2011—2018年山東省規(guī)?；i場偽狂犬病血清流行病學(xué)調(diào)查

寧慧波，王 鵬，劉 偉，李 聰

[1.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，北京 海淀 100193；2.海博萊生物科技咨詢（北京）有限公司，海淀 100086]

豬偽狂犬?。≒orcine pseudorabies,PR）是由偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus,PRV）引起的一種影響現(xiàn)代養(yǎng)豬生產(chǎn)的重要的病毒性傳染病，對全球養(yǎng)豬業(yè)的危害已經(jīng)超過100年，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失[1]。我國早在20世紀(jì)50年代就有該病流行的報道[2]；到了80年代，該病在18個省市自治區(qū)被相繼報道[3]，并造成嚴(yán)重的臨床損失。由于Bartha-K61株疫苗的使用，以及gE-ELISA的廣泛應(yīng)用，PR在我國得到較好的防控。2011年，該病自北向南呈暴發(fā)狀態(tài)，引發(fā)母豬流產(chǎn)及仔豬高死亡率，雖然近幾年該病臨床上趨于緩和，但PRV野毒感染豬場依然很多，這增加了豬病防控的復(fù)雜性，嚴(yán)重影響了我國養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展[4]。

為了掌握現(xiàn)有防控體系下山東省規(guī)?；i場PRV感染狀況，進(jìn)而更有效地防控和凈化PR，筆者對山東省430個規(guī)?；i場不同豬群的35 505份血清樣品進(jìn)行PRV gE抗體檢測，并對PRV野毒感染情況進(jìn)行系統(tǒng)分析。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清樣品 樣品采集時間為2011年1月至2018年12月，采集區(qū)域為山東省，采樣豬場基礎(chǔ)母豬存欄數(shù)＞200頭，共430個豬場，35 505份血清（表1）。所有采樣豬場均使用偽狂犬病gE基因缺失疫苗。

表1 2011—2018年規(guī)?；i場采樣數(shù)量

1.1.2 試劑盒 選用西班牙HIPRA公司PRV gE抗體檢測試劑盒。

1.2 方法

1.2.1 血清采集 采用橫斷面采樣方法，分別采集公豬、后備母豬、不同胎次經(jīng)產(chǎn)母豬及不同生長階段的仔豬（＞10周齡）的血液。

1.2.2 PRV gE抗體檢測 采用阻斷酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）法，操作方法及結(jié)果判定按照操作試劑盒說明書進(jìn)行。檢測的血清樣品全部采自免疫gE基因缺失疫苗的豬場，故檢測到gE抗體陽性樣品可以初步判斷該豬場被PRV野毒感染。在進(jìn)行豬場及樣品結(jié)果判定和統(tǒng)計時，只要豬場有1個樣品為gE抗體陽性，則該場判定為PRV野毒陽性場。

2 結(jié)果與分析

2.1 2011—2018年山東省規(guī)模化豬場PRV gE抗體檢測結(jié)果

從全省范圍分析看，2011—2018年，豬場陽性率呈快速上升后緩慢下降趨勢，2011年陽性率最低，為21.05%；2015年陽性率最高，為94.37%，且2013年后，陽性率一直維持在81.82%以上（圖1）。樣品陽性率整體呈快速上升后快速下降趨勢，2011年陽性率最低，為1.48%；2015年陽性率最高，為59.21%。結(jié)果表明，PR在山東省依然較為嚴(yán)重，需進(jìn)行長期系統(tǒng)性的防控。

2.2 2011—2018年山東省規(guī)?；i場種豬PRV gE抗體檢測結(jié)果

2011—2018年，種豬陽性率呈快速上升后快速下降趨勢，2011年陽性率最低，僅為1.79%；2015年陽性率最高，為71.97%，且2012年后，陽性率一直維持在34.99%以上（圖2）。陽性豬場種豬陽性率變化趨勢與種豬陽性變化趨勢基本一致，整體呈快速上升后快速下降趨勢，2011年陽性率最低，僅為7.20%；2015年陽性率最高，為75.34%。結(jié)果表明，2011年以后，山東省種豬群大比例感染PR；感染PR的豬場，種豬陽性比例更高，2012年以后，約50%以上的種豬呈PR感染狀態(tài)。

2.3 2011—2018年山東省規(guī)?；i場仔豬PRV gE抗體檢測結(jié)果

如同種豬陽性率變化趨勢，2011—2018年，仔豬陽性率整體呈快速上升后下降趨勢，2011年陽性率最低，僅為0.93%；2015年陽性率最高，為40.54%（圖3）。陽性豬場仔豬陽性率變化趨勢與仔豬陽性變化趨勢基本一致，整體呈快速上升后下降趨勢，2011年陽性率最低，僅為4.42%；2014年陽性率最高，為42.46%。結(jié)果表明，2011年后，山東省仔豬群大比例感染PR；感染PR的豬場，仔豬陽性比例更高，2012年以后，約40.47%以上的仔豬呈PR感染狀態(tài)。2016與2018年仔豬陽性率偏低可能與仔豬采樣數(shù)量少有一定關(guān)系。

3 討論

3.1 豬偽狂犬病在山東省豬群中依然廣泛流行

近年來，我國研究學(xué)者對不同地區(qū)的豬場PRV野毒感染情況進(jìn)行了大量的血清學(xué)檢測。李聰2009—2011年調(diào)查顯示，PRV感染豬場比例分別為59.3%、48.2%、40.6%，樣品陽性率分別為12.7%、10.4%、13.8%[5]。中國農(nóng)業(yè)大學(xué)楊漢春教授調(diào)查顯示，2014—2017年gE抗體陽性豬場分別80.08%、76.08%、75.28%、78.33%[6]。華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物疫病中心對2011—2016年送檢樣品檢測結(jié)果顯示：gE抗體陽性率2011為7.70%，2016年上升至39.92%?？偟膩砜矗?011年之前，豬場及樣品陽性率比較低；但是2011年之后，PRV陽性豬場高達(dá)80%以上，近50%的樣品為陽性。這些數(shù)據(jù)表明，近幾年我國偽狂犬病的防控壓力逐步增大，需引起高度重視。

本研究對山東省的430個規(guī)?；i場進(jìn)行調(diào)查，共35 505份血清樣品。調(diào)查結(jié)果顯示：2011—2018年，豬場陽性率從21.05%上升到81.82%，2015年最高為94.37%；樣品陽性率從1.48%上升到28.49%，2015年最高為59.21%。盡管2016—2018年，豬場及樣品陽性率呈現(xiàn)下降趨勢，但2018年的陽性率依然遠(yuǎn)高于2011年，整體變化趨勢與國內(nèi)PR的感染趨勢基本一致。說明，豬偽狂犬病在山東省依然廣泛流行，需引起高度重視。

3.2 種豬群是偽狂犬病防控的重點

檢測結(jié)果顯示，2011年種豬陽性率僅為1.79%，而后迅速上升，呈現(xiàn)高比例的感染。盡管2011年之后，豬場對于PR的防控越來越重視，加大了種豬的免疫頻率，但由于PRV具有潛伏感染特性，種豬的陽性率依然呈現(xiàn)上升趨勢。處于潛伏感染的種豬受到外界的不利因素刺激后，潛伏感染的PRV可以被活化，進(jìn)而造成PRV通過軸突返回到宿主的外周組織，從而造成種豬發(fā)病及通過口腔、鼻腔、生殖道及精液等途徑來排毒。這些不利因素包括應(yīng)激、分娩、混合感染、免疫力下降、免疫抑制類藥物（如地塞米松、乙酰膽堿）的使用[7-8]。所以潛伏感染PRV的種豬是潛在的傳染源，這給PR的防控帶來了很大的困難。因此對于生產(chǎn)性能不佳的母豬及公豬，應(yīng)加快其淘汰速度。

3.3 肥育豬群的偽狂犬病防控不容忽視

母源抗體對初生仔豬被動獲取保護(hù)以抵抗PRV的感染具有十分重要的作用，但是對于仔豬后期的主動免疫卻存在抑制作用[9]?？贵w水平越高，對仔豬免疫的干擾越大。野毒感染的母豬，抗體高于陰性母豬免疫能達(dá)到的水平，對仔豬免疫的干擾最大。推遲仔豬首次肌注的時間及加強免疫有利于抗體的上升。Oirschot報道，對于有母源抗體的仔豬在4周或10周齡肌注免疫1次活苗均不能快速提高抗體水平，而在間隔4或6周后加強免疫1次后，抗體水平會迅速提升[10]；同時研究對于有母源抗體的仔豬，在10周齡時肌注1次活苗5周后并不能提供有效保護(hù)，而肌注2次活苗8周后可以提供有效臨床保護(hù)[11]。

調(diào)查結(jié)果顯示，2011年仔豬陽性率僅為0.93%，而后迅速上升，呈現(xiàn)高比例的感染。盡管2011年之后，豬場對于PR的防控越來越重視，加大了種豬及仔豬的免疫頻率，但仔豬的陽性率依然呈現(xiàn)上升趨勢。由于PR的母源抗體可以持續(xù)到12～14周，所以仔豬的陽性率可能與未消退的母源抗有一定關(guān)系，但是陽性率的攀升說明仔豬后期感染壓力逐漸增大。這可能與免疫程序不合理有一定的關(guān)系，仔豬除了進(jìn)行噴鼻免疫外，應(yīng)在9～10周齡及13～14周齡分別進(jìn)行兩次免疫，以降低中大豬感染PRV的幾率。

3.4 豬偽狂犬病的防控任重道遠(yuǎn)

近年來，西班牙、德國、法國、意大利、奧地利、匈牙利、波蘭、芬蘭、荷蘭、瑞典、瑞士、丹麥、英國等歐洲國家，以及美國、加拿大、新西蘭等國家也已經(jīng)在生豬群凈化了PR，僅在野豬體內(nèi)能檢測到PRV的存在，并且已經(jīng)禁止對家豬進(jìn)行PRV疫苗免疫[12-17]。在亞洲，日本已經(jīng)凈化了PR，但PR在多數(shù)國家和地區(qū)呈地方性流行，一些國家實施偽狂犬病疫苗免疫（越南、韓國、泰國、菲律賓、柬埔寨）[18]，豬群中PR野毒的陽性率在10%～20%。

目前山東省規(guī)模化豬場普遍存在PRV的感染，種豬群及肥豬群感染較為嚴(yán)重，應(yīng)引起重視。由于山東省豬場數(shù)量多、規(guī)模大、養(yǎng)殖水平參差不齊，導(dǎo)致影響山東省PR流行的風(fēng)險因素眾多，除了加強豬群的疫苗免疫，還應(yīng)重視豬群的種豬引入、種豬管理與淘汰，車輛、設(shè)備與人員的清洗消毒，切實做好生物安全，從而對偽狂犬病進(jìn)行系統(tǒng)性的防控與凈化。