質(zhì)譜技術(shù)在出生缺陷防控中的應(yīng)用

李增明

（江西省婦幼保健院，南昌 330006）

出生缺陷是指出生以前就已發(fā)生的身體功能上、結(jié)構(gòu)上，或代謝的異常，出生缺陷是導(dǎo)致死胎、流產(chǎn)、嬰幼兒死亡和先天性殘障的主要原因之一，預(yù)防和減少出生缺陷，是提高出生人口素質(zhì)、實(shí)施健康中國(guó)行動(dòng)和奪取脫貧攻堅(jiān)全面勝利的內(nèi)在要求。為了降低出生缺陷發(fā)生率，WHO 提出了出生缺陷的三級(jí)預(yù)防策略[1,2]。出生缺陷發(fā)生的原因主要包括遺傳因素、環(huán)境因素以及遺傳環(huán)境兩因素相互作用，建立高靈敏度、高特異性、高通量和穩(wěn)定性好的出生缺陷風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估預(yù)測(cè)、篩查、診斷和鑒別診斷及成因因素分析檢測(cè)方法，對(duì)于出生缺陷的防控具有重要意義[3,4]，質(zhì)譜分析的精準(zhǔn)定性定量特性使得其可為出生缺陷的篩查、診斷和鑒別診斷和成因分析提供科學(xué)依據(jù)，因此質(zhì)譜技術(shù)在出生缺陷防控中發(fā)揮著重要作用?，F(xiàn)對(duì)質(zhì)譜技術(shù)在出生缺陷防控中的應(yīng)用進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期為質(zhì)譜技術(shù)在出生缺陷風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)、篩查、檢測(cè)和診斷中的進(jìn)一步應(yīng)用提供參考。

1 質(zhì)譜技術(shù)概述

質(zhì)譜是眾多分析技術(shù)中同時(shí)具備了靈敏度高、特異性好、響應(yīng)速度快的普適性分析檢測(cè)方法，在諸多分析測(cè)試領(lǐng)域均有非常廣泛的應(yīng)用。目前已有13 個(gè)諾貝爾獎(jiǎng)授予了與質(zhì)譜技術(shù)的誕生和發(fā)展以及有關(guān)應(yīng)用方面的研究。2002 年，美國(guó)芬恩教授和日本田中耕一教授發(fā)明了生物大分子質(zhì)譜分析法，獲得諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)[5]。

質(zhì)譜技術(shù)由于其在靈敏度和特異性上的突出優(yōu)勢(shì)，適合于復(fù)雜臨床生物樣本的分析檢測(cè)，該技術(shù)在臨床檢測(cè)和診斷領(lǐng)域的發(fā)展尤為迅猛。目前質(zhì)譜技術(shù)除了已成為臨床小分子化合物的主要質(zhì)控參考方法外，在臨床內(nèi)分泌、治療藥物監(jiān)測(cè)、新型生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)分析等臨床檢測(cè)領(lǐng)域應(yīng)用越來(lái)越廣泛，可為疾病的診斷提供準(zhǔn)確可靠的臨床依據(jù)，在臨床檢測(cè)診斷領(lǐng)域發(fā)揮愈來(lái)愈重要的作用。質(zhì)譜分析的精準(zhǔn)定性定量特性在臨床分析特別是在精準(zhǔn)醫(yī)療方面提供了快速可靠的解決方案。目前質(zhì)譜技術(shù)的臨床應(yīng)用主要是對(duì)人體的體液 （如血液、尿液、唾液等）和人體組織切片的分析，揭示疾病的相關(guān)信息，對(duì)生理病理研究和臨床診斷具有重要意義。質(zhì)譜技術(shù)在出生缺陷風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)、篩查、檢測(cè)和診斷中的應(yīng)用具有如下優(yōu)勢(shì)：質(zhì)譜技術(shù)具有突出的特異性；靈敏度高也是質(zhì)譜技術(shù)的另外一個(gè)突出優(yōu)勢(shì)；質(zhì)譜技術(shù)具有多通道檢測(cè)能力，可以同時(shí)檢測(cè)多種化合物，因此通量較高，所需樣本量少。

2 質(zhì)譜技術(shù)在出生缺陷一級(jí)預(yù)防中的應(yīng)用

出生缺陷的一級(jí)預(yù)防手段主要是通過(guò)婚前、孕前醫(yī)學(xué)檢查和胚胎植入前遺傳學(xué)診斷 （Preimplantation Genetic Diagnosis，PGD）實(shí)現(xiàn)。通過(guò)婚前、孕前篩查和PGD 防治出生缺陷，國(guó)內(nèi)外都有成效顯著的先例。針對(duì)遺傳相關(guān)的出生缺陷，以單細(xì)胞高通量檢測(cè)方法為核心的PGD 技術(shù)，相關(guān)技術(shù)進(jìn)一步臨床應(yīng)用轉(zhuǎn)化，構(gòu)建新型、主動(dòng)、精準(zhǔn)且高效的遺傳性出生缺陷孕前發(fā)現(xiàn)診斷、胚胎植入前即可阻斷的出生缺陷防控新模式，創(chuàng)建有特色優(yōu)生和防控關(guān)口前移的新模式。PGD 技術(shù)是對(duì)胚胎或極體或卵子行卵裂球/滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行活檢，開展染色體和/或基因組學(xué)篩查檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果可提示胚胎攜帶的遺傳變異情況，進(jìn)而疾病的精準(zhǔn)分類和精準(zhǔn)診斷，選擇未攜帶基因和染色體異常的胚胎植入子宮進(jìn)而出生健康新生兒的方法。PGD 技術(shù)可以從根源上解決生育遺傳性出生缺陷問(wèn)題，其通過(guò)只移植健康胚胎，進(jìn)而可以進(jìn)行一級(jí)預(yù)防遺傳相關(guān)出生缺陷新生兒的出生，可以避免產(chǎn)前診斷有創(chuàng)性操作導(dǎo)致的感染、出血以及流產(chǎn)等并發(fā)癥發(fā)生，避免孕婦懷遺傳病胎兒時(shí)經(jīng)受的身心損害，并且徹底阻斷了致病基因遺傳，真正實(shí)現(xiàn)了優(yōu)生優(yōu)育，是目前臨床精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)應(yīng)用的典范[6]。

在婚前孕前醫(yī)學(xué)檢查和PGD 中，脫氧核糖核酸分析對(duì)于遺傳性出生缺陷的風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警、篩查和檢測(cè)非常重要，因此,建立和發(fā)展靈敏、快速、高效和精準(zhǔn)的DNA 各種性質(zhì)的分析方法具有重要意義。在20 世紀(jì) 80 年代末，Tanaka 等提出基體輔助激光解吸電離技術(shù)，并與飛行時(shí)間質(zhì)譜相結(jié)合，產(chǎn)生了“軟”電離的基體輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)，目前，MALDI-TOF-MS已被應(yīng)用于脊髓性肌肉萎縮癥基因檢測(cè)、地中海貧血基因檢測(cè)、G6PD 基因突變檢測(cè)和葉酸代謝相關(guān)基因檢測(cè)等[7,8]。傳統(tǒng)的DNA 分析方法主要有熒光定量PCR、數(shù)值化PCR 和毛細(xì)管測(cè)序法，其缺點(diǎn)是通量較低單次分析檢測(cè)的位點(diǎn)少，新興的基因芯片法、二代測(cè)序和單分子測(cè)序用于DNA 分析優(yōu)點(diǎn)是高通量且獲得的信息量大，其缺點(diǎn)是成本高、周期長(zhǎng)、操作復(fù)雜、解讀難，而飛行時(shí)間質(zhì)譜用于DNA 分析具有中通量且可以多基因多位點(diǎn)分析，具有準(zhǔn)確、快速、經(jīng)濟(jì)的優(yōu)點(diǎn)。

神經(jīng)管畸形 ( Neural tube defects，NTDs) 是指神經(jīng)管具有缺陷導(dǎo)致的嚴(yán)重先天性畸形，補(bǔ)充合適劑量的葉酸是降低NTDs 發(fā)病率的重要預(yù)防措施。然而，葉酸過(guò)量也存在一定的副反應(yīng)：過(guò)量劑量的葉酸會(huì)掩蓋進(jìn)而加重維生素B12缺乏引發(fā)的相關(guān)癥狀，過(guò)量劑量的葉酸不適合預(yù)防NTDs，還可能會(huì)引發(fā)智力及發(fā)育障礙等。再者也不是所有的NTDs 通過(guò)補(bǔ)充葉酸都可以進(jìn)行預(yù)防。因此葉酸及其代謝產(chǎn)物的分析檢測(cè)對(duì)于NTDs 風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)和評(píng)估及指導(dǎo)精準(zhǔn)補(bǔ)充葉酸非常重要。黃敏等[9]建立了基于液相色譜質(zhì)譜方法的葉酸及葉酸的代謝產(chǎn)物5-甲酰基四氫葉酸、5-甲基四氫葉酸、同型半胱氨酸、組氨酸和絲氨酸的檢測(cè)方法并用于NTDs 的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和預(yù)測(cè)具有很好的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值。

早期生命的各種影響因素是生命體出現(xiàn)疾病的最早影響因素，這種作用甚至可以決定個(gè)體未來(lái)的健康情況。Baker 等發(fā)表 “成人疾病胎源學(xué)說(shuō)”，該學(xué)說(shuō)認(rèn)為宮內(nèi)受到有害因素暴露或營(yíng)養(yǎng)不良，會(huì)導(dǎo)致胎兒的組織器官在功能和結(jié)構(gòu)上發(fā)生程序性或永久性改變，這些變化增加了出生缺陷的風(fēng)險(xiǎn)。目前我國(guó)環(huán)境污染形勢(shì)嚴(yán)峻，孕前進(jìn)行環(huán)境有害物質(zhì)暴露水平的檢測(cè)和評(píng)估對(duì)預(yù)防出生缺陷有重要意義。要準(zhǔn)確真實(shí)評(píng)估環(huán)境有害物質(zhì)暴露水平和劑量，首先得建立高靈敏度、高特異性、高通量且穩(wěn)定性好的分析檢測(cè)方法。質(zhì)譜技術(shù)由于其在靈敏度和特異性上的突出優(yōu)勢(shì)，適合于復(fù)雜臨床生物樣本的分析檢測(cè)，越來(lái)越受到重視。Yang BC 等[10]發(fā)展了固相基底電噴霧電離直接質(zhì)譜技術(shù)，在無(wú)需樣品預(yù)處理的情況下，以醫(yī)用棉簽取樣后直接耦合在納升電噴霧電離質(zhì)譜儀上，實(shí)現(xiàn)了尼古丁和可替寧直接快速定性定量分析，1min 內(nèi)可以完成一個(gè)樣本的檢測(cè)，大大提高了分析速度，節(jié)約時(shí)間的同時(shí)也節(jié)約了大量溶劑成本。經(jīng)濟(jì)飛速發(fā)展同時(shí)帶來(lái)了城市機(jī)動(dòng)車輛的快速增長(zhǎng)，冬季燃煤取暖和機(jī)動(dòng)車尾氣排放造成的環(huán)境污染問(wèn)題日益突出，多環(huán)芳烴化合物就是不可忽視的重點(diǎn)污染物之一。來(lái)自世界范圍的多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)人體尿液中多環(huán)芳烴代謝物檢出率大于90%，提示人類普遍暴露于多環(huán)芳烴。近年來(lái)評(píng)估人體接觸多環(huán)芳烴的暴露情況已成為新的研究熱點(diǎn)，目前研究表明多環(huán)芳烴具有致癌、致突變和發(fā)育毒性，而孕婦作為易感人群，孕前及婚前進(jìn)行多環(huán)芳烴暴露水平的評(píng)估對(duì)于指導(dǎo)生育具有重要意義，Yang BC 等[11]發(fā)展了固相微萃取-玻璃毛細(xì)管納升電噴霧電離質(zhì)譜技術(shù)，在無(wú)需樣品預(yù)處理的情況下，實(shí)現(xiàn)了人尿液中多環(huán)芳烴六種代謝物的快速定性定量分析，1 分鐘內(nèi)可以完成一個(gè)樣本的檢測(cè)，大大提高了分析速度。

3 質(zhì)譜技術(shù)在出生缺陷二級(jí)預(yù)防中的應(yīng)用

產(chǎn)前篩查和產(chǎn)前診斷是預(yù)防出生缺陷的第二道防線。采用 PCR 技術(shù)、Sanger 測(cè)序技術(shù)、SNP array 和NGS 對(duì)羊水細(xì)胞或絨毛膜組織基因檢測(cè)在遺傳代謝缺陷病的產(chǎn)前診斷中發(fā)揮著重要作用，基因檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)是準(zhǔn)確，可明確是患者、攜帶者或無(wú)攜帶，缺點(diǎn)是基因型和表型相關(guān)性問(wèn)題：?jiǎn)蝹€(gè)遺傳基因座的不同突變可以不同的疾病，并且不同的個(gè)體中相同的突變可以引起不同嚴(yán)重程度的疾病?；蚪M學(xué)結(jié)果反映的是什么是可以發(fā)生的，轉(zhuǎn)錄組學(xué)結(jié)果反映的是什么是即將發(fā)生的，蛋白質(zhì)組學(xué)結(jié)果反映的是什么是正在發(fā)生的，只有代謝組學(xué)結(jié)果才真正反映什么是已發(fā)生的，因此采用質(zhì)譜方法檢測(cè)羊水中代謝產(chǎn)物水平的變化有助于一些遺傳代謝缺陷病的明確產(chǎn)前診斷，且羊水代謝產(chǎn)物檢測(cè)分析速度更快。如在有機(jī)酸血癥胎兒的產(chǎn)前診斷中，健康孕婦羊水里?；鈮A水平和有機(jī)酸代謝產(chǎn)物濃度都很低，但懷有有機(jī)酸血癥胎兒的孕婦羊水中這些?；鈮A和有機(jī)酸代謝產(chǎn)物會(huì)顯著增高，結(jié)合基因檢測(cè)的結(jié)果和羊水氣相色譜質(zhì)譜代謝產(chǎn)物測(cè)定結(jié)果,有助于提高產(chǎn)前診斷的準(zhǔn)確性。并且在不同孕期孕婦羊水中有機(jī)酸和?；鈮A水平并無(wú)明顯差異。韓鳳等[12]探討了氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)及液相色譜質(zhì)譜測(cè)定羊水中的有機(jī)酸即酰基肉堿水平用于丙酸血癥胎兒產(chǎn)前診斷的應(yīng)用價(jià)值。收集40 例進(jìn)行產(chǎn)前診斷且生育過(guò)丙酸血癥患兒的孕婦作為丙酸血癥母親組。從同期進(jìn)行常規(guī)產(chǎn)前診斷孕婦中隨機(jī)選取40例作為對(duì)照組。兩組孕婦都是在妊娠16～20 周通過(guò)羊膜腔穿刺術(shù)抽取得到羊水，然后通過(guò)液相色譜質(zhì)譜測(cè)定羊水丙酰肉堿和乙酰肉堿濃度,通過(guò)氣相色譜質(zhì)譜測(cè)定羊水中甲基枸櫞酸和3-羥基丙酸濃度,羊水細(xì)胞進(jìn)行基因檢測(cè)。結(jié)果丙酸血癥母親組孕婦羊水丙酰肉堿和甲基枸櫞酸水平均高于對(duì)照組,可利用串聯(lián)質(zhì)譜及氣相色譜質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)羊水中的丙酰肉堿、甲基枸櫞酸水平,對(duì)先證者為丙酸血癥的孕婦進(jìn)行產(chǎn)前診斷。

地中海貧血是世界上最常見(jiàn)的單基因遺傳病之一，通過(guò)二級(jí)預(yù)防產(chǎn)前診斷是地中海貧血防控的重要措施之一，母血漿胎兒游離核酸的發(fā)現(xiàn)為地貧的無(wú)創(chuàng)性產(chǎn)前診斷提供了新的途徑。近些年來(lái),飛行時(shí)間質(zhì)譜分析已應(yīng)用于針對(duì)地貧遺傳缺陷(特別是β 地貧點(diǎn)突變)的母血漿胎兒游離DNA 檢測(cè)[13]。

4 質(zhì)譜技術(shù)在出生缺陷三級(jí)預(yù)防中的應(yīng)用

新生兒篩查是預(yù)防出生缺陷的最后一道防線。1990 年時(shí)來(lái)自美國(guó)杜克大學(xué)的陳垣崇教授團(tuán)隊(duì)成員Millington 博士率先提出采用串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)開展新生兒遺傳代謝性疾病的篩查[14]。1995 年時(shí)Rashed 等利用電噴霧電離質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)行新生兒代謝性疾病的篩查，篩查出丙酸血癥、短鏈及中鏈?；o酶A 脫氫酶缺乏癥、甲基丙二酸血癥等多種遺傳代謝病[15]。電噴霧電離質(zhì)譜技術(shù)是一種軟電離技術(shù)，該技術(shù)與自動(dòng)連續(xù)進(jìn)樣器聯(lián)用，應(yīng)用自動(dòng)進(jìn)樣器提升了分析的速度和準(zhǔn)確度，使得分析通量大大提升，為大規(guī)模進(jìn)行新生兒遺傳代謝病篩查奠定了有利條件，從此各新生兒疾病篩查實(shí)驗(yàn)室開始使用串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)行新生兒遺傳代謝病篩查。

采用串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)行新生兒遺傳代謝病篩查，其在2-3 分鐘內(nèi)對(duì)每個(gè)標(biāo)本可同時(shí)測(cè)定幾十種小分子代謝物，測(cè)定物質(zhì)包括氨基酸及脂肪酸線粒體氧化代謝紊亂和有機(jī)酸障礙在內(nèi)的40 余種遺傳代謝性疾病，使得新生兒遺傳代謝性疾病的篩查從“一次實(shí)驗(yàn)只能篩查一種疾病”向“一次實(shí)驗(yàn)可篩查多種疾病” 轉(zhuǎn)變，質(zhì)技術(shù)具有靈敏度高、、分析速度快且分析通量高的優(yōu)點(diǎn)，質(zhì)譜技術(shù)應(yīng)用于新生兒遺傳代謝病篩查不僅增加了篩查疾病的病種，還大大提高了篩查的速率及篩查的準(zhǔn)確性和特異性，進(jìn)而使得新生兒遺傳代謝病的篩查進(jìn)入到新紀(jì)元。

串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)通過(guò)聯(lián)合二級(jí)檢驗(yàn)指標(biāo)能夠有效地改善傳統(tǒng)篩查性能。比如，先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥常規(guī)篩查的生物標(biāo)志物是17α-羥孕酮，但假陽(yáng)性率很高。Minutti 等[16]發(fā)展了基于 液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)同時(shí)測(cè)定血斑中雄烯二酮、17α-羥孕酮等類固醇類物質(zhì)，這種二級(jí)篩查能夠識(shí)別常規(guī)篩查中的假陽(yáng)性結(jié)果。11β-羥化酶缺陷癥引發(fā)的先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥較為罕見(jiàn)，其不是新生兒遺傳代謝病篩查檢測(cè)的主要疾病。然而標(biāo)準(zhǔn)的免疫實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)中，患兒的17α-羥孕酮水平會(huì)輕度增加。Peter 等[17]發(fā)展了基于 液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)通過(guò)免疫測(cè)定法發(fā)現(xiàn)的17α-羥孕酮濃度增高的患兒的血片進(jìn)行二級(jí)篩查檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)這種血片中雄烯二酮和11-脫氧皮質(zhì)醇水平升高，而皮質(zhì)醇濃度降低，結(jié)合家族病史即可診斷為11β-羥化酶缺陷癥。通過(guò)濾紙干血斑檢測(cè)總高胱氨酸水平已成為現(xiàn)實(shí)，就是在出生后3 天內(nèi)采濾紙干血斑，這種檢測(cè)方法的敏感性還可達(dá)到100%，因此可以發(fā)展為新生兒高胱氨酸尿癥檢測(cè)首選方法。再而，串聯(lián)質(zhì)譜遺傳代謝病的陽(yáng)性篩查結(jié)果不僅僅是一種代謝物的水平的變化，還可以多指標(biāo)提示，這大大提高了遺傳代謝病篩查的特異性和敏感性，使得篩查檢出率比臨床診斷更高。

采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)尿液中有機(jī)酸水平對(duì)于有機(jī)酸血癥等遺傳代謝缺陷病的篩查、診斷和鑒別診斷具有重要作用，與串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)濾紙干血斑中的氨基酸肉堿水平相比，氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)尿液中有機(jī)酸水平操作復(fù)查，通量較低，限制了其大規(guī)模開展，下一步有必要研發(fā)簡(jiǎn)便快速高通量準(zhǔn)確的尿液中有機(jī)酸水平質(zhì)譜分析檢測(cè)方法。

溶酶體貯積癥由于基因突變引發(fā)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白或溶酶體酶缺乏進(jìn)而造成底物在溶酶體內(nèi)聚集而引發(fā)的一類遺傳代謝疾病，多數(shù)為常染色體隱性遺傳，也有部分為X 染色體連鎖遺傳。溶酶體貯積癥會(huì)損傷全身多種器官，首先是中樞神經(jīng)系統(tǒng)，溶酶體貯積癥的臨床癥狀具有進(jìn)行性發(fā)展特點(diǎn)，如果沒(méi)有及時(shí)治療或許引發(fā)患者死亡或終身殘疾。我國(guó)大陸目前還沒(méi)有進(jìn)行新生兒溶酶體貯積癥的群體篩查，造成許多溶酶體貯積癥患兒無(wú)法早發(fā)現(xiàn)早治療，因此開展新生兒溶酶體貯積癥群體篩查有重要意義。溶酶體貯積癥的群體篩查方法主要有：質(zhì)譜技術(shù)、多免疫定量法和熒光法。熒光法由于非特異性其不能同時(shí)測(cè)定多種酶的活性因此假陽(yáng)性高，多免疫定量法目前還沒(méi)批準(zhǔn)試劑盒，而質(zhì)譜技術(shù)具有準(zhǔn)確度高、靈敏度好且一次檢測(cè)篩查發(fā)現(xiàn)多種疾病，因而在溶酶體貯積癥群體篩查中有優(yōu)勢(shì)。萬(wàn)智慧等[18]利用串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)6 種溶酶體貯積癥：戈謝病、尼曼匹克病A/B、克拉伯病、黏多糖貯積癥I 型、法布里病和龐貝病的篩查指標(biāo)，評(píng)估質(zhì)譜方法用于新生兒6 種溶酶體貯積癥篩查的可行性。結(jié)果表明質(zhì)譜方法適用于6 種溶酶體貯積癥的新生兒篩查，也可用于相關(guān)6 種溶酶體貯積癥患者治療后的酶活監(jiān)測(cè)，為串聯(lián)質(zhì)譜法篩查溶酶體貯積癥奠定了基礎(chǔ)。

我國(guó)現(xiàn)在殘疾人8296 萬(wàn)，其中聽(tīng)力障礙人群高達(dá)2780 萬(wàn)。遺傳因素是致聾的主要因素之一，新生兒物理聽(tīng)力篩查聯(lián)合耳聾基因篩查是防聾控聾的最佳策略。付華鈺等[19]比較了芯片法和飛行時(shí)間質(zhì)譜法在非綜合征性耳聾基因篩查中的應(yīng)用，發(fā)現(xiàn)兩種方法檢測(cè)結(jié)果并無(wú)顯著差異，飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)的檢測(cè)位點(diǎn)多且檢出率高，這在一定程度可減少漏篩率，在大規(guī)模人群耳聾基因篩查中有其優(yōu)勢(shì)，但飛行質(zhì)譜方法方法所需的儀器設(shè)備成本較高，對(duì)檢測(cè)人員的專業(yè)水平要求較高。

5 結(jié)語(yǔ)

質(zhì)譜技術(shù)在出生缺陷三級(jí)預(yù)防中均有所應(yīng)用，但應(yīng)用最為廣泛的是串聯(lián)質(zhì)譜新生兒遺傳代謝病篩查，其優(yōu)勢(shì)在于操作方便、高通量、篩查病種多。質(zhì)譜技術(shù)優(yōu)勢(shì)是靈敏度高、特異性好、可多通道檢測(cè)同時(shí)檢測(cè)多種化合物。質(zhì)譜技術(shù)出生缺陷的進(jìn)一步應(yīng)用存在一些瓶頸，如影響結(jié)果可靠性和重現(xiàn)性的因素多；如基質(zhì)效應(yīng)、干擾、源內(nèi)變構(gòu)及方法標(biāo)準(zhǔn)化跟免疫法比較，質(zhì)譜法自動(dòng)化程度還是很低，需要樣品處理和色譜分離，手工操作難以避免，難以實(shí)現(xiàn)隨機(jī)插入同時(shí)也面臨法規(guī)上的瓶頸；如相關(guān)規(guī)范性文件和收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。