• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    TLR4/MyD88信號(hào)通路在卵巢癌紫杉醇化療抵抗中的研究進(jìn)展

    2019-12-22 03:35:47王安鳳童曉文
    外科研究與新技術(shù) 2019年1期
    關(guān)鍵詞:免疫抑制紫杉醇卵巢癌

    王安鳳,潘 晨,童曉文

    1.同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院婦產(chǎn)科,上海 200065 2.江蘇省人民醫(yī)院溧陽分院婦產(chǎn)科,溧陽 213300

    近年來,腫瘤已成為現(xiàn)代社會(huì)威脅人類生命最嚴(yán)重的疾病之一,癌癥是發(fā)展中國家首位死因,WHO預(yù)測(cè)全球癌癥死亡在2007—2030年將增加45%,2030年將有癌癥新發(fā)病例2 640萬例,死亡1 700萬。上皮性卵巢癌是美國女性癌癥第5位死因,2017年有超過14 000死亡人數(shù)[1].卵巢癌由于發(fā)病率高、病程隱匿、早期診斷困難、總體預(yù)后不良等特點(diǎn),導(dǎo)致其對(duì)女性的健康及生命帶來了嚴(yán)重威脅,它的治療方法是腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)加術(shù)后系統(tǒng)的TC方案化療,但80%的卵巢癌患者在1~2年內(nèi)復(fù)發(fā),晚期卵巢癌的5年生存率長期滯留在30%左右,無明顯改觀。一方面手術(shù)的徹底性至關(guān)重要,但是50%ⅢC期及Ⅳ期患者很難達(dá)到滿意的無肉眼殘留病變。隨后提倡的術(shù)前給與新輔助化療,預(yù)后仍無明顯改善。原因很多,其中主要還是化療藥物耐藥的問題,故尋找敏感的化療方案及解決卵巢癌化療耐藥的問題迫在眉睫。

    紫杉醇作為卵巢癌化療的一線用藥,其抗腫瘤的機(jī)制主要是“凍結(jié)有絲分裂”使腫瘤細(xì)胞停止在G2期和M期,直至死亡;另外,紫杉醇也可作用于巨噬細(xì)胞上的腫瘤壞死因子(TNF)受體,對(duì)腫瘤細(xì)胞起殺傷或抑制腫瘤細(xì)胞遷移作用[2]。近年研究發(fā)現(xiàn)紫杉醇是Toll受體4(TLR4)的主要配體之一,可以通過TLR4/髓樣細(xì)胞分化因子88信號(hào)通路促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞增殖和抗凋亡作用,也就是在特定的情況下,紫杉醇對(duì)于卵巢癌細(xì)胞具有促凋亡和抗凋亡的雙重作用[3-6].

    1 TLR4/MyD88信號(hào)通路作用機(jī)制

    1.1 TLR4的生物學(xué)特性

    TLR4是由胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)三個(gè)部分組成的Ⅰ型跨膜蛋白,其胞外區(qū)結(jié)構(gòu)由富含亮氨酸的重復(fù)序列(leucine-rich repeats,LRR)組成,TLR胞內(nèi)區(qū)結(jié)構(gòu)與白介素L受體1的保守區(qū)域相似,稱為TIR區(qū)(TLRVIL,R1 homologous region)[7],跨膜區(qū)是富含半胱氨酸的結(jié)構(gòu)域。TLR4可識(shí)別多種配體,最主要的是來自革蘭陰性菌細(xì)胞壁的LPS,研究發(fā)現(xiàn)紫杉醇也是可被其識(shí)別的非病原體相關(guān)分子模式(PAMP)分子[8],能激活MyD88依賴性、MyD88非依賴性通路即TLR相關(guān)的干擾素活化子(TIR domain containing adaptor protein inducing interferon-β,TRIF)依賴信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,從而誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞釋放多種因子或上調(diào)抗凋亡信號(hào)等一系列效應(yīng)。

    高遷移率族蛋白B1(high mobility group box-1,HMGB1)是近年備受關(guān)注的TLR4內(nèi)源性配體之一,不斷增加的證據(jù)顯示,紫杉醇和(或)LPS誘導(dǎo)受損組織或壞死細(xì)胞釋放HMGB1,并通過RACE或TLR4信號(hào)通路繼而介導(dǎo)自噬和釋放多種細(xì)胞因子[9]。

    1.2 髓樣細(xì)胞分化因子88(myeloid differentiation factor 88, MyD88)的生物學(xué)特性

    MyD88[10]是含有TLR結(jié)構(gòu)域的接頭蛋白,在TLR信號(hào)通路中有關(guān)鍵性的作用,其N端的死亡區(qū)(death domain,DD)與白細(xì)胞介素-1受體相關(guān)激酶(interleukin-1 receptor associate kinase,IRAK)的死亡結(jié)構(gòu)域相結(jié)合,并引起IRAK的自身磷酸化,最終引起炎性細(xì)胞因子的合成和釋放,從而誘發(fā)機(jī)體本身的炎癥反應(yīng)過程。

    1.3 TLR4/MyD88信號(hào)通路

    目前主要根據(jù)接頭蛋白不同,分為MyD88依賴性途徑和非MyD88依賴性途徑。

    1.3.1 MyD88

    依賴性信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑是TLR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的共同通路(TLR3除外),MyD88依賴性途徑主要包括兩種作用方式:NF-kB和JNK/SAPK,具體過程為:當(dāng)TLR與PAMPs或紫杉醇結(jié)合后,受體發(fā)生二聚化,此時(shí)胞質(zhì)中Toll的結(jié)構(gòu)域與MyD88的羧基末端相互作用,MyD88用它的DD募集下游同樣含死亡作用域IRAK家族相結(jié)合,導(dǎo)致IRAK自身磷酸化,磷酸化的IRAK脫離MyD88與腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(TNF receptor-associated factor 6, TRAF6)結(jié)合,TRF6活化引起上述兩條不同途徑的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。

    1.3.2 在MyD88

    非依賴性途徑中,能夠激活干擾素調(diào)節(jié)因子3(interferon regulatory factor 3, IRF3)和TANK聯(lián)合激酶1(TANK binding kinase 1, TBK1)等信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子,最終誘導(dǎo)干擾素β(interferon-β,IFN-β)的表達(dá)。研究表明,該通路也可導(dǎo)致NF-kB和MAPK的激活[8]。

    2 TLR4/MyD88信號(hào)通路與卵巢癌

    2.1 TLR4/MyD88信號(hào)通路在卵巢癌細(xì)胞中的表達(dá)

    現(xiàn)認(rèn)為,在卵巢癌細(xì)胞表面TLR4/MyD88的表達(dá)可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸,同時(shí)參與細(xì)胞凋亡及腫瘤細(xì)胞化療耐藥。朱熠等[11]通過研究109例卵巢組織石蠟包埋組織標(biāo)本研究卵巢癌TLR4/MyD88信號(hào)通路的表達(dá)及臨床預(yù)后相關(guān)性,其結(jié)果表明發(fā)現(xiàn)TLR4在卵巢良惡性細(xì)胞中均有表達(dá),但在惡性細(xì)胞中染色強(qiáng)度明顯增高,且MyD88+的卵巢癌患者較不表達(dá)者DFS及OS明顯縮短。

    2.2 TLR4/MyD88信號(hào)通路與卵巢癌復(fù)發(fā)及紫杉醇耐藥的關(guān)系

    作為卵巢癌一線用藥的紫杉醇,其耐藥的過程是一個(gè)多因素、多途徑、多層次相互作用的結(jié)果[12]。Wang等人研究發(fā)現(xiàn)下調(diào)卵巢癌細(xì)胞中的TLR4的表達(dá)可下調(diào)XIAP和pAkt的表達(dá),恢復(fù)紫杉醇對(duì)SKOV3細(xì)胞增殖的抑制作用,阻礙癌細(xì)胞周期進(jìn)程[13]。鑒于炎癥與腫瘤關(guān)系密切,目前研究發(fā)現(xiàn)介導(dǎo)慢性炎癥反應(yīng)的Toll樣受體(Toll-like receptors, TLRs)及其銜接蛋白MyD88起到了至關(guān)重要的作用[14-15]。以下主要從炎癥微環(huán)境[3]、凋亡抑制、免疫抑制3個(gè)方面綜述[5]:

    2.2.1 TLR4/MyD88激活導(dǎo)致的炎癥微環(huán)境改變

    研究發(fā)現(xiàn),炎癥在惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展等方面發(fā)揮重要作用,腫瘤細(xì)胞、周圍正常的宿主基質(zhì)細(xì)胞和浸潤的炎性細(xì)胞共同組成一個(gè)整體——腫瘤微環(huán)境。目前已證明在腫瘤中促進(jìn)炎癥發(fā)生的重要因素包括自由基、細(xì)胞因子和轉(zhuǎn)錄激活因子-3(STAT-3)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)、環(huán)氧合酶-2(COX-2)、VEGF以及HMGB1等[16]。IL-6屬于微環(huán)境中最常見的促進(jìn)獲得性免疫的細(xì)胞因子。Wang等研究說明卵巢癌細(xì)胞分泌的IL-6、IL-8可能是卵巢癌對(duì)傳統(tǒng)化療藥物產(chǎn)生抵抗的原因,其機(jī)制主要是下調(diào)細(xì)胞凋亡蛋白酶caspase-3的蛋白水解活性。其次IL-6、IL-8誘導(dǎo)的化療抵抗與多耐藥基因(MDR和GSTpi)、細(xì)胞凋亡抑制蛋白(Bcl-2、Bcl-xL、XIAP)的增加有關(guān),還涉及到Ras/MEK/ERK和PI3K/Akt的活化。HMGB1是一種廣泛存在于真核生物細(xì)胞內(nèi),富含電荷的非組蛋白染色質(zhì)核蛋白,其在壓力條件下(氧化壓力及炎癥反應(yīng)等),會(huì)主動(dòng)或被動(dòng)釋放到胞外,胞外HMGB1可參與NF-kB通路釋放促炎性細(xì)胞因子、趨化因子、血管生成因子等,參與形成炎性微環(huán)境。此外還能介導(dǎo)中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)的形成(neutrophil extracellular traps, NETs)[17]。

    另外有研究顯示,COX-2在卵巢癌中高表達(dá),其表達(dá)水平與卵巢癌的分型、分化程度、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[18]。Rouba等[19]為探究COX-2在晚期卵巢癌中與腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡、血管生成及生存率的關(guān)系,使用免疫組化的方式檢測(cè)118例晚期卵巢癌病人的COX-2、Ki-67、VEGF、和bcl-2的表達(dá)情況,結(jié)果也證實(shí)了環(huán)氧合酶-2的表達(dá)與腫瘤增殖和腫瘤血管生成有關(guān)。COX-2主要是通過前列腺素(PGs)起作用,通過影響細(xì)胞周期,還能抑制細(xì)胞凋亡和增加VEGF的表達(dá),增減微血管密度(MVD),促進(jìn)新生血管的生成,起到促進(jìn)腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的效果[20]。

    2.2.2 TLR4/MyD88的凋亡抑制作用

    survivin特異性表達(dá)于細(xì)胞的G2/M期,是目前抑制作用最強(qiáng)的凋亡抑制蛋白,其與卵巢癌細(xì)胞生長、侵襲轉(zhuǎn)移和耐藥密切相關(guān)。為探索survivin在卵巢癌預(yù)后中的作用,Athanassiadou等[20]選取100例卵巢癌標(biāo)本進(jìn)行免疫細(xì)胞學(xué)染色檢測(cè)survivin的表達(dá)情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn)survivin的表達(dá)與腫瘤惡性程度及細(xì)胞學(xué)分級(jí)呈正相關(guān)(P<0.0001)。在抑制細(xì)胞凋亡的過程中,survivin通過線粒體細(xì)胞色素C的釋放,直接抑制下游凋亡效應(yīng)因子caspase-3和caspase-7的作用[21]。另外,survivin表達(dá)異常增高促進(jìn)VEGF等促血管生成因子的表達(dá),有研究[8,22]發(fā)現(xiàn)血管生成素(angiopoietin, Ang)II的作用依賴于survivin的表達(dá)上調(diào),其通過survivin抑制Caspase-3來調(diào)節(jié)腫瘤血管生成。

    血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是促進(jìn)腫瘤血管形成的主要因子,在卵巢癌惡性腫瘤中異常高表達(dá),其作為貫穿血管通透性的初始誘導(dǎo)到內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和存活等許多步驟的關(guān)鍵驅(qū)動(dòng)因素[15]。卵巢癌組織缺氧能刺激產(chǎn)生更多的VEGF[23],另外紫杉醇能直接激活TLR4/MyD88信號(hào)通路或通過上調(diào)HMGB1的表達(dá)促使VEGF產(chǎn)生和內(nèi)皮細(xì)胞增殖,VEGF能通過PI3K/Akt信號(hào)通路誘導(dǎo)survivin的表達(dá),從而導(dǎo)致化療耐藥。

    X連鎖凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein, XIAP)屬于凋亡抑制蛋白, Miyamoto等[24]研究發(fā)現(xiàn)高表達(dá)于卵巢癌細(xì)胞中,其過表達(dá)與腫瘤的進(jìn)展、復(fù)發(fā)、預(yù)后以及耐藥密切相關(guān)[25]。XIAP通過抑制caspase-9、caspase-3和caspase-7的活性、激活核因子kB(NF-kB)、與磷脂酸肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路相互作用、作用于絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)阻礙細(xì)胞凋亡[26]。鄒冬玲等[27]為研究MyD88在卵巢癌中的耐藥機(jī)制,研究發(fā)現(xiàn)MyD88蛋白通過調(diào)節(jié)PKB/Akt信號(hào)通路、XIAP以及MDR1表達(dá)參與對(duì)卵巢癌對(duì)紫杉醇的耐藥性。另外,紫杉醇結(jié)合TLR4/MyD88通路啟動(dòng)PI3K/Akt生存途徑的同時(shí)激活NF-kB及其核轉(zhuǎn)移,促使卵巢癌細(xì)胞釋放炎癥因子IL-6和誘導(dǎo)凋亡抑制蛋白表達(dá);王丹等[28]利用構(gòu)建內(nèi)源性過表達(dá)的IL-6的人卵巢癌A2780細(xì)胞系和內(nèi)源性抑制IL-6表達(dá)的人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞,與Duan[29]等在非小細(xì)胞肺癌中的研究結(jié)果相似,證實(shí)了IL-6也可激活PI3K/Akt信號(hào)通路增強(qiáng)卵巢癌細(xì)胞細(xì)胞的黏附和侵襲能力以及抗凋亡作用,如此惡性循環(huán)最終引起卵巢癌抗凋亡。

    2.2.3 TLR4/MyD88與免疫抑制

    大量證據(jù)表明,卵巢癌是免疫源性腫瘤[30],癌細(xì)胞異常高表達(dá)免疫抑制相關(guān)分子,如Toll樣受體4(TLR4)、MyD88、吲哚胺2/3-雙加氧酶1(IDO1)、PD-L1、PD-1以及芳香烴受體(AHR),此外還表達(dá)分泌可溶性免疫抑制相關(guān)因子,如白細(xì)胞介素(IL)-6、轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)等。導(dǎo)致卵巢癌免疫抑制或逃逸的因素包括卵巢癌細(xì)胞誘導(dǎo)的調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞(Treg)[4]、漿細(xì)胞樣DC(pDC)、髓源性抑制細(xì)胞(MDSC)和腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tumor-associated macrophages, TAMs),它們被募集到卵巢組織中,形成卵巢癌免疫抑制微環(huán)境;此外,卵巢癌細(xì)胞分泌的可溶性免疫抑制因子,抑制了局部抗原提呈細(xì)胞(APC)的成熟,抑制APC有效提呈腫瘤抗體,阻斷T細(xì)胞、自然殺傷(NK)細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等的抗瘤活性,抑制機(jī)體免疫和CTL細(xì)胞毒效應(yīng),導(dǎo)致免疫細(xì)胞不能識(shí)別靶細(xì)胞或免疫功能不全[31]。其機(jī)制主要是卵巢癌細(xì)胞通過TLR4-髓樣分化因子(MD2)復(fù)合物介導(dǎo)的MyD88依賴的PI3K/蛋白激酶B(Akt)/核因子kB(NF-kB)信號(hào)通路活化,促進(jìn)IL-6、TGF-β1和IL-17A的表達(dá)和分泌,誘導(dǎo)IDO1高表達(dá)及其色氨酸代謝產(chǎn)物犬尿氨酸(KYN)產(chǎn)生,并誘導(dǎo)Treg細(xì)胞CD4+CD25+叉頭蛋白P3(Foxp3)的表達(dá),抑制巨噬細(xì)胞的功能和DC的活性,降低T淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)和細(xì)胞毒性作用,Foxp3也能調(diào)節(jié)Treg的功能和表達(dá)[32]。MyD88+卵巢癌細(xì)胞表達(dá)和分泌IL-6,對(duì)IDO1和AHR活化起到了決定性作用,AHR的內(nèi)源性配體KYN,可誘導(dǎo)免疫耐受性DC和Treg的產(chǎn)生。另外,通過KYN活化的AHR作為轉(zhuǎn)錄因子又進(jìn)一步促進(jìn)了IL-6的轉(zhuǎn)錄表達(dá),形成IL-6/IDO1/KYN/AHR/IL-6信號(hào)通路的回路。新近研究還顯示IL-6通過酪氨酸蛋白激酶(JAK)/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)信號(hào)通路的活化,上調(diào)PD-1并降低免疫抑制的作用。卵巢癌主要通過MyD88/IDO1/KYN/AHR信號(hào)通路的活化以及IL-6/IDO1/KYN/AHR/IL-6信號(hào)通路回路形成免疫抑制微環(huán)境,最終導(dǎo)致免疫抑制或免疫逃脫[33]。

    3 總結(jié)

    綜上所述,卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤中預(yù)后最差的一種,患者生存質(zhì)量差,5年OS率低。因此,亟待尋求方法提高卵巢癌患者的臨床治療療效及生存質(zhì)量。隨著醫(yī)療的進(jìn)步,卵巢癌化療紫杉醇抵抗是目前認(rèn)為其死亡率高的主要原因,研究證實(shí)當(dāng)紫杉醇刺激表達(dá)與卵巢癌細(xì)胞表面的TLR4/MyD88通路激活NF-kB通路或Akt生存途徑,從而誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞釋放多種促炎因子、凋亡抵抗以及免疫抵抗,其相互作用,最終導(dǎo)致免疫逃逸和化療失敗。在上述機(jī)制的共同作用中TLR4/MyD88信號(hào)通路及其負(fù)調(diào)控策略成為研究熱點(diǎn)。根據(jù)上述機(jī)制,一方面可考慮靶向阻斷通路,如針對(duì)TLR4通路的不同階段,可將現(xiàn)有的負(fù)調(diào)控因子分為三類:一是TLR4表達(dá)抑制劑,如阿托伐他汀等;二是TLR4二聚體化抑制劑,如MPLA、姜黃素等;三是TLR4通路分子抑制因子,如Gas6、Traid3A等。另一方面,可通過免疫治療,如阻斷導(dǎo)致卵巢癌免疫逃逸的通路、殺傷細(xì)胞(CIK細(xì)胞)回輸、樹突狀細(xì)胞-殺傷細(xì)胞(DC-CIK細(xì)胞)療法以及自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)療法。另外,有研究表明,COX-2抑制劑能抑制腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá)[34],各種促炎性因子及免疫抑制因子之間相互作用,其過表達(dá)在卵巢癌細(xì)胞生長、凋亡、腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移、腫瘤血管生成及腫瘤化療耐藥產(chǎn)生相關(guān),使用相關(guān)抑制劑改善卵巢癌進(jìn)展及化療敏感性,也可考慮通過下調(diào)抗凋亡蛋白如survivin表達(dá)恢復(fù)化療敏感性。對(duì)于卵巢癌抗凋亡微環(huán)境分子之間的內(nèi)在聯(lián)系及相互作用仍需要深入研究,認(rèn)識(shí)卵巢癌免疫抑制的分子機(jī)制、尋找卵巢癌靶標(biāo)分子、選擇卵巢癌高效的治療方案,這對(duì)于改善卵巢癌預(yù)后具有重要意義。

    猜你喜歡
    免疫抑制紫杉醇卵巢癌
    豬免疫抑制性疾病的病因、發(fā)病特點(diǎn)及防控措施
    卵巢癌:被遺忘的女性“沉默殺手”
    防控豬群免疫抑制的技術(shù)措施
    紫杉醇脂質(zhì)體與紫杉醇不同途徑灌注治療兔舌癌的療效研究
    Wnt3 a和TCF4在人卵巢癌中的表達(dá)及臨床意義
    脂質(zhì)體紫杉醇周療方案與普通紫杉醇治療乳腺癌的療效及不良反應(yīng)比較
    丹參總酚酸對(duì)大鼠缺血性腦卒中后免疫抑制現(xiàn)象的改善作用
    護(hù)理干預(yù)對(duì)預(yù)防紫杉醇過敏反應(yīng)療效觀察
    microRNA與卵巢癌轉(zhuǎn)移的研究進(jìn)展
    紫杉醇新劑型的研究進(jìn)展
    波野结衣二区三区在线| 少妇的逼好多水| 亚洲色图综合在线观看| av女优亚洲男人天堂| 国产爽快片一区二区三区| 国产日韩欧美在线精品| 天堂中文最新版在线下载 | 久久久久九九精品影院| 日本三级黄在线观看| 精品少妇黑人巨大在线播放| 国产爱豆传媒在线观看| 精品国产三级普通话版| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 免费大片黄手机在线观看| 日本与韩国留学比较| 亚洲av福利一区| 插阴视频在线观看视频| 97在线人人人人妻| 网址你懂的国产日韩在线| av播播在线观看一区| 国产成年人精品一区二区| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 中文字幕亚洲精品专区| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 中文欧美无线码| 欧美另类一区| 久久人人爽人人片av| 国产伦精品一区二区三区四那| 国产免费福利视频在线观看| 少妇的逼好多水| 国产精品嫩草影院av在线观看| av黄色大香蕉| 人妻夜夜爽99麻豆av| 各种免费的搞黄视频| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 九九爱精品视频在线观看| 日本熟妇午夜| eeuss影院久久| 日韩成人av中文字幕在线观看| 国产乱来视频区| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 综合色av麻豆| 干丝袜人妻中文字幕| 亚洲欧美成人精品一区二区| 日本午夜av视频| 视频中文字幕在线观看| 干丝袜人妻中文字幕| 亚洲,欧美,日韩| 国产精品偷伦视频观看了| 国产高清国产精品国产三级 | 亚洲欧美成人精品一区二区| 中文欧美无线码| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 一级黄片播放器| 赤兔流量卡办理| freevideosex欧美| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 啦啦啦啦在线视频资源| 伦精品一区二区三区| 亚洲欧美精品专区久久| 免费观看无遮挡的男女| av黄色大香蕉| 麻豆久久精品国产亚洲av| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 一本久久精品| 丝袜喷水一区| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 欧美国产精品一级二级三级 | 亚洲精品国产av成人精品| 久久久a久久爽久久v久久| 国产精品久久久久久久电影| 久久久精品94久久精品| 午夜激情福利司机影院| av线在线观看网站| 久久久欧美国产精品| 人妻一区二区av| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 99精国产麻豆久久婷婷| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 日韩欧美精品v在线| 少妇人妻久久综合中文| 日韩强制内射视频| 色播亚洲综合网| 乱系列少妇在线播放| 亚洲国产成人一精品久久久| 成人美女网站在线观看视频| 久久久久久久久久成人| 插逼视频在线观看| 欧美日韩在线观看h| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 秋霞在线观看毛片| 久久久久久久久久成人| 99久久中文字幕三级久久日本| 日本一二三区视频观看| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 欧美日韩视频精品一区| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 亚洲在线观看片| 午夜福利网站1000一区二区三区| 久久久精品94久久精品| 婷婷色av中文字幕| 亚洲成人av在线免费| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 日本一本二区三区精品| 永久免费av网站大全| 久久精品综合一区二区三区| 欧美成人精品欧美一级黄| 成年版毛片免费区| 五月玫瑰六月丁香| 免费看av在线观看网站| 在线a可以看的网站| xxx大片免费视频| 欧美xxxx性猛交bbbb| 中国美白少妇内射xxxbb| 亚洲成人中文字幕在线播放| 国产精品熟女久久久久浪| 一级毛片aaaaaa免费看小| 神马国产精品三级电影在线观看| 美女内射精品一级片tv| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| av播播在线观看一区| 丝袜美腿在线中文| 联通29元200g的流量卡| 国产黄频视频在线观看| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 亚洲美女搞黄在线观看| 亚洲国产高清在线一区二区三| 国产av不卡久久| 亚洲精品日本国产第一区| 另类亚洲欧美激情| 日韩中字成人| 热99国产精品久久久久久7| 国产午夜精品一二区理论片| 日韩制服骚丝袜av| 少妇人妻精品综合一区二区| 在线精品无人区一区二区三 | 成人漫画全彩无遮挡| 亚洲人成网站在线播| 高清午夜精品一区二区三区| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲精品第二区| 岛国毛片在线播放| 国产男女内射视频| 亚洲人成网站在线播| 国产午夜福利久久久久久| 国国产精品蜜臀av免费| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 在现免费观看毛片| 国产精品不卡视频一区二区| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 亚洲欧美日韩东京热| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 免费黄色在线免费观看| 波野结衣二区三区在线| 国产精品精品国产色婷婷| 亚洲美女搞黄在线观看| 2022亚洲国产成人精品| 国产精品久久久久久av不卡| 亚洲人成网站在线观看播放| 亚洲国产av新网站| 国产亚洲一区二区精品| 免费大片黄手机在线观看| 97超视频在线观看视频| 国产精品久久久久久精品古装| 久久久久久久久久人人人人人人| 国产高清国产精品国产三级 | 人妻制服诱惑在线中文字幕| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产69精品久久久久777片| 亚洲av二区三区四区| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 一级黄片播放器| 成人免费观看视频高清| 久久精品综合一区二区三区| 中文在线观看免费www的网站| 亚洲一区二区三区欧美精品 | 国产探花极品一区二区| 亚洲av福利一区| 国产精品久久久久久精品古装| 最近中文字幕2019免费版| 激情五月婷婷亚洲| 中文在线观看免费www的网站| 午夜日本视频在线| 免费观看的影片在线观看| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 日韩三级伦理在线观看| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 国产精品伦人一区二区| 久久久久久久久久久免费av| 精品久久久久久电影网| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 亚洲av中文av极速乱| 精品一区二区免费观看| 91在线精品国自产拍蜜月| 性色avwww在线观看| 成年av动漫网址| 久久久久久久久久成人| 我的老师免费观看完整版| av免费在线看不卡| 婷婷色综合www| 一级爰片在线观看| 天堂中文最新版在线下载 | 一区二区三区四区激情视频| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 好男人视频免费观看在线| 免费黄网站久久成人精品| 少妇高潮的动态图| 少妇丰满av| 一级毛片我不卡| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 精品视频人人做人人爽| 白带黄色成豆腐渣| 啦啦啦啦在线视频资源| 精品久久久噜噜| 国产午夜福利久久久久久| 少妇人妻久久综合中文| 精品久久久久久久末码| 伊人久久国产一区二区| 最近中文字幕2019免费版| 777米奇影视久久| 国产成人aa在线观看| 免费看不卡的av| 中文天堂在线官网| 能在线免费看毛片的网站| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 啦啦啦在线观看免费高清www| 成人无遮挡网站| 高清毛片免费看| 老女人水多毛片| 免费观看av网站的网址| 国产精品一及| 99久国产av精品国产电影| 少妇 在线观看| 观看免费一级毛片| 伦理电影大哥的女人| 一区二区三区精品91| 亚洲国产欧美在线一区| 国产av不卡久久| 久久久久久久精品精品| 天天躁日日操中文字幕| 久久精品久久久久久久性| 久久久欧美国产精品| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 欧美日韩精品成人综合77777| 久久97久久精品| 大香蕉97超碰在线| 国产午夜精品一二区理论片| 久久精品人妻少妇| 国产综合精华液| 熟妇人妻不卡中文字幕| 麻豆久久精品国产亚洲av| 欧美另类一区| 亚洲精品成人av观看孕妇| 免费黄频网站在线观看国产| 亚洲av二区三区四区| 亚洲av国产av综合av卡| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 黄色视频在线播放观看不卡| 国产 一区 欧美 日韩| 亚洲欧美精品自产自拍| 色哟哟·www| 欧美xxxx性猛交bbbb| 另类亚洲欧美激情| 亚洲av中文av极速乱| 国产亚洲最大av| 国产黄色视频一区二区在线观看| 欧美高清成人免费视频www| 国产黄色免费在线视频| 亚洲最大成人av| 国产精品伦人一区二区| 99久久九九国产精品国产免费| 日本wwww免费看| 一本久久精品| 国产在线男女| 国产黄色免费在线视频| 插阴视频在线观看视频| 久久久久久久久久久免费av| 亚洲精品久久午夜乱码| 免费av观看视频| 日韩大片免费观看网站| 极品教师在线视频| 国产精品无大码| 简卡轻食公司| 制服丝袜香蕉在线| av国产久精品久网站免费入址| 国产伦在线观看视频一区| 久久人人爽人人爽人人片va| 观看免费一级毛片| 国产成人免费观看mmmm| 成年免费大片在线观看| 亚洲av欧美aⅴ国产| 永久免费av网站大全| 99热网站在线观看| 五月玫瑰六月丁香| 成年人午夜在线观看视频| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 伦理电影大哥的女人| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 色播亚洲综合网| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 老司机影院毛片| 亚洲自偷自拍三级| 性色avwww在线观看| av在线app专区| 边亲边吃奶的免费视频| 亚洲国产欧美在线一区| 午夜爱爱视频在线播放| 免费av观看视频| eeuss影院久久| 99久国产av精品国产电影| 午夜免费男女啪啪视频观看| 一区二区三区精品91| 欧美zozozo另类| 免费黄频网站在线观看国产| 午夜日本视频在线| 观看美女的网站| av线在线观看网站| 国产免费福利视频在线观看| 国产精品爽爽va在线观看网站| 亚洲精品中文字幕在线视频 | av又黄又爽大尺度在线免费看| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 国产黄片美女视频| 午夜免费观看性视频| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 国产男女内射视频| 亚洲不卡免费看| 国产精品一区二区在线观看99| 在线观看三级黄色| 久久久久国产精品人妻一区二区| 天天一区二区日本电影三级| 我的女老师完整版在线观看| 免费在线观看成人毛片| 亚洲av二区三区四区| 激情 狠狠 欧美| 国产色婷婷99| 欧美bdsm另类| 亚洲四区av| 午夜视频国产福利| 成人国产麻豆网| a级毛色黄片| 亚洲精品视频女| 国产黄色视频一区二区在线观看| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 简卡轻食公司| 婷婷色麻豆天堂久久| 97精品久久久久久久久久精品| 久久热精品热| 久久久久性生活片| 免费看a级黄色片| 99热全是精品| 一区二区三区精品91| 久久久久性生活片| 欧美日韩视频精品一区| 人妻系列 视频| 亚洲精品亚洲一区二区| 韩国高清视频一区二区三区| 亚洲自拍偷在线| 超碰97精品在线观看| 久久99精品国语久久久| 超碰97精品在线观看| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 亚洲国产最新在线播放| 亚洲欧美成人精品一区二区| 少妇人妻久久综合中文| 国产一级毛片在线| eeuss影院久久| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 精品国产乱码久久久久久小说| 国产精品久久久久久久久免| 日韩精品有码人妻一区| videos熟女内射| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频 | 九色成人免费人妻av| 青春草视频在线免费观看| 精品午夜福利在线看| av在线老鸭窝| 大片电影免费在线观看免费| 日韩欧美一区视频在线观看 | 精品久久久久久电影网| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 久久久久久久久大av| 老女人水多毛片| 国产一区亚洲一区在线观看| 免费少妇av软件| 国产精品人妻久久久影院| 国产免费又黄又爽又色| 2018国产大陆天天弄谢| 国产午夜精品一二区理论片| 综合色丁香网| 99久久九九国产精品国产免费| 天天躁日日操中文字幕| 国产午夜福利久久久久久| 久久久色成人| 日日啪夜夜撸| 国产精品伦人一区二区| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 伊人久久国产一区二区| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 观看免费一级毛片| 男女边吃奶边做爰视频| 久久久久久久久久成人| av卡一久久| 高清午夜精品一区二区三区| 下体分泌物呈黄色| 午夜福利在线在线| 免费看日本二区| 国产一区二区在线观看日韩| 亚洲国产精品国产精品| 亚洲国产欧美在线一区| 国产又色又爽无遮挡免| 校园人妻丝袜中文字幕| 国产高清不卡午夜福利| 在线 av 中文字幕| 久久久亚洲精品成人影院| 国产精品一二三区在线看| av播播在线观看一区| 美女视频免费永久观看网站| 国产成人91sexporn| 亚洲av成人精品一区久久| 国产黄a三级三级三级人| 国产精品国产av在线观看| 成人漫画全彩无遮挡| 久久久久国产网址| 国模一区二区三区四区视频| 永久免费av网站大全| 久久人人爽人人片av| 黄片无遮挡物在线观看| 亚洲av在线观看美女高潮| 日韩大片免费观看网站| 欧美变态另类bdsm刘玥| 午夜免费鲁丝| 色网站视频免费| 成年人午夜在线观看视频| freevideosex欧美| 国产精品蜜桃在线观看| 亚洲国产精品专区欧美| 99久久精品一区二区三区| 国产精品精品国产色婷婷| 成人高潮视频无遮挡免费网站| av卡一久久| 日本黄大片高清| 最近的中文字幕免费完整| 91aial.com中文字幕在线观看| 内地一区二区视频在线| 亚州av有码| 99久久精品一区二区三区| 亚洲av一区综合| 国产黄片美女视频| 日本欧美国产在线视频| 日日啪夜夜撸| 日本三级黄在线观看| 777米奇影视久久| 欧美变态另类bdsm刘玥| 欧美激情在线99| 在线天堂最新版资源| 午夜爱爱视频在线播放| 日本午夜av视频| 国产乱人偷精品视频| 九色成人免费人妻av| 国产成人一区二区在线| 大片免费播放器 马上看| 寂寞人妻少妇视频99o| 欧美xxxx性猛交bbbb| 日本午夜av视频| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 国产男女超爽视频在线观看| 在线免费十八禁| 2021天堂中文幕一二区在线观| 国产91av在线免费观看| 精品午夜福利在线看| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| av国产精品久久久久影院| 黄色一级大片看看| 亚洲,一卡二卡三卡| 内地一区二区视频在线| 精品视频人人做人人爽| 国产男人的电影天堂91| 国产成人精品一,二区| 婷婷色综合大香蕉| 国产精品一二三区在线看| 国产亚洲5aaaaa淫片| 精品人妻熟女av久视频| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 日韩欧美精品免费久久| 天天一区二区日本电影三级| 欧美一区二区亚洲| 日韩在线高清观看一区二区三区| 我要看日韩黄色一级片| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 成人高潮视频无遮挡免费网站| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 国产精品不卡视频一区二区| 搡老乐熟女国产| 欧美变态另类bdsm刘玥| 中国国产av一级| 午夜视频国产福利| 欧美少妇被猛烈插入视频| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 国产精品一及| 涩涩av久久男人的天堂| 99久久中文字幕三级久久日本| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 精品久久久久久电影网| 久久精品国产a三级三级三级| 久久久成人免费电影| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 少妇被粗大猛烈的视频| 又大又黄又爽视频免费| 欧美极品一区二区三区四区| 精品国产乱码久久久久久小说| 99热这里只有精品一区| 少妇人妻 视频| 精品人妻一区二区三区麻豆| 免费电影在线观看免费观看| 在线观看人妻少妇| 丰满人妻一区二区三区视频av| 在线观看人妻少妇| 777米奇影视久久| av专区在线播放| 国产精品爽爽va在线观看网站| 日韩在线高清观看一区二区三区| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 亚洲av二区三区四区| 欧美xxxx性猛交bbbb| 日本wwww免费看| 午夜免费男女啪啪视频观看| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | a级毛片免费高清观看在线播放| 一个人看的www免费观看视频| 最近的中文字幕免费完整| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 久久久欧美国产精品| 亚洲国产最新在线播放| 亚洲精品,欧美精品| av在线老鸭窝| 免费观看性生交大片5| 国产成人精品久久久久久| 成年免费大片在线观看| xxx大片免费视频| 国产欧美亚洲国产| 国产美女午夜福利| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 一区二区三区免费毛片| 久久99蜜桃精品久久| 男女那种视频在线观看| 国产高清有码在线观看视频| 人妻夜夜爽99麻豆av| 成人亚洲精品av一区二区| 欧美少妇被猛烈插入视频| 大陆偷拍与自拍| 啦啦啦啦在线视频资源| 午夜激情久久久久久久| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 观看美女的网站| 免费av不卡在线播放| 老司机影院成人| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 狂野欧美激情性bbbbbb| 中文欧美无线码| 免费黄网站久久成人精品| 亚洲国产精品专区欧美| 国产色婷婷99| 男女国产视频网站| 国产伦在线观看视频一区| 亚洲国产精品成人综合色| 久久久久久久久久人人人人人人| 亚洲最大成人手机在线| 中文天堂在线官网| 久久精品久久久久久久性| 亚洲av成人精品一二三区| 真实男女啪啪啪动态图| 国产一区亚洲一区在线观看| 又爽又黄a免费视频| 亚洲美女视频黄频| 在线观看一区二区三区激情| 黑人高潮一二区| 亚洲天堂国产精品一区在线| 一区二区av电影网| 精品一区二区三卡| 激情 狠狠 欧美| 伦理电影大哥的女人| 亚洲四区av| 免费高清在线观看视频在线观看| 成人二区视频| 亚洲av.av天堂| 免费看不卡的av| 日本一二三区视频观看| 精品久久久久久久久亚洲| 免费看不卡的av| 色婷婷久久久亚洲欧美| 草草在线视频免费看| 中国美白少妇内射xxxbb| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 少妇丰满av| 免费av观看视频| 久久久久网色| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 欧美人与善性xxx| 狂野欧美激情性bbbbbb| 国产成年人精品一区二区| 亚洲av二区三区四区|