黑皮雞樅菌工廠化生產(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)

葉雷 劉定權(quán) 趙建龍 李小林

摘? ?要? 簡(jiǎn)介黑皮雞樅生物學(xué)特性，以及工廠化液體菌種制備、工廠化制袋及接種、發(fā)菌及菌絲后熟管理等技術(shù)要點(diǎn)。從覆土材料選擇及預(yù)處理，設(shè)施廠房層架排袋，出菇管理及病蟲害防控，采收和貯運(yùn)幾個(gè)方面闡述了從生產(chǎn)實(shí)踐中總結(jié)提煉出的工廠化出菇關(guān)鍵技術(shù)。

關(guān)鍵詞? ?黑皮雞樅菌;工廠化生產(chǎn);關(guān)鍵技術(shù)

中圖分類號(hào)：S646.1+1? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B? ? DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2019.31.002

黑皮雞樅菌是四川近幾年快速發(fā)展的人工可栽培珍稀菌類之一，其子實(shí)體富含多糖、氨基酸和微量元素等，可生食，同時(shí)菌絲體發(fā)酵物和子實(shí)體含長(zhǎng)根菇素（小奧德黃酮），具有抑制霉菌等生長(zhǎng)和降低人體血壓的作用。四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所早在2000年就選育出了黑皮雞樅新品種[1]，對(duì)該類菌株的碳源、氮源、酸堿度、溫度等栽培特性進(jìn)行了全面研究[2-3]，并在德陽(yáng)、廣元和成都等地推廣應(yīng)用，至今每年都有小規(guī)模的農(nóng)法栽培。隨著科技的進(jìn)步，工廠化生產(chǎn)成為食用菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展的新方向。本文系對(duì)黑皮雞樅工廠化生產(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)的總結(jié)提煉。

1 生物學(xué)特性

黑皮雞樅菌（Oudemansiella radicata），又名長(zhǎng)根金錢菌、露水雞樅、長(zhǎng)根小奧德蘑等[4]，屬中偏高溫型菇類，為擔(dān)子菌亞門（Basidiomycotina）、傘菌目（Agaricales）、白蘑科（Tricholomataceae）、小奧德蘑屬（Oudemansiella）的腐生菌[5]，野生種在四川、云南、廣西、河南和安徽等地有分布。其菌絲體喜pH值5.5～6.5的微酸性環(huán)境[6]，菌絲體生長(zhǎng)溫度5～35 ℃，最適溫度18～25 ℃;子實(shí)體發(fā)生及發(fā)育的溫度15～32 ℃，最適出菇溫度22～27 ℃;菌絲有后熟特性，一般要經(jīng)過(guò)30～40 d的生理成熟期;喜覆土出菇，但不覆土也可少量出菇。

2 工廠化液體菌種制備

2.1 母種制作

母種制作多選用固體斜面培養(yǎng)基或固體平板進(jìn)行，常用培養(yǎng)基配方為：1）馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，pH自然，加水至1 L[7];2）馬鈴薯180～210 g，麥麩25～30 g，葡萄糖15～20 g，磷酸二氫鉀1～3 g，硫酸鎂0.5～1.0 g，維生素B1 5～10 mg，瓊脂18～22 g，pH值5.5～7.0，加水至1 L。

培養(yǎng)基制作按照常規(guī)方法進(jìn)行。生產(chǎn)用菌種應(yīng)選擇無(wú)雜菌、純度高、活力強(qiáng)的菌株。長(zhǎng)期不用的菌種應(yīng)采用蒸餾水法、液氮保存法等方式進(jìn)行低溫保存。

2.2 液體菌種制備

2.2.1 一級(jí)搖瓶菌種制備

多采用容量1 L的三角瓶進(jìn)行，其部分液體培養(yǎng)基如下：1）玉米粉2～4 g，酵母膏3～4 g，蔗糖18～22 g，磷酸二氫鉀0.2～0.5 g，七水硫酸鎂0.5～1.0 g，維生素B1 8～12 mg，消泡劑（聚二甲基硅氧烷乳液）0.2～0.4 mL，輕質(zhì)碳酸鈣適量，pH值調(diào)整至6.5左右，加水至1 L。2）豆粕粉3～7 g，葡萄糖15～25 g，磷酸二氫鉀0.5～1.0 g，七水硫酸鎂0.5～1.0 g，維生素B1 8～12 mg，消泡劑（聚二甲基硅氧烷乳液）0.2～0.4 mL，輕質(zhì)碳酸鈣適量，pH值調(diào)整至6.5左右，加水至1 L。

按照配方組分配制液體，在磁力攪拌器上加熱攪拌后分裝在容量為1 L的三角瓶中，液體裝量為三角瓶容量的45%以下，蓋好硅膠瓶塞，放在高壓滅菌鍋中按照張偉[8]所述的方法進(jìn)行滅菌后，取出培養(yǎng)基放置在干凈的超凈工作臺(tái)上冷卻。

待液體溫度冷卻至28 ℃以下即可開展接種，整個(gè)接種過(guò)程采用無(wú)菌操作流程，將固體培養(yǎng)基上的菌絲體用接種工具劃為3～5 mm×3～5 mm×0.1～0.2 mm的接種塊，接種量控制在5～20塊/瓶，然后將接種塊轉(zhuǎn)移到液體培養(yǎng)基中，瓶口用無(wú)菌硅膠塞蓋緊，然后放置在黑暗的搖床上搖瓶培養(yǎng)。

搖床參數(shù)：溫度22～25 ℃，濕度自然，無(wú)光，轉(zhuǎn)速90～160 r/min。一般培養(yǎng)6～7 d，質(zhì)量檢測(cè)合格后即可用于后續(xù)深層發(fā)酵接種。對(duì)不能及時(shí)使用的菌種，可先暫時(shí)存放在4 ℃冰箱，但是不能長(zhǎng)時(shí)間存放。

2.2.2 液體菌種培養(yǎng)罐深層發(fā)酵

采用專業(yè)的食用菌液體菌種深層發(fā)酵培養(yǎng)罐進(jìn)行液體菌種擴(kuò)繁。所用液體培養(yǎng)基配方與一級(jí)搖瓶菌種用液體一致，按照組分進(jìn)行擴(kuò)大配制，采用成套設(shè)備對(duì)液體培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌并冷卻到28 ℃以下，用無(wú)菌方式將培養(yǎng)基導(dǎo)入深層發(fā)酵培養(yǎng)罐，并對(duì)液體進(jìn)行合格檢測(cè)，對(duì)合格液體按照無(wú)菌操作流程將上述一級(jí)搖瓶菌種接入一級(jí)發(fā)酵罐中，一般1～3瓶接種1罐（100 L液體），且將接種后的三角瓶殘液在超凈臺(tái)內(nèi)接入肉湯培養(yǎng)基和PDA斜面試管等，置于（37±1） ℃培養(yǎng)，16～48 h后觀察是否有雜菌生長(zhǎng)，有條件可進(jìn)行顯微鏡染色檢測(cè)。

設(shè)置培養(yǎng)罐參數(shù)：控制罐壓0.02～0.05 MPa，轉(zhuǎn)動(dòng)頻率25～30 Hz，溫度25 ℃，根據(jù)罐體中菌絲量適當(dāng)調(diào)整通氣量，液體與通氣比一般為1∶（0.2～0.5）。

一級(jí)發(fā)酵罐一般培養(yǎng)（5±1） d可達(dá)到菌絲體積占比8%以上的接種濃度，即可用于二級(jí)深層發(fā)酵罐（一般選擇1 000 L或者1 500 L的罐）接種，接種量10%左右;二級(jí)罐參數(shù)按照一級(jí)罐相同設(shè)置，一般培養(yǎng)4 d即可達(dá)到接種濃度，用于料袋接種。

3 工廠化制袋及接種

黑皮雞樅生產(chǎn)均采用袋料栽培，采用工廠化專業(yè)機(jī)械進(jìn)行拌料、裝袋、滅菌、接種等。部分主要生產(chǎn)配方如下：

1）雜木屑75～78份，麥麩（或米糠）12～15份，玉米粉6～8份，過(guò)磷酸鈣1份，石膏粉1份，石灰2份;

2）棉籽殼78～82份，麥麩（或米糠）10～12份，玉米粉5～8份，蔗糖1份，過(guò)磷酸鈣1份，石膏粉1份，石灰2份;

3）雜木屑60～65份，玉米芯15～20份，麩皮（或米糠）15～18份，蔗糖1份，石膏粉1份，石灰3份;

4）棉籽殼50～60份，木屑25～35份，米糠10～13份，石膏1份，過(guò)磷酸鈣1份，石灰3份;

5）棉籽殼78～82份，豆粕5～8份，玉米芯10～15份，玉米粉2.5～3份，過(guò)磷酸鈣1份，石膏粉1份，石灰2.5份。

按照配方稱取各種原料，先將主料干拌均勻，再加入其他輔料混合，并調(diào)節(jié)基質(zhì)水份至55%～65%（重量比）。一般采用規(guī)格15 cm×33 cm×0.004 cm的聚丙烯料袋裝料，重量約1.15～1.25 kg/袋，料袋可選用套環(huán)或窩口方式進(jìn)行生產(chǎn)。裝袋完畢后，進(jìn)行高壓滅菌，維持溫度125 ℃、2 h，自然冷卻4～8 h，趁熱出鍋，放置在經(jīng)消毒處理的冷卻室，采用降溫設(shè)備對(duì)料袋進(jìn)行降溫，使得袋料中部溫度在28 ℃以下即可開展接種工作。料袋接種采用專業(yè)接種機(jī)械（見圖1）進(jìn)行，控制接種量為液體菌種25～30 g/袋。

4 發(fā)菌及菌絲后熟管理

培養(yǎng)房須提前3～7 d預(yù)先清洗消毒，接種的料菌袋移入后，控制環(huán)境溫度（22±3） ℃，空氣相對(duì)濕度75%左右，黑暗無(wú)光，適當(dāng)通風(fēng)換氣。菌袋培養(yǎng)過(guò)程中，盡量減少人為走動(dòng)，避免人為因素影響發(fā)菌效果，還要定期清理雜菌污染袋?？販嘏囵B(yǎng)條件下，30 d左右菌絲即可滿袋，但是滿袋后不能急忙用于出菇，應(yīng)繼續(xù)低溫培養(yǎng)菌袋，將環(huán)境溫度調(diào)控至（13±2） ℃，約維持20～30 d，當(dāng)基料表面出現(xiàn)黑褐色條紋或出現(xiàn)凸起原基時(shí)，即可結(jié)束培養(yǎng)，轉(zhuǎn)入出菇環(huán)節(jié)。

5 工廠化出菇關(guān)鍵技術(shù)

5.1 覆土材料選擇及預(yù)處理

5.1.1 覆土材料選擇

黑皮雞樅覆土出菇是最理想的出菇方式，可大大提高出菇單產(chǎn)。所選覆土材料可為土壤、泥炭土、珍珠巖、腐殖質(zhì)等，為了方便一般選用土壤進(jìn)行覆土，所選土壤要求質(zhì)地疏松，透氣性好，有機(jī)質(zhì)含量豐富，以砂壤土為最佳。

5.1.2 覆土材料預(yù)處理

覆土前5 d左右，將沙壤土撒布石灰粉和噴施高效綠霉凈進(jìn)行拌勻消毒，控制含水量在30%左右，pH值為8～10，然后悶堆并用薄膜覆蓋2～3 d，使用前一天測(cè)定土壤酸堿度，調(diào)整pH值為7.0～7.5，即可用于后續(xù)覆土或墊土。

5.2 設(shè)施廠房層架排袋

黑皮雞樅工廠化出菇均采用層架式（見圖2）出菇，其目的是提高單產(chǎn)，一般分為3～6層，單層層架長(zhǎng)30～40 m，每層放置2 000～2 500個(gè)菌包，一個(gè)出菇房放置1.2萬(wàn)～1.8萬(wàn)個(gè)菌包。在準(zhǔn)備用于出菇前3～5 d，用防霉、防蟲藥劑對(duì)菇房出菇層架、地面、墻體等進(jìn)行消毒處理，然后再擺袋出菇。根據(jù)栽培出菇是否脫袋，分為脫袋出菇和袋內(nèi)出菇兩種。

5.2.1 脫袋出菇

是一種將菌袋的塑料料袋人工去除，再進(jìn)行覆土出菇的一種方式，因該種方法可增加出菇面積，間接提高出菇產(chǎn)量，是四川地區(qū)的主要栽培方式。

首先在出菇房中的潔凈層流罩下方采用無(wú)菌刀片將菌絲生理成熟了的菌袋表面聚丙烯料袋脫下，將菌包放置在消毒處理了的無(wú)菌塑料托盤中，裝滿后用平板拖車轉(zhuǎn)移至出菇種植架，采用機(jī)械臂或者人工將菌包排列在底部鋪有約5 cm厚經(jīng)處理過(guò)的土壤上，垂直放立一般一排排列9個(gè)（菌包間距3 cm左右，菌袋規(guī)格17 cm×33 cm×0.004 cm），使得整個(gè)脫袋菌包鋪滿種植床架，然后將覆土土壤填滿菌包間隙，并覆蓋約5 cm厚的土壤（見圖3）。待后續(xù)出菇管理。

5.2.2 袋內(nèi)出菇

是一種不用脫去菌袋的塑料料袋而直接在菌袋一端開口進(jìn)行覆土出菇的方式，該方式過(guò)程簡(jiǎn)單，處理廢棄菌渣容易，但由于出菇面積相對(duì)較小，單產(chǎn)相對(duì)于脫袋覆土略低。將菌絲生理成熟了的菌袋一端開口，用處理過(guò)的土壤覆蓋約5 cm厚，將開口菌袋垂直均勻地?cái)[放在出菇房的床架上。待后續(xù)出菇管理。

5.3 出菇管理及病蟲害防控

無(wú)論是脫袋出菇還是袋內(nèi)出菇，在工廠化出菇房中完成菌袋覆土后，都須對(duì)覆土進(jìn)行澆水，所用水均為澄清石灰水（pH值7.0～7.5）;維持土壤含水量約25%左右，土壤溫度23～27 ℃，空氣相對(duì)濕度80%以上，1 500～2 000 lx光照，注意通風(fēng)，15～25 d即可出現(xiàn)大量原基，原基長(zhǎng)出后，要增加噴水次數(shù)，以細(xì)噴多次為原則，且宜在早晚噴。菇蕾繼續(xù)生長(zhǎng)5～10 d，八分熟以前采收，采收完一茬停水養(yǎng)菌約5 d進(jìn)入下一潮菇的管理。

在出菇期病蟲害防控上，以預(yù)防為主，在出菇房中放適量黃板、殺蟲燈、誘殺劑等，發(fā)現(xiàn)病蟲害立即隔離處理，如出現(xiàn)黏菌（見圖4左）等為害，可在其發(fā)生區(qū)撒入適量生石灰，營(yíng)造強(qiáng)堿性環(huán)境加以控制;跳蟲（見圖4右）體表為油質(zhì)，藥液很難滲入體內(nèi)，應(yīng)以預(yù)防為主，多在出菇房放置黃板，或在出菇前對(duì)菇房進(jìn)行熏蒸消毒。

5.4 采收和貯運(yùn)

當(dāng)菌蓋開傘5～8成時(shí)（見圖5）即判定子實(shí)體可采收。采收時(shí)單手握住菌柄，輕輕向上旋轉(zhuǎn)拉出整個(gè)子實(shí)體，然后均勻放置在潔凈的托盤中，采收后立即放置在4 ℃冷卻室中預(yù)冷，再立即用小刀削去菌柄基部泥土及其“根”，然后可進(jìn)行進(jìn)一步分級(jí)。

分級(jí)完成的菇按照一定重量規(guī)格打包進(jìn)行冷鏈鮮銷，保藏庫(kù)溫度0～4.0 ℃，無(wú)光，空氣相對(duì)濕度80%左右，一般保鮮期可達(dá)8～10 d。目前，四川省已在敘永縣麻城鎮(zhèn)建成食用菌工廠化生產(chǎn)基地，產(chǎn)品在本省銷售，同時(shí)遠(yuǎn)銷北京、廣東、上海、重慶等市場(chǎng)，供不應(yīng)求，市場(chǎng)前景廣闊。

參考文獻(xiàn)：

[1] 譚偉，鄭林用，彭衛(wèi)紅，等.食用菌人工馴化新品種——露水雞樅選育研究[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2002，15（2）：24-27.

[2] 譚偉，鄭林用.六種碳源和氮源對(duì)長(zhǎng)根奧德蘑菌絲生長(zhǎng)的影響[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2001，14（3）：109-111.

[3] 譚偉.長(zhǎng)根金錢菌生物學(xué)特性研究[J].食用菌學(xué)報(bào)，2001，8（3）：16-22.

[4] 陳建飛，程萱，周愛珠，等.長(zhǎng)根菇化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].食藥用菌，2018，26（4）：222-224.

[5] 顧新偉，何伯偉，鄭巧平，等.浙南山區(qū)大型真菌[M].杭州：浙江科學(xué)技術(shù)出版社，2012.

[6] 鄒祥，胡昌華.長(zhǎng)根菇液體深層發(fā)酵條件的研究[J].食品科學(xué)，2005，26（2）：130-134.

[7] 葉雷，付雨，鄒捷，等.四川3種商業(yè)塊菌內(nèi)生真菌的分離及鑒定[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2018，34（24）：57-63.

[8] 譚偉，張偉.長(zhǎng)根奧德蘑菌種培養(yǎng)基篩選試驗(yàn)[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2001，14（S1）：127-129.

（責(zé)任編輯：丁志祥）