一起家庭食源性疾病事件的病原學(xué)及分子生物學(xué)調(diào)查分析

沈靜 張靜 王姍 金虹飛

（上海市虹口區(qū)疾病預(yù)防控制中心 上海 200082）

食源性疾病事件在突發(fā)公共衛(wèi)生事件中占有很大的比例，因而明確該事件的致病菌，加強(qiáng)日常食源性疾病的管控就顯得尤為重要。2019年6月14日15時(shí)55分我中心急傳科接轄區(qū)某醫(yī)院電話報(bào)告，稱(chēng)該院腸道門(mén)診接診一名腹瀉病人，自述本人及家中其余2名家屬食用醬鴨后均有腹瀉癥狀。隨即，本疾病預(yù)防控制中心應(yīng)急辦派工作人員赴醫(yī)院及病例家中開(kāi)展流行病學(xué)調(diào)查和處置工作，經(jīng)調(diào)查該家庭3名成員分別出現(xiàn)不同程度的發(fā)熱、腹瀉癥狀。于此同時(shí)，本單位實(shí)驗(yàn)室也對(duì)流調(diào)人員采集的現(xiàn)場(chǎng)標(biāo)本開(kāi)展系列微生物學(xué)檢測(cè)。

1.資料與方法

1.1 樣品來(lái)源

2019年6 月14 日20 時(shí)收到流調(diào)人員送檢的病例肛拭標(biāo)本1件；家屬肛拭樣品2件；食品醬鴨1件。

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1 檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)《感染性腹瀉診斷標(biāo)準(zhǔn)》WS 271-2007,《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)》GB 4789.4—2016[1]對(duì)送檢樣本開(kāi)展增菌、分離培養(yǎng)、生化鑒定、血清學(xué)鑒定等致病菌檢測(cè)。

1.2.2 PFGE檢測(cè)參照美國(guó)CDC提供的PFGE分子分型的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室規(guī)程對(duì)腸炎沙門(mén)氏菌進(jìn)行脈沖場(chǎng)凝膠電泳（PFGE）分析[2]。

1.2.3 藥敏檢測(cè)依據(jù)美國(guó)CLSI推薦的微量肉湯稀釋法,購(gòu)置商品化藥敏板進(jìn)行藥敏試驗(yàn),選用30種抗生素包括：氨芐西林AMP、氨芐西林-舒巴坦AMS、四環(huán)素TET、氯霉素CHL、復(fù)方新諾明SXT、頭孢唑林CFZ、頭孢噻肟CTX、頭孢他啶CAZ、頭孢西丁CFX、慶大霉素GEN、亞胺培南IMI、萘啶酸NAL、阿奇霉素AZI磺胺異噁唑SUL、環(huán)丙沙星CIP、阿莫西林-克拉維酸AMC、頭孢噻肟-克拉維酸CTX-T、頭孢他啶-克拉維酸CAZ-C、多粘菌素E CT、多粘菌素B PB、米諾環(huán)素MIN、阿米卡星AMI、氨曲南AZM、頭孢吡肟FEP、美羅培南MEM、左氧氟沙星LEV、多西環(huán)素DOX、卡那霉素KAN、鏈霉素STR、吉米沙星GEM。根據(jù)CLSIM100-S27(2017)出版的藥敏試驗(yàn)指南進(jìn)行耐藥判定,質(zhì)控菌株為大腸埃希氏菌ATCC25922。

2.結(jié)果

2.1 細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定結(jié)果

樣品中分離出4株腸炎沙門(mén)氏菌。其中1株來(lái)自病例，2株來(lái)自其家屬，另一株來(lái)自于食品醬鴨（購(gòu)置于單位食堂）。

2.2 PFGE分型結(jié)果

4株腸炎沙門(mén)菌依次編號(hào)HKSM19007～`HKSM19010基因組DNA經(jīng)XbaI內(nèi)切酶酶切后,產(chǎn)生4條條帶數(shù)目和分子量大小完全一致的條帶，見(jiàn)下圖1。通過(guò)BioNumerics軟件分析形成了聚類(lèi)圖,可見(jiàn)條帶數(shù)目和位置也完全相同，相似度達(dá)100%,可見(jiàn)來(lái)自同一克隆株,具有同源性，見(jiàn)圖2。

圖1 腸炎沙門(mén)菌脈沖場(chǎng)凝膠電泳分型圖

圖2 4株腸炎沙門(mén)氏菌的聚類(lèi)樹(shù)狀圖

2.3 藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果

經(jīng)藥敏試驗(yàn)4株腸炎沙門(mén)氏菌對(duì)AMP,NAL,Sul,STR的耐藥率為100%；對(duì)CFZ的耐藥率為75%；對(duì)AMS的耐藥率為50%，對(duì)其余24種抗生素敏感性為100%，可見(jiàn)具有相似的耐藥譜，結(jié)果見(jiàn)表。

表 4株腸炎沙門(mén)氏菌的耐藥譜

3.討論

此次事件通過(guò)對(duì)細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定結(jié)果、分子溯源分析以及細(xì)菌耐藥譜的分析，可以認(rèn)為該事件是由于家庭成員食用了被腸炎沙門(mén)氏菌污染的醬鴨所導(dǎo)致的一起聚集性食源性疾病事件。此次調(diào)查過(guò)程中所采集的標(biāo)本包括了可疑食物和病例，分離到了相同血清型的沙門(mén)氏菌，并且經(jīng)PFGE分子分型獲得了完全一致的條帶為判定腸炎沙門(mén)氏菌引起的食源性疾病事件提供了可靠的證據(jù)。但是，據(jù)流調(diào)顯示可疑食物醬鴨購(gòu)買(mǎi)于患者兒子單位食堂，沒(méi)能采集到食物加工的環(huán)節(jié)是本次事件證據(jù)鏈的重要缺失，希望今后遇到此類(lèi)事件相關(guān)部門(mén)能協(xié)同合作采集到更完整的樣本。

PFGE分型被認(rèn)為是目前細(xì)菌分子流行病學(xué)研究的“金標(biāo)準(zhǔn)”[3]。此次事件就是我們實(shí)驗(yàn)室將PFGE 技術(shù)在病原菌分子溯源方面一次有效的實(shí)踐。然而，我們國(guó)家對(duì)于腸道致病菌的脈沖場(chǎng)數(shù)據(jù)庫(kù)包含的數(shù)據(jù)資料還十分有限,因而加快建設(shè)國(guó)家致病性識(shí)別網(wǎng)體系就顯得非常重要。

腸炎沙門(mén)菌是沙門(mén)菌食物中毒最常見(jiàn)的血清型之一[4]。為了避免此類(lèi)食源性疾病的發(fā)生，我們普通老百姓最好采購(gòu)新鮮的食材，應(yīng)避免使用冰箱內(nèi)久置存放的食品，減少隔夜菜的攝入，本次事件經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查，正是由于食用了放置于冰箱的隔夜醬鴨所致。當(dāng)下天氣炎熱，食品極其容易腐敗變質(zhì)，衛(wèi)生監(jiān)督部門(mén)，應(yīng)加大對(duì)餐飲業(yè)，集體食堂，學(xué)校等各類(lèi)場(chǎng)所的監(jiān)查力度，著重加強(qiáng)督查食品采購(gòu)、貯存、加工、銷(xiāo)售中容易造成食源性疾患的重要環(huán)節(jié)[5]。