明日葉的實(shí)驗(yàn)及臨床應(yīng)用研究進(jìn)展

王妍妍 李文靜 陳海英

河北醫(yī)科大學(xué)護(hù)理學(xué)院，河北 石家莊 050031

明日葉是一種多年生長(zhǎng)的草本植物(拉丁學(xué)名:Angelicakeiskei(Miq.) Koidz.;英名:Ashitaba，日文名:アシタバ)，原產(chǎn)于日本著名的健康長(zhǎng)壽之鄉(xiāng)八丈島。我國(guó)明日葉種植產(chǎn)區(qū)主要分布于云南、廣西、貴州及臺(tái)灣等地區(qū)[1]。作為一種天然綠色植物，明日葉具有抗氧化應(yīng)激、抗衰老、緩解抑郁焦慮情緒、抗血栓、抗癌、降血糖血脂等諸多功效，提高人體免疫力[2]。明日葉是一種多功能健康食品，目前多應(yīng)用于食品保健行業(yè)，使用方法多種多樣，也可將其制成膠囊、飲片等，甚至可加入到于日常飲食中。

目前對(duì)于明日葉的研究已初具體系，文章從中醫(yī)保健、生理活性及其機(jī)制、應(yīng)用前景和存在問(wèn)題等方面進(jìn)行綜述。

1 中醫(yī)藥對(duì)明日葉的論述

在傳統(tǒng)藥物中，明日葉的使用歷史悠久，李時(shí)珍的《本草綱目》、日本寶永六年《大和本草》及正德二年《和滿三才圖會(huì)》中都有關(guān)于對(duì)明日葉的記載[3]。明日葉全草可供藥用，是傘形科當(dāng)歸屬植物，外形酷似芹菜。味甘，性溫，歸肝、腎、脾、胃經(jīng)。明日葉莖、葉含有多種維生素、胡蘿卜素、氨基酸，其莖葉中的黃色汁液、含有膽堿，具有抗?jié)?、抗炎的作用，可作為入藥部位[4]。明日葉的食用方法也多種多樣，可將其制成明日葉茶、粉、顆粒等，其中明日葉茶是最傳統(tǒng)的食用方式，一般取2～3 g加入沸水五分鐘后可飲用[5]。

2 明日葉的保健作用及其機(jī)制

2.1 抗衰老及氧化應(yīng)激 流行病學(xué)研究表明，經(jīng)常食用富含多酚的食物可能會(huì)降低慢性病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。類(lèi)黃酮是明日葉的主要成分之一，同時(shí)也是最大的多酚類(lèi)食物的代表，研究人員篩選近200種黃酮亞類(lèi)后發(fā)現(xiàn)類(lèi)黃酮4,4′-二甲氧基查爾酮(DMC)這一物質(zhì)，這種物質(zhì)大量存在于明日葉的莖和葉中[6]。在實(shí)驗(yàn)中證實(shí)了DMC的確具有減緩酵母細(xì)胞衰老的作用后，研究人員又檢測(cè)了DMC對(duì)線蟲(chóng)和果蠅的影響。結(jié)果表明，小劑量的DMC確實(shí)延長(zhǎng)了果蠅、蠕蟲(chóng)等動(dòng)物的壽命。其機(jī)制可能是DMC通過(guò)增強(qiáng)細(xì)胞自噬從而達(dá)到抗衰老的作用[7]。在體外實(shí)驗(yàn)中，研究人員使用異戊烯醇化的查爾酮(XAG)對(duì)人肝癌細(xì)胞進(jìn)行處理，盡管沒(méi)有顯著降低Hep3B和Huh7肝癌細(xì)胞系的活力，但抑制了癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移，其機(jī)制在于XAG通過(guò)激活A(yù)MPK / mTOR信號(hào)傳導(dǎo)途徑來(lái)誘導(dǎo)自噬進(jìn)而發(fā)揮抗癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的作用[8]。Kil Y等[9]同樣證實(shí)從明日葉中提取的次要酚類(lèi)物質(zhì)降低了氧化應(yīng)激帶來(lái)的損傷。隨著老齡化問(wèn)題日益突出，明日葉有望在抗衰老方面有所應(yīng)用。

2.2 抗抑郁焦慮 Higgs J等[10-11]應(yīng)用明日葉中的主要成分——查爾酮及其衍生物進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn)5′-甲基-2′-羥基查爾酮在高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)中對(duì)小鼠產(chǎn)生抗焦慮作用，而查耳酮核則在懸尾實(shí)驗(yàn)中對(duì)小鼠產(chǎn)生抗抑郁樣作用并揭示了其可能是通過(guò)抑制單胺氧化酶的活性來(lái)實(shí)現(xiàn)抗抑郁作用。Guan L P等[12]應(yīng)用查爾酮—1203通過(guò)經(jīng)典動(dòng)物行為絕望測(cè)試觀察此物質(zhì)的抗抑郁作用，結(jié)果表明應(yīng)用查爾酮—1203不同劑量處理30min后能有效緩解小鼠的抑郁樣行為，之后測(cè)定小鼠腦中主要神經(jīng)遞質(zhì)的變化，發(fā)現(xiàn)查爾酮-1203顯著增加了海馬、下丘腦以及皮質(zhì)中五羥色胺(5-HT)和去甲腎上腺素(NE)的濃度。Ferreira M K A等[13]研究者利用斑馬魚(yú)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明查爾酮合成物PAAPFBA通過(guò)GABA系統(tǒng)介導(dǎo)從而產(chǎn)生抗焦慮樣作用。有學(xué)者[14]研究表明從明日葉中分離出來(lái)的查耳酮能顯著增加小鼠脂肪細(xì)胞中脂聯(lián)素的產(chǎn)生和脂聯(lián)素基因的表達(dá)，而脂聯(lián)素是脂肪細(xì)胞分泌最多的蛋白激素，一種胰島素增敏激素，具有抗糖尿病的潛力。也有研究者[15]發(fā)現(xiàn)脂聯(lián)素與神經(jīng)精神疾病同樣存在密切關(guān)系，其機(jī)制可能由于脂聯(lián)素作用于HPA軸或者促進(jìn)海馬神經(jīng)再生進(jìn)而達(dá)到抗抑郁的效果。

2.3 緩解認(rèn)知障礙 阿爾茨海默病(Alzheimer Disease，AD)又稱(chēng)老年癡呆，是臨床上最常見(jiàn)的神經(jīng)退行性疾病。據(jù)統(tǒng)計(jì)全球有4600萬(wàn)AD患者，預(yù)計(jì)到2050年將有1.315億，嚴(yán)重降低患者及家屬患者的生活質(zhì)量，給社會(huì)發(fā)展帶來(lái)負(fù)擔(dān)[16]。AD主要以進(jìn)行性認(rèn)知功能障礙、記憶障礙、人格改變等精神癥狀為臨床表現(xiàn)，發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，受到遺傳和環(huán)境的因素雙重影響。主流研究認(rèn)為，腦內(nèi)乙酰膽堿(ACh)含量的增多可能會(huì)使AD的癥狀得到改善，而東莨菪堿作為乙酰膽堿酯受體拮抗劑，可影響腦內(nèi)乙酰膽堿(ACh)的分泌，損害認(rèn)知功能[17]。明日葉能減弱東莨菪堿誘導(dǎo)的小鼠認(rèn)知功能的下降，逆轉(zhuǎn)海馬區(qū)細(xì)胞環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)結(jié)合蛋白的磷酸化過(guò)程和腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)的減少，表明明日葉可能有助于緩解阿爾茨海默病造成的學(xué)習(xí)和記憶障礙[18]。

2.4 對(duì)血糖的影響 由于目前應(yīng)用于治療糖尿病藥物具有較多的副作用和不良反應(yīng)，使得現(xiàn)有的藥物在使用中受到很大程度的限制，所以開(kāi)發(fā)利用天然的抗氧化劑來(lái)防治糖尿病將會(huì)成為一種可行的途徑。脂聯(lián)素作為脂肪細(xì)胞分泌的一種細(xì)胞因子，具有調(diào)節(jié)血糖的作用。Li Y J等[19]研究來(lái)自明日葉中的植物化學(xué)成分4-羥基蓖麻油酸(4-HD)對(duì)小鼠脂肪細(xì)胞分化的影響，結(jié)果表明4-HD通過(guò)增加脂聯(lián)素的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)水平，增強(qiáng)胰島素敏感性，從而達(dá)到降血糖的目的，并且也同樣證實(shí)從明日葉中提取的黃嘌呤醇(XA)和4-HD抑制了肥胖誘導(dǎo)的炎癥和脂肪細(xì)胞功能障礙。與此同時(shí)，Li Y J等[20]研究了4-HD和XAG的降糖機(jī)制，具體是通過(guò)3T3-L1脂肪細(xì)胞中的LKB1 / AMPK信號(hào)傳導(dǎo)途徑增加GLUT4依賴(lài)性葡萄糖攝取，進(jìn)而降低血糖。

2.5 降血脂及抗凝血作用 研究人員發(fā)現(xiàn)4-HD和XAG抑制了高脂飲食導(dǎo)致的體重增加和脂肪沉積，降低了膽固醇、甘油三酯，增加脂聯(lián)素水平，其機(jī)制可能是通過(guò)脂肪組織和肝臟中AMPK的磷酸化調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝來(lái)預(yù)防肥胖[21-22]。在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)當(dāng)中，Zhang W等[23]應(yīng)用明日葉提取物類(lèi)黃酮，在糖尿病小鼠模型研究中發(fā)現(xiàn)，類(lèi)黃酮可使空腹血糖顯著降低，降低血清中總甘油三酯水平(TC)。Lee H等[24]通過(guò)應(yīng)用明日葉提取物Isobavachalcone(IBC)，緩解高脂高膽固醇飲食導(dǎo)致的斑馬魚(yú)脂肪肝病變，其機(jī)制可能是IBC通過(guò)下調(diào)脂肪形成因子抑制3T3-L1脂肪細(xì)胞分化，降低肝內(nèi)脂肪沉積，顯示出抗肥胖活性，這表明IBC可能會(huì)作為未來(lái)開(kāi)發(fā)抗肥胖藥物的主要活性成分。除此之外，在最新的研究中得到證實(shí)，每日補(bǔ)充新鮮的明日葉汁可通過(guò)調(diào)節(jié)腸道微生物菌群來(lái)降低高脂飲食導(dǎo)致的肥胖和代謝紊亂[25]。血栓纖溶酶原激活物抑制劑-1(PAI-1)是組織纖溶酶原激活物的主要生理抑制劑，而血漿中過(guò)量的PAI-1則會(huì)破壞纖維蛋白溶解性平衡并促進(jìn)血栓形成，血漿PAI-1的主要來(lái)源是脂肪組織和肝臟。將查爾酮加入到糖尿病小鼠的飲食后發(fā)現(xiàn)其顯著地抑制了肝臟中的PAI-1蛋白水平，說(shuō)明補(bǔ)充含有查爾酮的飲食有助于預(yù)防血栓性疾病[26]。類(lèi)似地研究發(fā)現(xiàn)明日葉中的黃烷酮、香豆素等物質(zhì)同樣具有抑制血小板聚集、抗血栓的能力[27-28]。

2.6 抗腫瘤作用 在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，4-HD和XAG顯著減弱黑素瘤小鼠模型中的腫瘤發(fā)生率和體積。Sumiyoshi M 等[29]同樣證實(shí)4-HD和XAG對(duì)LM-8骨肉瘤小鼠具有抗腫瘤和抗轉(zhuǎn)移作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明4-HD和XAG抑制了腫瘤生長(zhǎng)和腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞的表達(dá)。臨床上多種癌癥發(fā)生伴隨著腫瘤組織的成纖維生長(zhǎng)因子受體(FGFR)的過(guò)表達(dá)和激活，從明日葉提取的生物堿成分—PQ具有抗癌能力，在食管鱗狀細(xì)胞癌中抑制FGFR誘導(dǎo)的細(xì)胞轉(zhuǎn)化，抑制癌細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，具有抗腫瘤轉(zhuǎn)移的活性[30]。此外，明日葉的乙醇提取物對(duì)乙酰氨基酚(AAP)誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞和人肝祖細(xì)胞導(dǎo)致的肝毒性具有逆轉(zhuǎn)作用[31]。

2.7 抗炎作用 氧化應(yīng)激參與幽門(mén)螺桿菌相關(guān)的胃潰瘍和癌的發(fā)生。明日葉富含類(lèi)胡蘿卜素和類(lèi)黃酮，具有抗氧化和抗炎的作用。有研究[32]假設(shè)明日葉可以逆轉(zhuǎn)幽門(mén)螺旋桿菌感染所導(dǎo)致的小鼠胃粘膜損傷，同時(shí)用抗氧化劑N-乙酰半胱氨酸作陽(yáng)性對(duì)照處理。結(jié)果表明，明日葉對(duì)幽門(mén)螺桿菌誘導(dǎo)的感染抑制作用與N-乙酰半胱氨酸的作用相似，因此適量補(bǔ)充明日葉可以預(yù)防胃潰瘍和胃黏膜炎癥。將明日葉提取物以不同劑量給小鼠灌胃給藥后發(fā)現(xiàn)高劑量的提取物可以增加小鼠體內(nèi)抗體含量，提高脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)，說(shuō)明明日葉具有提高機(jī)體體液免疫和抗炎的功能[33]。

2.8 抗結(jié)核 結(jié)核病作為世界難治性疾病之一，具有高度的耐藥性和感染性。因此，控制結(jié)核病的傳染仍然是目前維持生命健康發(fā)展的重點(diǎn)。在Kusuma S A F等[34]研究中發(fā)現(xiàn)，明日葉乙醇提取物有較強(qiáng)的抑制結(jié)核桿菌的作用，是一種新型天然抗結(jié)核的藥物，可作為未來(lái)新藥開(kāi)發(fā)的重點(diǎn)。

2.9 其他 男性精子質(zhì)量不斷下降導(dǎo)致不育率逐漸升高。明日葉可預(yù)防由于熱應(yīng)激引起的小鼠精子質(zhì)量和數(shù)量的下降，由于Hspa1l和Hspa2在睪丸中的高度表達(dá)并且其對(duì)生育至關(guān)重要，而明日葉可以阻止熱應(yīng)激誘導(dǎo)的Hspa1l和Hspa2表達(dá)的減少，保護(hù)睪丸細(xì)胞免受熱應(yīng)激，因此補(bǔ)充膳食功能性植物化學(xué)物質(zhì)可能有助于預(yù)防熱應(yīng)激引起的男性不育癥[35]。也有研究[36]發(fā)現(xiàn)，明日葉對(duì)過(guò)度訓(xùn)練的大鼠導(dǎo)致的胃腸道功能紊亂具有改善作用，能夠從腸道菌群等方面進(jìn)行綜合調(diào)節(jié)，促進(jìn)腸道健康。類(lèi)似地，從明日葉中分離出9種烷基化查耳酮和4種香豆素對(duì)急性呼吸性冠狀病毒(SARS-CoV)表現(xiàn)出顯著的抑制作用[37]。

3 明日葉的臨床應(yīng)用

3.1 代謝性疾病 明日葉含有許多抗炎、抗氧化作用的生物活性成分，對(duì)于高血壓，糖尿病和高脂血癥的治療具有顯著作用，但尚未明確這些作用與明日葉中活性成分的關(guān)系。Oh Ha等[38]提取20名受試者的血漿并進(jìn)行代謝組學(xué)分析，結(jié)果表明明日葉中的4-HD和XAG等成分使血漿中代謝物的水平發(fā)生了變化，這些代謝物的變化與預(yù)防糖尿病，高脂血癥，動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)。酒精可導(dǎo)致氧化應(yīng)激和炎癥，進(jìn)而引發(fā)肝炎和肝硬化。Noh H-M等[39]采用隨機(jī)雙盲臨床實(shí)驗(yàn)表明，與安慰劑組相比，使用明日葉提取物的重度飲酒者的γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶水平顯著下降，說(shuō)明明日葉提取物可改善重度飲酒者的肝功能，保護(hù)肝臟。槲皮素具有降低血壓、降血脂、擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，增加冠脈血流量等作用。葉黃素則具有保護(hù)視力、抗氧化、抗癌和降血糖的特性。Correa C R等[40]研究者將明日葉粉末加入到健康組和代謝綜合征組的日常膳食中，結(jié)果表明兩組受試者的血漿中槲皮素、葉黃素的濃度均增加。

3.2 減輕淋巴細(xì)胞DNA的損傷 氧化應(yīng)激是自由基在體內(nèi)產(chǎn)生的一種負(fù)面作用，并被認(rèn)為是導(dǎo)致衰老和疾病的一個(gè)重要因素。吸煙者在吸煙時(shí)會(huì)受到較強(qiáng)的氧化應(yīng)激，罹患各種疾病的風(fēng)險(xiǎn)增加。食用天然產(chǎn)品會(huì)使淋巴細(xì)胞DNA對(duì)氧化應(yīng)激產(chǎn)生抗體，因此研究人員將明日葉汁給予20名吸煙者，每天240 mL，共8周。結(jié)果表明每日補(bǔ)充明日葉汁可逆轉(zhuǎn)吸煙導(dǎo)致的外周淋巴細(xì)胞中DNA的氧化損傷，但仍需要更大的樣本量進(jìn)行進(jìn)一步測(cè)試[41]。

4 前景與問(wèn)題

明日葉作為一種傳統(tǒng)草藥，采用多種色譜方法，分離純化得到14個(gè)化合物，主要有效成分為查爾酮，黃原膠等物質(zhì)[42]?；A(chǔ)和臨床實(shí)驗(yàn)表明其具有一定的抗氧化、抗衰老、抗抑郁焦慮以及降糖、降脂等功能，范軼歐等[43]為了全面了解明日葉的安全性，使大鼠口服不同劑量的明日葉提取物，評(píng)價(jià)對(duì)大鼠產(chǎn)生的影響，并進(jìn)行了急性毒性、遺傳毒性和亞慢性毒性試驗(yàn)。根據(jù)急性毒性標(biāo)準(zhǔn)發(fā)現(xiàn)其屬無(wú)毒級(jí)；體內(nèi)體細(xì)胞和生殖細(xì)胞的試驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)遺傳毒理學(xué)方面的改變；在90 d灌胃試驗(yàn)中，各劑量灌胃的大鼠未出現(xiàn)中毒癥狀以及靶器官毒性病理改變，其研究結(jié)果為明日葉的長(zhǎng)期服用以及安全性提供基礎(chǔ)。明日葉的天然性和安全性提示其有良好的應(yīng)用前景與發(fā)展空間，但仍然存在一些問(wèn)題：①現(xiàn)有的研究大多數(shù)以動(dòng)物和細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，但二者與人體具有較大的差異，雖有臨床研究，但應(yīng)用明日葉時(shí)的劑量、濃度、時(shí)間等細(xì)節(jié)問(wèn)題未統(tǒng)一，明日葉及其提取物完全應(yīng)用于臨床還需較長(zhǎng)時(shí)間；②明日葉在我國(guó)的種植尚未得到大規(guī)模的推廣，相關(guān)專(zhuān)業(yè)人人才缺乏，由于未形成標(biāo)準(zhǔn)化的種植和加工技術(shù)，導(dǎo)致其相應(yīng)的深加工產(chǎn)品鮮有報(bào)道；③雖對(duì)于明日葉的生理作用進(jìn)行了機(jī)制探討，但其中一些課題研究尚未形成一致性的科研結(jié)論。為了使明日葉得到更好的開(kāi)發(fā)和利用，有必要對(duì)其進(jìn)一步加強(qiáng)研究。