牛樟芝的藥理毒理學(xué)研究及臨床應(yīng)用進展

葉財發(fā)，楊育儒，倪曉霞，陳錦珊

(聯(lián)勤保障部隊第九〇九醫(yī)院/廈門大學(xué)附屬東南醫(yī)院制劑科，福建漳州 363000)

牛樟芝是臺灣特有的多孔真菌，主要藥效成分為三萜和多糖?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，其具有保護肝臟、抗氧化、抗炎、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、保護神經(jīng)、抗光損傷、抗菌、調(diào)節(jié)血糖及血脂等作用。近年來牛樟芝制劑在保護肝臟、抗腫瘤、治療輕度認知障礙(mild cognitive impairment，MCI)、降血糖、降膽固醇、降血壓、抗痛風(fēng)和保護皮膚等方面的臨床應(yīng)用有許多報道，現(xiàn)綜述如下。

1 牛樟芝的藥理作用

1.1 保護肝臟 Chen等[1]利用刀豆蛋白A誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷模型，給予小鼠口服樟芝酸A (zhankuic acid A)治療，發(fā)現(xiàn)樟芝酸A能明顯改善小鼠急性肝損傷，其機制可能是通過抑制酪氨酸激酶janus kinase 2 (JAK2)通路發(fā)揮抗炎作用。Gokila Vani等[2]利用對偶氮二異丁脒鹽酸鹽誘導(dǎo)小鼠形成人肝癌HepG2細胞，體外給予樟芝酸H(zhankuic acid H)治療，并以水飛薊素為陽性對照，結(jié)果表明樟芝酸H通過激活Nrf2或抗氧化反應(yīng)元件(ARE)來發(fā)揮保護肝細胞的作用。Huang等[3]利用四氯化碳誘導(dǎo)小鼠肝損傷，再腹腔注射牛樟芝提取物去氫齒孔菌酸(dehydroeburicoic acid,DEA)和齒孔菌酸(eburicoic acid,EA)，結(jié)果顯示能顯著抑制一氧化氮合酶和環(huán)氧合酶-2，以及細胞色素P4502E1的表達，推測DEA和EA可能通過抗氧化和抗炎途徑保護肝臟。

1.2 抗氧化 Chang等[4]建立小鼠Lieber-DeCarli肝損傷模型，給予牛樟芝提取物antroterol治療，結(jié)果顯示血清/肝臟脂質(zhì)等指標(biāo)明顯降低，可能主要由于antroterol可提高小鼠體內(nèi)脂質(zhì)代謝、抗氧化能力、酒精代謝及抗炎作用。Huang等[5]通過實驗發(fā)現(xiàn)，牛樟芝能提高雄鼠大腦皮層的抗氧化能力，并且能增加抗氧化酶活性。

1.3 抗炎 牛樟芝具有顯著的抗炎活性，特別是麥角甾烷類三萜成分，原因可能是麥角甾烷類三萜的結(jié)構(gòu)與類固醇激素和膽固醇的結(jié)構(gòu)類似，與其受體接觸，可發(fā)揮抗炎作用[6]。Qiao等[7]通過給大鼠喂食牛樟芝乙醇提取物來研究牛樟芝在大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)，利用超高效液相色譜-四極桿飛行時間質(zhì)譜法(UHPLC/QTOF-MS)監(jiān)測大鼠血漿中的18種三萜類化合物，并經(jīng)核磁共振(NMR)鑒定以及antcins B、C、H、K對照品比對確認，發(fā)現(xiàn)高極性的麥角甾烷類三萜被迅速吸收和消除，低極性的羊毛甾烷類三萜則長時間停留在血漿中，而antcin K、H被證明是主要的抗炎和抗腫瘤活性成分，其藥理活性與三萜類構(gòu)型緊密相關(guān)，羥基越多，碳基越少，其生物利用度越高。Lin等[8]通過實驗發(fā)現(xiàn)，牛樟芝水提取物中的高分子多糖作用于樹突細胞可促進促炎性細胞因子分泌及成熟，可能機制是激活了絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)及核因子κB(NF-κB)通路。Kuo等[9]通過體外實驗發(fā)現(xiàn)，從牛樟芝中分離得到的ergostatrien-3β-ol具有明顯的抗炎及抗光損傷作用，ergostatrien-3β-ol有望成為一種抗光損傷抗原。

1.4 抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié) 張遠騰等[10]總結(jié)了牛樟芝的抗腫瘤作用是通過細胞毒作用、抑制癌細胞轉(zhuǎn)移和抑制血管新生作用等機制實現(xiàn)的。Du等[11]從牛樟芝中分離得到antcin K、antcin C、zhankuic acid C、zhankuic acid A和DEA，通過小鼠HL60細胞異種移植模型實驗，給予DEA治療能顯著縮小腫瘤瘤體，但小鼠體重不降低。Lee等[12]發(fā)現(xiàn)從牛樟芝中柱分離得到的1(10→6)abeo-ergosta-5,7,9,22-tetraen-3α-ol、citreoanthrasteroid B、dankasterones A和B具有抗白血病的作用。Chang等[13]比較了牛樟芝多糖的殼聚糖二氧化硅復(fù)合物膠囊和二氧化硅膠囊的抗肝癌活性，結(jié)果顯示殼聚糖二氧化硅復(fù)合物膠囊的抗肝癌活性更高。食用菌牛樟芝硫酸化多糖(SPS)是一種新的免疫調(diào)節(jié)劑，Lu等[14]通過體外實驗發(fā)現(xiàn)，SPS能抑制A549及LLC1肺癌細胞活性，其機制可能是SPS在轉(zhuǎn)化生長因子β受體(transforming growth factor β receptors,TGFR)降解和caspase 3和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)激活中起關(guān)鍵作用，有效地降低了TGFR蛋白水平。Peng等[15]發(fā)現(xiàn)，從牛樟芝子實體提取的methyl antcinate A (MAA)對人乳腺癌細胞MCF7毒性低，且能阻止MCF7細胞群的轉(zhuǎn)移能力。在免疫印跡分析中，MAA顯示出抑制熱休克蛋白27表達的作用。Shang等[16]采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)建立牛樟芝子實體的指紋圖譜來確定牛樟芝的質(zhì)量，利用體外實驗干預(yù)乳腺癌細胞，以他莫昔芬為陽性對照，結(jié)果表明牛樟芝提取物對人乳腺癌細胞抗原具有抑制作用，其效果優(yōu)于或等于他莫昔芬。Yang等[17]發(fā)現(xiàn)牛樟芝深層發(fā)酵液以劑量依賴形式抑制卵巢癌細胞增長，其機制可能是抑制人表皮生長因子受體2(HER-2/neu)信號通路。Lin等[18]闡明麥角甾烷類三萜能顯著抑制基礎(chǔ)過敏反應(yīng)及樹突細胞的免疫抑制作用，如樟芝酸C呈劑量依賴性抑制樹突細胞成熟，說明牛樟芝中麥角甾烷類三萜可能用于治療慢性炎癥和自身免疫疾病。Lee等[19]發(fā)現(xiàn)牛樟芝的11個提取物(MAA、methyl antcinate B、DEA和15α-acetyl-dehydrosulfurenic acid等)對14種人癌細胞和2種非轉(zhuǎn)化型細胞有選擇性毒性，呈劑量依賴形式發(fā)揮細胞凋亡作用，對這些三萜類成分進行結(jié)構(gòu)修飾可能有助于開發(fā)出更有效的抗腫瘤藥物。

1.5 保護神經(jīng) Chang等[20]通過建立小鼠神經(jīng)細胞PC12細胞模型，利用β-淀粉蛋白(Aβ25-35)誘導(dǎo)神經(jīng)毒性，發(fā)現(xiàn)牛樟芝乙醇提取物(ethanol extract ofAntrodiacinnamomea，EEAC)通過挽救線粒體凋亡途徑抑制神經(jīng)毒性，同時通過下調(diào)腺苷A1和腺苷A2A受體延緩神經(jīng)變性和記憶功能障礙。Shi等[21]發(fā)現(xiàn)牛樟芝二次代謝產(chǎn)物可通過強抗氧化作用來保護Aβ誘導(dǎo)的神經(jīng)損傷，而海洋深層水(DOW)可促進牛樟芝二次代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生。

1.6 其他 Kuo等[22]建立以高脂肪飲食誘導(dǎo)的小鼠模型并分組，分別給予一定量的antcin K、非諾貝特以及二甲雙胍治療，結(jié)果antcin K組小鼠血糖、三酰甘油、總膽固醇以及瘦素水平顯著降低，表明antcin K具有治療2型糖尿病和高脂血癥的潛力。趙能等[23]采用抑菌圈法，評價牛樟芝菌絲體發(fā)酵液的乙酸乙酯提取物對13種致病細菌的抗菌活性，發(fā)現(xiàn)隨著細菌培養(yǎng)時間的延長，提取物的抗菌活性也增強，說明牛樟芝菌絲體在液體培養(yǎng)條件下，能夠產(chǎn)生廣譜高效抑菌活性的次生代謝產(chǎn)物。LIU等[24]通過給小鼠喂食不同劑量的牛樟芝，研究氧化應(yīng)激信號與牛樟芝作用機制的關(guān)系，結(jié)果顯示牛樟芝能明顯增加小鼠的運動耐力，其機制可能與調(diào)節(jié)腺苷酸活化蛋白激酶、蛋白激酶B和小鼠肝臟和骨骼肌中雷帕霉素哺乳動物靶點有關(guān)。Wang等[25]研究發(fā)現(xiàn)，牛樟芝還具有治療慢性腎病的作用。

2 牛樟芝的毒理學(xué)研究

Lin等[26]為驗證牛樟芝的遺傳毒性、口服毒性和致畸作用，通過喂食妊娠大鼠一定量(700～2800 mg·kg-1·d-1)的牛樟芝14 d后，未發(fā)現(xiàn)明顯毒性。Huang等[27]通過喂食大鼠不同劑量的牛樟芝菌絲體，來驗證其亞慢性毒性和致畸作用，結(jié)果表明在喂食大鼠最高劑量(6 mg/kg)牛樟芝菌絲體后，未發(fā)現(xiàn)與治療相關(guān)的異常(肉眼和顯微鏡觀察)。Lin等[28]通過埃姆斯實驗(Ames test)、中國倉鼠卵巢細胞實驗以及急性和慢性毒性實驗，驗證了牛樟芝膠囊的安全性。

3 牛樟芝的臨床應(yīng)用

3.1 肝臟保護 Chiu等[29]在臨床研究中發(fā)現(xiàn)，慢性丙型肝炎(丙肝)患者服用牛樟芝菌絲體(4.68 g/d，bid)24～48周后，人體內(nèi)重金屬水平明顯降低，且鋅含量明顯增加，進而減輕了丙肝患者治療過程中的副作用。

3.2 抗腫瘤 單麗珠等[30]采用一定量牛樟芝聯(lián)合化療治療惡性腫瘤患者，結(jié)果顯示聯(lián)合使用牛樟芝能提高機體免疫功能，穩(wěn)定血常規(guī)，促進骨髓造血功能的恢復(fù)，減少化療毒副反應(yīng)的發(fā)生，改善患者生活質(zhì)量。因此牛樟芝可能用作惡性腫瘤化療的輔助用藥。黃界乙[31]治療原發(fā)性肝癌晚期患者，對照組術(shù)后采用注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸(商品名 思美泰)或苦黃注射液利膽退黃，治療組在對照組治療基礎(chǔ)上，加用以益氣活血清化利水的方劑，并口服牛樟芝，療程3個月。觀察1～2個療程。結(jié)果顯示患者體內(nèi)天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶(ALT)等指標(biāo)明顯降低，治療6個月后對腫瘤生長有顯著的抑制；可明顯改善納差、乏力癥狀(P<0.05)，可顯著改善脅痛、腹脹、腹水情況(P<0.01)；兩個療程內(nèi)治療前后兩組生存率無明顯差異。但是Tsai等[32]在2010年8月至2012年7月期間，采用牛樟芝配合化學(xué)藥物治療胃癌、肺癌、肝癌等患者17例，結(jié)果顯示效果不明顯，原因可能是樣本量太少。

3.3 改善MCI 樟芝升百膠囊系福建中醫(yī)藥大學(xué)阮時寶教授治療MCI常用經(jīng)驗方，由淫羊藿、西洋參、川三七、牛樟芝、炙甘草等多味中藥組成，由臺灣天明制藥股份有限公司按照原方劑配伍比例生產(chǎn)。吳春幸等[33]采用針灸結(jié)合樟芝升百膠囊內(nèi)服，治療MCI患者29例，給予樟芝升白膠囊(2粒，bid,po)，于早、晚飯后30 min后服用，4周為1個療程，共治療2個療程，結(jié)果顯示患者的認知水平明顯提高。

3.4 降血糖 江碩儒[34]以臺灣4所醫(yī)院診斷的體質(zhì)為少陰病陽虛寒水之體質(zhì)的糖尿病患者為研究對象，患者分為3組，分別服用經(jīng)方真武湯、牛樟芝及真武湯加牛樟芝三組藥物，結(jié)合“六經(jīng)辨證”中少陰病理論，結(jié)果顯示牛樟芝組患者血糖顯著降低，真武湯組和真武湯加牛樟芝組降血糖速度較牛樟芝組快，其差異與牛樟芝使用的劑量和糖尿病的證型有關(guān)。Yu[35]用牛樟芝片(400 mg/片)治療糖尿病患者，取得明顯降糖效果。如53歲男性，治療前血糖水平31.28 mmol/L，給予牛樟芝片(3片，tid,po)后，血糖濃度降至6.67 mmol/L。61歲男性，治療前血糖水平25 mmol/L，給予牛樟芝片(5片，qid,po)，療程2個月，血糖水平降至9.44 mmol/L。68歲女性，治療前血糖水平16.67 mmol/L，給予牛樟芝片(2片，qid,po)，血糖水平降至7.78～8.33 mmol/L。54歲女性，治療前血糖水平11.11 mmol/L，給予牛樟芝片(3片，tid，po)，療程2個月，血糖水平降至6.67 mmol/L。31歲男性，治療前血糖水平26.83 mmol/L，給予牛樟芝片(4片，tid，po)，療程1個月，血糖水平降至6.5 mmol/L。73歲男性，治療前血糖水平16.67 mmol/L，給予牛樟芝片(6片/d)，血糖水平降至7.78 mmol/L。

3.5 降膽固醇 Yu[35]報道，男性患者，52歲，治療前膽固醇水平8.02 mmol/L，給予牛樟芝片(3片，qid,po)，療程3周，膽固醇水平降至6.44 mmol/L。男性患者，治療前膽固醇水平7.89 mmol/L，給予牛樟芝片(4片，bid,po)，療程2個月，膽固醇水平降至4.09 mmol/L。

3.6 降血壓 Chen等[36]利用牛樟芝治療高血壓患者(收縮壓130～179 mm Hg或舒張壓85～109 mm Hg，1 mm Hg=0.133 kPa)共41例，療程8周，繼續(xù)治療2周，收縮壓顯著降低[(144.86±11.34)～(133.10±10.90) mm Hg]，舒張壓顯著降低[(96.19±7.42)～(91.38±7.56) mm Hg]。

3.7 治療痛風(fēng) Yu[35]報道牛樟芝臨床應(yīng)用于痛風(fēng)治療實例。男性患者，46歲，治療前尿酸水平為666.4 μmol/L，給予牛樟芝片(6片，bid,po)療程3個月，尿酸水平降低至529.55 μmol/L，期間沒有采取任何其他降低尿酸的治療方案。

3.8 治療皮膚疾病 Yu[35]報道牛樟芝臨床應(yīng)用于皮膚有關(guān)疾病治療實例。尋常性痤瘡：26歲女性，患病2～3年，多種方法治療無效，給予牛樟芝片(2片，tid,po)，療程2個月，治療后臉部痤瘡明顯消失，且無復(fù)發(fā)。蕁麻疹：47歲男性，患慢性蕁麻疹超6個月，多種方案治療無效，給予牛樟芝片(2片，bid,po)，療程2個月，蕁麻疹消失。濕疹：29歲男性，患病多年，全身60%～70%皮膚受影響，多種方案治療無效，給予牛樟芝片(2片，bid，po)，癥狀迅速消失，未復(fù)發(fā)。過敏性鼻炎：37歲男性，患過敏性鼻炎，給予牛樟芝片(2片，tid,po)療程1個月， 癥狀減輕。60歲男性，患過敏性鼻炎，治療方案1：給予牛樟芝片(1/2片，bid,吸入)，療程3個月， 癥狀減輕；治療方案2：給予牛樟芝片(4片，bid，po)，療程3個月， 癥狀減輕。

4 結(jié)論和展望

由于牛樟芝的藥理作用廣泛，探究其作為藥物應(yīng)用具有重要意義，今后可從以下幾個方面加強系統(tǒng)性研究。(1)牛樟芝具有解毒作用，但是資料零散、缺少深度研究，作用機制也不明確，應(yīng)進行系統(tǒng)研究；(2)在神經(jīng)保護、肝臟保護、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等方面的臨床應(yīng)用雖有報道，但研究較少，應(yīng)用實例不多，應(yīng)進一步加強研究；(3)盡管目前的研究尚未發(fā)現(xiàn)其存在明顯的毒副作用，但仍有必要進一步深入研究；(4)糖尿病在我國發(fā)病率很高，但各種口服藥的降糖效果不甚理想，而本文收集的臨床資料顯示，牛樟芝的降糖效果明顯，故應(yīng)進一步研究證實?？傊?，目前牛樟芝相關(guān)制劑主要應(yīng)用于保護肝臟、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)、MCI、降血糖、降膽固醇及治療皮膚相關(guān)疾病，但還缺少相關(guān)機制研究和深入、系統(tǒng)的研究，在臨床應(yīng)用方面還處于零星觀察階段，缺乏公認的治療方案。建議今后按照藥物研究的程序和要求，加強牛樟芝的藥理學(xué)和毒理學(xué)研究，研制合理的劑型，加強臨床應(yīng)用觀察，盡早造福于患者。