí)際應(yīng)用提供新思路。

1 非編碼RNA概述

非編碼RNA（non-coding RNA，ncRNA）是當(dāng)今生命科學(xué)領(lǐng)域發(fā)展最迅速的前沿研究領(lǐng)域之一，構(gòu)成了一個(gè)存在于高等生物中巨大的、尚未被完全發(fā)現(xiàn)的RNA世界[8]。人類基因組轉(zhuǎn)錄區(qū)高達(dá)76%，但轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中只有不到2%是編碼蛋白質(zhì)的mRNA，其余均為ncRNA。ncRNA可根據(jù)其功能分為管家ncRNA和調(diào)控ncRNA，其中管家ncRNA包括：1）可參與蛋白質(zhì)合成的ncRNA，如核糖體RNA、轉(zhuǎn)運(yùn)RNA、細(xì)胞質(zhì)小RNA；2）可參與RNA加工的ncRNA，如細(xì)胞核內(nèi)小RNA、核仁小RNA、催化性小RNA等。調(diào)控ncRNA可根據(jù)其大小和結(jié)構(gòu)分為：1）短鏈ncRNA，長(zhǎng)度小于200個(gè)核苷酸（nt），如微小RNA（microRNA,miRNA，miR）、小干擾RNA和與PIWI蛋白相互作用的RNA；2）長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long noncoding RNA, lncRNA），長(zhǎng)度大于200 nt；3）環(huán)狀RNA（circular RNA，circRNA），轉(zhuǎn)錄后形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)。其中miRNA、lncRNA、circRNA等因其重要的功能，受到廣泛關(guān)注[9]。

ncRNA的共同特點(diǎn)是均轉(zhuǎn)錄自基因組中的非翻譯區(qū)或內(nèi)含子區(qū)，但不翻譯成蛋白質(zhì)[10]。在很長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)，大部分ncRNA都被認(rèn)為是基因組轉(zhuǎn)錄過程中的“噪音”，后研究逐步發(fā)現(xiàn)這些ncRNA通過與蛋白質(zhì)或其他分子相結(jié)合來開啟或關(guān)閉基因，從而在調(diào)控基因表達(dá)中發(fā)揮關(guān)鍵作用[11]。本文主要綜述了目前研究比較集中的幾種ncRNA在牙周膜干細(xì)胞成骨向分化中的調(diào)控機(jī)制（詳見表1）。

表1 ncRNA參與牙周膜干細(xì)胞成骨分化調(diào)控Tab 1 Regulation of ncRNAs on osteogenic differentiation of periodontal ligament stem cells

續(xù)表1

2 miRNA與牙周膜干細(xì)胞成骨向分化

miRNA是普遍存在的、內(nèi)源性的非編碼短鏈RNA，其長(zhǎng)度通常為20～24 nt，在過去10年內(nèi)被大量研究，其作用機(jī)制已經(jīng)相對(duì)明確[12]。miRNA通過靶向結(jié)合mRNA的3’-非翻譯區(qū)（untranslated region，UTR）上的miRNA識(shí)別元件，在轉(zhuǎn)錄后水平導(dǎo)致mRNA降解或阻止其蛋白質(zhì)翻譯，且每個(gè)miRNA能夠結(jié)合多個(gè)靶標(biāo)[13]。

筆者團(tuán)隊(duì)[14]前期采用miRNA基因芯片技術(shù)檢測(cè)牙周膜干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)組和非誘導(dǎo)組miRNA表達(dá)量變化，結(jié)果顯示在成骨誘導(dǎo)14 d后，共有116個(gè)miRNA出現(xiàn)顯著差異表達(dá)，其中30個(gè)上調(diào)，86個(gè)下調(diào)，提示了miRNA在牙周膜干細(xì)胞成骨向分化中具有重要調(diào)控作用。

Li等[15]同樣采用基因芯片技術(shù)檢測(cè)了分化的和未分化的牙周膜干細(xì)胞中miRNA的表達(dá)水平，觀察到成骨向分化的牙周膜干細(xì)胞中miR-24-3p水平顯著降低，進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)證明miR-24-3p可直接靶向轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白Smad5的3’-UTR，抑制其蛋白質(zhì)表達(dá)。Wei等[16]亦發(fā)現(xiàn)miR-21可抑制Smad5的表達(dá)，從而抑制牙周膜干細(xì)胞的成骨向分化。此外，有學(xué)者[17]研究發(fā)現(xiàn)，組織腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor, TNF）-α可通過抑制miR-21/軟脂?；椎鞍譙pry1功能軸抑制牙周膜干細(xì)胞的成骨向分化。miR-203、miR-1305和miR-218可通過靶向調(diào)控核心結(jié)合蛋白因子Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子（Runtrelated transcription factor，Runx）2，對(duì)牙周膜干細(xì)胞的成骨向分化能力起抑制作用[18-20]。miR-214可通過靶向活化轉(zhuǎn)錄因子（activating transcription factor，ATF）4抑制牙周膜干細(xì)胞的成骨向分化[21]，還可通過靶向β-連環(huán)蛋白1調(diào)節(jié)Wnt/β-連環(huán)蛋白信號(hào)傳導(dǎo)途徑參與牙周膜干細(xì)胞的成骨向分化[22]。miR-17可以通過影響轉(zhuǎn)錄因子（transcriptional factor，TCF）3的表達(dá)，激活Wnt通路發(fā)揮對(duì)牙周膜干細(xì)胞成骨向分化的調(diào)控[23-24]。在高濃度葡萄糖介導(dǎo)的抑制牙周膜干細(xì)胞成骨向分化過程中，miR-31通過靶向特異性結(jié)合蛋白（special AT-rich sequence-binding protein，Satb）2發(fā)揮調(diào)控作用[25]。以上報(bào)道的均是通過miRNA經(jīng)典途徑靶向成骨相關(guān)基因發(fā)揮抑制作用。

除此之外，miRNA亦可以促進(jìn)牙周膜干細(xì)胞成骨向分化。miR-200c可有效抑制牙周膜干細(xì)胞中的白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-6、IL-8和趨化因子（chemokine，CCL）-5，增強(qiáng)成骨向分化[26]。筆者團(tuán)隊(duì)[27]前期研究發(fā)現(xiàn)，miR-543直接與ERBB2的轉(zhuǎn)導(dǎo)子2,2（transducer of ERBB2,2，TOB2）mRNA的3’-UTR相互作用，在牙周膜干細(xì)胞中起促進(jìn)成骨的作用。miR-22可通過抑制組蛋白去乙?；福╤istone deacetylase，HDAC）6表達(dá)促進(jìn)牙周膜干細(xì)胞成骨向分化[28]。

除了在礦化誘導(dǎo)液作用下調(diào)節(jié)牙周膜干細(xì)胞成骨向分化，miRNA也可在應(yīng)力作用下發(fā)揮調(diào)控。Wei等[29]發(fā)現(xiàn)，拉應(yīng)力作用牙周膜干細(xì)胞后，有53個(gè)miRNA顯著差異表達(dá)，其中26個(gè)上調(diào)，27個(gè)下調(diào)；進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，miR-21與剪切應(yīng)力密切相關(guān)，其直接作用于激活素受體（activin A receptor，ACVR）2B基因的3’-UTR，從而抑制ACVR2B的表達(dá)，影響牙周膜干細(xì)胞成骨向分化。

miRNA除了靶向負(fù)調(diào)控基因的mRNA水平，介導(dǎo)其降解或阻止其翻譯以外，還有其他幾種調(diào)控機(jī)制[30]。例如，miRNA可與其他功能蛋白質(zhì)相結(jié)合；可直接激活Toll樣受體（Toll-like receptor，TLR）受體蛋白；可提高蛋白質(zhì)表達(dá)水平；可靶向調(diào)控線粒體相關(guān)基因的mRNA；可直接激活基因的轉(zhuǎn)錄過程；可靶向負(fù)調(diào)控其他ncRNA的前體RNA；miRNA的前體pri-miRNA可翻譯為多肽。目前的研究主要集中在miRNA的負(fù)向調(diào)控機(jī)制上，對(duì)其他的調(diào)控機(jī)制鮮有涉及，還需進(jìn)一步探索。

3 lncRNA與牙周膜干細(xì)胞成骨向分化

lncRNA是長(zhǎng)度為200～20 000 nt的ncRNA，由于其長(zhǎng)度較長(zhǎng)，分子形成二級(jí)結(jié)構(gòu)甚至更高級(jí)結(jié)構(gòu)，使其調(diào)控的方式和機(jī)制大大復(fù)雜化。另外，lncRNA的可變剪切以及不同轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)又進(jìn)一步增加了其調(diào)控的復(fù)雜性。lncRNA可以直接結(jié)合同源基因組DNA和RNA，也可以通過形成復(fù)雜的二級(jí)結(jié)構(gòu)與許多蛋白質(zhì)相互作用，在轉(zhuǎn)錄水平、轉(zhuǎn)錄后水平及表觀遺傳水平等多個(gè)層面上調(diào)控基因的表達(dá)，從而參與許多重要的生物學(xué)過程，如細(xì)胞存活、增殖、分化、染色質(zhì)重塑和器官的形成等[31]。

Zheng等[32]利用RNA測(cè)序檢測(cè)牙周膜干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)3、7和14 d時(shí)lncRNA的表達(dá)變化，顯示17個(gè)lncRNA在3、7和14 d穩(wěn)定上調(diào)， 31個(gè)穩(wěn)定下調(diào)。Gu等[33]通過RNA測(cè)序檢測(cè)正常培養(yǎng)、成骨誘導(dǎo)7 d的牙周膜干細(xì)胞中l(wèi)ncRNA的表達(dá)變化，與正常培養(yǎng)組相比，誘導(dǎo)組777個(gè)lncRNA表達(dá)上調(diào)，183個(gè)lncRNA表達(dá)下調(diào)。筆者團(tuán)隊(duì)[34]前期對(duì)成骨誘導(dǎo)和未誘導(dǎo)的牙周膜干細(xì)胞采用lncRNA基因芯片檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)在14 d有994個(gè)lncRNA出現(xiàn)上調(diào)表達(dá)，1 177個(gè)lncRNA下調(diào)表達(dá)，進(jìn)一步通路分析顯示，共有83條信號(hào)通路參與牙周膜干細(xì)胞成骨向分化過程，包括有絲分裂原活化蛋白激酶（mitogenactivated protein kinase，MAPK）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（transforming growth factor，TGF）-β等通路；編碼-非編碼基因共表達(dá)（codingnoncoding gene co-expression）分析結(jié)果顯示，出現(xiàn)差異表達(dá)的lncRNA與這些成骨相關(guān)mRNA之間存在著潛在的調(diào)控關(guān)系，其中有131對(duì)基因之間存在負(fù)相關(guān)，262對(duì)基因之間存在正相關(guān)。Huang等[35]利用RNA測(cè)序檢測(cè)牙周膜干細(xì)胞在壓應(yīng)力作用下lncRNA的表達(dá)變化，結(jié)果顯示總共有90個(gè)lncRNA差異表達(dá)，其中72個(gè)上調(diào)，18個(gè)下調(diào)。目前，lncRNA在牙周膜干細(xì)胞成骨向分化方面的研究主要集中在轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后水平。

3.1 轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控

lncRNA可以與特定蛋白質(zhì)結(jié)合，影響該蛋白質(zhì)在細(xì)胞發(fā)育過程中的功能，進(jìn)而影響下游基因的轉(zhuǎn)錄。

RNA結(jié)合蛋白（RNA binding protein，RBP）作為一種影響lncRNA調(diào)節(jié)功能的新型蛋白質(zhì)，也受到學(xué)者特別關(guān)注。He等[36]利用生物信息學(xué)手段預(yù)測(cè)并篩選出lncRNA-牛磺酸上調(diào)基因（taurine upregulated gene，TUG）1，并發(fā)現(xiàn)Lin28同源物A（Lin-28 homolog A，Lin28A）能與lncRNA-TUG1靶向結(jié)合，作為參與牙周膜干細(xì)胞成骨向分化的RBP與lncRNA-TUG1相互作用，形成lncRNA-RBP正性調(diào)控網(wǎng)絡(luò)協(xié)同促進(jìn)牙周膜干細(xì)胞成骨基因的表達(dá)，進(jìn)而部分實(shí)現(xiàn)lncRNA-TUG1促進(jìn)牙周膜干細(xì)胞成骨向分化的作用。Liu等[37]研究證明，腫瘤抑制基因lncRNA母系印記（maternally expressed，MEG）3與RNA結(jié)合蛋白異質(zhì)性細(xì)胞核核糖核蛋白（heterogeneous nuclear ribonucleoprotein，hnRNP）K結(jié)合后，會(huì)影響骨形態(tài)發(fā)生蛋白（bone morphogenetic protein，BMP）2的轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而抑制牙周膜干細(xì)胞的成骨向分化。

lncRNA也可干擾mRNA或其他ncRNA的轉(zhuǎn)錄。Jia等[38]發(fā)現(xiàn)反分化非編碼RNA（antidifferentiation noncoding RNA，ANCR/differentiation antagonizing noncoding RNA，DANCR）可以通過調(diào)控糖原合成激酶（glycogen synthase kinase，GSK）3β的表達(dá)，抑制經(jīng)典Wnt/β-連環(huán)蛋白信號(hào)通路，使RUNX2表達(dá)下調(diào)，從而抑制牙周膜干細(xì)胞成骨向分化能力。

3.2 轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控

許多l(xiāng)ncRNA可以吸附miRNA，與靶基因競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合miRNA，從而影響各種生物過程中的靶向因子活性。

牙周炎患者的牙周膜干細(xì)胞核因子（nuclear factor，NF）-κB信號(hào)通路被激活，使miR-182表達(dá)上調(diào)，lncRNA-POIR可以作為競(jìng)爭(zhēng)性內(nèi)源RNA（competing endogenous RNA，ceRNA）而與miR-182結(jié)合，調(diào)節(jié)靶向基因叉頭轉(zhuǎn)錄因子（forkhead box protein，F(xiàn)ox）O1在炎性牙周膜干細(xì)胞成骨向分化過程中的表達(dá)。FoxO1可抑制經(jīng)典Wnt信號(hào)通路，從而促進(jìn)炎性牙周膜干細(xì)胞的成骨向分化，為牙周炎的治療提供了新策略[39]。

Peng等[40]發(fā)現(xiàn)lncRNA-ANCR可與Notch通路受體（Notch receptor，Notch）2基因競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miR-758，從而形成ANCR/miR-758/Notch2功能軸，在調(diào)節(jié)牙周膜干細(xì)胞的成骨向分化過程中起重要作用。Jia等[41]發(fā)現(xiàn)，前列腺癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子（prostate cancer-associated ncRNA transcript，lncRNA-PCAT）1可以競(jìng)爭(zhēng)性逆轉(zhuǎn)miR-106a-5p對(duì)BMP2的抑制作用，激活BMP/Smad通路，此外還發(fā)現(xiàn)miR-106a-5p的另一個(gè)靶標(biāo)E2F轉(zhuǎn)錄因子5（E2F transcription factor 5，E2F5）可以與lncRNA-PCAT1的啟動(dòng)子結(jié)合，形成PCAT1/miR-106a-5p前饋調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)，繼而增強(qiáng)牙周膜干細(xì)胞成骨向分化。

此外，Chen等[42]發(fā)現(xiàn)，lncRNA缺氧誘導(dǎo)因子-1α反義RNA2（hypoxia inducible factor 1α antisense RNA 2，HIF1A AS2）可以通過堿基配對(duì)與互補(bǔ)mRNA缺氧誘導(dǎo)因子（hypoxia inducible factor，HIF）1α形成雙鏈RNA，增加了其穩(wěn)定性，提高了蛋白質(zhì)翻譯水平，從而促進(jìn)牙周膜干細(xì)胞的成骨向分化。

3.3 表觀遺傳水平調(diào)控

從表觀遺傳學(xué)的角度來看，一些特異的lncRNA可以作為染色質(zhì)修飾的協(xié)調(diào)者，參與蛋白質(zhì)復(fù)合物的合成，改變DNA甲基化狀態(tài)，從而控制相關(guān)基因的表達(dá)。已有研究報(bào)道，lncRNA可在表觀遺傳水平調(diào)控成骨向分化。Zhu等[43]發(fā)現(xiàn)，lncRNA ANCR可與組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶Zerste基因增強(qiáng)子同源物（enhancer of zeste homolog，EZH）2結(jié)合，促進(jìn)組蛋白H3第27位賴氨酸（Histone H3 on Lys27，H3K27）甲基化，進(jìn)而抑制人胎兒成骨細(xì)胞的成骨向分化。目前關(guān)于lncRNA在表觀遺傳水平調(diào)控牙周膜干細(xì)胞成骨向分化方面鮮有涉及，仍需進(jìn)一步探索。

lncRNA的發(fā)現(xiàn)補(bǔ)充了分子機(jī)制上的許多空白，其可以從轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后和表觀遺傳3個(gè)層面進(jìn)行基因表達(dá)的調(diào)控，幾乎參與生命體所有進(jìn)程。lncRNA在牙周膜干細(xì)胞成骨向分化中的研究主要集中在轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后水平上，但絕大多數(shù)文章未對(duì)這些lncRNA進(jìn)行亞細(xì)胞定位，而細(xì)胞質(zhì)定位是lncRNA發(fā)揮功能的基礎(chǔ)，尤其是ceRNA機(jī)制研究[44]。由于lncRNA數(shù)量龐大以及其作用極為復(fù)雜，目前研究透徹的lncRNA也只是冰山一角，lncRNA參與牙周膜干細(xì)胞成骨向分化的機(jī)制仍需進(jìn)一步探索。

4 circRNA與牙周膜干細(xì)胞成骨向分化

circRNA的概念在1976年首次被提出，是一種新型的內(nèi)源性ncRNA，現(xiàn)已被證實(shí)存在于多種生物體中。與線性RNA不同，circRNA的3’末端與5’末端結(jié)合在一起，形成共價(jià)閉合的連續(xù)環(huán)，獨(dú)特閉環(huán)結(jié)構(gòu)使其更能抵抗RNA酶R的消化作用，是理想的診斷生物標(biāo)志物[45]。越來越多的研究表明，circRNA參與胚胎發(fā)育、細(xì)胞活動(dòng)和許多人類疾病的發(fā)生、發(fā)展。

Gu等[33]通過RNA測(cè)序檢測(cè)正常培養(yǎng)、成骨誘導(dǎo)7 d的牙周膜干細(xì)胞中circRNA的表達(dá)變化，與正常培養(yǎng)組相比，誘導(dǎo)組766個(gè)circRNA表達(dá)上調(diào)，690個(gè)circRNA表達(dá)下調(diào)，基因分類分析（gene ontology，GO）、Kyoto基因與基因組數(shù)據(jù)庫分析預(yù)測(cè)，circRNA可能通過親本基因參與基礎(chǔ)生物學(xué)過程，包括干細(xì)胞的成骨向分化；miRanda預(yù)測(cè)發(fā)現(xiàn)，其中1 382個(gè)差異表達(dá)的circRNA可與148個(gè)miRNA結(jié)合，并與744個(gè)mRNA競(jìng)爭(zhēng)miRNA結(jié)合位點(diǎn)。這些circRNA與miRNA組成了復(fù)雜的ceRNA網(wǎng)絡(luò)圖，其中circRNA PTPRG、EXOC4、PRKCA及SETBP1可與多個(gè)miRNA結(jié)合，同一個(gè)miRNA也可與多個(gè)circRNA相結(jié)合，這些circRNA可能作為miRNA吸附“海綿”，調(diào)控牙周膜干細(xì)胞成骨向分化。Li等[46]研究發(fā)現(xiàn)，circRNA CDR1充當(dāng)miR-7海綿，調(diào)控生長(zhǎng)分化因子（growth differentiation factor，GDF）5的上調(diào)和Smad1/5/8及p38 MAPK的磷酸化，從而促進(jìn)牙周膜干細(xì)胞的成骨向分化。Wang等[47]發(fā)現(xiàn)circRNA在機(jī)械力誘導(dǎo)牙周膜干細(xì)胞成骨向分化過程中亦有變化。以上研究證實(shí)，circRNA可能在牙周膜干細(xì)胞的成骨過程中起重要調(diào)控作用。

目前，cirRNA在牙周膜干細(xì)胞成骨向分化研究中多集中于ceRNA機(jī)制，但在其他領(lǐng)域的研究中，還存在其他作用機(jī)制。例如，cirRNA可在轉(zhuǎn)錄和剪接水平上調(diào)節(jié)基因表達(dá)[48-49]，還可與蛋白質(zhì)相互作用形成特定復(fù)合物進(jìn)而發(fā)揮作用[50]?？傊?，circRNA的功能及其相關(guān)機(jī)制可能是多種多樣的，其可能影響病理、生理過程，作為疾病的診斷或預(yù)測(cè)生物標(biāo)志物，也可提供新的潛在治療靶點(diǎn)。探討circRNA在牙周膜干細(xì)胞成骨向分化過程中的作用及功能，可能為牙周再生治療提供具有應(yīng)用潛力的新方向。

5 挑戰(zhàn)與展望

目前牙周病臨床治療方法主要包括基礎(chǔ)及手術(shù)治療，但這些方法仍無法完全修復(fù)已破壞的牙周組織。近年來，再生醫(yī)學(xué)的發(fā)展為口腔多種組織修復(fù)再生提供了新的策略，牙周膜干細(xì)胞有望在牙周組織修復(fù)再生的臨床應(yīng)用上發(fā)揮重要作用，為重度牙周疾病患者的治療開拓新途徑。在牙周膜干細(xì)胞成骨向分化的過程中，有眾多轉(zhuǎn)錄因子及信號(hào)通路參與，每種因子和信號(hào)通路都處于十分復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)之中，其確切機(jī)制尚不完全清楚，且尚有一些因子及信號(hào)通路未被完全發(fā)現(xiàn)。

盡管面臨挑戰(zhàn)，但以ncRNA調(diào)控牙周膜干細(xì)胞為基礎(chǔ)的牙周病治療方法是十分有前景的。已有大量研究證實(shí)ncRNA在轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后及表觀遺傳等多個(gè)水平調(diào)控基因表達(dá)，參與細(xì)胞分化、個(gè)體發(fā)育和疾病發(fā)生與發(fā)展等多種生物學(xué)進(jìn)程，如miRNA在再生醫(yī)學(xué)和腫瘤的發(fā)生與發(fā)展中起到關(guān)鍵作用；lncRNA可利用多種作用模式來調(diào)節(jié)基因表達(dá)，并廣泛參與細(xì)胞過程；circRNA可能成為研究疾病發(fā)病機(jī)制、診斷和預(yù)后的理想候選標(biāo)志物。因此，進(jìn)一步加強(qiáng)ncRNA對(duì)牙周膜干細(xì)胞成骨向分化機(jī)制的研究，不僅可以擴(kuò)展對(duì)ncRNA復(fù)雜世界的理解，也有助于通過調(diào)控牙周膜干細(xì)胞的分化方向，為牙周組織再生提供理論依據(jù)。