核酸檢測法對甲型病毒性肝炎的免疫檢驗(yàn)價(jià)值分析

許琳婧 花艷艷 張錦偉

免疫檢驗(yàn)方法的使用原理是抗原與抗體之間會(huì)發(fā)生一系列的反應(yīng),而這些反應(yīng)可以通過各種免疫學(xué)的指標(biāo)進(jìn)行分析,確定患者的標(biāo)本是否含有抗體,然后對患者的疾病進(jìn)一步進(jìn)行診斷,促進(jìn)患者的康復(fù)［1］。甲型病毒性肝炎的治療周期一般在6 個(gè)月以上,傳染性較高,同時(shí)發(fā)病幾率也較高,表現(xiàn)出食欲降低、疲乏無力及發(fā)熱等癥狀［2］,嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致患者的皮膚發(fā)黃以及肝功能異常等,對患者的生活以及工作造成非常大的影響,所以高效的早期診斷可以有效提高診斷的準(zhǔn)確性,醫(yī)生可以依據(jù)診斷結(jié)果為患者制定更加適合的治療方案,同時(shí)指導(dǎo)患者注意休息,避免過度疲勞,并減少甚至避免飲酒,給予藥物治療,為患者良好的治療效果提供保障。本文選取本院78 例抗-甲型肝炎病毒IgM 檢驗(yàn)標(biāo)本中呈現(xiàn)陽性的患者作為研究對象,采用不同方法對患者的標(biāo)本進(jìn)行免疫檢驗(yàn),確定檢驗(yàn)方法的準(zhǔn)確性。具體報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017 年5 月～2018 年5 月本院78 例抗-甲型肝炎病毒IgM 檢驗(yàn)標(biāo)本中呈現(xiàn)陽性的患者作為研究對象,隨機(jī)分為對照組與實(shí)驗(yàn)組,每組39 例。對照組患者中男20 例,女19 例；年齡25～51 歲,平均年齡(35.14±7.1) 歲。實(shí)驗(yàn)組患者中男22 例,女17 例；年齡27～48 歲,平均年齡(34.25±6.9) 歲。兩組患者性別、年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。本次試驗(yàn)在醫(yī)院倫理委員會(huì)的同意以及監(jiān)督下進(jìn)行,可以確保實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。

1.2 方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)組 患者采用核酸檢測法進(jìn)行檢驗(yàn)。采集患者的檢驗(yàn)標(biāo)本,對患者的RNA 進(jìn)行檢驗(yàn),利用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)確定患者標(biāo)本中是否有甲型肝炎病毒的存在［3］。

1.2.2 對照組 患者采用的是酶聯(lián)免疫捕獲法進(jìn)行檢驗(yàn)。首先酶聯(lián)免疫捕獲試劑在冷藏的環(huán)境取出后應(yīng)該放置一段時(shí)間,使試劑恢復(fù)到正常溫度才可以使用,血清要經(jīng)過約30 min的反應(yīng),提取其中的血清才可以進(jìn)行進(jìn)一步的檢驗(yàn)。將酶聯(lián)免疫藥劑使用稀釋液進(jìn)行稀釋后,將血清以及陰性、陽性對照加入其中,經(jīng)過1 h 的孵育后加入底物并進(jìn)行約30 min 的避光反應(yīng),然后讀取數(shù)值,確定檢驗(yàn)結(jié)果的陽性或者陰性［4］。

1.3 觀察指標(biāo) 統(tǒng)計(jì)對比兩組患者的檢驗(yàn)準(zhǔn)確率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

實(shí)驗(yàn)組檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確36 例,檢驗(yàn)準(zhǔn)確率為92.3%；對照組檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確25 例,檢驗(yàn)準(zhǔn)確率為64.1%；實(shí)驗(yàn)組檢驗(yàn)準(zhǔn)確率高于對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

3 討論

甲型肝炎病毒作為一種抵抗力非常強(qiáng)的病毒,會(huì)對患者肝臟造成一定程度的損害,其傳染源主要是通過口部與糞便進(jìn)行傳播,如果與攜帶甲型肝炎病毒的患者一同用餐或者使用同一個(gè)餐具、水杯等用具就有可能通過口部傳染甲型病毒性肝炎,如果接觸到甲型病毒性肝炎的患者或者甲型肝炎病毒攜帶者的糞便也有可能感染甲型病毒性肝炎,因?yàn)榧仔透窝撞《灸軌蛟诩S便中存活近1 個(gè)月的時(shí)間［5］。甲型肝炎病毒的感染人群不受年齡的影響,所有年齡階段的人都有可能感染甲型病毒性肝炎,其中感染人群多為未成年兒童以及青少年,因?yàn)樵趯W(xué)習(xí)以及輔導(dǎo)機(jī)構(gòu)學(xué)生會(huì)在一起用餐以及飲水,感染甲型病毒性肝炎的可能性較高［6］。在甲型病毒性肝炎感染的初期會(huì)有15～30 d 的潛伏期,在這期間患者基本不會(huì)有較為明顯的不適癥狀,不會(huì)到醫(yī)院進(jìn)行治療,由此不僅會(huì)導(dǎo)致甲型病毒性肝炎不斷的發(fā)展,而且這個(gè)時(shí)期的甲型肝炎病毒的傳染性最強(qiáng),在沒有任何預(yù)防的情況下不斷傳播,導(dǎo)致更多的人傳染甲型肝炎病毒［7］。所以在對甲型病毒性肝炎患者診斷時(shí)要依據(jù)其臨床表現(xiàn)及免疫檢驗(yàn)結(jié)果,進(jìn)而提高診斷結(jié)果［8］。根據(jù)現(xiàn)有研究資料發(fā)現(xiàn),甲型感染性肝炎的傳播路徑分為很多中,主要包括［9］：①食物污染,不干凈的食物以及不良飲食習(xí)慣會(huì)造成甲型肝炎病毒的傳播；②因?yàn)樗词艿轿廴舅斐傻募膊∫彩羌仔透窝撞《镜闹饕緩?其病發(fā)規(guī)模依據(jù)水源污染程度而異；③輸血渠道,血液可以傳播多種疾病,甲型病毒性肝炎亦是如此,如患者輸血時(shí)不慎通過靜脈輸入含甲型肝炎病毒血液或血漿就會(huì)造成病毒的傳播；④平時(shí)生活接觸也會(huì)傳播甲型肝炎病毒。

在甲型病毒性肝炎的臨床診斷期間,通過免疫學(xué)檢驗(yàn)的方法可以快速確診疾病,該方法主要通過免疫學(xué)抗原以及抗體發(fā)生反應(yīng)的原理,最終快速完成病原體檢驗(yàn)。近幾年該技術(shù)得到快速發(fā)展,并且隨著相關(guān)技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展,越來越多的學(xué)者開始通過放射性同位素、熒光素、酶等各種不同的敏感標(biāo)志與示蹤技術(shù),對各種具有特異性的物質(zhì)進(jìn)行檢測,因此可以獲得相關(guān)物質(zhì)的詳細(xì)信息。在疾病臨床診斷中,醫(yī)護(hù)人員通過對人體中的相關(guān)病理以及生理指標(biāo)進(jìn)行識(shí)別,并通過免疫學(xué)指標(biāo)進(jìn)行檢測。在整個(gè)診斷過程中,通過酶聯(lián)免疫法所使用的標(biāo)記指示物是酶,酶作為一種固相吸附測定的方法,具有抗原體免疫反應(yīng)的能力［10］。操作期間將待測標(biāo)本與酶標(biāo)記的抗體或抗原按照相關(guān)步驟逐步將其加入到反應(yīng)體系中,使其可以與固相載體上的抗原發(fā)生反應(yīng),并通過這種反應(yīng)獲得抗原抗體-酶復(fù)合物。之后在分立固相抗原抗體-酶復(fù)合物的其他成分,主要使用的方法就是洗滌,需要按照相應(yīng)的比例來控制固相載體上的酶量；而在添加酶反應(yīng)底物后,根據(jù)酶的催化作用逐漸將底物變成一種有色產(chǎn)物,此時(shí)產(chǎn)物的數(shù)量受標(biāo)本中相關(guān)物質(zhì)的影響,因此在識(shí)別階段可以根據(jù)成色變化進(jìn)行含量識(shí)別［11］。在本次研究中,通過甲型病毒性肝炎的免疫性檢驗(yàn),檢驗(yàn)期間能夠結(jié)合蛋白質(zhì)分子中的正電荷基團(tuán),而由于這種結(jié)合屬于靜電結(jié)合范疇,所以基本不會(huì)影響蛋白質(zhì)的生物特性。除此之外,膠體金不僅能夠與蛋白質(zhì)之間實(shí)現(xiàn)結(jié)合,也能根據(jù)膠體金的高電子密度以及顆粒形狀等關(guān)鍵物理特性來適應(yīng)不同的檢測環(huán)境,所以具有廣闊的應(yīng)用前景。

本次研究結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確36 例,檢驗(yàn)準(zhǔn)確率為92.3%；對照組檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確25 例,檢驗(yàn)準(zhǔn)確率為64.1%；實(shí)驗(yàn)組檢驗(yàn)準(zhǔn)確率高于對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。由此可以看出,在對患者進(jìn)行甲型病毒性肝炎的免疫性進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí),核酸檢測法的檢驗(yàn)準(zhǔn)確率優(yōu)于酶聯(lián)免疫捕獲檢測法,所以核酸檢測法可以更好的對患者的疾病進(jìn)行檢驗(yàn),進(jìn)一步的對疾病的預(yù)防以及治療也有極大的指導(dǎo)意義。據(jù)相關(guān)研究表明,當(dāng)酶聯(lián)免疫捕獲法與核酸檢測法聯(lián)合使用時(shí),能夠達(dá)到更高的檢驗(yàn)準(zhǔn)確率,所以在甲型病毒性肝炎的免疫檢驗(yàn)中可以推廣使用核酸檢測法,當(dāng)不能準(zhǔn)確的判斷患者的疾病時(shí),可以將酶聯(lián)免疫捕獲法與核酸檢測法聯(lián)合使用,將檢驗(yàn)準(zhǔn)確率最大化,盡早的對患者進(jìn)行治療,進(jìn)一步的促進(jìn)患者的康復(fù)［12］。同時(shí)根據(jù)本文的研究結(jié)果可知,在感染甲型肝炎病毒后,臨床癥狀在血清抗體出現(xiàn)之前就已經(jīng)出現(xiàn),因此在窗口期開展免疫學(xué)檢驗(yàn)即可取得滿意的效果。

綜上所述,在對感染性疾病甲型病毒性肝炎進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí)采用核酸檢測法,其對甲型病毒性肝炎的檢驗(yàn)準(zhǔn)確率更高,為后續(xù)的疾病干預(yù)與治療提供保障,可以在臨床檢驗(yàn)中推廣使用。