新型冠狀病毒實(shí)驗(yàn)室生物安全指南(第二版)

中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)

根據(jù)目前掌握的新型冠狀病毒生物學(xué)特點(diǎn)、流行病學(xué)特征、致病性、臨床表現(xiàn)等信息，該病原體暫按照病原微生物危害程度分類中第二類病原微生物進(jìn)行管理。

1 實(shí)驗(yàn)活動(dòng)生物安全要求

1.1 病毒培養(yǎng) 指病毒的分離、培養(yǎng)、滴定、中和試驗(yàn)、活病毒及其蛋白純化、病毒凍干以及產(chǎn)生活病毒的重組實(shí)驗(yàn)等操作。上述操作應(yīng)當(dāng)在生物安全三級(jí)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。使用病毒培養(yǎng)物提取核酸，裂解劑或滅活劑的加入必須在與病毒培養(yǎng)等同級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室和防護(hù)條件下進(jìn)行，裂解劑或滅活劑加入后可比照未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料的防護(hù)等級(jí)進(jìn)行操作。實(shí)驗(yàn)室開展相關(guān)活動(dòng)前，應(yīng)當(dāng)報(bào)經(jīng)國(guó)家衛(wèi)生健康委批準(zhǔn)，取得開展相應(yīng)活動(dòng)的資質(zhì)。

1.2 動(dòng)物感染實(shí)驗(yàn) 指以活病毒感染動(dòng)物、感染動(dòng)物取樣、感染性樣本處理和檢測(cè)、感染動(dòng)物特殊檢查、感染動(dòng)物排泄物處理等實(shí)驗(yàn)操作，應(yīng)當(dāng)在生物安全三級(jí)實(shí)驗(yàn)室操作。實(shí)驗(yàn)室開展相關(guān)活動(dòng)前，應(yīng)當(dāng)報(bào)經(jīng)國(guó)家衛(wèi)生健康委批準(zhǔn)，取得開展相應(yīng)活動(dòng)的資質(zhì)。

1.3 未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料的操作 指未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料在采用可靠的方法滅活前進(jìn)行的病毒抗原檢測(cè)、血清學(xué)檢測(cè)、核酸提取、生化分析，以及臨床樣本的滅活等操作，應(yīng)當(dāng)在生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，同時(shí)采用生物安全三級(jí)實(shí)驗(yàn)室的個(gè)人防護(hù)。

1.4 滅活材料的操作 感染性材料或活病毒在采用可靠的方法滅活后進(jìn)行的核酸檢測(cè)、抗原檢測(cè)、血清學(xué)檢測(cè)、生化分析等操作應(yīng)當(dāng)在生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。分子克隆等不含致病性活病毒的其他操作，可以在生物安全一級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

2 病原體及樣本運(yùn)輸和管理

2.1 國(guó)內(nèi)運(yùn)輸 新型冠狀病毒毒株或其他潛在感染性生物材料的運(yùn)輸包裝分類屬于A類，對(duì)應(yīng)的聯(lián)合國(guó)編號(hào)為UN2814，包裝符合國(guó)際民航組織文件Doc9284《危險(xiǎn)品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則》的PI602分類包裝要求；環(huán)境樣本屬于B類，對(duì)應(yīng)的聯(lián)合國(guó)編號(hào)為UN3373，包裝符合國(guó)際民航組織文件Doc9284《危險(xiǎn)品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則》的PI650分類包裝要求；通過其他交通工具運(yùn)輸?shù)目蓞⒄找陨蠘?biāo)準(zhǔn)包裝。

新型冠狀病毒毒株或其他潛在感染性材料運(yùn)輸應(yīng)當(dāng)按照《可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定》(衛(wèi)生部令第45號(hào))辦理《準(zhǔn)運(yùn)證書》。

2.2 國(guó)際運(yùn)輸 新型冠狀病毒毒株或樣本在國(guó)際間運(yùn)輸?shù)?，?yīng)當(dāng)規(guī)范包裝，按照《出入境特殊物品衛(wèi)生檢疫管理規(guī)定》辦理相關(guān)手續(xù)，并滿足相關(guān)國(guó)家和國(guó)際相關(guān)要求。

2.3 毒株和樣本管理 新型冠狀病毒毒株和相關(guān)樣本應(yīng)當(dāng)由專人管理，準(zhǔn)確記錄毒株和樣本的來源、種類、數(shù)量、編號(hào)登記，采取有效措施確保毒株和樣本的安全，嚴(yán)防發(fā)生誤用、惡意使用、被盜、被搶、丟失、泄露等事件。

3 廢棄物管理

①開展新型冠狀病毒相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)制定廢棄物處置程序文件及污物、污水處理操作程序。②所有的危險(xiǎn)性廢棄物必須依照統(tǒng)一規(guī)格化的容器和標(biāo)示方式，完整并且合規(guī)地標(biāo)示廢棄物內(nèi)容。③應(yīng)當(dāng)由經(jīng)過適當(dāng)培訓(xùn)的人員使用適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備和設(shè)備處理危險(xiǎn)廢棄物。 ④廢棄物的處理措施：廢棄物的處理是控制實(shí)驗(yàn)室生物安全的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，切實(shí)安全地處理感染性廢棄物，必須充分掌握生物安全廢棄物的分類，并嚴(yán)格執(zhí)行相應(yīng)的處理程序。廢液的處理：實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的廢液可分為普通污水和感染性廢液。普通污水產(chǎn)生于洗手池等設(shè)備，對(duì)此類污水應(yīng)當(dāng)單獨(dú)收集，排入實(shí)驗(yàn)室水處理系統(tǒng)，經(jīng)處理達(dá)標(biāo)后方可排放。感染性廢液即在實(shí)驗(yàn)操作過程中產(chǎn)生的廢水，采用化學(xué)消毒或物理消毒方式處理，并對(duì)消毒效果進(jìn)行驗(yàn)證，確保徹底滅活。工作人員應(yīng)當(dāng)及時(shí)處理廢棄物，不得將廢棄物帶出實(shí)驗(yàn)區(qū)。固體廢物的處理：固體廢物分類收集，固體廢物的收集容器應(yīng)當(dāng)具有不易破裂、防滲漏、耐濕耐熱、可密封等特性。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的感染性垃圾不允許堆積存放，應(yīng)當(dāng)及時(shí)壓力蒸汽滅菌處理。廢物處置之前，應(yīng)當(dāng)存放在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)指定的安全地方。小型固體廢物如組織標(biāo)本、耗材、個(gè)人防護(hù)裝備等均需經(jīng)過壓力蒸汽滅菌處理，再沿廢棄物通道移出實(shí)驗(yàn)室。體積較大的固體廢物如HEPA過濾器，應(yīng)當(dāng)由專業(yè)人士進(jìn)行原位消毒后，裝入安全容器內(nèi)進(jìn)行消毒滅菌。不能進(jìn)行壓力蒸汽滅菌的物品如電子設(shè)備可以采用環(huán)氧乙烷熏蒸消毒處理。經(jīng)消毒滅菌處理后移出實(shí)驗(yàn)室的固體廢物，集中交由固體廢物處理單位處置。實(shí)驗(yàn)過程如使用銳器(包括針頭、小刀、金屬和玻璃等)要直接棄置于銳器盒內(nèi)，高壓滅菌后，再做統(tǒng)一處理。⑤建立廢棄物處理記錄：定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室排風(fēng)HEPA過濾器進(jìn)行檢漏和更換，定期對(duì)處理后的污水進(jìn)行監(jiān)測(cè)，采用生物指示劑監(jiān)測(cè)壓力蒸汽滅菌效果。

4 實(shí)驗(yàn)室生物安全操作失誤或意外的處理

4.1 新型冠狀病毒毒株或其他潛在感染性材料污染生物安全柜的操作臺(tái)造成局限污染 使用有效氯含量為0.55%消毒液，消毒液需要現(xiàn)用現(xiàn)配，24 h內(nèi)使用。此后內(nèi)容中有效氯含量參照此濃度。

4.2 含病毒培養(yǎng)器皿碎裂或傾覆造成實(shí)驗(yàn)室污染 保持實(shí)驗(yàn)室空間密閉，避免污染物擴(kuò)散，使用0.55%有效氯消毒液的毛巾覆蓋污染區(qū)。必要時(shí)(大量溢撒時(shí))可用過氧乙酸加熱熏蒸實(shí)驗(yàn)室，劑量為2 g/m3，熏蒸過夜；或20 g/L過氧乙酸消毒液用氣溶膠噴霧器噴霧，用量8 mL/m3，作用1～2 h；必要時(shí)或用高錳酸鉀-甲醛熏蒸：高錳酸鉀8 g/m3，放入耐熱耐腐蝕容器(陶罐或玻璃容器)，后加入甲醛(40%)10 mL/m3，熏蒸4 h以上。熏蒸時(shí)室內(nèi)濕度60%～80%。

清理污染物嚴(yán)格遵循活病毒生物安全操作要求，采用壓力蒸汽滅菌處理，并進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室換氣等，防止次生危害。

(下載網(wǎng)址：http://www.nhc.gov.cn/qjjys/s794 8/202001/0909555408d842a58828611dde2e6a26.shtml)