抗苗勒管激素和促卵泡激素等聯(lián)合檢測在不孕癥患者卵巢儲備功能中的價值研究

蔣毅，呂玉珍，劉祎琳

(焦作市婦幼保健院，河南 焦作 454000)

女性在未采取任何避孕對策且1年以上未懷孕即為不孕癥。據(jù)有關(guān)資料顯示[1]，我國大約10%的女性存在不孕癥，且患病人數(shù)越來越多，該病癥的存在對夫妻正常生活造成了嚴重影響，而且影響了家庭和諧與穩(wěn)定，同時也發(fā)展成育齡夫婦面臨的主要問題[2]。近年來，隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展，輔助生殖技術(shù)(ART)不斷完善，ART治療期間，患者卵巢儲備能力在輔助生殖技術(shù)選擇中具有重要作用，根據(jù)卵巢有關(guān)指標可對卵巢狀況進行有效判斷，準確評價卵巢儲備功能[3]。基于此，本研究選擇不孕癥患者為研究對象，探討抗苗勒管激素(AMH)、雌激素(E2)、促卵泡激素(FSH)、黃體生成素(LH)對其卵巢儲備功能的預(yù)測價值，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年1月—2018年12月采取體內(nèi)受精不孕患者68 例，以獲取卵泡數(shù)目為依據(jù)分為卵巢低反應(yīng)組(n=28)與卵巢正常反應(yīng)組(n=40)。卵泡低反應(yīng)組患者年齡(30.21±2.41) 歲，不孕時間(3.31±0.35) 年；卵巢正常反應(yīng)組患者年齡(30.18±2.38) 歲；不孕時間(3.28±0.36) 年。兩組患者月經(jīng)均正常、規(guī)律，無卵巢手術(shù)史。本研究經(jīng)我院倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 藥物、設(shè)備及試劑

藥物包括促性腺激素(Gn)、促性腺激素釋放激素激動劑(GnRH-a)。采用德國西門子CENTAUR XP全自動化學(xué)發(fā)光儀檢測LH，E2和FSH，聯(lián)合配套試劑。采取羅氏Cobas E601電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測AMH，并聯(lián)合配套試劑。

1.2.2 方法

1.2.2.1 檢測系統(tǒng)性能驗證試驗

根據(jù)美國臨床及實驗室標準化協(xié)會(CLSI)EP15-A2文件及其相關(guān)說明書，分別驗證羅氏Cobas E601電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀與德國西門子CENTAUR XP全自動化學(xué)發(fā)光儀的正確度及精密度。經(jīng)檢測均符合標準，與臨床檢測需求相符。全面落實標準中的質(zhì)量控制，并按照操作步驟進行校準。每日與質(zhì)量控制下開展標本檢測，確保檢測質(zhì)量。

1.2.2.2 檢測方法

治療1 個月前，予以GnRH-a 1 mg注射，目的是對垂體進行調(diào)節(jié)，14 d后檢測血清中各激素水平，與降低要求相符時，也就是E2在50 pg/mL以下、卵泡直徑在10 mm以下和LH在5 mIU/mL以下時，予以促性腺激素，加快排卵速度，在此過程中，檢測卵泡大小、LH和E2水平，并于第3天檢測基礎(chǔ)黃體生成激素(bLH)、基礎(chǔ)FSH(bFSH)、AMH及基礎(chǔ)雌二醇(bE2)，收集3 mL肘靜脈血液，置于干燥紅色血管中，以3 000 r/min的速度離心10 min，血清分離后進行檢測。采用化學(xué)發(fā)光法檢測bFSH，bE2及bLH水平，電化學(xué)發(fā)光法檢測AMH水平，嚴格落實每項操作步驟。

1.3 觀察指標

比較各組卵巢儲備各參數(shù)值，通過ROC曲線分析聯(lián)合預(yù)測卵巢低反應(yīng)率、AMH，bE2，bFSH/bLH，bFSH及bLH，并分析每個指標ROC曲線特異度及靈敏度。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 兩組卵巢儲備各參數(shù)值比較

兩組bE2水平及不孕時間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；卵巢正常反應(yīng)組的獲卵數(shù)、AFC，AMH，bLH高于卵巢低反應(yīng)組，而bFSH及bFSH/bLH低于卵巢低反應(yīng)組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)(見表1)。

表1 比較兩組卵巢儲備各參數(shù)值

2.2 bFSH，bE2，AMH，bFSH/bLH及卵巢低反應(yīng)率聯(lián)合預(yù)測的ROC曲線分析

AMH，bE2，bFSH，bFSH/bLH及聯(lián)合預(yù)測這四項指標的線下面積(AUC)值分別是(0.79±0.12)，(0.54±0.01)，(0.61±0.08)，(0.68±0.05)和(0.89±0.09)。其中，bE2的AUC值與參考值比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；AMH，bFSH/bLH，bFSH及聯(lián)合預(yù)測的AUC均大于參考線，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，通常情況下，0.50.9以上說明診斷值較高。bFSH，bE2，AMH，bFSH/bLH及卵巢低反應(yīng)率聯(lián)合預(yù)測ROC曲線分析特異度及靈敏度見表2。

表2 各指標ROC曲線分析特異度與靈敏度分析 %

3 討 論

近些年來，我國女性不孕癥患者越來越多，目前，多用ART方法進行治療。人工授精指通過非性交方法向女性生殖道傳遞精子，以此實現(xiàn)女性受孕，該方式屬于輔助生殖技術(shù)[4]。就排卵障礙患者而言，治療原則為加快排卵速度，在此期間密切監(jiān)測卵巢儲備功能具有重要作用。女性卵巢儲備功能指女性卵巢分泌卵子的質(zhì)量及數(shù)目能力[5]?，F(xiàn)階段，評價指標中常用AFC，E2，AMH，F(xiàn)SH及LH等，其中檢測操作方便的指標包括bLH，bE2，F(xiàn)SH，上述指標適用范圍越來越廣。AMH指的是卵巢竇卵泡顆粒細胞中分泌的活性因子，其為近幾年評價提供了新指標。據(jù)有關(guān)資料顯示[6]，年齡超過25 歲女性卵巢儲備功能評價指標中，AMH具有重要作用，早期年齡越大，AMH水平越低，其能夠有效預(yù)測女性卵巢儲備功能，而且與月經(jīng)周期無關(guān)，具備較強的穩(wěn)定性。相關(guān)研究表明[7]，AMH在卵巢反應(yīng)預(yù)測中具有較高的特異度與靈敏度。AMH可用于卵巢儲備檢測及卵巢刺激反應(yīng)預(yù)測，所以，AMH是加快排卵個體治療中非常重要的一項指標[8]。ROC曲線可以從客觀角度對檢測中多項指標進行評價，AUC值與診斷價值成正相關(guān)[8]。

女性卵泡數(shù)量隨著年齡的增加越來越少，而且卵泡對促性腺激素敏感度與卵巢儲備功能逐漸降低。據(jù)有關(guān)資料顯示，女性30 歲以后，生育能力越來越低，而且35 歲后降低速度加快顯著，40 歲后妊娠率較低。通過本次研究發(fā)現(xiàn)，卵巢反應(yīng)性隨著年齡的提高越來越低。機體在產(chǎn)生卵泡時，血清E2水平提高明顯，所以，卵巢儲備功能檢測中，bE2具有較高的應(yīng)用價值。相關(guān)資料表明[9]，卵巢低反應(yīng)診斷中，血清E2具有較低的靈敏度與特異度。本研究中卵巢正常反應(yīng)組的bE2水平低于卵巢低反應(yīng)組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；通過分析ROC曲線，AUC值在0.7以下，具有較低的診斷值，而且較聯(lián)合檢測值低，由此可見，卵巢低反應(yīng)監(jiān)測中，bE2具有較低的診斷價值。bFSH從一定程度上反映卵巢儲備功能，而且兩者成反比，bFSH水平越高儲備功能越低[9]。本研究中卵巢正常反應(yīng)組的bFSH低于卵巢低反應(yīng)組。通過分析ROC曲線，AUC在0.6以上，屬于中等診斷值范圍內(nèi)。bFSH/bLH提高則表示卵巢儲備功能降低，同bLH及bFSH相比，其特異度、靈敏度更高。隨著年齡的增加，AMH水平越來越高，直至青春期，25 歲后，該指標水平逐漸降低，絕經(jīng)期則可能無法準確檢測出。由此可見，AMH水平直接影響著卵巢儲備，而且同獲卵數(shù)成正比。本次實驗結(jié)果顯示，在AMH水平及獲卵數(shù)方面，卵巢低反應(yīng)組明顯降低。通過分析ROC曲線可知，AUC水平在0.7以上，而且相比于其他激素，具有較高的靈敏度、特異度，但是聯(lián)合4項指標，卵巢儲備功能檢測中診斷價值較高[10]。

總而言之，卵巢儲備功能診斷期間，聯(lián)合LH，AMH，E2和FSH 4項指標有助于提高診斷準確率，具有較高的應(yīng)用價值。