• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于90K芯片的小麥穗長和旗葉長QTL分析

    2020-03-05 04:20:54姚儉昕張傳量宋曉朋許小宛邢永鋒呂棟云宋鵬博楊孟于孫道杰
    麥類作物學(xué)報 2020年11期
    關(guān)鍵詞:環(huán)境檢測

    姚儉昕,張傳量,宋曉朋,許小宛,邢永鋒,呂棟云,宋鵬博,楊孟于,孫道杰

    (1.西北農(nóng)林科技大學(xué)農(nóng)學(xué)院,陜西楊凌 712100;2.周口市農(nóng)業(yè)科學(xué)院,河南周口 466000;3.駐馬店市農(nóng)業(yè)科學(xué)院,河南駐馬店 463000)

    小麥(TriticumaestivumL.)是全球重要的糧食作物,提供人類所需的熱量和蛋白質(zhì)[1-2]。小麥育種的基礎(chǔ)目標(biāo)是增加單位面積產(chǎn)量,而影響小麥產(chǎn)量的大部分農(nóng)藝相關(guān)性狀由微效多基因控制[3]。其中,穗長與小麥產(chǎn)量三要素(單位面積穗數(shù)、穗粒數(shù)和粒重)均密切相關(guān)[4],小麥旗葉長則與穗粒數(shù)和單株籽粒產(chǎn)量呈顯著正相關(guān)[5-6]。因此,小麥的穗長和旗葉長是小麥育種過程中重要的目標(biāo)性狀,對其進(jìn)行QTL定位研究,可為提高小麥產(chǎn)量提供參考依據(jù)。

    迄今為止,已有許多國內(nèi)外學(xué)者在不同環(huán)境下對小麥穗長和旗葉長的遺傳機(jī)制進(jìn)行了大量研究,并取得了一定的進(jìn)展。然而,調(diào)控穗長的主要基因還未被確認(rèn),但是定位了大約400個控制穗長的QTL,定位信息覆蓋了整個染色體組[7-16]。Wu等[17]研究發(fā)現(xiàn),與穗長相關(guān)的一些效應(yīng)較大的或在多個環(huán)境中檢測到的QTL,分布在2D、3A、4A、4B、5A、6A、6B、7A、7B和7D染色體上,且QSpl.nau-2D(HL1)被定位到2D染色體的短臂上。Zhai等[12]利用RIL群體經(jīng)多環(huán)境的聯(lián)合分析,發(fā)現(xiàn)QSl.cau-2D與矮桿基因Rht8定位區(qū)間一致,為相同的基因,在不改變小穗數(shù)的情況下,可降低穗長長度。Ma等[8]基于RIL群體和F2群體,在7D染色體上定位到效應(yīng)較大的數(shù)量位點(diǎn)QSpl.nau-7D;Yao等[18]利用近等基因系對該位點(diǎn)進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)該位點(diǎn)的優(yōu)良等位基因能夠增加穗長,提高小穗數(shù)和穗粒數(shù)。隨著定位技術(shù)水平的提高,挖掘到的QTL數(shù)量逐漸豐富,但仍需繼續(xù)挖掘新的控制穗長的QTL,以深入了解穗長的遺傳機(jī)制。

    近些年,關(guān)于小麥旗葉長的QTL定位研究逐漸增多,小麥的旗葉大小極易受環(huán)境影響,屬于典型的數(shù)量性狀[19],控制旗葉大小的QTL在小麥21條染色體上均能被檢測到。例如,Isidro等[20]在硬粒小麥中,發(fā)現(xiàn)控制旗葉長的QTL分布在2A、3B、5B、7A和2B染色體上。Hussain等[21]基于基因型測序(GBS)技術(shù),以Harry(耐旱)與Wesley(干旱易感)兩個品種構(gòu)建的RIL群體為材料,對旗葉相關(guān)性狀進(jìn)行QTL定位,共檢測到7個控制旗葉長的QTL,分布在2D、5A、6A、7A和7B染色體上。Liu等[22]利用半野生小麥藏1817和普通小麥寧冬3331構(gòu)建的含有213個株系的RIL群體進(jìn)行QTL定位,共檢測到7個控制旗葉長的QTL,分布在2B、3A、4B和5A染色體上。Fan等[23]利用科農(nóng)9024與京411兩個親本構(gòu)建的含有188個株系的重組自交系為材料,進(jìn)行旗葉長的QTL定位,共檢測到11個控制旗葉長的QTL,分布在1B、2B、4A、4B、5B和5D染色體上,其中,有2個QTL能夠在8個環(huán)境中檢測到,為穩(wěn)定QTL。大量的研究也表明,旗葉相關(guān)性狀與產(chǎn)量相關(guān)性狀之間存在相關(guān)性,適當(dāng)?shù)钠烊~大小將有利于產(chǎn)量的提高。例如,Liu等[22]研究發(fā)現(xiàn),部分QTL同時控制旗葉和產(chǎn)量相關(guān)性狀。Ma等[27]通過條件QTL分析發(fā)現(xiàn),旗葉大小和角度之間的適當(dāng)平衡可以提高產(chǎn)量。Zhao等[19]利用3個不同親本組合的RIL群體為材料,發(fā)現(xiàn)10個同時控制旗葉和產(chǎn)量相關(guān)性狀的QTL簇。

    雖然目前針對小麥穗長和旗葉長已經(jīng)開展了大量研究工作,但結(jié)論卻各不相同,這可能與選擇的遺傳材料不同有關(guān)。隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展,分子標(biāo)記技術(shù)在作物育種研究中得到廣泛應(yīng)用,其中,SNP標(biāo)記由于具有數(shù)量豐富、多態(tài)性高和穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn),近年來被廣泛應(yīng)用。因此,本研究以小偃81和西農(nóng)1376為親本構(gòu)建的含120個株系的RIL群體為研究對象,利用90K SNP芯片對穗長和旗葉長進(jìn)行QTL定位,挖掘在多環(huán)境下能夠穩(wěn)定表達(dá)的主效QTL,以期為相關(guān)基因克隆和分子育種提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    以優(yōu)良品種(系)小偃81(XY81)和西農(nóng)1376(XN1376)構(gòu)建的包含120個株系的F9∶10代RIL群體為材料,于2016年10月至2017年6月和2017年10月至2018年6月,分別在陜西楊凌和河南南陽(分別用2017YL、2017NY、2018YL和2018NY表示)進(jìn)行試驗,各試驗點(diǎn)均采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計,每個株系種植2行,行長2 m,每行70株,行距 0.3 m。重復(fù)5次。其他田間管理措施同當(dāng)?shù)厣a(chǎn)管理。

    1.2 表型鑒定

    于小麥蠟熟期,每個株系選取長勢良好且均勻一致的5個單株(排除邊際效應(yīng)),對其主莖穗長和旗葉長進(jìn)行測量。利用R/leme4計算各個環(huán)境的表型數(shù)據(jù),并進(jìn)行W-test檢驗,對親本性狀的數(shù)值進(jìn)行多重比較及遺傳力計算,廣義遺傳力的計算公式為:

    H2=VG/(VG+VGY/y+VGE/e+VE/nr)× 100%

    其中,y代表年數(shù),e代表環(huán)境數(shù),n代表重復(fù)數(shù)。根據(jù)多環(huán)境的表型數(shù)據(jù)進(jìn)行隨機(jī)效應(yīng)的線性分解,對BLUP育種值(best linear unbiased prediction)進(jìn)行預(yù)測,利用各個環(huán)境的平均值和BLUP育種值進(jìn)行QTL作圖[24]。

    1.3 遺傳圖譜的構(gòu)建

    以小麥幼嫩葉片為材料,采用CTAB法提取小麥基因組DNA。利用Illumina 基因分型技術(shù)測試平臺(北京博奧生物有限公司)的微珠芯片技術(shù)(Bead Array)對小麥90K SNP芯片標(biāo)記進(jìn)行檢測,利用Genomestudio v1.0軟件進(jìn)行多態(tài)性分析。構(gòu)建圖譜的大致流程為:芯片標(biāo)記分型成功之后,導(dǎo)入EXCEL,篩選出兩親本間存在多態(tài)性的標(biāo)記,剔除偏分離標(biāo)記(P<0.001)和缺失率>20%的標(biāo)記,然后用CARTHAGENE[25]進(jìn)行遺傳圖譜的構(gòu)建,LOD> 5,distance<0.3。

    1.4 QTL的檢測

    利用完備復(fù)合區(qū)間模型(ICIM)[26]對4種環(huán)境下的表型值及育種值(BLUP)分別進(jìn)行QTL定位。在a=0.05顯著水平下進(jìn)行1 000次的排列檢驗,確定LOD值的大小,采用正反逐步回歸法控制背景,步長設(shè)為1 cM。定位結(jié)果與中國春的物理位置(IWGSC RefSeq v1.0)進(jìn)行比對,以確定具體的物理位置。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 表型數(shù)據(jù)分析

    由表1可以看出,不同環(huán)境的穗長和旗葉長在親本XY81與XN1376間均存在顯著差異。穗長和旗葉長的遺傳力分別為0.82和0.74,說明均不易受環(huán)境影響;穗長的遺傳力大于旗葉長,兩性狀均出現(xiàn)不同程度的超親分離。W-test檢驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),兩性狀在各環(huán)境下的P值皆大于 0.01,符合正態(tài)分布,屬于典型的數(shù)量性狀。

    表1 親本及RIL家系的穗長和旗葉長的統(tǒng)計分析

    2.2 遺傳圖譜的構(gòu)建

    利用小麥90K SNP芯片81 587個標(biāo)記對XY81和XN1376及其組配的RIL群體進(jìn)行多態(tài)性標(biāo)記篩選,共篩選出9 728個多態(tài)性標(biāo)記。對多態(tài)性標(biāo)記進(jìn)行篩選,設(shè)定偏分離P的閾值為 0.001,缺失率的閾值為20%,最終5 531個標(biāo)記被掛載到連鎖群上,連鎖群全長為3 172.49 cM,平均圖距0.57 cM,覆蓋小麥21條染色體,平均每個株系單條染色體的交換率為1.48次。

    遺傳圖譜的初步分析結(jié)果(表2)表明,90K SNP芯片的連鎖標(biāo)記數(shù)在小麥基因組A、B和D間分布不均衡,表現(xiàn)為A亞組的標(biāo)記數(shù)>B亞組的標(biāo)記數(shù)>D亞組的標(biāo)記數(shù);A亞組的連鎖群長度>B亞組的連鎖群長度>D亞組的連鎖群長度。

    表2 遺傳圖譜中 SNP 標(biāo)記在小麥染色體組中的分布

    2.3 穗長和旗葉長的QTL分析

    2.3.1 單環(huán)境QTL定位

    從表3、圖1可以看出,共檢測到3個控制穗長的QTL,分別分布在2B、2D和5D染色體上,表型變異的貢獻(xiàn)率為6.78%~22.51%,其中,Qsl.nwsuaf-2D和Qsl.nwsuaf-5D在多個環(huán)境中均能被檢測到,其平均表型變異解釋率分別為20.74%和12.33%,為主效QTL;Qsl.nwsuaf-2B僅在1個環(huán)境中被檢測到,其表型變異解釋率為6.78%,為微效QTL,這3個QTL位點(diǎn)的增效等位基因均來源于XY81。檢測到2個控制旗葉長的QTL,均分布在5A染色體上,表型變異貢獻(xiàn)率為8.30%~16.36%。其中,Qfll.nwsuaf-5A.1在多個環(huán)境下均能被檢測到,且其平均表型變異貢獻(xiàn)率大于10%,為主效QTL。Qfll.nwsuaf-5A.1的增效等位基因來源于XY81,而Qfll.nwsuaf-5A.2的增效等位基因則來源于XN1376。

    表3 穗長和旗葉長的定位信息

    圖1 穗長和旗葉長QTL在染色體上的分布

    2.3.2 環(huán)境互作QTL定位

    從表4、圖1可以看出,共檢測到3個控制穗長的QTL,分別為Qsl.nwsuaf-2D、Qsl.nwsuaf-4D和Qsl.nwsuaf-5D,分布在2D、4D和5D染色體上,表型變異解釋率分別為15.91%、4.89%和10.81%,環(huán)境互作解釋的表型變異PVE(AbyE)分別為0.53%,0.33%和0.54%。其中,Qsl.nwsuaf-2D和Qsl.nwsuaf-5D正向調(diào)控穗長,Qsl.nwsuaf-4D則負(fù)向調(diào)控穗長。共檢測到4個控制旗葉長的QTL,分別為Qfll.nwsuaf-4B、Qfll.nwsuaf-5A.1、Qfll.nwsuaf-5A.2和Qfll.nwsuaf-6A,分布在4B、5A和6A染色體上,表型變異解釋率分別為4.26%、14.03%、7.53%和7.07%,PVE(AbyE)分別為1.44%、1.69%、3.11%和0.23%。其中,Qfll.nwsuaf-4B和Qfll.nwsuaf-5A.1正向調(diào)控旗葉長,Qfll.nwsuaf-6A和Qfll.nwsuaf-5A.2負(fù)向調(diào)控旗葉 長度。

    表4 多環(huán)境下穗長和旗葉長的QTL定位信息

    2.3.3 定位結(jié)果綜合分析

    通過對單環(huán)境和環(huán)境互作QTL定位結(jié)果進(jìn)行比對,發(fā)現(xiàn)Qsl.nwsuaf-4D、Qfll.nwsuaf-4B和Qfll.nwsuaf-6A這3個QTL均未在單環(huán)境中檢測到,表明這些位點(diǎn)受環(huán)境影響較大;而Qsl.nwsuaf-2D、Qsl.nwsuaf-5D、Qfll.nwsuaf-5A.1和Qfll.nwsuaf-5A.2用兩種定位方法均能檢測到,其中,Qfll.nwsuaf-5A.2在單環(huán)境QTL定位結(jié)果中,僅在一個環(huán)境中檢測到,但在多環(huán)境QTL定位結(jié)果中,PVE(AbyE)占總表型變異解釋率的41.29%,說明該位點(diǎn)易受環(huán)境影響;Qsl.nwsuaf-5D僅在兩個環(huán)境中檢測到。綜合結(jié)果表明,Qsl.nwsuaf-2D和Qfll.nwsuaf-5A.1為環(huán)境鈍感QTL。

    3 討 論

    構(gòu)建高密度且分布范圍廣的遺傳圖譜是提高QTL定位準(zhǔn)確性的前提。由于SNP標(biāo)記具有分布均勻且數(shù)目眾多的優(yōu)異特性,因此,可用于構(gòu)建高密度且覆蓋所有染色體的連鎖圖譜,有利于將QTL定位到較小的區(qū)間內(nèi),極大的降低候選基因預(yù)測和基因克隆的難度,提高遺傳分析的精度和效率。小麥為異源六倍體,基因組構(gòu)成復(fù)雜,與其他作物相比,小麥SNP標(biāo)記的開發(fā)與利用起步較晚,基于SNP標(biāo)記的小麥群體遺傳分析相對較少。本研究利用小麥Illumina 90K基因芯片,共篩選出5 531個標(biāo)記,連鎖群全長為3 172.49 cM,平均圖距0.57 cM,構(gòu)建了覆蓋小麥21條染色體的高密度遺傳圖譜。但從染色體組的覆蓋度來看,D亞組的分子標(biāo)記少,連鎖群長度短,說明90K芯片對普通小麥D染色體組的覆蓋程度具有局限性[12]。從定位結(jié)果來看,定位的遺傳距離為1.0~6.5 cM,物理距離為2.915 Kb~65 Mb,相較于傳統(tǒng)分子標(biāo)記遺傳研究,定位區(qū)間進(jìn)一步縮小。

    本試驗利用西農(nóng)1376和小偃81構(gòu)建的RIL群體,基于完備復(fù)合區(qū)間模型(ICIM)對4種環(huán)境下的表型值采用單環(huán)境和多環(huán)境分別進(jìn)行QTL定位,結(jié)果表明,在單環(huán)境QTL分析中,共定位到3個控制穗長的QTL,其中包括一個多環(huán)境下穩(wěn)定表達(dá)的主效位點(diǎn)Qsl.nwsuaf-2D,該位點(diǎn)在基因組上的物理距離為20.770~22.449 Mb,此結(jié)果與Zhai等[17]定位結(jié)果一致,推測此位點(diǎn)和Rht8基因為同一個基因,而Chai等[14]則利用近等基因系材料證明此位點(diǎn)為控制株高和穗長的耦合位點(diǎn)。位于5D染色體上的主效位點(diǎn)Qsl.nwsuaf-5D,其變異解釋率為9.57%~14.94%,前人在5D染色體上尚未發(fā)現(xiàn)有控制穗長的QTL,推測可能為新的位點(diǎn)。位于2B染色體上的位點(diǎn)Qsl.nwsuaf-2B,參考基因組上位置為11.185~17.457 Mb,與Zhai等[12]定位到的Qsl.cau-2B.2相差11 Mb,推測可能為新的位點(diǎn),但是不排除是同一QTL的可能;共定位到2個控制旗葉長的QTL,其中5A染色體上控制旗葉長的主效位點(diǎn)Qfll.nwsuaf-5A.1參考基因組位置為547.415~549.801 Mb,與Hussain等[21]在干旱條件下定位到的位點(diǎn)在參考基因組上出現(xiàn)部分重疊,可能為同一位點(diǎn),此位點(diǎn)在干旱條件下能夠穩(wěn)定表達(dá);而在多環(huán)境QTL定位中共定位到7個QTL,其中,Qfll.nwsuaf-4B和Qfll.nwsuaf-5A.2的PVE(AbyE)占總表型變異解釋率的33.69%和 41.29%,受環(huán)境影響較大。

    綜上所述,結(jié)合單環(huán)境和多環(huán)境兩種定位方法,共定位到3個相同的QTL,其中Qsl.nwsuaf-2D和Qfll.nwsuaf-5A.1在兩種方法中的貢獻(xiàn)率均大于10%,屬于環(huán)境鈍感QTL,說明兩位點(diǎn)為多環(huán)境下穩(wěn)定表達(dá)的主效位點(diǎn),不易受環(huán)境影響。這兩個QTL為進(jìn)一步挖掘小麥穗長和旗葉長的遺傳機(jī)制奠定了基礎(chǔ),并為后續(xù)精細(xì)定位和標(biāo)記開發(fā)提供參考。

    猜你喜歡
    環(huán)境檢測
    “不等式”檢測題
    “一元一次不等式”檢測題
    “一元一次不等式組”檢測題
    長期鍛煉創(chuàng)造體內(nèi)抑癌環(huán)境
    一種用于自主學(xué)習(xí)的虛擬仿真環(huán)境
    “幾何圖形”檢測題
    “角”檢測題
    孕期遠(yuǎn)離容易致畸的環(huán)境
    不能改變環(huán)境,那就改變心境
    環(huán)境
    日韩大尺度精品在线看网址| 久久久久久国产a免费观看| 午夜福利18| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 欧美黑人欧美精品刺激| 天天添夜夜摸| 岛国在线免费视频观看| 国产精品亚洲av一区麻豆| 啦啦啦韩国在线观看视频| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 久久天堂一区二区三区四区| 欧美zozozo另类| 99久久国产精品久久久| 9191精品国产免费久久| 99国产极品粉嫩在线观看| 久久精品影院6| 亚洲黑人精品在线| 国产激情久久老熟女| 国产精品亚洲美女久久久| 日韩精品青青久久久久久| 亚洲av成人av| 麻豆国产av国片精品| 欧美大码av| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 久久人人精品亚洲av| 欧美性猛交黑人性爽| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 欧美在线黄色| 在线a可以看的网站| av国产免费在线观看| 极品教师在线免费播放| e午夜精品久久久久久久| 99国产精品99久久久久| av天堂在线播放| videosex国产| 久久久国产成人精品二区| 精品熟女少妇八av免费久了| 一级毛片高清免费大全| 精品人妻1区二区| 淫秽高清视频在线观看| 黄色片一级片一级黄色片| 国产激情欧美一区二区| 国产精品影院久久| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 两性夫妻黄色片| 欧美大码av| 中文亚洲av片在线观看爽| 久久99热这里只有精品18| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 一a级毛片在线观看| 中文字幕高清在线视频| 中文在线观看免费www的网站 | 亚洲国产中文字幕在线视频| 久久伊人香网站| 国产av麻豆久久久久久久| 亚洲一区中文字幕在线| 国产午夜福利久久久久久| 国产野战对白在线观看| 亚洲激情在线av| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 可以在线观看的亚洲视频| 精品午夜福利视频在线观看一区| 黑人欧美特级aaaaaa片| 欧美日韩国产亚洲二区| 日本黄色视频三级网站网址| 无遮挡黄片免费观看| 色噜噜av男人的天堂激情| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 欧美另类亚洲清纯唯美| 成人特级黄色片久久久久久久| 国产私拍福利视频在线观看| av福利片在线| 亚洲专区字幕在线| 在线永久观看黄色视频| 俺也久久电影网| 黄色a级毛片大全视频| 999精品在线视频| 哪里可以看免费的av片| 精品无人区乱码1区二区| 色综合婷婷激情| 男人舔奶头视频| 亚洲人成77777在线视频| 午夜老司机福利片| 国内精品一区二区在线观看| 18禁国产床啪视频网站| 舔av片在线| 欧美又色又爽又黄视频| 少妇熟女aⅴ在线视频| av免费在线观看网站| 国产高清视频在线播放一区| 国产私拍福利视频在线观看| cao死你这个sao货| 99久久精品国产亚洲精品| 欧美最黄视频在线播放免费| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 在线观看舔阴道视频| 欧美日韩精品网址| 12—13女人毛片做爰片一| 亚洲成人中文字幕在线播放| 一个人免费在线观看的高清视频| 一边摸一边抽搐一进一小说| 久久这里只有精品19| 色哟哟哟哟哟哟| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | www.www免费av| 久久伊人香网站| 亚洲一区中文字幕在线| 男女午夜视频在线观看| 99久久精品热视频| or卡值多少钱| 国产欧美日韩一区二区精品| 高清在线国产一区| 又黄又爽又免费观看的视频| 久久久久亚洲av毛片大全| 日韩欧美三级三区| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 欧美一级毛片孕妇| 黄色毛片三级朝国网站| 在线观看www视频免费| 国产一区二区在线观看日韩 | www国产在线视频色| 国产激情偷乱视频一区二区| 黄色 视频免费看| 精品乱码久久久久久99久播| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 亚洲av成人精品一区久久| 国产伦一二天堂av在线观看| 女同久久另类99精品国产91| 国产成人系列免费观看| 九色成人免费人妻av| 国模一区二区三区四区视频 | 午夜久久久久精精品| 欧美日本视频| 大型黄色视频在线免费观看| 美女黄网站色视频| 男女视频在线观看网站免费 | 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 久久99热这里只有精品18| 91成年电影在线观看| 黄频高清免费视频| 亚洲精品国产一区二区精华液| 久热爱精品视频在线9| 少妇被粗大的猛进出69影院| 99精品欧美一区二区三区四区| 亚洲av美国av| 哪里可以看免费的av片| 天堂√8在线中文| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 久久亚洲精品不卡| 九色成人免费人妻av| 久久久水蜜桃国产精品网| 亚洲成人国产一区在线观看| 在线视频色国产色| 精品电影一区二区在线| 久久精品91蜜桃| 97碰自拍视频| 亚洲熟女毛片儿| 亚洲国产高清在线一区二区三| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲精品美女久久av网站| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 黄片小视频在线播放| 99精品欧美一区二区三区四区| 99re在线观看精品视频| 久久国产乱子伦精品免费另类| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲av成人av| 一a级毛片在线观看| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产成人精品久久二区二区91| 久久九九热精品免费| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 99久久99久久久精品蜜桃| 久久午夜综合久久蜜桃| 亚洲成av人片在线播放无| 久久久久久久久中文| 激情在线观看视频在线高清| 91九色精品人成在线观看| 男女那种视频在线观看| 91老司机精品| 欧美国产日韩亚洲一区| 精品无人区乱码1区二区| 日韩高清综合在线| 国产成人影院久久av| 男人舔女人下体高潮全视频| 国产黄a三级三级三级人| 午夜影院日韩av| 老熟妇仑乱视频hdxx| 老熟妇仑乱视频hdxx| АⅤ资源中文在线天堂| 五月玫瑰六月丁香| 亚洲av熟女| 丝袜人妻中文字幕| 日韩av在线大香蕉| 国产高清有码在线观看视频 | 国产伦在线观看视频一区| 亚洲国产精品sss在线观看| 性色av乱码一区二区三区2| av片东京热男人的天堂| 丁香六月欧美| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 国产精品久久久av美女十八| 国产三级黄色录像| 男插女下体视频免费在线播放| 国产高清videossex| 国语自产精品视频在线第100页| 一a级毛片在线观看| 69av精品久久久久久| 91麻豆av在线| 不卡一级毛片| 人成视频在线观看免费观看| 麻豆一二三区av精品| 亚洲国产看品久久| 国产熟女午夜一区二区三区| 日本成人三级电影网站| 丝袜美腿诱惑在线| 国产精品久久电影中文字幕| 国产精品1区2区在线观看.| 久久 成人 亚洲| 精品久久久久久成人av| 日韩大尺度精品在线看网址| 午夜免费成人在线视频| 99久久无色码亚洲精品果冻| 成熟少妇高潮喷水视频| 国产精品一区二区精品视频观看| 国语自产精品视频在线第100页| 亚洲成人久久性| 一a级毛片在线观看| 亚洲人成77777在线视频| 国产亚洲av嫩草精品影院| 日本一二三区视频观看| 国产单亲对白刺激| 男女那种视频在线观看| 欧美乱色亚洲激情| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 这个男人来自地球电影免费观看| 窝窝影院91人妻| 欧美一区二区精品小视频在线| 在线观看免费视频日本深夜| 国产爱豆传媒在线观看 | 99久久无色码亚洲精品果冻| www.www免费av| 国产成人av教育| 亚洲人与动物交配视频| 人妻久久中文字幕网| 欧美最黄视频在线播放免费| 日韩欧美在线乱码| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 国产精品香港三级国产av潘金莲| or卡值多少钱| 两个人视频免费观看高清| 亚洲精华国产精华精| 99热6这里只有精品| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 国产精品亚洲美女久久久| 超碰成人久久| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 成人av一区二区三区在线看| 久久久久久久久久黄片| 亚洲男人天堂网一区| 欧美黑人巨大hd| 高清在线国产一区| 国产精品乱码一区二三区的特点| 久久国产乱子伦精品免费另类| videosex国产| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 亚洲自偷自拍图片 自拍| av在线播放免费不卡| 国产成人影院久久av| 免费在线观看日本一区| 色哟哟哟哟哟哟| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 夜夜夜夜夜久久久久| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 巨乳人妻的诱惑在线观看| av超薄肉色丝袜交足视频| 久久午夜综合久久蜜桃| 少妇被粗大的猛进出69影院| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 欧美又色又爽又黄视频| bbb黄色大片| 亚洲熟女毛片儿| 日韩av在线大香蕉| 欧美激情久久久久久爽电影| 51午夜福利影视在线观看| 国产av麻豆久久久久久久| 宅男免费午夜| 成人18禁在线播放| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 久久久久性生活片| 此物有八面人人有两片| 亚洲成av人片免费观看| 一边摸一边做爽爽视频免费| 午夜亚洲福利在线播放| 九色国产91popny在线| 亚洲真实伦在线观看| 高清毛片免费观看视频网站| 天堂av国产一区二区熟女人妻 | 国产亚洲欧美在线一区二区| 少妇的丰满在线观看| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 亚洲中文日韩欧美视频| 亚洲乱码一区二区免费版| 人成视频在线观看免费观看| 一进一出好大好爽视频| 欧美黑人巨大hd| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 无遮挡黄片免费观看| 可以在线观看的亚洲视频| 亚洲精品在线美女| 高清毛片免费观看视频网站| 熟女电影av网| 亚洲精品久久国产高清桃花| 国产精品98久久久久久宅男小说| 国产高清有码在线观看视频 | 久久久水蜜桃国产精品网| 亚洲一区高清亚洲精品| 一级黄色大片毛片| 欧美一区二区国产精品久久精品 | 99热这里只有是精品50| 国产野战对白在线观看| 亚洲黑人精品在线| 成人欧美大片| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 99久久无色码亚洲精品果冻| 久久久久久久久免费视频了| 午夜福利在线在线| 成人午夜高清在线视频| 一本精品99久久精品77| 国产三级中文精品| 日韩高清综合在线| 国产69精品久久久久777片 | 亚洲美女视频黄频| 国内精品久久久久久久电影| 久久国产精品影院| 国产精品av久久久久免费| 国产人伦9x9x在线观看| 男人舔女人的私密视频| 桃红色精品国产亚洲av| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 校园春色视频在线观看| 久久精品91蜜桃| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 91麻豆av在线| 成人av一区二区三区在线看| 免费人成视频x8x8入口观看| 脱女人内裤的视频| 国内揄拍国产精品人妻在线| 亚洲成人久久爱视频| 国产黄片美女视频| 淫秽高清视频在线观看| 亚洲成a人片在线一区二区| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 亚洲真实伦在线观看| 久久久久九九精品影院| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 午夜视频精品福利| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 国产在线精品亚洲第一网站| 国产野战对白在线观看| 一本久久中文字幕| 午夜日韩欧美国产| 国产一区二区在线观看日韩 | 正在播放国产对白刺激| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 国产私拍福利视频在线观看| 成人av在线播放网站| 韩国av一区二区三区四区| 免费在线观看完整版高清| 欧美色欧美亚洲另类二区| 手机成人av网站| av有码第一页| 男女视频在线观看网站免费 | 身体一侧抽搐| 一二三四社区在线视频社区8| 麻豆成人午夜福利视频| 又黄又爽又免费观看的视频| 日韩欧美三级三区| 最新在线观看一区二区三区| 久热爱精品视频在线9| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 精品久久蜜臀av无| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 亚洲av熟女| 一区二区三区国产精品乱码| 久久精品国产清高在天天线| www国产在线视频色| 成人av一区二区三区在线看| 欧美zozozo另类| 中文字幕高清在线视频| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 国产真实乱freesex| 亚洲av五月六月丁香网| 久久久水蜜桃国产精品网| √禁漫天堂资源中文www| www.自偷自拍.com| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 午夜影院日韩av| 精品欧美一区二区三区在线| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 黄色丝袜av网址大全| 亚洲成人国产一区在线观看| 看免费av毛片| 舔av片在线| 国产免费男女视频| 夜夜爽天天搞| 亚洲成人免费电影在线观看| av福利片在线| 久久人人精品亚洲av| 两人在一起打扑克的视频| 12—13女人毛片做爰片一| 久久久久九九精品影院| 国产精品乱码一区二三区的特点| 国产黄a三级三级三级人| 亚洲欧美精品综合久久99| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 嫁个100分男人电影在线观看| 少妇熟女aⅴ在线视频| 久久久久久大精品| 91老司机精品| 两个人免费观看高清视频| 亚洲一区高清亚洲精品| 又粗又爽又猛毛片免费看| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 亚洲自拍偷在线| 婷婷丁香在线五月| 国产私拍福利视频在线观看| 可以在线观看毛片的网站| videosex国产| 国产成人av激情在线播放| 国产精品av视频在线免费观看| 亚洲人与动物交配视频| 日本成人三级电影网站| 国产黄色小视频在线观看| 人人妻人人看人人澡| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 亚洲人成网站高清观看| 天堂动漫精品| 国产人伦9x9x在线观看| 国产亚洲精品第一综合不卡| 女警被强在线播放| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 国产爱豆传媒在线观看 | 国产精品免费视频内射| 母亲3免费完整高清在线观看| 亚洲最大成人中文| 久久精品国产亚洲av高清一级| 久久久久免费精品人妻一区二区| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 免费电影在线观看免费观看| svipshipincom国产片| 黄色女人牲交| www.熟女人妻精品国产| 午夜a级毛片| 亚洲男人的天堂狠狠| 欧美在线黄色| 99久久国产精品久久久| 国产一区二区三区视频了| 禁无遮挡网站| 国产99白浆流出| 久久久久九九精品影院| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 欧美激情久久久久久爽电影| 大型av网站在线播放| 国产免费男女视频| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 在线观看舔阴道视频| 淫秽高清视频在线观看| 久久精品国产综合久久久| 国产精品av久久久久免费| 欧美乱色亚洲激情| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 性色av乱码一区二区三区2| 日韩国内少妇激情av| 久久久久久久午夜电影| 亚洲成av人片在线播放无| 99国产综合亚洲精品| 91在线观看av| 欧美性猛交黑人性爽| 黄色a级毛片大全视频| 美女黄网站色视频| 两个人看的免费小视频| 国产成年人精品一区二区| 国产探花在线观看一区二区| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 国产v大片淫在线免费观看| 美女大奶头视频| 成人三级做爰电影| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 无遮挡黄片免费观看| 又爽又黄无遮挡网站| 国产真人三级小视频在线观看| 亚洲免费av在线视频| 神马国产精品三级电影在线观看 | 2021天堂中文幕一二区在线观| 制服诱惑二区| 日本黄色视频三级网站网址| 夜夜爽天天搞| 国语自产精品视频在线第100页| 亚洲黑人精品在线| 99国产精品一区二区三区| 成人午夜高清在线视频| 国产精品一区二区精品视频观看| 午夜免费激情av| 一进一出抽搐gif免费好疼| 女警被强在线播放| 国产亚洲精品第一综合不卡| 色综合欧美亚洲国产小说| 久久这里只有精品中国| 欧美国产日韩亚洲一区| 国产私拍福利视频在线观看| 一级毛片女人18水好多| av有码第一页| 色综合婷婷激情| 精品国产乱码久久久久久男人| 亚洲国产精品合色在线| av视频在线观看入口| 欧美性长视频在线观看| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 亚洲国产高清在线一区二区三| 麻豆国产av国片精品| 久久久久亚洲av毛片大全| 女警被强在线播放| 99国产极品粉嫩在线观看| 欧美色欧美亚洲另类二区| 亚洲自拍偷在线| 成人亚洲精品av一区二区| 香蕉av资源在线| xxx96com| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 免费在线观看日本一区| 亚洲激情在线av| 国产高清videossex| 国产精品久久久久久精品电影| 最近最新中文字幕大全电影3| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 久久久精品大字幕| 久久久久久久午夜电影| 免费观看精品视频网站| 亚洲成人国产一区在线观看| 观看免费一级毛片| 久久香蕉国产精品| 欧美日本视频| 国产黄色小视频在线观看| 精品福利观看| 国产精华一区二区三区| 国产黄片美女视频| 国产欧美日韩一区二区精品| 黄色 视频免费看| 欧美日韩一级在线毛片| 亚洲欧美日韩无卡精品| 精品一区二区三区四区五区乱码| 久久久国产欧美日韩av| 成人18禁在线播放| 精品乱码久久久久久99久播| 亚洲在线自拍视频| 国产亚洲欧美在线一区二区| 91九色精品人成在线观看| 欧美日韩乱码在线| 岛国在线观看网站| 久久精品91无色码中文字幕| 三级国产精品欧美在线观看 | 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 一进一出抽搐gif免费好疼| 给我免费播放毛片高清在线观看| 日韩免费av在线播放| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 草草在线视频免费看| 黄色丝袜av网址大全| 床上黄色一级片| 国产成人精品久久二区二区免费| 露出奶头的视频| 国产伦在线观看视频一区| av视频在线观看入口| 又黄又爽又免费观看的视频| 男插女下体视频免费在线播放| 国产三级中文精品| 国产区一区二久久| 亚洲精品一区av在线观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 亚洲avbb在线观看| 久久中文看片网| 国产成人av激情在线播放| 五月玫瑰六月丁香| 精品国产乱子伦一区二区三区| 久久久久久大精品| 亚洲一区中文字幕在线| 日日干狠狠操夜夜爽| 欧美三级亚洲精品| 真人一进一出gif抽搐免费| 亚洲精品在线美女| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 999久久久国产精品视频| xxxwww97欧美| 少妇被粗大的猛进出69影院| 精品国产乱子伦一区二区三区| 90打野战视频偷拍视频| 不卡av一区二区三区| 中国美女看黄片| 国产精品综合久久久久久久免费| 午夜激情福利司机影院| 欧美av亚洲av综合av国产av| 亚洲国产精品久久男人天堂| 日本精品一区二区三区蜜桃| 人人妻人人看人人澡| 男女之事视频高清在线观看|