半乳凝素-3在RMPP氣道炎癥中表達(dá)及與肺炎支原體載量及中性粒細(xì)胞水平相關(guān)性

李俊利 朱華 白玉新 馬春艷 張國(guó)棟 馮萬禹 劉春麗

肺炎支原體肺炎屬于臨床上常見的急性炎癥，主要是由肺炎支原體造成，其發(fā)生率約占社區(qū)獲得性肺炎的40%左右，其中RMPP(難治性肺炎支原體肺炎)較為常見，一旦患上RMPP后，患兒病情明顯加重，且肺部病灶范圍擴(kuò)大，密度升高，甚至可能伴有壞死性肺炎、胸腔積液、肺不張等現(xiàn)象，不僅增加治療難度，同時(shí)提升對(duì)患兒的傷害，受到醫(yī)療界重點(diǎn)關(guān)注[1-3]。隨著醫(yī)療水平的完善發(fā)展，臨床發(fā)現(xiàn)支氣管肺泡灌洗在肺炎支原體肺炎中效果顯著，其中灌洗液中細(xì)胞學(xué)分類以中性粒細(xì)胞增加、巨噬細(xì)胞降低為主要特征[4-5]。另外有研究發(fā)現(xiàn)，急性期患兒的血清中半乳凝素-3明顯升高，因此證明半乳凝素-3與肺炎支原體感染造成的炎癥損傷有關(guān)[6-7]。但國(guó)內(nèi)相關(guān)報(bào)道較少，我院對(duì)此展開研究，報(bào)告如下。

資料與方法

一、一般資料

選擇我院2018年5月-2019年2月納入的103例RMPP患兒作為研究組，另選擇同一時(shí)間接收的30例支氣管異物患兒作為對(duì)照組。其中研究組男性患兒59例，女性患兒44例，年齡3～9歲，平均年齡(6.78±1.02)歲，體重17～40kg，平均體重(29.87±1.47)kg，急性期61例，恢復(fù)期42例；對(duì)照組男性患兒18例，女性患兒12例，年齡3～10歲，平均年齡(6.90±1.13)歲，體重18～40kg，平均體重(30.05±1.59)kg。兩組基本資料相比無差異(P>0.05)(見表1)。

納入標(biāo)準(zhǔn)[8]：(1)研究組患兒均符合《兒童肺炎支原體肺炎診治專家共識(shí)(2015年版)》中疾病的診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)患兒家屬均知曉本次研究目的，并自愿加入本次研究中；(3)中途未退出研究者；(4)對(duì)照組患兒均存在異物吸入史，病程不超過7d，經(jīng)過胸片檢查未發(fā)現(xiàn)肺部感染。

排除標(biāo)準(zhǔn)[9]：(1)研究前經(jīng)檢查顯示肺結(jié)核、先天性疾病者、病原體混合感染或者肺部基礎(chǔ)疾病者；(2)存在支氣管哮喘史；(3)存在精神方面疾病者，依從性較差，無法配合研究者。

二、方法

所有研究對(duì)象實(shí)施支氣管肺泡灌洗治療，術(shù)前給予常規(guī)檢查，選擇0.02～0.03mg/kg阿托品+0.05～0.10ug/kg咪達(dá)唑侖進(jìn)行肌注，儀器選擇纖維支氣管鏡(Olympus BF30c-20)，同時(shí)利用利多卡因遵照邊麻邊進(jìn)方式，依次通過聲門、隆突、氣管、葉支氣管，并將纖維支氣管鏡放在病灶的側(cè)葉、段或者亞段支氣管，選擇生理鹽水進(jìn)行局部灌洗，另外通過負(fù)壓回抽液體，保證灌洗液回收率超過40%，保存2mL灌洗液檢測(cè)中性粒細(xì)胞水平，再保存2mL置于12000rpm低溫條件下離心5min左右，檢測(cè)半乳凝素-3與肺炎支原體載量。

表1 兩組患者的基線數(shù)據(jù)對(duì)比

選擇單層紗布過濾灌洗液中黏液，經(jīng)過離心后細(xì)胞沉渣給予蘇木素依紅染色，記錄其中細(xì)胞總數(shù)、中性粒及巨噬細(xì)胞的百分比。嚴(yán)格遵照酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)灌洗液上清中半乳凝素-3水平，而肺炎支原體載量通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法檢測(cè)。

三、觀察指標(biāo)

分別記錄兩組的半乳凝素-3、肺炎支原體載量、中性粒細(xì)胞及巨噬細(xì)胞水平，同時(shí)研究組中急性期與恢復(fù)期患兒的各項(xiàng)指標(biāo)水平，最后分析半乳凝素-3與肺炎支原體載量、中性粒細(xì)胞及巨噬細(xì)胞的相關(guān)性。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

結(jié) 果

一、比較兩組半乳凝素-3、肺炎支原體載量、中性粒細(xì)胞及巨噬細(xì)胞水平

研究組的半乳凝素-3、肺炎支原體載量、中性粒細(xì)胞及巨噬細(xì)胞水平與對(duì)照組相比，差異顯著(P<0.05)(見表2)。

表2 比較兩組半乳凝素-3、肺炎支原體載量、中性粒細(xì)胞及巨噬細(xì)胞水平

二、比較研究組中不同時(shí)期的半乳凝素-3、肺炎支原體載量、中性粒細(xì)胞及巨噬細(xì)胞水平

研究組中急性期患兒的半乳凝素-3、肺炎支原體載量、中性粒細(xì)胞水平與恢復(fù)期相比差異顯著(P<0.05)，但不同時(shí)期患兒的巨噬細(xì)胞水平相比無差異(P>0.05)(見表3)。

表3 比較研究組中不同時(shí)期的半乳凝素-3、肺炎支原體載量、中性粒細(xì)胞及巨噬細(xì)胞水平

三、半乳凝素-3與肺炎支原體載量、中性粒細(xì)胞及巨噬細(xì)胞的相關(guān)性

半乳凝素-3與肺炎支原體載量、中性粒細(xì)胞呈現(xiàn)正相關(guān)性(P<0.05)，但與巨噬細(xì)胞無相關(guān)性(P>0.05)(見表4)。

表4 半乳凝素-3與肺炎支原體載量、中性粒細(xì)胞及巨噬細(xì)胞的相關(guān)性

討 論

半乳凝素-3屬于半乳凝素家族中主要成員，在細(xì)胞粘附、增殖及凋亡中具有一定的參與價(jià)值，另外還可與細(xì)胞中糖蛋白、細(xì)胞表面分子及細(xì)胞外的基質(zhì)發(fā)生作用。研究表明，半乳凝素-3與多種炎癥反應(yīng)密切相關(guān)，尤其是中性粒細(xì)胞的粘附與激活、注釋細(xì)胞的化學(xué)趨化等[10-12]。目前臨床上發(fā)現(xiàn)半乳凝素-3在RMPP患兒中呈現(xiàn)高水平，且急性期患兒較恢復(fù)期升高，證明半乳凝素-3在RMPP的炎癥反應(yīng)中具有重要意義[13-15]。

本文對(duì)此展開研究，結(jié)果顯示：研究組的半乳凝素-3、肺炎支原體載量、中性粒細(xì)胞及巨噬細(xì)胞水平與對(duì)照組相比，差異顯著(P<0.05)；研究組中，急性期患兒的半乳凝素-3、肺炎支原體載量、中性粒細(xì)胞水平與恢復(fù)期相比差異顯著(P<0.05)，但不同時(shí)期患兒的巨噬細(xì)胞水平相比無差異(P>0.05)；半乳凝素-3與肺炎支原體載量、中性粒細(xì)胞呈現(xiàn)正相關(guān)性(P<0.05)，但與巨噬細(xì)胞無相關(guān)性(P>0.05)，提示半乳凝素-3在RMPP氣道炎癥中具有重要價(jià)值，其水平與肺炎支原體載量及中性粒細(xì)胞水平密切相關(guān)。曾有研究顯示，RMPP患兒的外周血及肺泡內(nèi)中性粒細(xì)胞水平明顯升高，其與胸腔積液、肺損傷等情況息息相關(guān)。本文研究結(jié)果中急性期患兒的中性粒細(xì)胞水平高于恢復(fù)期，分析原因可能是中性粒細(xì)胞參與了肺炎支原體感染后的免疫炎癥反應(yīng)。另外半乳凝素-3是由肺部Clara細(xì)胞及巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，屬于常見的促炎因子，加上肺炎支原體傷害患兒下呼吸道，主要取決于巨噬細(xì)胞的吞噬作用清除[16-17]。從上述研究中看到半乳凝素-3與肺炎支原體載量正相關(guān)，可能是因?yàn)榉窝字гw對(duì)患兒氣道上皮細(xì)胞及巨噬細(xì)胞產(chǎn)生刺激，從而分泌出半乳凝素-3，而半乳凝素-3能夠促進(jìn)巨噬細(xì)胞發(fā)生活化反應(yīng)，進(jìn)一步清除肺炎支原體，但感染過程中可能消耗部分巨噬細(xì)胞[18-20]。但本次研究中仍存在一定研究不足與局限性，如樣本選取存在一定局限性，雖然按相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了篩選，但所選取的標(biāo)本是否合理有待商榷。另外樣本選取例數(shù)較少，研究時(shí)間較短，臨床可進(jìn)一步擴(kuò)大研究對(duì)象人數(shù)，延長(zhǎng)研究時(shí)間，從而提升研究結(jié)果的準(zhǔn)確性。

綜上所述，半乳凝素-3參與了RMPP氣道炎癥反應(yīng)，而肺炎支原體能夠消耗巨噬細(xì)胞，另外半乳凝素-3與中性粒細(xì)胞及肺炎支原體載量密切相關(guān)，因此半乳凝素-3檢測(cè)在評(píng)估疾病中具有重要作用，值得臨床推廣使用。