非洲豬瘟綜述(續(xù)2)

張軍杰 郭小勇 宋慶慶

摘? 要：歐洲、俄羅斯聯(lián)邦、中國和最近暴發(fā)非洲豬瘟的蒙古及越南已經(jīng)更加意識(shí)到非洲豬瘟對(duì)全球的養(yǎng)豬業(yè)和食品安全造成了致命性的打擊。我們將在本綜述中闡述一下什么是非洲豬瘟？它會(huì)導(dǎo)致什么情況？非洲豬瘟如何傳播？以及非洲豬瘟當(dāng)前全球流行情況;同時(shí)，我們還討論防控非洲豬瘟在家豬和野豬中傳播的方法以及疫苗的開發(fā)前景。

關(guān)鍵詞：非洲豬瘟;流行病學(xué);疫苗;傳播

中圖分類號(hào)：S855.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：C 文章編號(hào)：1001-0769（2019）10-0013-03

6? 疫苗開發(fā)前景

20世紀(jì)50年代，Detray（1957）第一個(gè)報(bào)道了暴發(fā)非洲豬瘟后康復(fù)的豬能夠抵抗非洲豬瘟病毒相關(guān)毒株的攻擊。由于這些研究證明豬獲得了高水平的保護(hù)作用，所以非洲豬瘟病毒疫苗的開發(fā)前景被看好。然而，疫苗研究的進(jìn)展緩慢，疫苗注冊允許在田間使用仍有很長的路要走。有證據(jù)表明非洲豬瘟病毒抗體在保護(hù)豬免受感染上起著一定的作用，Onisk等（1994）和Wardley等（1985）證明，從受保護(hù)的豬上被動(dòng)獲得抗體的新生仔豬能夠得到部分的保護(hù)。CD8+細(xì)胞在產(chǎn)生保護(hù)作用上仍是必要的，因?yàn)镃D8+細(xì)胞亞群的抗體介導(dǎo)耗竭能夠消除病毒的弱毒株誘發(fā)的保護(hù)作用。因此，有效的疫苗能夠誘導(dǎo)豬產(chǎn)生保護(hù)性的抗體和細(xì)胞免疫應(yīng)答。最近，一個(gè)專家小組回顧了有效疫苗的開發(fā)前景，并且已經(jīng)出版（Arias等，2017a）。

6.1 非洲豬瘟病毒滅活疫苗

非洲豬瘟病毒的復(fù)雜性是導(dǎo)致疫苗開發(fā)進(jìn)程緩慢的重要原因。通常用于產(chǎn)生抗簡單病毒的病毒滅活苗還沒有取得成功（Blome等，2014;Stone和Hess，1967），因?yàn)闇缁蠲缤ㄟ^誘導(dǎo)產(chǎn)生能夠抑制病毒感染細(xì)胞的抗體發(fā)揮作用。這些中和抗體不能完全阻止非洲豬瘟病毒的感染，這很可能是由于非洲豬瘟病毒粒子有兩種感染方式——細(xì)胞內(nèi)成熟和細(xì)胞外成熟。此外，Andres（2017）和Hernaez等（2016）證明，非洲豬瘟病毒進(jìn)入巨噬細(xì)胞的機(jī)制有兩種，即網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡和巨胞飲作用。這種多層病毒粒子含有80多種蛋白（Alejo等，2018），不同的蛋白質(zhì)存在于細(xì)胞外包膜和細(xì)胞內(nèi)成熟的感染性病毒粒子的表面，因此中和抗體必須作用于多種蛋白。早期的研究確定了病毒蛋白p72/B646L、p54/E183L和p30/CP204L作為中和抗體的作用目標(biāo)。

6.2 弱毒活疫苗

King等（2011）、Leitao等（2001）、O'Donnell等（2017）和Reis等（2016，2017）報(bào)道，弱毒活疫苗能使高達(dá)100%的免疫豬產(chǎn)生保護(hù)作用，但疫苗的安全性，如由疫苗引發(fā)的不良反應(yīng)以及疫苗株在田間持續(xù)傳染的能力，影響了非洲豬瘟病毒疫苗的這種開發(fā)策略。候選的弱毒活疫苗株已經(jīng)在細(xì)胞培養(yǎng)基上通過傳代產(chǎn)生，或者通過對(duì)高致病性毒株的基因進(jìn)行合理的敲除后產(chǎn)生。此外，Boinas等（2004）和Leitao等（2001）證明，非洲豬瘟病毒的低毒力分離株有可能會(huì)成為疫苗的候選株。

對(duì)非洲豬瘟病毒基因功能了解上取得的進(jìn)展使疫苗研發(fā)人員確定了需要敲除的目標(biāo)基因，以生成候選弱毒活疫苗株;這些展現(xiàn)出的希望包括I型干擾素反映的抑制因子，如MGF360和505/530或DP148R的成員。Lewis等（2000）已經(jīng)成功地敲除了能夠直接促進(jìn)病毒復(fù)制的其他基因，如B119L/9GL——可編碼病毒裝配所需氧化還原路徑中的一個(gè)蛋白。O'Donnell等（2017）報(bào)道，敲除能夠編碼某些功能未知的蛋白的基因（如DP96R/UK）已經(jīng)能夠削弱非洲豬瘟病毒的毒力。從非洲豬瘟病毒弱毒株研究中獲得的教訓(xùn)包括對(duì)不同毒株進(jìn)行基因敲除不會(huì)總是產(chǎn)生相同的結(jié)果。

6.3 亞單位疫苗

敲除非洲豬瘟病毒的單個(gè)或一部分基因或蛋白后制成的疫苗最終可能比減毒活疫苗更安全。研究人員在一項(xiàng)研究中將重組蛋白p72/B646L、p54/E183L和p30/CP204L組合起來誘導(dǎo)產(chǎn)生了部分保護(hù)力，但在另一項(xiàng)研究中盡管誘導(dǎo)產(chǎn)生了中和抗體，但沒有產(chǎn)生保護(hù)作用。CD2v/EP402R重組蛋白的敲除也能誘導(dǎo)產(chǎn)生部分保護(hù)力。用CD2v/EP402R胞外結(jié)構(gòu)域p30/CP204L基因和p54/E183L基因的融合以及泛素基因的DNA疫苗接種能夠產(chǎn)生部分保護(hù)，一部分非洲豬瘟病毒DNA片段與泛素基因融合也是這樣。DNA疫苗能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生強(qiáng)烈的細(xì)胞毒性T細(xì)胞反應(yīng)，但缺乏特異性的抗體反應(yīng)。

在研究更有潛力的保護(hù)性抗原上，Jancovich等（2018）和Lokhandwala等（2017）使用不能復(fù)制的病毒載體，如腺病毒和痘病毒，已經(jīng)將非洲豬瘟病毒的基因庫傳輸給豬。Jancovich等（2018）誘導(dǎo)產(chǎn)生了理想的抗體和細(xì)胞反應(yīng)，同時(shí)對(duì)不同的免疫原性進(jìn)行了排序。盡管這些結(jié)果很有應(yīng)用前景，但還需要進(jìn)行更多的研究來確定一個(gè)小的抗原池和一種可用于商業(yè)疫苗的生產(chǎn)方法。

7? 抗病毒藥和其他控制措施

7.1 抗病毒藥

在缺乏疫苗的情況下，非洲豬瘟防控應(yīng)考慮采用替代性策略。利用小分子抗病毒藥來限制病毒復(fù)制從而防止另一種豬?。ǖ湫拓i瘟）傳播的想法已經(jīng)得到驗(yàn)證。給感染非洲豬瘟病毒的豬服用抗病毒藥可以將血液中的病毒滴度降低1 000倍，使病毒血癥周期縮短74%，同時(shí)使病毒在感染豬傳染未治療的哨兵豬的比例減少85%。流行病學(xué)模型表明，在預(yù)防非洲豬瘟上，抗病毒藥能夠達(dá)到傳統(tǒng)控制策略（如撲殺或者緊急免疫）相同的效果。

非洲豬瘟病毒的復(fù)制需要大量的病毒特異性酶，包括RNA聚合酶和DNA聚合酶，對(duì)開發(fā)抗病毒藥而言，這是一個(gè)理想的具體目標(biāo)。Frouco等（2017）、Galindo等（2011）和Hakobyan等（2018）證明，多種藥物能夠阻止非洲豬瘟病毒在細(xì)胞培養(yǎng)基上增殖。

7.2 其他控制策略

相關(guān)部門已經(jīng)提出了控制非洲豬瘟流行的其他策略，如培育或選育能夠抵抗非洲豬瘟的豬種。但是，我們首先必須開發(fā)出一個(gè)能夠成功控制非洲豬瘟的策略以阻止非洲豬瘟病毒的復(fù)制。利用有組織的豬育種計(jì)劃，這種策略在某些情況下可能會(huì)取得成功，但在控制野豬疾病方面大概是無效的。

8? 進(jìn)一步的研究

當(dāng)前的非洲豬瘟控制策略很大程度上依賴于快速的檢測、隔離和撲殺，這種策略通常是無效的，且可能會(huì)造成豬被大量淘汰。替代性策略，如安全有效的疫苗，可能會(huì)提供一個(gè)額外的方法，幫助非洲豬瘟呈地方流行性的國家控制此病的暴發(fā)，同時(shí)對(duì)野豬和家豬進(jìn)行非洲豬瘟病毒凈化。雖然研究人員已經(jīng)獲得了有希望的候選疫苗株，但在田間應(yīng)用前還需要進(jìn)行更深入的研究。要開發(fā)下一代疫苗還需要完成一些基礎(chǔ)研究，這包括非洲豬瘟病毒是如何調(diào)控宿主的免疫反應(yīng)以及病毒編碼蛋白在體內(nèi)和體外逃避宿主免疫防御上的作用。這將使研究人員能夠開發(fā)出改良型弱毒活疫苗。

目前我們還需要更多有關(guān)免疫保護(hù)機(jī)制和相互關(guān)系以及能夠誘導(dǎo)動(dòng)物產(chǎn)生該保護(hù)作用的病毒抗原的信息，這將有助于促進(jìn)非洲豬瘟病毒亞單位疫苗的開發(fā)。有關(guān)病毒與豬巨噬細(xì)胞（包括參與入侵動(dòng)物機(jī)體、病毒復(fù)制和形態(tài)變化的細(xì)胞蛋白和病毒蛋白）的基礎(chǔ)研究將有助于為病毒復(fù)制和疫苗生產(chǎn)開發(fā)改進(jìn)型細(xì)胞系，并確定疫苗研發(fā)的新目標(biāo)。

進(jìn)一步理解非洲豬瘟病毒在家豬和野豬中傳播的機(jī)制將會(huì)有助于控制工作，因?yàn)槿藗兛梢圆扇《喾N措施切斷這些傳播途徑。最近，全球非洲豬瘟病毒研究聯(lián)盟已經(jīng)就需要進(jìn)行的研究發(fā)布了一份更完整的報(bào)告。

（續(xù)完）

原題名：African swine fever（英文）

原作者：L. K. Dixon、H. Sun和H. Roberts（英國）