非洲豬瘟的研究進展

劉杉杉，孫偉，楊慧

（1.銅仁職業(yè)技術學院農學院貴州銅仁 554300；2.民族中獸藥分離純化技術國家地方聯(lián)合工程研究中心貴州銅仁 554300）

非洲豬瘟（African swine fever，ASF）是由非洲豬瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）引起豬的一種急性、高度致死性的傳染病[1,2]。ASF 最早于1921年發(fā)現(xiàn)于非洲地區(qū)的肯尼亞，之后在歐洲、拉美和亞洲等60 個國家均有發(fā)現(xiàn)[3]，給世界經濟造成了嚴重的損失。該病于2018年8 月在我國遼寧沈陽報道了第一例之后，在其他多個省份陸續(xù)也有報道，嚴重危害我國的養(yǎng)豬業(yè)[4]。目前，尚未有防控ASF的有效疫苗，這對ASF 的防控提出了更加嚴峻的要求。本文將從ASF 病原學、流行病學、診斷與具體的防控措施等方面進行綜述。

1 病原學

ASFV 是一種呈二十面體對稱的囊膜病毒，其病毒粒子直徑約為200nm，屬于非洲豬瘟病毒科，非洲豬瘟病毒屬[5]。ASFV基因組長度約為170～190kbp，雙股線狀DNA，共編碼150～200 種蛋白質。ASFV主要在感染豬體內免疫細胞（單核細胞、巨噬細胞及網(wǎng)狀內皮細胞）的細胞質中增殖，但細胞核也是病毒DNA 早期合成的位點之一[6,7]。ASFV 還可在某些軟蜱體內復制。目前，ASFV 已適應在多種傳代細胞系中生長增殖，包括PK15、Vero、BHK21等。

ASFV 結構復雜，其中抗原變異主要發(fā)生在結構蛋白P150、P14、P12 等；P72為主要衣殼蛋白，具有高度保守性，常將此蛋白作為血清學檢測的抗原，另根據(jù)P72編碼基因具有較高的同源性的特點，將ASFV 分為24 個與地域相關的基因型[8,9]；P54 主要作用于病毒的吸附、入侵、內化等，在病毒感染過程中發(fā)揮重要作用，可作為血清學抗體檢測抗原。

ASFV 對pH 變化和干燥的抵抗力強，普通消毒藥物對其無效，但可被乙醚、氯仿等脂溶劑以及次氯酸鹽有效殺滅。在60℃經10min 或55℃經30min 的條件下，均可使病毒滅活。ASFV 對外界環(huán)境抵抗力強，室溫條件下感染豬的排泄物、血清或血液中病毒可存活一年以上。冷凍保存的感染豬肉及其制品中，病毒可存活數(shù)月，在土壤中可存活3 個月。由于該病毒在豬體內、豬肉及其制品和環(huán)境中存在時間均較長，因此易于擴散傳播，尤其是污染的圈舍、未熟的豬肉、腌肉、運輸生豬的裝備和車輛、生豬屠宰場、泔水等都可傳染。

2 流行病學

ASF 不傳染人，感染豬后病死率可達100%。ASFV 感染豬后，其臨床癥狀和病理變化與經典豬瘟非常相似，極易將兩種病混淆。主要表現(xiàn)為高熱（豬體溫一般高達40.5～42℃），皮膚發(fā)紺有出血點，甚至出現(xiàn)大量無癥狀死亡的豬只，其中脾臟異常腫大為其典型癥狀。豬是ASFV 自然感染的唯一家畜，野豬也易感，野豬感染后的臨床癥狀和病理變化與家豬類似。鈍緣蜱是ASFV 的自然宿主。被ASFV 污染的豬肉制品（如火腿、腌肉、風干肉等）、飼料、水源、運輸車、餐食剩余垃圾等制成的泔水，發(fā)病豬，帶毒豬等都是ASFV 的傳染源。ASFV 可通過消化道和呼吸道進行傳播。健康家豬通過與感染ASFV 的病豬或感染ASFV 的野豬直接接觸，食用被ASFV 污染的食物，接觸被ASFV 污染的空氣等，均可被感染。

1921 年非洲地區(qū)東部的肯尼亞發(fā)現(xiàn)了第一例ASF 以來，ASF一直在撒哈拉以南的非洲中、南部國家流行，隨后本病開始于1957 年傳入葡萄牙等歐洲地區(qū)國家，20 世紀70 年代開始傳入古巴、西班牙、意大利、馬耳他島、巴西和多美尼亞共和國等國家，給世界養(yǎng)豬業(yè)帶來了毀滅性的打擊。其中塞內加爾、喀麥隆、安哥拉、剛果等非洲國家和西班牙、法國、荷蘭、意大利等歐洲國家以及巴西、古巴、海地等拉美國家是該疫病的常發(fā)國家。本世紀初，ASF 再次開始在世界上多個國家，例如德國、捷克、贊比亞、美國、俄羅斯聯(lián)邦、烏干達等國家密集出現(xiàn)，使得ASF 的防控顯得尤其嚴峻。2017 年傳播至俄羅斯遠東地區(qū)伊爾庫茨克[10]。2018 年，全球ASF疫情明顯重于往年，新增疫情國家數(shù)同比上升30%，疫情數(shù)同比增加10.7%，部分國家甚至呈現(xiàn)大暴發(fā)、大流行態(tài)勢。2018 年8 月ASF 傳入我國，首先于遼寧沈陽暴發(fā)，基因型測定結果為基因II型，與2017 年傳入俄羅斯遠東地區(qū)的基因型一致[11]。之后的幾個月，席卷了大半個中國。截至2019 年7 月3 日，我國共發(fā)生ASF疫情143 起，116 萬余頭生豬被撲殺，其中25 個省（區(qū)、市）的疫區(qū)已經全部解除封鎖。目前，世界上僅有13 個國家實現(xiàn)了ASF 的根除。對于我國而言，ASF 疫情雖然給我國養(yǎng)豬業(yè)帶來了沉重打擊，但是目前已經明顯可控，養(yǎng)豬業(yè)的復養(yǎng)也在慢慢恢復。

3 診斷

ASF 的臨床癥狀和病理變化與豬的許多其他出血性疾病，尤其是豬瘟病毒很難區(qū)分，死亡率一般為100%，且沒有有效的疫苗對其進行防控，因此需要快速準確的檢測方法對ASF 進行檢測。ASF 病原學檢測方法主要包括聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）、實時熒光定量PCR（real-time PCR）、紅細胞吸附試驗（hemadsorption，HAD）、熒光抗體試驗（flurescent treponemal antibody absorption，F(xiàn)TA）、環(huán)介導等溫擴增技術（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）等[12,13]。ASFV 的P72 基因比較保守，因此針對P72 基因建立了多種抗原檢測方法，其中以普通PCR 和real-time PCR 方法居多，這也是臨床上檢測ASF 病原最常用的兩種快速檢測方法[14-16]。HAD 試驗原理是感染ASFV 的巨噬細胞或單核細胞能夠被豬的紅細胞吸附，形成玫瑰花環(huán)樣或桑葚狀形態(tài)，這種方法比較耗時，且現(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)部分毒株感染的巨噬細胞并不能被紅細胞吸附。因此該方法也逐漸被淘汰，或者更多時候是作為檢測ASF 的補充方法[17]。FTA 可以用于檢測ASFV 可疑豬組織，或者HAD 陰性的巨噬細胞或單核細胞，敏感性和準確性均較高，對急性期感染的ASF 具有較好的檢測效果，但需要專業(yè)的技術人員，對試驗設備也有較高的要求，因此也只是作為ASF 檢測的輔助手段之一。

血清學檢測方法主要包括酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）和間接免疫熒光試驗（indirect fluorescent antibody assay，IFA）等[12]。ELISA 方法最為常用，作為包被抗原的既有基于全病毒的包被物，也有基于P72 蛋白、P54蛋白等作為抗原包被物的阻斷ELISA，目前也已經有很多商品化的試劑盒。通過檢測感染豬體內的ASF 抗體水平，可以了解其感染情況，但如果是亞急性或慢性感染的豬體內ASF 抗體不易檢出[18]。同樣，雖然IFA 具有更高的準確性和敏感性，但涉及到專業(yè)的技術人員和較高的設備要求，往往僅限于實驗室使用。

4 防控

目前，全世界尚未有有效的藥物和疫苗可以防控ASF 的感染[19]。對于尚無該疫情的地區(qū)，要加強防控，建立ASF 監(jiān)測體系，完善ASF 凈化措施，將ASF 疫情隔離在外。一旦發(fā)現(xiàn)ASF 疫情，要盡快隔離病豬，撲殺患病豬群，銷毀死亡豬只，對運輸豬只的來往車輛、接觸病豬的相關人員以及圈舍都要進行嚴格的消毒處理，對廢棄物及時采取無害化處理措施；同時，對患病區(qū)周圍的豬群盡快采用血清學等方法進行疫情監(jiān)測。

對于規(guī)?；i場，要建立三道屏障[20]。第一道屏障為物理性屏障，即建立圍擋。在豬場周圍架設鐵網(wǎng)和籬笆等，將豬舍與外界進行隔離。圍擋高度要大于1.5m，無常開式出入門，能夠有效阻擋嚙齒類動物進入，并嚴禁一切豬源產品和豬肉制品的進入。同時應當保證有專人巡察圍擋的有效性，做到至少一周一次。第二道屏障為生物安全屏障。對于養(yǎng)豬場的負責人，要主動認識到建立生物安全隔離區(qū)的重要性，能夠保證區(qū)域屏障的形成。禁止一切外源豬、豬源制品、泔水、豬肉產品等進入養(yǎng)殖場；對引進仔豬和授精精液進行檢測，確保無ASFV 攜帶；對豬場周圍的隔離帶可采取噴灑消毒液、燒荒等措施；豬場實行嚴格的消毒制度，不僅要對豬場內所有可能被污染的區(qū)域，而且要尤其注意進入豬場的車輛、人員要嚴格消毒，人員要嚴格執(zhí)行隔離期制度，在隔離期內禁止與生豬產品接觸；豬場內禁養(yǎng)一切寵物，包括犬、貓、鳥等，保證衛(wèi)生，做好滅鼠殺蟲等工作；對豬場內的病死豬、糞便等及時銷毀焚燒，做好無害化處理；豬場負責人要以身作則，帶頭執(zhí)行，嚴格執(zhí)行生物安全措施。第三道屏障為意識屏障。養(yǎng)殖場要緊繃生物安全神經，尤其是對出入的人員、車輛和進出的食品等做好消毒工作，建立嚴格的管理制度，流動車輛要注意做到先清洗后消毒，不能單純只進行消毒而忽略清洗；車輛駕駛人員、流動人員進入場區(qū)要執(zhí)行嚴格的消毒制度；消毒液的配置、使用和管理等以及消毒的環(huán)節(jié)均要設置專人負責，尤其確保消毒液配置的準確性，并做到消毒無遺漏。

對于養(yǎng)殖戶，要執(zhí)行嚴格的飼養(yǎng)管理制度和生物安全措施。在調運生豬及其產品前要向有關檢疫部門申報、備案，嚴禁從發(fā)生疫情的省份地區(qū)調運生豬、仔豬和引種等；新引進豬要保證全進全出，隔離飼養(yǎng)，避免接觸野豬；嚴禁飼喂豬源飼料制品和泔水等；對豬場進出的人員和車輛實行嚴格的消毒制度，豬場無關人員和無關車輛嚴禁進入；一旦發(fā)現(xiàn)ASF 可疑病例，立即隔離可疑豬群，限制可疑豬群的移動，并及時通知上報獸醫(yī)相關部門，對豬場各個環(huán)節(jié)進行消毒，積極配合做好豬群的移動監(jiān)管等工作。

5 小結

ASF 一直是我國重點防范的外來疫病，其病原結構和流行病學復雜，目前尚無有效的疫苗和治療方法，因此對該病的防控就顯得尤為重要。ASF 已經傳入我國，且目前正在流行，要求不僅要對已經發(fā)生的疫情進行控制，而且需要加強宣傳，提高民眾的防控意識，各級部門、養(yǎng)殖人員和普通民眾等各司其職，制定和嚴格執(zhí)行ASF 的綜合防控策略。