牧場(chǎng)無乳鏈球菌的危害與清除計(jì)劃實(shí)施要點(diǎn)

文/黃 凱 韓 超

〔默沙東動(dòng)物保健品（上海）有限公司〕

乳房炎是導(dǎo)致牧場(chǎng)損失最嚴(yán)重的一種疾病，從病原方面，可以簡(jiǎn)單的分為傳染性乳房炎和環(huán)境性乳房炎兩大類。近年來，越來越多的牧場(chǎng)受困于傳染性乳房炎，盡管國(guó)內(nèi)很多奶業(yè)專家經(jīng)常提到如何防控金黃色葡萄球菌、支原體等傳染性致病菌，但對(duì)于無乳鏈球菌的危害及如何防控涉及較少，牧場(chǎng)對(duì)其也缺乏認(rèn)識(shí)。

1 無乳鏈球菌概述

無乳鏈球菌屬于鏈球菌屬的一員，在顯微鏡下，其染色、形態(tài)方面與其他鏈球菌無顯著區(qū)別。1 9 3 0 年，人們首次發(fā)現(xiàn)無乳鏈球菌可導(dǎo)致奶牛乳腺感染，此前人們只知其可以引發(fā)人類疾病。無乳鏈球菌是一種傳播能力非常強(qiáng)的細(xì)菌，曾在國(guó)外牧場(chǎng)引起過多次大流行，使牧場(chǎng)損失慘重。根據(jù)筆者近幾年服務(wù)牧場(chǎng)積累的臨床經(jīng)驗(yàn)，此病菌已在國(guó)內(nèi)牧場(chǎng)開始流行，并給牧場(chǎng)帶來了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

1.1 生物學(xué)特點(diǎn)

無乳鏈球菌具備兩個(gè)生物學(xué)特點(diǎn)，一是將無乳鏈球菌在-20 ℃下凍存，不會(huì)影響細(xì)菌分離結(jié)果。若牧場(chǎng)不具備檢測(cè)無乳鏈球菌的能力，可以將生鮮乳樣本凍存，送出去檢測(cè)。二是無乳鏈球菌在27 ℃以下不會(huì)快速繁殖。牧場(chǎng)的制冷罐能將生鮮乳的溫度快速降到27 ℃以下，并最終降至4 ℃左右，這意味著，如果在大罐奶中檢出大量無乳鏈球菌，說明其不是在奶罐中快速繁殖的，而是因?yàn)榕Ｈ褐杏写罅颗Ｖ槐桓腥舅隆?/p>

1.2 危害

1.2.1 牧場(chǎng)內(nèi)感染率升高

當(dāng)牛群感染了無乳鏈球菌，奶牛并不會(huì)立即表現(xiàn)出臨床癥狀，大部分牛只是隱性感染。對(duì)北京和南方的某些牧場(chǎng)進(jìn)行全群檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)，無乳鏈球菌造成牧場(chǎng)內(nèi)乳房炎高發(fā)，感染率為10%～30%；若感染率超過30%，則約有15%的牛只會(huì)表現(xiàn)出臨床癥狀。美國(guó)曾在1982年開展過乳房炎致病菌的相關(guān)研究，結(jié)果顯示，無乳鏈球菌感染率較高，這可能與當(dāng)時(shí)還沒有很好地推廣擠奶前藥浴和大范圍使用干奶藥有關(guān)。這給牧場(chǎng)一個(gè)警示，如果牧場(chǎng)不重視無乳鏈球菌，一旦奶牛感染且不加控制，感染率將會(huì)快速升高[1]。

1.2.2 大罐奶體細(xì)胞數(shù)和細(xì)菌數(shù)升高

如果奶牛感染了無乳鏈球菌，在感染早期階段便可大量散播該菌，同時(shí)也會(huì)引起大量的乳腺上皮細(xì)胞脫落，引起白細(xì)胞聚集，使大罐奶中的體細(xì)胞數(shù)和細(xì)菌數(shù)升高。

1.2.3 慢性復(fù)發(fā)病例增加

牧場(chǎng)常認(rèn)為無乳鏈球菌造成的奶牛亞臨床性乳房炎是慢性的、不顯著的，易被忽略的。但實(shí)踐中，無乳鏈球菌會(huì)對(duì)乳腺組織造成不可逆的損傷，使奶牛乳腺形成膿腫纖維化和結(jié)締組織增生，而乳腺組織一旦形成損傷，藥物是無法徹底治愈的，將導(dǎo)致奶牛乳房炎復(fù)發(fā)病例增多。

1.3 來源及傳播特點(diǎn)

1.3.1 來源

牧場(chǎng)購買了無乳鏈球菌陽性的成母牛是該菌在牧場(chǎng)存在的最主要原因。購買青年牛的傳播風(fēng)險(xiǎn)幾乎為零。因此，購入成母牛之前，要逐一進(jìn)行無乳鏈球菌的檢測(cè)，以排除感染風(fēng)險(xiǎn)[2]。牧場(chǎng)自繁自養(yǎng)，無外來牛群調(diào)入，可大大減少該菌的感染風(fēng)險(xiǎn)。

1.3.2 傳播特點(diǎn)

（1）具有極強(qiáng)的傳染性

無乳鏈球菌具有極強(qiáng)的傳染性，在牛群中能很快傳播。當(dāng)大罐奶中的體細(xì)胞數(shù)或牛群發(fā)病率明顯上升時(shí)，牛群內(nèi)的亞臨床感染可能已經(jīng)超過20%。大量的亞臨床感染病例會(huì)轉(zhuǎn)變?yōu)榕R床病例且不停傳播，若此時(shí)僅治療臨床病例，而不干預(yù)亞臨床病例，牧場(chǎng)將會(huì)陷入無休止的惡性循環(huán)，導(dǎo)致?lián)p失慘重[3]。

（2）乳腺專性寄生菌

無乳鏈球菌是乳腺專性寄生菌，只存在于感染的奶牛乳房?jī)?nèi)，在環(huán)境中不能存活[3]。無乳鏈球菌無法在乳頭皮膚和乳頭孔處定植，其生存必須借助乳腺內(nèi)的特殊環(huán)境，離開乳腺之后很快就會(huì)死亡。因此，即使體外環(huán)境合適，該菌也不具有傳染的特點(diǎn)。因此，防控?zé)o乳鏈球菌的關(guān)鍵是隔離陽性牛，切斷傳播途徑。

（3）擠奶過程是牧場(chǎng)內(nèi)傳播的主要途徑

擠奶過程是無乳鏈球菌在泌乳牛間傳播的唯一途徑。在擠奶衛(wèi)生操作不規(guī)范和乳頭藥浴執(zhí)行不到位的牧場(chǎng)中，無乳鏈球菌很容易在擠奶過程中感染健康牛的乳腺[4]。該菌可通過毛巾、奶襯、擠奶人員的手感染陰性乳區(qū)及臨近的奶牛。另外，給犢牛飼喂無乳鏈球菌病牛所產(chǎn)的奶，也存在感染風(fēng)險(xiǎn)，犢牛成年后易形成瞎乳區(qū)或分娩時(shí)已經(jīng)罹患臨床乳房炎。疑似感染無乳鏈球菌的大青年牛分娩后如不加以檢測(cè)識(shí)別，及時(shí)隔離治療，將會(huì)成為新的感染源。

（4）可被凈化

與支原體和金黃色葡萄球菌不同的是，無乳鏈球菌對(duì)于頭孢類抗生素高度敏感，新發(fā)病例可以被完全徹底治愈。臨床生產(chǎn)中配合相應(yīng)的檢測(cè)隔離治療方案即實(shí)施無乳鏈球菌清除計(jì)劃，完全有可能清除牛群中的無乳鏈球菌，進(jìn)而達(dá)到凈化牛群的目的。

2 國(guó)內(nèi)外流行狀況及生產(chǎn)實(shí)踐中存在的問題

2.1 歐美流行狀況

在歐美國(guó)家的牧場(chǎng)中，無乳鏈球菌曾經(jīng)是一種主要的奶牛致病菌。以美國(guó)為例，曾經(jīng)爆發(fā)了3次無乳鏈球菌全國(guó)大流行，每次流行都伴隨著奶牛養(yǎng)殖模式的更迭。最近一次大流行發(fā)生在1990—2000年間，這個(gè)時(shí)期美國(guó)流行大型牧場(chǎng)的興建，牛群在牧場(chǎng)間的流動(dòng)加快了無乳鏈球菌的流行。20世紀(jì)90年代，有學(xué)者在美國(guó)東北部的福蒙特州和南部的密西西比州開展無乳鏈球菌的流行病學(xué)調(diào)查，其中密西西比州是養(yǎng)奶牛大省，在調(diào)查的998 個(gè)牛場(chǎng)中，435 個(gè)牧場(chǎng)無乳鏈球菌陽性，陽性率高達(dá)43.59%；在福蒙特州調(diào)查的2 931 個(gè)牧場(chǎng)中，1 377 個(gè)牧場(chǎng)無乳鏈球菌陽性，陽性率高達(dá)46.98%。但美國(guó)在后期通過擠奶前藥浴、干奶藥、泌乳期治療3個(gè)手段，很好地控制了無乳鏈球菌的感染。

20世紀(jì)90年代，在加拿大安大略地區(qū)調(diào)查的250個(gè)牧場(chǎng)中，106 個(gè)陽性，陽性率為42.40%[5]；魁北克地區(qū)調(diào)查的400 個(gè)牧場(chǎng)中，172 個(gè)陽性，陽性率為43.00%[6]；亞伯達(dá)省調(diào)查的1 350 個(gè)牧場(chǎng)中，148 個(gè)陽性，陽性率為10.96 %[7]。亞伯達(dá)省牧場(chǎng)陽性率相對(duì)較少的原因是亞伯達(dá)省為島嶼，牛群調(diào)動(dòng)少。

2.2 國(guó)內(nèi)流行狀況

2016年，中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)畢研亮、曹志軍等發(fā)表了關(guān)于內(nèi)蒙古、黑龍江、河北3 省規(guī)?；膛ｐB(yǎng)殖場(chǎng)乳房炎病原菌分布的調(diào)查結(jié)果[8]，即對(duì)894 個(gè)牧場(chǎng)的大罐奶樣進(jìn)行了熒光定量PCR檢測(cè)，結(jié)果顯示，大罐奶中無乳鏈球菌陽性的牧場(chǎng)達(dá)92.15%，是所調(diào)查地區(qū)導(dǎo)致奶牛乳房炎的第二大病原菌；葡萄球菌β-內(nèi)酰胺酶基因陽性牧場(chǎng)占61.65%，位列第五，說明牧場(chǎng)中耐受β內(nèi)酰胺類抗生素的葡萄球菌菌株已經(jīng)普遍存在，提示牧場(chǎng)注意抗生素的選擇，避免因?yàn)橛盟庡e(cuò)誤導(dǎo)致耐藥性進(jìn)一步增加；金黃色葡萄球菌陽性牧場(chǎng)占50.06%，位列第六，從檢測(cè)結(jié)果來看，目前國(guó)內(nèi)無乳鏈球菌的流行廣度要高于金黃色葡萄球菌，應(yīng)引起重視，尤其是有牛群調(diào)入歷史的牧場(chǎng)最好立即開展無乳鏈球菌檢測(cè)，以免傳播范圍擴(kuò)大。

南京農(nóng)業(yè)大學(xué)的研究人員在江蘇、安徽、山東、浙江、福建、江西、上海7 個(gè)地區(qū)選取了33 個(gè)牧場(chǎng)，對(duì)619 份奶樣進(jìn)行了無乳鏈球菌PCR檢測(cè)，其中場(chǎng)間陽性率為63.60%，牛只陽性率為16.40%，說明無乳鏈球菌在南方牧場(chǎng)也普遍存在[9]。

默沙東公司于2019年1月使用進(jìn)口顯色培養(yǎng)基對(duì)南方某牧場(chǎng)患有臨床乳房炎的27 份奶樣進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)患有無乳鏈球菌的奶樣占15 份，陽性率達(dá)55.56%。2019年8月又對(duì)南方某牧業(yè)集團(tuán)下屬18 個(gè)牧場(chǎng)的103份大罐奶樣進(jìn)行PCR試劑盒檢測(cè)，大罐奶陽性率為46.60%，場(chǎng)間陽性率為77.78%（14/18）。2019年9月對(duì)我國(guó)東南地區(qū)11 個(gè)牧場(chǎng)的大罐奶樣進(jìn)行調(diào)查，使用實(shí)時(shí)定量熒光PCR進(jìn)行檢測(cè)，得出無乳鏈球菌的大罐奶陽性率為27.30%，經(jīng)過分析得知，場(chǎng)間陽性率低是因?yàn)檫@些牧場(chǎng)相對(duì)集中，堅(jiān)持自繁自養(yǎng)，調(diào)入牛群少。

從以上國(guó)內(nèi)無乳鏈球菌的流行現(xiàn)狀調(diào)研情況得知，首先，很多牧場(chǎng)對(duì)無乳鏈球菌的危害沒有充分認(rèn)識(shí)，有些牧場(chǎng)甚至不知道無乳鏈球菌；其次，有些開展化驗(yàn)的牧場(chǎng)還不具備鑒別無乳鏈球菌的能力，錯(cuò)過了防控該菌流行的最佳時(shí)機(jī)；第三，牧業(yè)集團(tuán)內(nèi)部牧場(chǎng)間調(diào)牛前沒有進(jìn)行無乳鏈球菌的檢測(cè)，造成很多陰性牧場(chǎng)遭受感染，損失巨大；第四，已經(jīng)爆發(fā)無乳鏈球菌乳房炎的牧場(chǎng)，缺乏有效的防控策略。因此，國(guó)內(nèi)牧場(chǎng)應(yīng)盡快進(jìn)行無乳鏈球菌的檢測(cè)，開展相關(guān)培訓(xùn)，采取措施。

3 無乳鏈球菌的防控策略

Keefe[10]提出了針對(duì)無乳鏈球菌的三步防控策略：無乳清除計(jì)劃（檢測(cè)+治療）執(zhí)行嚴(yán)格的擠奶操作，采用有效的干奶抗生素治療。從美國(guó)多年的防控經(jīng)驗(yàn)看，該策略著實(shí)有效，但是這三步一定要同時(shí)進(jìn)行。

3.1 執(zhí)行無乳鏈球菌清除計(jì)劃

無乳鏈球菌清除計(jì)劃可以幫助牧場(chǎng)更快捷地達(dá)到控制和清除的目的[11]。針對(duì)無乳鏈球菌感染陽性牛要實(shí)施“檢測(cè)+治療”，相比通過體細(xì)胞數(shù)（超過設(shè)定的閾值）判斷為可疑陽性牛并進(jìn)行治療，或是對(duì)所有泌乳牛都進(jìn)行治療具有明顯的經(jīng)濟(jì)可行性[2]。

3.2 檢測(cè)

僅對(duì)有臨床癥狀的無乳鏈球菌病例進(jìn)行治療，無濟(jì)于事，因?yàn)榇蟛糠植∨Ｊ请[性感染，該菌仍會(huì)在牛群中快速傳播。因此，當(dāng)牛群乳房炎的發(fā)病率高時(shí)，必須主動(dòng)進(jìn)行全群檢測(cè)，篩選無乳鏈球菌感染病例。

3.3 治療

對(duì)于無乳鏈球菌亞臨床感染病例，即使其所產(chǎn)生鮮乳正常，也一定要將其隔離，單獨(dú)治療，這種方法在美國(guó)叫“閃電治療法”。治療上，選擇合適的抗生素可以事半功倍。頭孢喹肟是治療無乳鏈球菌感染的有效藥物，國(guó)外某牧場(chǎng)對(duì)627 頭泌乳牛進(jìn)行全群檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)99 頭為無乳鏈球菌亞臨床感染病例，通過頭孢喹肟進(jìn)行治療，97 頭治愈，復(fù)檢未檢出無乳鏈球菌，證明已經(jīng)徹底治愈。治愈牛與未感染牛對(duì)比，治愈牛的泌乳能力恢復(fù)正常，兩者沒有明顯差異。

實(shí)施無乳清除計(jì)劃雖然短期看花費(fèi)不菲，但綜合全部成本和收益看，其投入產(chǎn)出比約為1∶2.25，因此，具有經(jīng)濟(jì)可行性[12]。

3.3.1 執(zhí)行嚴(yán)格的擠奶操作

清除計(jì)劃需配合良好的牛體衛(wèi)生和擠奶衛(wèi)生，需要嚴(yán)格執(zhí)行乳頭藥浴，否則效果也會(huì)打折扣。前藥浴對(duì)于控制無乳鏈球菌非常重要，請(qǐng)確保使用質(zhì)量可靠的藥浴液，并確保按照說明書配制。但注意，單獨(dú)使用這種防控方案無法根除牛群中的無乳鏈球菌[13]。

3.3.2 采用有效的干奶抗生素治療

無乳鏈球菌的流行與很多因素有關(guān)，其中實(shí)施選擇性干奶是其中一個(gè)重要原因。對(duì)于可能存在無乳鏈球菌感染的牧場(chǎng)，建議全群使用青霉素成分的干奶藥。研究證明，青霉素成分的干奶藥對(duì)于無乳鏈球菌的治愈率高達(dá)95.00%（n=1 004 個(gè)乳區(qū)）[14，15]，但治愈速度相對(duì)較慢。

4 小結(jié)

牧場(chǎng)應(yīng)對(duì)無乳鏈球菌實(shí)施零容忍策略。雖然清除無乳鏈球菌，會(huì)遇到治療過程中的棄奶和藥費(fèi)等阻力，但是一旦確定牧場(chǎng)存在感染，應(yīng)盡快開展此計(jì)劃，盡早在亞臨床感染牛數(shù)量少的情況下控制，減少治療成本。另外僅針對(duì)高體細(xì)胞數(shù)牛進(jìn)行治療，已被證明存在很大紕漏，因?yàn)閬喤R床感染牛并非都會(huì)出現(xiàn)體細(xì)胞升高[12]，不徹底的治療只會(huì)增加傳染幾率，導(dǎo)致更大的損失。

在用藥方面，頭孢喹肟是第四代頭孢菌素，是目前治療無乳鏈球菌最好的藥物之一，具有殺滅病菌徹底、棄奶期短等特點(diǎn)。克百勝是全球首個(gè)此類乳區(qū)注入劑，效果確實(shí)，推薦使用。干奶時(shí)建議選用青霉素成分的干奶藥，可有效殺滅無乳鏈球菌，以防一下胎次進(jìn)入泌乳牛群再次成為傳染源。