500例孕婦地中海貧血篩查與產(chǎn)前診斷分析

黃琦玲

【摘要】 目的 研究孕婦地中海貧血篩查與產(chǎn)前診斷的意義。方法 500例孕婦均進(jìn)行產(chǎn)前地中海貧血篩查， 對(duì)孕婦先行血常規(guī)檢測(cè)， 若其中一方平均紅細(xì)胞體積（MCV）≤82 fl或平均血紅蛋白含量（MCH）≤27 pg， 則夫婦雙方均進(jìn)行血紅蛋白電泳分析， 若雙方血紅蛋白電泳分析結(jié)果均異常， 則需接受地中海貧血基因檢測(cè)。觀(guān)察血常規(guī)檢查結(jié)果、基因檢測(cè)結(jié)果及隨訪(fǎng)結(jié)果。結(jié)果 500對(duì)夫婦中， 148對(duì)夫婦需做地中海貧血血紅蛋白電泳分析篩查， 陽(yáng)性99例， 其中孕婦55例， 配偶44例。25對(duì)夫婦需做地中海貧血基因檢測(cè)， 顯示同型的10對(duì)夫婦產(chǎn)前基因檢測(cè)結(jié)果輕度α地中海貧血3對(duì)（12%）， 中度α地中海貧血2對(duì)（8%）， 重度α地中海貧血5對(duì)（20%）。此10對(duì)夫婦生產(chǎn)后， 發(fā)現(xiàn)胎兒患有血紅蛋白H病1例（4%）、正常胎兒4例（16%）。另外15對(duì)夫婦產(chǎn)前β基因檢測(cè)結(jié)果孕婦正常6例（24%）、重度β地中海貧血3例（12%）、輕度β地中海貧血4例（16%）、中度β地中海貧血2例（8%）。8例重度地中海貧血孕婦接受建議均已引產(chǎn)， 基因檢測(cè)7例輕度地中海貧血孕婦產(chǎn)后胎兒隨訪(fǎng)， 絕大多數(shù)無(wú)明顯異常表現(xiàn)， 有1例為中度β地中海貧血， 于醫(yī)院接受輸血治療。結(jié)論 通過(guò)對(duì)有同類(lèi)型地中海貧血基因夫婦產(chǎn)前進(jìn)行基因診斷， 能有效了解胎兒貧血情況， 利于臨床對(duì)重度地中海貧血者早期給予終止妊娠， 避免對(duì)母體造成傷害。

【關(guān)鍵詞】 孕婦;地中海貧血;產(chǎn)前診斷

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.31.027

地中海貧血是我國(guó)常見(jiàn)的遺傳性溶血性疾病， 屬于遺傳疾病的一種， 一般在我國(guó)南方地區(qū)較為普遍， 對(duì)人們的健康造成了嚴(yán)重影響[1]。因此孕期篩查極為重要， 其能夠進(jìn)行有效的產(chǎn)前診斷， 改善臨床健康水平。本文通過(guò)行產(chǎn)前地中海貧血基因診斷， 旨在為今后臨床地中海貧血基因診斷提供參考依據(jù)， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取汕尾地區(qū)2017年1～12月收治的

500例孕婦進(jìn)行產(chǎn)前地中海貧血篩查， 孕婦均無(wú)其他疾病影響檢查預(yù)后， 且病情穩(wěn)定、意識(shí)清楚， 均為單胎頭位產(chǎn)婦， 且無(wú)早產(chǎn)史、流產(chǎn)史， 無(wú)嚴(yán)重心血管疾病及肢體功能障礙， 排除合并嚴(yán)重肝腎疾病及精神疾病者， 溝通障礙、文盲、不愿配合者， 臨床資料不全者。患者年齡21～32歲， 平均年齡（26.5±4.1）歲;孕周12～16周， 平均孕周（14.8±1.1）周。孕婦均自愿參與本次研究， 并簽署知情同意書(shū)。

1. 2 方法 對(duì)孕婦先行血常規(guī)檢測(cè)， 若（MCV≤82 fl或MCH≤27 pg， 則夫婦雙方均進(jìn)行血紅蛋白電泳分析， 若雙方血紅蛋白電泳分析結(jié)果均異常， 則需接受地中海貧血基因檢測(cè)。

獲得孕婦同意后， 根據(jù)孕婦妊娠周期不同， 對(duì)于妊娠<16周孕婦行絨毛穿刺活檢， ≥16周者可行臍帶血或羊水穿刺， 同時(shí)取孕婦外周血2～3 ml， 以復(fù)合熒光標(biāo)記短串聯(lián)重復(fù)序列（STR）法排除穿刺造成的母體組織污染。后以gap-PCR法對(duì)α地中海貧血進(jìn)行基因診斷， 檢查常見(jiàn)的三種α珠蛋白基因缺失型（--SEA、-α3.7、-α4.2）， 同時(shí)對(duì)夫婦雙方中至少一方存在突變時(shí)采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-反向點(diǎn)雜交法（PCR-RDB）法對(duì)采用三種點(diǎn)突變（αCS、αQS、αWS）進(jìn)行檢測(cè)。以聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-反向點(diǎn)雜交（PCR-RDB）法對(duì)β地中海貧血基因突變進(jìn)行檢測(cè)， 主要包括17種常見(jiàn)基因突變[IVS2-654 （C→T）、-29（A→G）、CD41-42 （-TCTT）、CD71-72（+A）、IVS1-1 （G→T， G→A）、-28 （A→G）、CD31（-C）、CD17（A→T）、CD27-28 （+C）、CD43（G→T）、-32（C→A）、IVSl-5 （G→C）、-30（T→C）等]， 對(duì)夫婦雙方中至少一方存在突變時(shí)， 加用DNA測(cè)序診斷， 參考序列為U01317， 范圍從β珠蛋白基因5端加帽位點(diǎn)上游 126 nt至3端 poly（A）剪切位點(diǎn)下游230 nt， 但不包括 IVS-II-70～626 nt區(qū)域。根據(jù)產(chǎn)前基因診斷結(jié)果對(duì)孕婦進(jìn)行優(yōu)生咨詢(xún)、指導(dǎo)， 對(duì)產(chǎn)前基因檢查為重癥地中海貧血胎兒建議引產(chǎn)， 對(duì)診斷為血紅蛋白H病胎兒告知孕婦及家屬詳細(xì)情況， 由孕婦及家屬自行確定胎兒是引產(chǎn)或繼續(xù)妊娠[2]。

1. 3 觀(guān)察指標(biāo) 統(tǒng)計(jì)需進(jìn)行血紅蛋白電泳分析的夫婦數(shù)量并進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)需接地中海貧血基因檢測(cè)的夫婦數(shù)量， 對(duì)于地中海貧血孕婦在嬰兒出生后進(jìn)行3～12個(gè)月隨訪(fǎng)， 觀(guān)察嬰兒情況， 并進(jìn)行血常規(guī)檢查與產(chǎn)前診斷。

2 結(jié)果

2. 1 血常規(guī)檢查 500對(duì)夫婦中， 148對(duì)夫婦需做地中海貧血血紅蛋白電泳分析篩查， 陽(yáng)性99例， 其中孕婦55例， 配偶44例。25對(duì)夫婦需做地中海貧血基因檢測(cè)， 其中攜帶α地中海貧血基因孕婦10例， 配偶10例;攜帶β地中海貧血基因孕婦7例， 配偶0例;攜帶β地中海貧血基因孕婦7例， 配偶0例;攜帶α+β地中海貧血孕婦2例， 配偶0例。同型有10對(duì)做產(chǎn)前診斷。

2. 2 基因檢測(cè) 地中海貧血基因檢測(cè)顯示同型的10對(duì)夫婦產(chǎn)前基因檢測(cè)結(jié)果輕度α地中海貧血3對(duì)（12%）， 中度α地中海貧血2對(duì)（8%）， 重度α地中海貧血5對(duì)（20%）。此10對(duì)夫婦生產(chǎn)后， 發(fā)現(xiàn)胎兒患有血紅蛋白H病1例（4%）、正常胎兒4例（16%）。另外15對(duì)夫婦產(chǎn)前β基因檢測(cè)結(jié)果正常孕婦6例（24%）、重度β地中海貧血3例（12%）、輕度β地中海貧血4例（16%）、中度β地中海貧血2例（8%）。

2. 3 隨訪(fǎng)結(jié)果統(tǒng)計(jì) 對(duì)產(chǎn)前基因檢測(cè)為重度地中海貧血者， 臨床建議給予終止妊娠， 8例接受建議診斷1周內(nèi)給予引產(chǎn)， 其中1例胎兒巴氏水腫胎、重型α地中海貧血[胎兒α珠蛋白基因-（SEA）/純合缺失， 基因型為-SEA/--SEA]， 2例胎兒輕型β地中海貧血[胎兒β珠蛋白基因IVS-Ⅱ-654（S-T）雜合突變， 基因型為β IVS-Ⅱ-654/βN]， 3例胎兒重型β地中海貧血[胎兒β珠蛋白基因IVS-Ⅱ-654（C-T）純合突變， 基因型為βIVS-Ⅱ-654/βIVS-Ⅱ-654]， 2例胎兒東南亞型α地中海貧血， 屬輕型α地中海貧血[胎兒為α珠蛋白基因-SEA/雜交缺失， 基因型為--（SEA/αα）]， 8例孕婦均已引產(chǎn)?；驒z測(cè)7例輕度地中海貧血者產(chǎn)后胎兒隨訪(fǎng)， 絕大多數(shù)無(wú)明顯異常表現(xiàn)， 有1例為中度β地中海貧血， 于醫(yī)院接受輸血治療。

3 討論

地中海貧血在我國(guó)南方地區(qū)屬于常見(jiàn)的遺傳性疾病， 死亡率較高， 屬于遺傳性血液病。主要是由于血紅蛋白合成中存在基因突變或缺失的現(xiàn)象， 發(fā)展為一定的慢性溶血性貧血[3]。

且雙方夫婦均攜帶相同類(lèi)型的地中海貧血基因， 在一定程度上會(huì)造成胎兒重型地中海貧血。胎兒會(huì)發(fā)生死胎、兒童期死亡， 為家庭帶來(lái)嚴(yán)重的精神壓力。而目前臨床仍未有明確的治療方式， 因此需要積極做好預(yù)防措施， 以有效降低臨床地中海貧血的發(fā)生。

由于地中海貧血為單基因疾病， 故產(chǎn)前診斷主要還是依靠臍血穿刺、絨毛活檢、羊水穿刺進(jìn)行檢查， 目前α地中海貧血基因診斷大多可通過(guò)gap-PCR法對(duì)常見(jiàn)的三種基因缺失類(lèi)型進(jìn)行診斷， 但對(duì)于點(diǎn)突變型可通過(guò)PCR-RDB法進(jìn)行診斷。大量臨床實(shí)踐表明點(diǎn)突變型血紅蛋白H病的貧血情況較基因缺失引起的血紅蛋白H病更為嚴(yán)重， 而β地中海貧血主要為核苷酸的插入、缺失、置換所致， 故主要以PCR-RDB法診斷[4-7]。

綜上所述， 汕尾地區(qū)孕婦地中海貧血的陽(yáng)性率較高， 通過(guò)健康教育等干預(yù)措施使其掌握地中海貧血相關(guān)知識(shí)， 能提高其主動(dòng)參與篩查率， 對(duì)于控制重型地中海貧血患兒的出生有重要意義。

參考文獻(xiàn)

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[收稿日期：2019-01-25]