意大利蜜蜂（Apis mellifera ligustica）蜂王漿分泌相關(guān)研究進(jìn)展

高 艷，朱雅楠，蘇松坤，聶紅毅

（福建農(nóng)林大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院[蜂學(xué)學(xué)院]，福建 福州350002）

蜜蜂具有明顯的級(jí)型分化和復(fù)雜的社會(huì)分工，是適合研究社會(huì)行為進(jìn)化的模式生物。蜂群成員間的勞動(dòng)分工具有極強(qiáng)的可塑性，對(duì)于維持群勢(shì)，適應(yīng)環(huán)境變化等有著不可取代的作用[1-2]。工蜂勞動(dòng)分工分化的哺育蜂和采集蜂不僅在群體繁衍發(fā)展方面發(fā)揮重要作用，更為人類帶來巨大的經(jīng)濟(jì)效益。盡管蜜蜂在農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)和生態(tài)系統(tǒng)服務(wù)中起著至關(guān)重要的作用，但直到20世紀(jì)初才開始在分子和生化水平上研究蜜蜂生物學(xué)[3]。哺育蜂分泌出的蜂王漿不僅對(duì)蜂群的發(fā)展至關(guān)重要，對(duì)于協(xié)調(diào)人體內(nèi)各項(xiàng)機(jī)能的健康發(fā)展也起到不可或缺的作用。蜂王漿是僅次于蜂蜜的主要蜂產(chǎn)品，蜂王漿的生理生化、藥理療效功能已在國(guó)內(nèi)外得到廣泛的研究，同時(shí)蜂王漿產(chǎn)業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)效益。經(jīng)過多年的發(fā)展，從普通意大利蜜蜂中培育的“浙農(nóng)大1號(hào)”意蜂的王漿產(chǎn)量高出普通意蜂的10倍以上，極大地提高了我國(guó)蜂王漿的產(chǎn)量，使我國(guó)成為世界上蜂王漿生產(chǎn)和輸出的第一大國(guó)，也極大地促進(jìn)了我國(guó)蜂業(yè)經(jīng)濟(jì)的高速發(fā)展。因此，探究蜂王漿形成的生物學(xué)機(jī)制對(duì)后期培育出更加優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的蜂王漿品種（蜂種）有著重要的理論意義。本文對(duì)西方蜜蜂咽下腺、上顎腺、腦的形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理功能以及現(xiàn)階段分子水平等已有研究報(bào)道進(jìn)行綜述，以期為深入研究蜂王漿的分泌機(jī)制和培養(yǎng)蜂王漿優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的蜂種提供理論參考。

1 咽下腺

1.1 咽下腺的形態(tài)結(jié)構(gòu)

蜂王漿主要由哺育蜂咽下腺和上顎腺分泌，其中咽下腺是分泌王漿的主要器官[4-5]。咽下腺位于工蜂頭內(nèi)部，呈葡萄串狀纏繞在頭部?jī)蓚?cè)，其生理功能會(huì)隨著工蜂在蜂群內(nèi)職務(wù)的改變而變化。目前，咽下腺發(fā)育的形態(tài)研究主要是借助顯微鏡及各類染色技術(shù)觀察不同日齡條件下咽下腺腺泡的體積或面積。此外，超顯微結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)咽下腺的發(fā)育不僅與工蜂的日齡和行為相關(guān)，也受其他因素的影響，如蜜蜂的種系、蜂群條件、季節(jié)氣候等[6]。咽下腺發(fā)育所需的蛋白主要來源于蜂群中花粉的供應(yīng)[7]。

咽下腺在哺育蜂時(shí)期腺泡體積達(dá)到最大、內(nèi)容物最充實(shí)，是觀察腺泡形態(tài)的最佳時(shí)期[8]。在自然蜂群中，10日齡左右的哺育蜂咽下腺腺泡中大部分充滿發(fā)育好的層狀粗內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，21日齡左右的采集蜂后粗內(nèi)質(zhì)網(wǎng)減少[9]。通過體視顯微觀察，發(fā)現(xiàn)漿蜂（一種從意大利蜜蜂品種中篩選出的高產(chǎn)蜂王漿蜂種）較普通意大利蜜蜂（以下簡(jiǎn)稱意蜂）的咽下腺腺泡發(fā)育早、內(nèi)容物增多，呈乳白色，分泌蜂王漿時(shí)間長(zhǎng)[10]。共聚焦顯微觀察咽下腺由數(shù)千個(gè)雙細(xì)胞單元組成，這些雙細(xì)胞單元由分泌細(xì)胞和導(dǎo)管細(xì)胞組成，并且這些雙細(xì)胞單元圍繞長(zhǎng)的收集管以約每12個(gè)1組排列而成[11]。Klose等人通過DAPI和鬼筆環(huán)肽染料對(duì)蛹期和剛出房意大利工蜂的咽下腺進(jìn)行染色，發(fā)現(xiàn)咽下腺是由假?gòu)?fù)層上皮排列的球囊發(fā)育成為成年工蜂的復(fù)雜器官[11]。通過考馬斯亮藍(lán)對(duì)不同發(fā)育日齡的咽下腺染色，普通光學(xué)顯微鏡下觀察染色后的咽下腺，發(fā)現(xiàn)9日齡工蜂（哺育蜂階段）的咽下腺的體積達(dá)到最大[6]。掃描電鏡觀察發(fā)現(xiàn)漿蜂咽下腺大小顯著高于意蜂，特別是在15日齡[12]。相比于意蜂，漿蜂咽下腺的腺泡體積增大，線粒體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)面積變大，核仁數(shù)目增多，分泌周期長(zhǎng)[9,10,13]。

比較漿蜂和意蜂的形態(tài)學(xué)，可以發(fā)現(xiàn)哺育蜂階段漿蜂咽下腺分泌活性的增強(qiáng)，這也為進(jìn)一步豐富工蜂咽下腺的形態(tài)學(xué)以及掌握咽下腺形態(tài)發(fā)育與蜂王漿分泌能力提供理論參考。

1.2 咽下腺的生理功能相關(guān)研究進(jìn)展

咽下腺的發(fā)育周期與勞動(dòng)分工密切相關(guān)，但并不受日齡的限制，為適應(yīng)蜂群的需要，咽下腺在大小和形態(tài)上也有很大的變化[14,16]。咽下腺在哺育蜂中主要負(fù)責(zé)分泌蜂王漿，而在采集蜂中主要職責(zé)轉(zhuǎn)變?yōu)榉置谙纸饷傅萚17-18]。哺育蜂階段，咽下腺發(fā)育飽滿并合成王漿主蛋白（Major Royal Jelly Proteins,MRJPs），而在采集蜂階段，它們會(huì)萎縮并合成將花蜜加工成蜂蜜的碳水化合物代謝酶[19-20]。蛋白質(zhì)是蜂王漿的主要成分，超過80%的蜂王漿蛋白由MRJPs組成[21]；MRJPs一般是含鐵量最多的蛋白，一定量的鐵可以提高蜂王漿的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值[22]。此外，哺育階段的哺育行為會(huì)刺激咽下腺分泌相關(guān)蛋白[16,23]。

隨著組學(xué)技術(shù)的發(fā)展，基于日齡依賴性的工蜂咽下腺發(fā)育階段的轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組的研究大量涌現(xiàn)。轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析不同發(fā)育階段意蜂咽下腺的差異基因，結(jié)果顯示大量上調(diào)差異基因參與核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的蛋白質(zhì)加工、蛋白質(zhì)輸出等通路[24]；蛋白質(zhì)組學(xué)分析意蜂咽下腺不同發(fā)育階段的蛋白質(zhì)，其中包括MRJPs、細(xì)胞骨架、抗氧化劑活性、發(fā)育調(diào)節(jié)以及碳水化合物、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)代謝相關(guān)的蛋白質(zhì)[25]；意蜂和漿蜂蛋白質(zhì)組學(xué)的全面表征和比較發(fā)現(xiàn)：漿蜂哺育蜂階段咽下腺中的大量上調(diào)蛋白參與能量代謝、蛋白質(zhì)生物合成、氨基酸代謝、細(xì)胞骨架和抗氧化。這些上調(diào)蛋白質(zhì)參與的生化功能不僅促進(jìn)咽下腺的發(fā)育而且也激發(fā)其分泌大量蜂王漿的能力[12,16]。

MRJPs屬于Yellow蛋白質(zhì)家族成員，由一系列的家族基因編碼，包括MRJP1～9[26]。具有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值功能的MRJP1～3和MRJP5占蜂王漿蛋白總量的82%～90%，其中MRJP1是MRJPs家族成員中含量最豐富的一種，由單體和低聚形式組成，該低聚物的分子量介于350～420 kDa之間，可分為55～5 kDa的單元。MRJP2，MRJP3，MRJP4和MRJP5是 介 于49～80 kDa之間的糖蛋白[27-28]。工蜂咽下腺組織中的MRJP1～5和MRJP7的基因表達(dá)量和蛋白質(zhì)含量呈日齡依賴性，并且在哺育蜂階段其表達(dá)量增加而在采集蜂階段減少。但MRJP6的表達(dá)譜相對(duì)其他MRJPs有很大差異，其在采集蜂階段的咽下腺中表達(dá)量高于哺育蜂階段[29]。另外一些基因，包括Apis mellifera buffy(Ambuffy)、Apis mellifera gustatory receptor 10(Am-GR10)、Major royal jelly protein 2(Mrjp2)在哺育蜂咽下腺中的表達(dá)量高于采集蜂，暗示它們?cè)诿鄯涞牟赣袨橹衅鹬A(chǔ)性作用[30-31]。此外，哺育蜂咽下腺的生理狀態(tài)也受到蛻皮激素和幼蟲信息素相關(guān)信號(hào)傳導(dǎo)的協(xié)同調(diào)控[30]。

2 上顎腺

2.1 上顎腺的形態(tài)結(jié)構(gòu)

工蜂上顎腺由分泌部和儲(chǔ)液囊二部分結(jié)構(gòu)組成，分泌部的分泌細(xì)胞中布滿儲(chǔ)存池，這與工蜂的分泌功能有關(guān)[32-34]。研究顯示：意蜂工蜂的上顎腺形態(tài)從羽化出房到采集過程中呈無規(guī)律變化，體積不隨日齡增長(zhǎng)發(fā)生明顯的變化，在出房時(shí)上顎腺發(fā)育已基本完成[35]。

2.2 上顎腺的生理功能以及研究進(jìn)展

工蜂上顎腺主要合成和分泌脂肪酸（蜂王漿主要成分之一）以及蜂群報(bào)警激素相關(guān)的2-庚酮等信息素[36]，工蜂上顎腺分泌脂肪酸的主要功能用于幼蟲食物營(yíng)養(yǎng)[37]。上顎腺的組成和分泌量不僅取決于蜜蜂的級(jí)型，而且還取決于工蜂的日齡[38]。蜂王漿的成分主要由水、蛋白質(zhì)、糖類、磷脂類、脂質(zhì)、礦物質(zhì)和維生素等組成，其中脂質(zhì)主要由中鏈脂肪酸組成。脂質(zhì)中的主要成分10-羥基-2-癸烯酸（10-hydroxy-2(E)-decenoic acid,10-HDA）是蜂王漿所特有的成分，也是評(píng)價(jià)蜂王漿質(zhì)量的重要參考標(biāo)準(zhǔn)[28]。蜂王漿已被證明具有廣泛的藥理作用，包括抗氧化活性、抗炎癥活性、免疫調(diào)節(jié)活性等[28]，蜂王漿的抗菌作用也是其重要生理功能之一，與蜂王漿含有的10-HDA有關(guān)。此外，對(duì)哺育蜂腦、上顎腺、咽下腺轉(zhuǎn)錄組測(cè)序發(fā)現(xiàn)抗菌肽基因在咽下腺中的表達(dá)量顯著高于腦部和上顎腺組織，暗示蜂王漿的抗菌作用還與蜂王漿中豐富的抗菌多肽有關(guān)[39]。同時(shí)，文獻(xiàn)報(bào)道：上顎腺還分泌糖類，其中包括D-葡萄糖、果糖和蔗糖[40]。

工蜂上顎腺主要合成10-HDA、10-羥基癸烯酸（10-hydroxy-decanoic acid，10-HDAA）等ω位功能化脂肪酸，但也合成少量的9-HDA等ω-1位功能化脂肪酸[37,41,42]。哺育蜂上顎腺合成10-HDA和10-HDAA的量一般高于采集蜂[43]，并且蜂王漿成分中的ω-羥基酸（10-HDA、10-HDAA）及其相應(yīng)的二酸是由哺育蜂上顎腺分泌的[44]，這些酸是蜂王漿中的主要脂質(zhì)成分[38]。

工蜂上顎腺分泌物合成的生化途徑報(bào)道較多，一般認(rèn)為，硬脂酸是上顎腺合成分泌物的最適合前體[45]。硬脂酸經(jīng)過ω-羥基化得到ω-羥化硬脂酸，ω-羥化硬脂酸經(jīng)過一系列β-氧化和功能化修飾得到主要分泌物10-HDA[46]。脂肪酸的合成均經(jīng)過羥基化、β氧化和功能集團(tuán)修飾。Plettner等[37]認(rèn)為羥基脂肪酸的β-氧化過程中可能有不同種類的酶催化不同長(zhǎng)度的脂肪酸，其中細(xì)胞色素P450是負(fù)責(zé)催化末端羥基化的關(guān)鍵蛋白[47]。此外，細(xì)胞色素P450與昆蟲體內(nèi)保幼激素、蛻皮激素的合成密切相關(guān)[47]。

工蜂上顎腺分泌物的相關(guān)研究多見于借助GC-MS、HPLC技術(shù)定量檢測(cè)工蜂上顎腺內(nèi)的10-HDA含量，如：GC-MS對(duì)黑小蜜蜂（Apis andreniformis Smith）、小 蜜 蜂（Apis florea Fabricius）、大蜜蜂（Apisdorsata Fabricius）、東方蜜蜂（Apis cerana Fabricius）、西方蜜蜂（Apis mellifera L.）5種蜂的工蜂上顎腺內(nèi)容物進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明：10-HDA在大蜜蜂和西方蜜蜂工蜂上顎腺中含量較高[41]；利用HPLC對(duì)0～30日齡意蜂工蜂頭部的10-HDA進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)工蜂上顎腺中10-HDA含量隨日齡總體呈逐漸上升的趨勢(shì)，在10～20日齡間保持平衡，30日齡含量達(dá)到最高，推測(cè)10～20日齡工蜂可能參與哺育行為，上顎腺分泌物有一部分已分泌進(jìn)入蜂王漿中，而25、30日齡處于采集階段，因此，10-HDA含量處于較高值[48]。

借助不斷發(fā)展的組學(xué)技術(shù)，有關(guān)上顎腺參與蜂王漿分泌過程合成主要脂肪酸物質(zhì)的生化過程在轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組方面的研究也取得了一定的進(jìn)展。轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析意大利蜜蜂上顎腺分泌物合成途徑，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞色素P450（CYP450）家族基因參與脂肪酸β-氧化和ω-氧化，其中CYP6AS8是工蜂中CYP450家族基因中表達(dá)量最高的基因，這一結(jié)果有助于闡明脂肪酸衍生的信息素生物合成的分子基礎(chǔ)[49]。

李建科團(tuán)隊(duì)利用蛋白質(zhì)組對(duì)日齡依賴性的意蜂和漿蜂上顎腺進(jìn)行比較，結(jié)果顯示剛出房工蜂中，蛋白質(zhì)組形成于上顎腺發(fā)育的起始階段。在哺育蜂階段，它在脂質(zhì)合成中驅(qū)動(dòng)高分泌活性；在采集蜂階段，它通過誘導(dǎo)脂質(zhì)代謝和小分子等活動(dòng)，合成特殊氣味物質(zhì)以提高采集效率。特別在哺育蜂階段，特異性和高度豐富的蛋白主要富集于與物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)和脂質(zhì)合成相關(guān)的通路，這表明上顎腺優(yōu)先啟動(dòng)脂質(zhì)合成中的高分泌活性以作為提供幼蟲營(yíng)養(yǎng)方面的來源，正是通過這個(gè)過程，哺育蜂上顎腺通過激活脂質(zhì)合成維持所需的脂肪酸來源（蜂王漿的主要成分）并最大限度地降低脂質(zhì)降解以增加10-HDA合成，從而有助于提高蜂王漿的產(chǎn)量[38]。

3 腦

3.1 腦的形態(tài)結(jié)構(gòu)

蜜蜂的大腦由幾丁質(zhì)外殼包圍，打開蜜蜂頭部正面幾丁質(zhì)后，整個(gè)腦隱藏于咽下腺、頭唾腺以及眼部色素下面[50]。大腦體積不足1 mm3，重量不足1 mg，神經(jīng)元不足1萬個(gè)，擁有的神經(jīng)細(xì)胞不足100萬個(gè)，但大腦有著一般模式昆蟲所不具備的認(rèn)知能力[51-53]。

3.2 腦的生理功能以及研究進(jìn)展

蜜蜂的大腦幾乎能夠調(diào)控它所有的行為，如，學(xué)習(xí)記憶行為、哺育行為、采集行為、跳舞行為等。蜜蜂表現(xiàn)出的各種行為響應(yīng)由腦部相對(duì)簡(jiǎn)單的神經(jīng)系統(tǒng)所調(diào)控，其中包括從哺育行為到采集行為的生命過渡過程，如分泌蜂王漿哺育幼蟲、采集、識(shí)別顏色和嗅覺線索、舞蹈交流、群體防御等[54-56]。

蜂王漿的分泌由哺育蜂哺育行為所介導(dǎo)，這一哺育行為已被人工用于生產(chǎn)蜂王漿供人類食用，由哺育行為介導(dǎo)的蜂王漿分泌過程離不開哺育蜂腦部復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)機(jī)制的調(diào)控。一般認(rèn)為，蜂王漿由適齡工蜂的咽下腺、上顎腺共同分泌[57-58]，而哺育行為介導(dǎo)的王漿分泌過程離不開中心器官——大腦的調(diào)控。腦部中樞神經(jīng)系統(tǒng)通過調(diào)控咽下腺和上顎腺相關(guān)基因的表達(dá)，促進(jìn)這些腺體的發(fā)育并且增強(qiáng)它們分泌蜂王漿的功能[59]。

基于日齡依賴性工蜂在從巢內(nèi)工作向巢外采集的轉(zhuǎn)變過程[60-62]與大腦的結(jié)構(gòu)、基因表達(dá)和蛋白質(zhì)合成的變化相關(guān)[63]，同時(shí)也與激素和神經(jīng)化學(xué)物質(zhì)的生理過程以及成千上萬基因的表達(dá)變化相關(guān)[31]，例如其在功能和形態(tài)方面的轉(zhuǎn)變會(huì)受保幼激素的控制[64]。

現(xiàn)大多研究主要集中從組學(xué)技術(shù)方面探討腦部調(diào)控行為的分子機(jī)制。轉(zhuǎn)錄組學(xué)方面分析腦部相關(guān)基因的表達(dá)變化，發(fā)現(xiàn)哺育蜂的大腦中高量表達(dá)的基因可能參與軸突形成和細(xì)胞黏附，這些基因可能參與哺育蜂在轉(zhuǎn)向采集活動(dòng)之前的大腦結(jié)構(gòu)變化[60]。哺育蜂腦部磷脂酰肌醇信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和花生四烯酸代謝水平的提高有助于增強(qiáng)嗅覺對(duì)幼蟲信息素刺激的反應(yīng)[65]，而在采集蜂腦部，與神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)的通路（SNARE在囊泡運(yùn)輸中的互作，wnt信號(hào)通路，TGF-beta信號(hào)通路等）的功能加強(qiáng)，增強(qiáng)了采集蜂的采集能力，這可以為蜂群提供充足的蛋白質(zhì)食物進(jìn)而滿足哺育蜂分泌蜂王漿對(duì)蛋白質(zhì)的需求[65]。從蛋白質(zhì)組學(xué)方面分析腦部膜蛋白，發(fā)現(xiàn)哺育蜂的大腦對(duì)蜂王漿分泌產(chǎn)生了一種獨(dú)特的神經(jīng)肽，哺育蜂分泌蜂王漿能力的增強(qiáng)與調(diào)節(jié)行為過程中高度增強(qiáng)的神經(jīng)肽有關(guān)，并通過調(diào)節(jié)水穩(wěn)態(tài)、對(duì)幼蟲信息素的識(shí)別、采集能力和收集花粉來增加蜂群群體的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)進(jìn)而提高蜂王漿的分泌，從而在提高蜂王漿產(chǎn)量方面發(fā)揮了作用[59]。

此外，除腦部神經(jīng)肽方面的相關(guān)研究外，關(guān)于腦部調(diào)控王漿分泌機(jī)制的研究多見于基于日齡依賴性開展的工蜂腦部磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)和膜蛋白質(zhì)組學(xué)方面，以及基于日齡依賴性開展意蜂與漿蜂之間的腦部蛋白質(zhì)組學(xué)工作[55,58,59,63]。此外，借助微陣列分析技術(shù)而展開基于日齡依賴性的工蜂腦部基因表達(dá)變化也有相關(guān)的報(bào)道[66]。

4 小結(jié)與展望

蜂王漿分泌機(jī)制的研究機(jī)理一直是蜂業(yè)界探討的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。到目前為止，對(duì)蜂王漿分泌的分子機(jī)制的廣泛研究集中在咽下腺組織，如李建科團(tuán)隊(duì)通過對(duì)意蜂咽下腺蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)的深入研究發(fā)現(xiàn)并明確了調(diào)控蜂王漿高產(chǎn)的關(guān)鍵代謝通路和蛋白質(zhì)功能[16,58,67]。然而，蛋白質(zhì)合成和蜂王漿分泌在哺育階段的機(jī)制尚不清楚。

目前在對(duì)上顎腺分泌物中相關(guān)脂肪酸的研究取得了一定的進(jìn)展，但對(duì)上顎腺分泌物中其他方面的分子機(jī)理的研究并不多。研究蜜蜂上顎腺中基因以及蛋白的表達(dá)與調(diào)控，對(duì)揭示上顎腺分泌物合成的分子機(jī)制和深入了解上顎腺相關(guān)靶基因誘導(dǎo)蜂王漿分泌的分子機(jī)制有著重要的意義，結(jié)合對(duì)脂肪酸代謝過程的了解，能夠?yàn)橹荚谔岣邼{蜂中10-HDA含量的蜜蜂分子育種工作提供參考。

蜜蜂大腦是進(jìn)行信息處理和行為調(diào)控的中央樞紐，對(duì)協(xié)調(diào)咽下腺和上顎腺等組織分泌蜂王漿有著重要的作用，但目前科研界對(duì)蜜蜂大腦的研究主要集中在勞動(dòng)分工、學(xué)習(xí)記憶、級(jí)型分化等方面，其中在勞動(dòng)分工方面的研究會(huì)涉及哺育蜂哺育行為相關(guān)的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控機(jī)制，這也能夠?yàn)槿藗兩钊肽X部調(diào)控腺體組織分泌蜂王漿的分子機(jī)制提供參考。

綜上所述，本文總結(jié)了與蜂王漿分泌密切相關(guān)的3個(gè)腺體/器官的研究進(jìn)展，期望從多維度為后續(xù)蜂王漿分泌的分子機(jī)制提供新的視角和理論參考。然而，目前關(guān)于蜂王漿分泌機(jī)制的研究主要集中于自然蜂群中不同日齡工蜂的咽下腺、上顎腺和腦，篩選了大量與蜂王漿分泌機(jī)制相關(guān)的關(guān)鍵候選基因。但是這些關(guān)鍵候選基因中部分基因也有可能是由于日齡差異所導(dǎo)致，因此，在后續(xù)研究中應(yīng)該利用蜜蜂行為的可塑性，人工組建相同日齡的蜂群，排除日齡因素的影響，進(jìn)而縮小與蜂王漿分泌機(jī)制相關(guān)的候選基因的范圍。同時(shí)隨著基因組編輯CRISPR/Cas9技術(shù)的成熟以及在蜜蜂中成功的應(yīng)用，該技術(shù)將為后期關(guān)鍵候選基因功能的驗(yàn)證提供了有力的工具，同時(shí)也為闡明蜂王漿分泌和調(diào)控的分子機(jī)制提供新的方向。