雪膽口服液治療雞大腸桿菌病的研究

駱延波 胡明 李璐璐 齊靜 張印 張慶 趙效南 劉玉慶 鄧旭明

摘? 要：為驗(yàn)證雪膽口服液對(duì)雞大腸桿菌病的防治效果，本試驗(yàn)選擇臨床某養(yǎng)殖場(chǎng)42日齡海蘭白殼蛋雞大腸桿菌自然病例作為研究對(duì)象，應(yīng)用雪膽口服液按4mL/L飲水添加，連續(xù)飲用5d，同時(shí)以硫酸新霉素可溶性粉（0.5g/L飲水）作為對(duì)照藥物，觀察兩種藥物對(duì)大腸桿菌病的防治效果。結(jié)果表明：雪膽口服液對(duì)雞大腸桿菌自然病例的保護(hù)率為86.71%，但效果不及新霉素（95.57%）。

關(guān)鍵詞：雪膽口服液;治療;雞;大腸桿菌

中圖分類(lèi)號(hào)：S858.313.92? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B? ? ?文章編號(hào)：1673-1085（2019）11-0003-03

雪膽（Hemsleya sinesis Cogn）為葫蘆科雪膽屬植物，其有效部分為塊根。其提取物具有抗腫瘤、廣譜抗菌、抗病毒、抗炎鎮(zhèn)咳、抗肝炎等作用[1-3]。為驗(yàn)證雪膽口服液對(duì)雞大腸桿菌的防治效果作用，根據(jù)中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告——獸用中藥、天然藥物臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則[4]（第1596號(hào)）中臨床擴(kuò)大試驗(yàn)要求，對(duì)雪膽口服液的臨床療效驗(yàn)證，選擇某養(yǎng)殖場(chǎng)飼養(yǎng)的海蘭白殼蛋雞大腸桿菌病自然病例作為研究對(duì)象，應(yīng)用雪膽口服液按4mL/L飲水添加，連續(xù)飲用5d，觀察防治效果。

1? 材料與方法

1.1? 試驗(yàn)動(dòng)物? 海蘭白殼蛋雞1400只，按常規(guī)免疫程序免疫疫苗，養(yǎng)至42日齡時(shí)，雞只表現(xiàn)精神萎靡，羽毛逆立，扎堆，食欲廢絕，腹瀉，糞便呈黃綠色水便，初步懷疑大腸桿菌病。

1.2? 病例診斷和分組? 對(duì)上述雞群，選擇癥狀典型病例，進(jìn)行剖檢和細(xì)菌分離、生化鑒定。

將1400只隨機(jī)分為中藥組及對(duì)照組兩組，每組約700只，兩組給予同樣的飼養(yǎng)管理?xiàng)l件。Ⅰ組為中藥組，給予濃度為推薦劑量的雪膽口服液自由飲水，連續(xù)給藥5d;Ⅱ組為硫酸新霉素可溶性粉組，按推薦劑量（0.5g/L）飲水給藥，連續(xù)給藥5d，每天觀察并記錄雞只的精神狀況。分組及給藥情況見(jiàn)表1。

1.3? 試驗(yàn)藥物與化學(xué)試劑? 雪膽口服液，德州神牛藥業(yè)有限公司中試生產(chǎn)，批號(hào)：20160412。硫酸新霉素可溶性粉，購(gòu)于河南森隆獸藥有限公司，批號(hào)：20160826;麥康凱瓊脂、營(yíng)養(yǎng)瓊脂、細(xì)菌微量生化反應(yīng)管，購(gòu)于杭州天和微生物試劑有限公司;營(yíng)養(yǎng)肉湯，購(gòu)于北京雙旋微生物培養(yǎng)基制品廠。

1.4? 試驗(yàn)儀器? 電熱鼓風(fēng)干燥箱，北京市永光明醫(yī)療儀器廠;生化培養(yǎng)箱（SPX-250B-Z），上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠;恒溫培養(yǎng)振蕩器（ZHWY-103D），上海智城分析儀器制造有限公司;電子天平（MR200A），上海第二天平儀器廠;超凈工作臺(tái)（LGJ-10），北京四環(huán)科學(xué)儀器廠。TGL- 16高速臺(tái)式電動(dòng)離心機(jī)，金壇市杰瑞爾電器有限公司。

1.5? 檢測(cè)指標(biāo)? 每天觀察記錄試驗(yàn)雞的臨床癥狀變化、死亡、增重情況，計(jì)算各組的保護(hù)率、治愈率、死亡率（統(tǒng)計(jì)方法同試驗(yàn)性臨床試驗(yàn)）。

1.6? 數(shù)據(jù)分析? 對(duì)采用SPSS 17軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，死亡率、保護(hù)率、治愈率采用卡方x2檢驗(yàn)。兩組的X2檢驗(yàn)： X2 = （ad-bc）2n/（a+b）（c+d）（a+c）（b+d），其中I組存活數(shù)a，死亡數(shù)c;II組存活數(shù)b，死亡數(shù)d。n為兩組動(dòng)物總數(shù)。X2

>6.63為差異顯著，X2<3.84表示差異不顯著。

2? 結(jié)果與分析

2.1? 病例診斷

2.1.1? 剖檢變化? 對(duì)典型病例進(jìn)行剖檢，可見(jiàn)到大腸桿菌病的病理變化：肌肉脫水，顏色暗紅;肝臟腫脹，有散在的出血點(diǎn)，部分雞有輕微的心包炎、肝周炎表現(xiàn)[5]。

2.1.2? 細(xì)菌分離、鑒定? 從病死雞的肝臟采集病料，接種于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)24h后，可見(jiàn)紅色菌落。挑取單個(gè)菌落，接種肉湯增菌后，進(jìn)行生化試驗(yàn)，生化鑒定結(jié)果符合大腸桿菌的生物學(xué)特征[6-8]。分離菌生化鑒定結(jié)果見(jiàn)表2。

2.2? 防治效果

觀察兩種藥物對(duì)大腸桿菌病雞的防治效果，新霉素組用藥第2天后癥狀明顯好轉(zhuǎn)，腹瀉停止，飲食欲有所恢復(fù)，第3天以后沒(méi)有再出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，中藥組在用藥后癥狀稍見(jiàn)好轉(zhuǎn)，部分雞精神萎靡，死亡現(xiàn)象一直持續(xù)到第4天，死亡數(shù)為93只。統(tǒng)計(jì)兩組藥物飲水給藥后的1周內(nèi)的治愈率、保護(hù)率、死亡率各項(xiàng)指標(biāo)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析均為差異顯著（P<0.05）。說(shuō)明雪膽口服液對(duì)雞大腸桿菌病的防治效果不及新霉素。結(jié)果見(jiàn)表3。

3? 結(jié)論

雪膽口服液對(duì)雞大腸桿菌自然病例的治療保護(hù)率為86.71%，但效果不及新霉素（95.57%）。

4? 討論

4.1? 雪膽口服液對(duì)雞大腸桿菌病具有一定的冶療效果，這與雪膽提取物具有廣譜抗菌作用的報(bào)道一致[1]。根據(jù)體外抗菌試驗(yàn)，從雪膽醇浸出物中提取的雪膽皂苷和膽苦味素對(duì)溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌、福氏痢疾桿菌、大腸桿菌、傷寒桿菌等都有不同程度的抗菌作用，較同濃度的氯霉素強(qiáng)[2]。雪膽素對(duì)革蘭氏陰性菌的MICs為0.0056～1.5mg/mL[3]。筆者也進(jìn)行了相關(guān)試驗(yàn)，雪膽提取物對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌、綠膿桿菌、沙門(mén)氏菌、克雷伯氏菌等均表現(xiàn)較好的抗菌效果，最低抑菌濃度（MIC）可達(dá)50～100mg/mL[8、9]。

4.2? 雪膽口服液對(duì)自然病例的保護(hù)率（86.71%）明顯高于實(shí)驗(yàn)室臨床試驗(yàn)中的保護(hù)率（56%），這與相關(guān)研究結(jié)論一致[10]。造成兩者差異的原因可能是：①臨床感染的大腸桿菌毒力較弱，因而造成死亡率低，藥物的保護(hù)率高;②自然感染大腸桿菌數(shù)量較少;③自然感染與實(shí)驗(yàn)室人工感染的途徑不同，自然感染多由消化道途徑，而人工感染是通過(guò)直接肌肉注射，自然病例的嚴(yán)重程度不同。

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Study on the Treatment of Chicken Colibacillosis with

Hemsleya Oral Liquid

LUO Yanbo1，2，HU Ming1， LI Lulu1，QI Jing1，ZHANG Yin1，ZHANG Qing1，

ZHAO Xiaonan1，LIU Yuqing1，DENG Xuming2

（1.Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine，Shandong Academy of Agricultural Sciences/Shandong Key Laboratory of Animal breeding and diseases Control，Jinan 250100，China;

2.College of Animal Medicine， Jilin University， Changchun 130062，China）

Abstract：In order to verify the prevention and treatment effect of Hemsleya oral liquid on chicken colibacillosis，the natural case of E.coli from 42-day-old Hailan white-shell chicken in a clinical farm were selected in this study.The concentration of? of Hemsleya oral solution was 4 mL/L drinking water， continuous drinking for 5 days， while using neomycin sulfate soluble powder （0.5g/L drinking water） as a control drug，then the effect of two drugs on the prevention and treatment of colibacillosis were observed.The results showed that the protection rate of Hemsleya oral liquid on natural cases of chicken E.coli was 86.71%， but the effect was not as good as that of neomycin （95.57%）.

Key words：Hemsleya oral liquid; treatment; chicken; Escherichia coli □