豬瘟流行特點(diǎn)及診斷方法

張?jiān)獊? 趙崇學(xué) 袁得光

摘? 要：筆者通過查閱文獻(xiàn)對(duì)近幾年豬瘟流行特點(diǎn)進(jìn)行了分析，針對(duì)豬瘟流行特點(diǎn)，結(jié)合臨床實(shí)踐歸納了其診斷方法，為進(jìn)一步研究豬瘟的流行病學(xué)調(diào)查和防治提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：豬瘟;流行特點(diǎn);診斷方法

中圖分類號(hào)：S855 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：C 文章編號(hào)：1001-0769（2019）11-0038-03

豬瘟，又稱古典豬瘟（Classical Swine Fever，CSF），是由豬瘟病毒（Classical Swine Fever Virus，CSFV）引起的嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)的重要傳染病之一，被世界衛(wèi)生組織列為A類傳染病，我國(guó)也將其列為一類傳染病[1]。1833年，該病首先發(fā)現(xiàn)于美國(guó)的俄亥俄州，呈世界性流行，以流行范圍廣、發(fā)病率和死亡率高為主要特征。該病的暴發(fā)能造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重影響國(guó)際貿(mào)易。

豬瘟在我國(guó)流行已有一百多年的歷史，是嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)的疾病之一，每年由豬瘟所造成的經(jīng)濟(jì)損失高達(dá)100億元左右。自改革開放以來，我國(guó)普遍采用以豬瘟兔化疫苗免疫接種為主的綜合性防治措施，一度有效地控制了豬瘟在我國(guó)的大規(guī)模流行[2]。近幾年來，隨著養(yǎng)豬業(yè)的迅猛發(fā)展，CSFV仍在養(yǎng)豬場(chǎng)廣為流行，主要引起妊娠母豬流產(chǎn)，早產(chǎn)，產(chǎn)死胎、畸胎、木乃伊胎或弱仔以及仔豬腹瀉，給豬瘟的診斷和防治工作帶來了新的難題[3]。筆者通過查閱國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)，結(jié)合臨床實(shí)踐，詳細(xì)闡述了豬瘟的流行特點(diǎn)及診斷方法，為進(jìn)一步研究豬瘟的流行病學(xué)和防治提供了理論依據(jù)。

1? 病原

豬瘟病毒屬于黃病毒科瘟病毒屬。本病毒主要存在于病豬的各種組織、器官和體液中，以脾臟、淋巴結(jié)、腎臟、血液及病豬的分泌物和排泄物中含毒量較高。根據(jù)毒力的強(qiáng)弱可以將其分為強(qiáng)毒株、中毒株、低毒株及無毒株。豬瘟病毒不同毒株間的毒力差異很大，強(qiáng)毒株能夠引起不同年齡豬的急性致死性感染，低毒株感染往往引起妊娠母豬的帶毒綜合征等。

豬瘟病毒對(duì)外界環(huán)境的抵抗力較弱。該病毒在糞便中于20 ℃能存活2周;72℃～ 76 ℃的水1 h能殺死病毒;強(qiáng)烈的陽(yáng)光照射1～4周能殺死病毒。常用的消毒劑為：2%燒堿溶液、5%漂白粉溶液、5%～10%石灰水和3%～5%來蘇兒溶液。其中2%燒堿溶液是最合適的消毒劑。

2? 豬瘟的流行特點(diǎn)

2.1 流行范圍廣，流行形式發(fā)生轉(zhuǎn)變

我國(guó)是一個(gè)生豬生產(chǎn)大國(guó)，隨著我國(guó)生豬及畜產(chǎn)品加工、出口日益頻繁，豬傳染病的防控也將面臨新的、巨大的挑戰(zhàn)。在我國(guó)，豬瘟的流行范圍較廣，典型或非典型豬瘟的報(bào)道在全國(guó)各地均有發(fā)生[4]，其流行形式也已經(jīng)發(fā)生了較大變化，目前已對(duì)我國(guó)的養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。呂宗吉和涂長(zhǎng)春等[5]利用RT-PCR方法和熒光抗體染色法，檢測(cè)了我國(guó)豬瘟流行的16個(gè)省、市和自治區(qū)的48個(gè)疫點(diǎn)，檢測(cè)結(jié)果顯示：豬瘟的發(fā)病率高達(dá)41%～44%。陳軼霞等[6]對(duì)甘肅省1990-1999年豬瘟的發(fā)生情況進(jìn)行調(diào)查統(tǒng)計(jì)，結(jié)果顯示甘肅省豬瘟的發(fā)病率高達(dá)56.66%。丘惠深等[7]對(duì)我國(guó)13個(gè)省、市的29個(gè)大、中型豬場(chǎng)調(diào)查，結(jié)果顯示29個(gè)豬場(chǎng)中全部存在母豬帶毒的情況，帶毒母豬綜合征感染率為11.12%。近年來，豬瘟的流行形式已從頻繁發(fā)生的大流行轉(zhuǎn)變?yōu)榈貐^(qū)性、散發(fā)性流行，規(guī)模較小，強(qiáng)度也較輕[10]。

2.2 發(fā)病豬的月齡小

由于豬瘟流行形式的改變，100日齡以下，尤其是2～10日齡的哺乳仔豬和斷奶到60 d的保育豬，是該病發(fā)病的主要豬群，特點(diǎn)是發(fā)病急，死亡率也較高，而且發(fā)病前無明顯的臨床癥狀。100 d以上的育肥豬和種豬發(fā)病則較少[8]。

2.3 發(fā)病溫和

當(dāng)前，豬瘟在許多國(guó)家已被控制，較大規(guī)模的流行很少發(fā)生，病程也由急性變?yōu)槁赃^程，病情來勢(shì)較為緩和。近年來研究表明，豬瘟在我國(guó)的發(fā)病多以溫和型、非典型、慢性型為主，主要是引起妊娠母豬出現(xiàn)繁殖障礙綜合征（如早產(chǎn)，流產(chǎn)，產(chǎn)死胎、畸胎、木乃伊胎和顫抖胎等）及仔豬腹瀉。

2.4 持續(xù)性感染與免疫耐受性

據(jù)報(bào)道，感染豬瘟的豬大約有60%未呈現(xiàn)典型的臨床癥狀，而呈現(xiàn)持續(xù)性感染及亞臨床感染。即繁殖母豬感染了野毒或低毒力的病毒，由于其具有較強(qiáng)的抵抗力，不呈現(xiàn)臨床癥狀，但卻源源不斷地向外界環(huán)境排毒或者通過胎盤將病毒傳染給胎兒。

通過研究發(fā)現(xiàn)，感染豬瘟病毒的母豬會(huì)發(fā)生所謂的“母豬帶毒綜合征”，其數(shù)量可達(dá)到妊娠母豬的43%。由于母豬的這種持續(xù)性感染，其所生的仔豬或其他被感染的仔豬會(huì)出現(xiàn)先天性的免疫耐受。當(dāng)外界環(huán)境條件發(fā)生變化時(shí)，豬瘟?xí)竺娣e流行。

2.5 繼發(fā)感染與混合感染

近年來，我國(guó)在豬瘟的防控方面面臨著混合感染與繼發(fā)感染的雙重挑戰(zhàn)。它們往往引起患病豬的病情復(fù)雜化，發(fā)病率和死亡率升高，且防治效果不顯著，最終多以死亡而告終。如豬瘟與豬肺疫、豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸障礙綜合征、豬弓形蟲病、豬鏈球菌病、豬白肌病、豬水腫病和仔豬副傷寒等發(fā)生混合感染，導(dǎo)致其臨床癥狀呈現(xiàn)多樣化、病理變化復(fù)雜化，從而增加了豬瘟診斷與防治的難度。

3 豬瘟的實(shí)驗(yàn)室診斷方法

3.1血清學(xué)診斷

血清學(xué)診斷包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、正向間接血凝試驗(yàn)、免疫熒光組化試驗(yàn)、瓊脂糖擴(kuò)散試驗(yàn)等，其具有以下優(yōu)缺點(diǎn)：

3.1.1 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA）是現(xiàn)在使用最廣的檢測(cè)手段，具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)單和檢測(cè)時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)，常用于規(guī)?；i場(chǎng)的檢測(cè)，在疫苗免疫效果的評(píng)定、疾病的防制等方面發(fā)揮著重要的作用。近年來，隨著檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，新的方法技術(shù)不斷發(fā)展和更新，廣泛應(yīng)用于豬瘟的檢測(cè)，如Dot-ELISA、BAS-ELISA等方法。研究人員通過在大腸桿菌中表達(dá)豬瘟病毒的E2基因，經(jīng)純化后作為包被抗原，建立了檢測(cè)豬瘟抗體的間接ELISA方法。結(jié)果表明該方法具有特異性高、易純化和成本低等特點(diǎn)。研究人員以桿狀病毒作為載體表達(dá)了豬瘟病毒的重組E2蛋白，以其作為包被抗原，建立了重組E2蛋白競(jìng)爭(zhēng)抑制ELISA（CI-ELISA）方法，該方法操作簡(jiǎn)便、快速，可以用于大量樣本的檢測(cè)和流行病學(xué)監(jiān)測(cè)。

目前用于檢測(cè)豬瘟抗體的ELISA試劑盒已經(jīng)比較成熟，在基層和市、縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室都得到了很好的運(yùn)用。但是，用于檢測(cè)豬瘟抗原的ELISA試劑盒仍然存在敏感性不高、非特異性強(qiáng)的問題，對(duì)于溫和型豬瘟與持續(xù)性帶毒豬的檢測(cè)還存在一定的問題。

3.1.2 免疫熒光法

免疫熒光法是豬瘟的常用診斷方法，可用于檢測(cè)病豬內(nèi)臟器官是否存在豬瘟病毒，對(duì)豬瘟的早期診斷具有十分重要的意義。其具有操作簡(jiǎn)單、快速、結(jié)果可靠、成本低等優(yōu)點(diǎn)。因此，目前許多國(guó)家將它作為執(zhí)行豬瘟消滅計(jì)劃的主要診斷試驗(yàn)之一。采用免疫熒光法凈化豬瘟已經(jīng)在一些豬場(chǎng)取得成功。

3.1.3 間接血凝試驗(yàn)

間接血凝試驗(yàn)（Indirect Hemagglutination，IHA）具有操作簡(jiǎn)便、快捷等優(yōu)點(diǎn)，可用于免疫抗體的檢測(cè)，但敏感性較低。采用IHA方法和Dot-ELISA方法可檢測(cè)仔豬血清中的母源抗體含量。結(jié)果表明：IHA方法比Dot-ELISA方法更能客觀地反映仔豬早期體內(nèi)的母源抗體水平，可用于檢測(cè)仔豬體內(nèi)的母源抗體水平的高低及評(píng)價(jià)疫苗的免疫效果。

目前，可用于豬瘟檢測(cè)的血清學(xué)診斷方法還包括中和試驗(yàn)、免疫膠體金技術(shù)等，但這些方法的一些缺點(diǎn)給推廣應(yīng)用帶來了極大的難度，應(yīng)用不廣。

3.2 分子生物學(xué)診斷

3.2.1 反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)（RT-PCR）

RT-PCR是發(fā)展最早的一種診斷技術(shù)，具有操作簡(jiǎn)單快捷、特異性強(qiáng)、敏感度高、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，可用于豬瘟病毒的檢測(cè)，能達(dá)到快速檢測(cè)的目的。采用RT-PCR方法對(duì)廣西19個(gè)豬場(chǎng)的58份疑似豬瘟病料進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果顯示：陽(yáng)性數(shù)為34份，陽(yáng)性率為58.62%。采用RT-PCR方法檢測(cè)了廣西地區(qū)的135份疑似豬瘟病料，結(jié)果表明：陽(yáng)性數(shù)為84份，陽(yáng)性率為62.20%。

3.2.2 熒光定量PCR技術(shù)

熒光定量PCR方法是近幾年逐步發(fā)展起來的一種核酸定量技術(shù)，具有檢測(cè)準(zhǔn)確、特異性強(qiáng)、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，可用于核酸的檢測(cè)，在病毒的定性和定量方面都有較好的效果。

3.2.3 核酸探針技術(shù)

核酸探針技術(shù)是在分子標(biāo)記的基礎(chǔ)上建立的一種診斷技術(shù)，具有準(zhǔn)確性高、特異性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，可用于豬瘟的診斷，但是該方法診斷費(fèi)用過高。

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