梔子炭的涼血止血作用的炮制機制研究進展

劉興朵

梔子是茜草科植物梔子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果實，功效為瀉火除煩、清熱利濕、涼血解毒，炒炭后入血分，寒性減弱，會產(chǎn)生止血作用，臨床上多用來治療吐血、咳血等多種出血癥。中藥炒炭技術是最具特色、最常用的中藥飲片炮制方法，根據(jù)中藥“炒炭存性”炮制理論，梔子炒炭要求“存性”，即需要保存中藥“本來之真性”，又具有止血等炮制作用[1]，“炒炭存性”是確保梔子臨床治療效果的核心技術，炒炭前后梔子物質(zhì)基礎的質(zhì)變與量變以及由此產(chǎn)生的藥效學變化是梔子“炒炭存性”的核心內(nèi)容，因此，有必要使用現(xiàn)代技術對梔子炒炭前后的物質(zhì)基礎變化與藥理作用變化進行深入研究，闡明梔子炒炭炮制機制，為梔子炭的合理用藥提供科學的依據(jù)。

1 梔子炭的涼血止血作用的物質(zhì)基礎研究進展

1.1 梔子炒炭前后的化學成分研究概況 目前，對梔子的化學成分的研究主要集中在梔子藥材，而對梔子炮制品的化學成分研究不多。梔子藥材含有多種化學成分，有環(huán)烯醚萜類成分、黃酮類成分、二萜以及三萜類成分、有機酸類成分、揮發(fā)油成分、多糖類成分等[2]，環(huán)烯醚萜類成分是梔子中含量最高的特征類成分，CHEN QC等[3]從梔子中分離得到了京尼平苷類8個環(huán)烯醚萜類成分；梔子中所含的有機酸類成分主要為綠原酸、異綠原酸B、奎寧酸類化合物等，Kmi HJ等[4]從梔子中分離得到了1個香草酸苷和5個奎寧酸。梔子炒炭后，梔子苷成分、熊果酸成分以及多糖類成分含量顯著減少，鞣質(zhì)類成分顯著增加，這可能是梔子炭止血與緩和藥性的藥理作用的物質(zhì)基礎。趙淑杰等[5]借助于HPLC法對梔子及其幾種炮制品種中梔子苷的含量進行測量，發(fā)現(xiàn)梔子炒炭后梔子苷含量明顯下降。而鞣質(zhì)類成分隨著炮制溫度的增加而含量增加，丁安偉等[6]研究發(fā)現(xiàn)，梔子炒炭后，鞣制含量逐漸增高，鞣質(zhì)類成分是炒炭止血作用的主要物質(zhì)基礎。還有研究指出，梔子炒炭后熊果酸類成分顯著下降；還有研究指出梔子炭的多糖類成分明顯降低。梔子炒炭時只能部分炭化，沒有炭化的部分仍然保留了梔子的本來性味特點，一是，梔子炒炭后，作為止血作用的物質(zhì)基礎，鞣質(zhì)類成分的含量增多；二是，由于梔子的瀉下作用的物質(zhì)基礎成分為梔子苷、梔子苷酸等，炒炭后這些成分的含量減少，能夠緩和梔子藥材的瀉下作用；三是，梔子炒炭能夠保留梔子生品的部分藥效功能。

1.2 梔子炒炭前后HPLC指紋圖譜研究進展 有研究[7]對梔子生品、炭品進行了HPLC指紋圖譜研究，建立了梔子生品、梔子炭這兩種飲片在2個檢測波長(238 nm、440 nm)下的HPLC指紋圖譜分析方法，結果發(fā)現(xiàn)，在238 nm下，梔子生品與炒炭品的HPLC指紋圖譜的差異不明顯，但是梔子炭的色譜峰面積相對較低；在440 nm檢測波長下，梔子炭的HPLC指紋圖譜變化較大，僅僅能夠檢測出比較少量的色譜峰，且由于炒炭炮制工藝不一致，不同廠家的梔子炭炮制品的HPLC指紋圖譜的差異較大。該研究以對照品對238 nm以及440 nm下梔子生品與梔子炭的HPLC指紋圖譜中的一些特征色譜峰進行了指認，進一步闡明了梔子炭的化學成分組成。姚藍等[8]使用HPLC-ESI-MS的方法，參考正負離子模式、主要碎片峰以及紫外吸收特征等結構信息，對梔子生品、梔子炭的主要成分進行鑒定與歸屬研究，為闡明梔子炭的化學成分的變化規(guī)律提供充分的科學依據(jù)。

1.3 梔子炒炭前后主要成分變化比較研究 有研究發(fā)現(xiàn)[9]，梔子炒炭后，40%的環(huán)烯醚萜類成分被破壞，與梔子生品相比，剩余成分保留而發(fā)揮梔子炭的藥理作用，而梔子生品與梔子炭的相對比值能夠直觀反應梔子炒炭前后環(huán)烯醚萜類的變化趨勢，但是各類成分的變化趨勢不一致。在梔子炒炭前后的二萜類色素的含量比較上，隨著梔子炮制炒炭溫度的升高，二萜類色素成分的含量呈明顯下降趨勢。綜上所述，梔子炭的環(huán)烯醚萜類成分的含量下降約50%，二萜類色素成分的含量下降約95%，證明梔子炭“炒炭存性”發(fā)揮止血的藥理作用與這兩類成分的含量變化密切相關。

1.4 梔子炒炭前后揮發(fā)油變化分析 有研究[10]基于GC-MS方法，梔子生品、梔子炭的圖譜有顯著差異，梔子生品圖譜的色譜峰強度、色譜峰數(shù)目均多與梔子炭，可以說明梔子炭的揮發(fā)性成分與含量均發(fā)生了顯著變化。通過對比梔子生品、梔子炭共有的10個化學成分中，梔子炭中有三個成分的質(zhì)量分數(shù)增高，其他七個成分的質(zhì)量分數(shù)均降低。與梔子生品相比，梔子炭的揮發(fā)油類成分在化學組成與含量變化方面均發(fā)生了明顯變化，這可能是梔子炭涼血止血變化的物質(zhì)基礎。

2 梔子炭涼血止血作用的炮制機制分析

筆者通過總結之前對梔子炭止血作用的機制進行研究與分析時，發(fā)現(xiàn)多選擇正常動物實驗方法或者體外實驗法，但是過去的研究模式忽略了梔子炭是在中醫(yī)理論指導下進行臨床應用的，故有研究者[11]基于中醫(yī)臨床辨證特點的血熱出血模型對梔子炭止血作用機制進行研究。該研究分別制備梔子生品、梔子炭兩種灌胃藥液，取40只SD大鼠，隨機分為空白組、模型組、陽性藥組、梔子生品組、梔子炭組，每組均為8只，陽性藥組為云南白藥組，制備血熱出血模型，這一模型是在血熱的基礎上，通過化學誘導致使大鼠出血，最終制備出中醫(yī)血熱出血的癥候模型，模型大鼠的體溫較高，全血黏度均明顯增加。該研究得出，與模型組相比，云南白藥組不能起到調(diào)節(jié)體溫的藥理作用；與模型組對比，梔子生品組能夠顯著降低大鼠的肛門溫度；但是梔子炭組只能在4 h內(nèi)明顯降低大鼠的肛門溫度，4 h后，梔子炭組對于大鼠肛溫的調(diào)節(jié)作用不夠明顯。在測定血液凝血功能相關指標上，該研究選擇PT、APTT以及TT這三個指標反映凝血功能，PT反映外源性凝血系統(tǒng)的功能，APTT反映內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的功能，TT反映內(nèi)、外源共同性凝血系統(tǒng)的功能，F(xiàn)IB則是通過影響纖溶系統(tǒng)來反映凝血效果，結果得出，與模型組相比，梔子炭組可以明顯縮短TT、APTT以及PT，顯著降低FIB的水平，故可以得出，梔子炭止血作用機制可能是通過影響內(nèi)源性、外源性凝血以及纖維蛋白原的含量[12]。

3 小結

通過分析梔子炮制前后化學成分的變化情況，發(fā)現(xiàn)梔子生品的梔子苷、梔子苷酸等的含量顯著下降，這些成分是梔子瀉下作用的物質(zhì)基礎，而止血作用的物質(zhì)基礎鞣質(zhì)類成分的含量明顯增加[13]。通過結合正常動物實驗以及血熱出血模型實驗，筆者得出，梔子炭的涼血止血的炮制作用機制可能是：①梔子苷類成分具有抗炎、抗凝血作用，能夠緩解由炎癥引發(fā)的發(fā)熱癥狀，改善血液的流動性，但是這類成分在炒炭后，有一部分的成分得到保留，故一定程度上起到了涼血的作用[14]。②鞣質(zhì)類成分具有止血作用，與梔子生品比較，梔子炭的鞣質(zhì)類成分含量增高，使梔子炭產(chǎn)生止血作用[15]。筆者通過對梔子炭的涼血止血作用的炮制機制研究進展進行總結得出，梔子炭如何在人體內(nèi)發(fā)揮涼血止血作用，這些研究亟待研究者進一步深入研究。