支氣管哮喘患者細(xì)胞間黏附因子-1、嗜酸粒細(xì)胞的水平變化及臨床意義

張長(zhǎng)生 張海濤

南京腦科醫(yī)院 南京醫(yī)科大學(xué)附屬腦科醫(yī)院呼吸內(nèi)科，江蘇南京 210029

支氣管哮喘作為一種呼吸道常見疾病，是由多種炎癥細(xì)胞、炎癥介質(zhì)參與的一類頑固性、反復(fù)發(fā)作的慢性氣道炎癥性疾病，具有氣流可逆性阻塞、氣道高反應(yīng)性等特點(diǎn)，常表現(xiàn)為多種炎性因子、炎癥介質(zhì)表達(dá)量出現(xiàn)異常[1-3]。近年來(lái)，隨著環(huán)境的變化，支氣管哮喘的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢(shì)，支氣管哮喘已成為威脅人類健康的一大殺手。支氣管哮喘發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，目前研究顯示[4-5]，一系列的炎性因子、細(xì)胞因子能夠參與其發(fā)病過(guò)程。細(xì)胞間黏附因子-1（ICAM-1）作為免疫球蛋白家族成員，在淋巴細(xì)胞中大量表達(dá)，能夠介導(dǎo)炎癥細(xì)胞的黏附，促進(jìn)細(xì)胞因子、炎性物質(zhì)的釋放，以及炎癥的發(fā)生、發(fā)展[6]。嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）作為損傷氣道最關(guān)鍵的炎癥細(xì)胞，能夠參與氣道局部炎癥的啟動(dòng)，對(duì)氣道造成不可逆的損傷[7]。ICAM-1 和EOS 水平的變化在一定程度上可能與支氣管哮喘患者的發(fā)病進(jìn)展相關(guān)，判斷患者病情變化。故本研究主要探究支氣管哮喘患者ICAM-1 和EOS 水平變化，分析臨床意義，具體研究如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012 年1 月～2017 年12 月于南京腦科醫(yī)院（以下簡(jiǎn)稱“我院”）就診的支氣管哮喘患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合2008 年版支氣管哮喘防治指南[8]；②臨床病例資料完整；③同意接受肺功能檢查；④病情發(fā)作時(shí)以呼氣相延長(zhǎng)，且以呼氣相為主的喘鳴音；⑤出現(xiàn)喘息的癥狀可自行緩解或者經(jīng)治療緩解；⑥患者及其家屬簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有嚴(yán)重心腎疾??；②患有免疫系統(tǒng)疾??；③服用激素藥物；④不配合治療。根據(jù)納入與排除標(biāo)準(zhǔn)，86 例患者入組，根據(jù)患者病情及癥狀將其分為急性發(fā)作組（45 例）和緩解組（41 例）。其中，急性發(fā)作組男25 例，女20 例；年齡16～73 歲，平均（53.71±14.81）歲；病程0.5～5.6 年，平均（2.71±0.61）年；輕度23 例，中度22 例。緩解組男20例，女21 例；年齡17～75 歲，平均（53.29±15.04）歲。選擇同期52 名于我院進(jìn)行健康檢查人群為對(duì)照組。其中男25 名，女27 名；年齡17～74 歲，平均（52.09±16.91）歲。三組人群性別、年齡等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 觀察指標(biāo)及方法

1.2.1 ICAM-1 和EOS 測(cè)定 CAM-1 測(cè)定：三組患者進(jìn)行氧氣射流霧化器吸入4.5%的高滲鹽水前進(jìn)行鼻腔分泌物清理，進(jìn)行漱口與吞水，多次深度咳嗽，盡量獲得1 g 以上的痰液。取無(wú)唾液成分的痰液放置于無(wú)菌EP 管中，加入2 倍體積的0.1%二硫蘇糖醇與痰液共同孵育，渦旋混勻。放置于37°C 恒溫水浴搖床中180 r/min 震蕩15 min 后3500 r/min 離心10 min，利用酶聯(lián)免疫吸附試劑盒[賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：20111009]測(cè)定ICAM-1 的含量，具體操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行。EOS 測(cè)定：患者于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下，抽取5 mL 肘靜脈血，以10 cm 的離心半徑，3500 r/min 離心10 min，取上清液，利用自動(dòng)血細(xì)胞分析儀[賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司]計(jì)數(shù)EOS。對(duì)照組于健康體檢時(shí)，抽取肘靜脈血。

1.2.2 肺功能檢查 患者入院治療時(shí)（對(duì)照組于健康體檢時(shí)）利用肺功能儀（S-980A Ⅲ，四川思可達(dá)科技有限公司）檢測(cè)患者每分鐘最大通氣量（MVV）/預(yù)計(jì)值、用力肺活量（FVC）、呼氣峰流速值（PEF）以及第1 秒用力呼氣容積（FEV1），所有患者均進(jìn)行3 次肺通氣功能檢查，選取最優(yōu)1 次作為檢測(cè)值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

運(yùn)用SPSS 17.0 軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t 檢驗(yàn)。相關(guān)性分析采用Spearman 分析。以P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組人群ICAM-1、EOS 水平變化比較

支氣管哮喘急性發(fā)作組與緩解組ICAM-1 與EOS 水平明顯高于對(duì)照組患者，且急性發(fā)作組高于緩解組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）。見表1。

表1 三組人群ICAM-1、EOS 水平變化比較（）

表1 三組人群ICAM-1、EOS 水平變化比較（）

注：與對(duì)照組比較，*P ＜0.05；與緩解組比較，#P ＜0.05。ICAM-1：細(xì)胞間黏附因子-1；EOS：嗜酸性粒細(xì)胞

2.2 三組人群肺功能比較

支氣管哮喘急性發(fā)作組與緩解組MVV/預(yù)計(jì)值、PEF、FEV1及FVC 均低于對(duì)照組，且急性發(fā)作組低于緩解組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）。見表2。

表2 三組人群肺功能比較（）

表2 三組人群肺功能比較（）

注：與對(duì)照組比較，*P ＜0.05；與緩解組比較，#P ＜0.05。MVV：每分鐘最大通氣量；PEF：呼氣峰流速值；FEV1：第1 秒用力呼氣容積；FVC：用力肺活量

2.3 支氣管哮喘患者ICAM-1、EOS 水平與肺功能相關(guān)性分析

支氣管哮喘患者ICAM-1、EOS 水平與FVC、FEV1呈負(fù)相關(guān)（r=-0.652，-0.548；r=-0.549，-0.598，均P ＜0.05）。

3 討論

支氣管哮喘病程較為漫長(zhǎng)，是由T 細(xì)胞、EOS、肥大細(xì)胞等多種細(xì)胞參與的慢性氣道炎癥性疾病，該病表現(xiàn)為持續(xù)性炎癥、氣道高反應(yīng)性[9-10]。免疫功能紊亂在支氣管哮喘發(fā)生、發(fā)展等過(guò)程中起到至關(guān)重要的作用，正常機(jī)體內(nèi)各種細(xì)胞因子相互作用，各種細(xì)胞因子之間相互促進(jìn)、相互制約，使機(jī)體中構(gòu)成的細(xì)胞因子免疫系統(tǒng)處于動(dòng)態(tài)平衡中，機(jī)體中的Th1/Th2 失衡后，細(xì)胞免疫系統(tǒng)遭到破壞，出現(xiàn)大量炎癥，進(jìn)而導(dǎo)致支氣管哮喘的發(fā)生[11-12]。氣道分泌的大量炎性因子釋放進(jìn)入血液，能夠引起機(jī)體出現(xiàn)局部或者全身性的炎性反應(yīng)[13]。ICAM-1 和EOS 是支氣管哮喘的發(fā)生、發(fā)展等進(jìn)程中的炎癥重要因子。ICAM-1 是一種免疫球蛋白家族的黏附分子，分布于人體的各個(gè)部位，能夠在各種組織中表達(dá)。在存有炎性反應(yīng)組織中，ICAM-1的表達(dá)量更為明顯[14]。大量研究[15]證實(shí)，EOS 在支氣管哮喘的分子機(jī)制中具有重要作用，與氣道局部的炎癥啟動(dòng)密切相關(guān)。EOS 的激活和趨化在氣道壁的炎性損傷過(guò)程中是必不可少的重要步驟，但是關(guān)于ICAM-1和EOS 在支氣管哮喘患者體內(nèi)的變化文獻(xiàn)報(bào)道較少。

本研究結(jié)果顯示，兩組患者ICAM-1 含量和EOS計(jì)數(shù)高于對(duì)照組，并且急性發(fā)作組含量亦高于緩解組。提示ICAM-1 和EOS 在支氣管哮喘患者體內(nèi)呈現(xiàn)高表達(dá)，并且在支氣管哮喘發(fā)展進(jìn)程的不同時(shí)期，含量、數(shù)量存在一定的差異，提示ICAM-1 和EOS 等氣道上皮細(xì)胞在支氣管哮喘的炎性反應(yīng)中起著至關(guān)重要的作用。氣道上皮細(xì)胞脫落導(dǎo)致支氣管炎癥的發(fā)生，而ICAM-1 能夠直接引起上皮剝落，ICAM-1 在細(xì)胞中某些部位表達(dá)，成為指示細(xì)胞活化的信號(hào)，繼而ICAM-1 遷移到發(fā)生炎癥的部位，與相應(yīng)的抗原相互作用，與靶抗原接觸致傷。ICAM-1 不僅能夠增強(qiáng)上皮細(xì)胞與T 細(xì)胞的黏附作用，而且還可以在T 細(xì)胞活化過(guò)程中起到信號(hào)傳遞的作用[16]。另一方面，ICAM-1 能夠參與EOS、淋巴細(xì)胞等激活，促進(jìn)炎性因子的遷移[17]。周潔等[18]研究結(jié)果顯示，ICAM-1 在支氣管哮喘患兒組織中蛋白水平與mRNA 水平的表達(dá)量明顯高于對(duì)照組，進(jìn)一步顯示ICAM-1 在支氣管患者體內(nèi)呈現(xiàn)高表達(dá)，與本研究結(jié)果一致。EOS 作為炎癥細(xì)胞，浸潤(rùn)作用是支氣管哮喘的主要發(fā)病特征之一。EOS 被激活后能夠分泌大量的EOS 陽(yáng)離子蛋白、EOS 過(guò)氧化氫酶等毒性蛋白、血小板活化因子、白三烯等炎性遞質(zhì)，發(fā)揮致炎作用，導(dǎo)致支氣管損傷、血小板聚集、黏膜水腫等炎性反應(yīng)，進(jìn)而促進(jìn)哮喘的發(fā)生[19-20]。ICAM-1 和EOS 在支氣管哮喘患者體內(nèi)呈現(xiàn)高表達(dá)，提示兩者相互作用，體內(nèi)炎癥細(xì)胞及炎性因子的大量產(chǎn)生，引起支氣管哮喘。孫婕怡等[21]研究結(jié)果顯示，EOS 作為支氣管哮喘的主要炎性因子，在患者體內(nèi)呈現(xiàn)高表達(dá)，并與炎性因子白細(xì)胞介素（IL）-17、血清免疫球蛋白（IgE）表達(dá)量具有相關(guān)性。本研究結(jié)果顯示，兩組患者肺功能指標(biāo)均低于對(duì)照組，且急性發(fā)作組肺功能指標(biāo)低于緩解組。提示支氣管哮喘患者的肺功能指標(biāo)明顯低于正常患者。支氣管哮喘患者肺部長(zhǎng)時(shí)間受到病毒侵襲，以氣道為代表的器官長(zhǎng)時(shí)間處于高炎性因子環(huán)境中，肺部環(huán)境較差、免疫系統(tǒng)遭到破壞、免疫功能變得較為低下、肺部功能減弱，與正常人群比較支氣管哮喘患者肺部功能較弱。本研究結(jié)果顯示，支氣管哮喘患者ICAM-1、EOS 水平與FVC、FEV1呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)。提示ICAM-1、EOS 水平變化與肺部某些功能相關(guān)，ICAM-1 在活化的T 細(xì)胞、上皮細(xì)胞以及EOS 中表達(dá)量呈現(xiàn)高表達(dá)。ICAM-1 表達(dá)量升高，使EOS 大量募集，患者體內(nèi)炎癥大量出現(xiàn)，導(dǎo)致支氣管患者病情加重，患者的肺功能受損程度逐漸加重[22]。吳思仿等[17]研究結(jié)果顯示，支氣管哮喘患者ICAM-1 和EOS 水平變化與患者病癥的嚴(yán)重程度、肺功能指標(biāo)變化密切相關(guān)，進(jìn)一步證實(shí)本結(jié)論。

綜上所述，支氣管哮喘患者體內(nèi)ICAM-1、EOS水平的變化能夠在某些程度上反映患者病情變化，ICAM-1、EOS 水平的變化對(duì)于早期支氣管哮喘的發(fā)現(xiàn)與治療具有一定的臨床參考價(jià)值。