面膜類化妝品微生物檢驗(yàn)方法適用性考察

王維亞*，吳珊珊，林智超，駱瑜，劉志斌

（南昌市食品藥品檢驗(yàn)所南昌市食品安全檢測與控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西 南昌 330012）

面膜，是護(hù)膚化妝品中的一個重要類別，在深層清潔肌膚的同時, 能夠及時補(bǔ)充肌膚所需的多種礦物質(zhì)及微量元素、氨基酸、維生素、蛋白質(zhì)等多種營養(yǎng)成分，深受消費(fèi)者的青睞。化妝品中豐富的營養(yǎng)物質(zhì)非常有利于微生物的生長繁殖，微生物指標(biāo)是化妝品安全性檢測的重要內(nèi)容，微生物污染會破壞或嚴(yán)重降低化妝品質(zhì)量，甚至導(dǎo)致消費(fèi)者過敏和感染[1]。所以多數(shù)化妝品中添加了防腐劑來抑制微生物生長，這也導(dǎo)致化妝品微生物檢出率普遍偏低，或出現(xiàn)假陰性結(jié)果。為了解面膜的質(zhì)量狀況，保障其使用安全，我所對轄區(qū)內(nèi)售賣的面膜產(chǎn)品進(jìn)行了抽查檢驗(yàn)，并對現(xiàn)行的《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》2015 年版[2]微生物檢驗(yàn)是否適合面膜類化妝品，能否真實(shí)反映其微生物的污染情況進(jìn)行了方法適用性考察。

1 材料與儀器

1.1 樣品

36 件面膜類化妝品均來自2018-2019 年南昌市化妝品監(jiān)督抽檢樣品。

1.2 試驗(yàn)菌

金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）[CMCC (B) 26003]；大腸埃希菌(Escherichia coli)[CMCC (B) 44102]；銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa) [CMCC (B) 10104]；枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis) [CMCC (B) 63501]；白 色 念珠 菌(Candida albicans) [CMCC (F) 98001]；黑曲霉 (Aspergillus niger) [CMCC (F) 98003]，均購自中國食品藥品檢定研究院。

1.3 培養(yǎng)基與主要儀器

SCDLP 液體培養(yǎng)基、卵磷脂吐溫80 營養(yǎng)瓊脂、孟加拉紅瓊脂、雙倍乳糖膽鹽（含中和劑）等培養(yǎng)基均由北京陸橋提供。SW-CJ-1A 型潔凈工作臺（蘇州科順醫(yī)用凈化設(shè)備廠）、BHC-1300Ⅱ型生物安全柜（蘇州凈化設(shè)備有限公司）、SPX-150 恒溫培養(yǎng)箱（揚(yáng)州 慧科電子有限公司）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 檢測項(xiàng)目與方法

《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》 2015 年版中微生物檢驗(yàn)部分，檢測項(xiàng)目：菌落總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)、耐熱大腸菌群、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌。

2.2 評價標(biāo)準(zhǔn)

按《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》 2015 年版規(guī)定，化妝品的微生物指標(biāo)應(yīng)符合下列規(guī)定，菌落總數(shù)：眼部化妝品及口唇等黏膜用化妝品以及嬰兒和兒童用化妝品≤500cfu/g（mL），其他化妝品≤1 000cfu/g（mL）；霉菌和酵母菌：≤100cfu/g（mL）；耐熱大腸菌群、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌均不得檢出。凡出現(xiàn)1 項(xiàng)及以上指標(biāo)不符合規(guī)定的，則判定為不合格樣品。

2.3 檢驗(yàn)方法適用性考察

參考《中國藥典》 2015 年版四部[3]非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查方法，采用5 種菌株的回收率試驗(yàn)，考察面膜類化妝品計(jì)數(shù)方法適用性；采用陽性菌對照試驗(yàn)，考察面膜類化妝品控制菌方法適用性。

3 結(jié)果

3.1 面膜類化妝品微生物檢測結(jié)果

如表1 所示，36 件化妝品的微生物指標(biāo)均符合規(guī)定，合格率為100%，表明2018-2019 年抽查的面膜類化妝品衛(wèi)生質(zhì)量較好，但由于抽樣數(shù)量不夠大和覆蓋不夠全面，此結(jié)果并不說明面膜類化妝品就不存在微生物污染方面的問題。

表1 面膜類化妝品微生物檢測結(jié)果

3.2 面膜類化妝品微生物計(jì)數(shù)方法適用性考察

按照《中國藥典》2015 年版四部非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查方法，各菌回收率均在50%～200%可作為該樣品菌落總數(shù)及霉菌和酵母菌總數(shù)檢查方法。如表2 所示，采用現(xiàn)行的方法1 mL/皿時，面膜A 和面膜B 的黑曲霉以及面膜C的枯草芽孢桿菌和白色念珠菌回收率均小于50%，在采用培養(yǎng)基稀釋法0.5 mL/皿時，各菌的回收率均達(dá)到要求。

表2 面膜微生物計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)回收率%

3.3 面膜類化妝品控制菌方法適用性考察

采用現(xiàn)行的控制菌檢測方法對4 批加入陽性對照菌的樣品進(jìn)行檢驗(yàn)，如表3 所示，所檢樣品中均檢出耐熱大腸菌群、金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌。說明現(xiàn)行的化妝品控制菌檢驗(yàn)方法基本適用于面膜類產(chǎn)品。

表3 面膜化妝品控制菌檢查方法適用性試驗(yàn)結(jié)果

4 討論

面膜在給皮膚帶來營養(yǎng)的同時也成了微生物生長的良好培養(yǎng)基，含有大量微生物的面膜敷于臉上15～30min 就可能會引起皮膚出現(xiàn)紅腫、發(fā)炎等感染現(xiàn)象[4]。因此，化妝品的微生物檢驗(yàn)十分重要，而檢驗(yàn)方法是否適用于相應(yīng)產(chǎn)品，直接關(guān)系到檢驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)可靠性，有必要對方法可行性進(jìn)行考察評估。

化妝品中防腐劑的加入給微生物檢驗(yàn)帶來了難題，本文參考《中國藥典》2015 年版四部非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查方法，對面膜類化妝品進(jìn)行了方法適用性考察。試驗(yàn)表明，采用培養(yǎng)基稀釋法0.5 mL/皿測定菌落總數(shù)及霉菌和酵母菌總數(shù)，采用現(xiàn)行的《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》2015 年版方法檢查控制菌，適用于面膜類化妝品，可以為此類化妝品的監(jiān)督檢查提供參考。