抗腫瘤多肽藥物研究進(jìn)展

李琬瓊，高艷鋒

（中山大學(xué)藥學(xué)院（深圳），廣東 深圳 518107）

惡性腫瘤嚴(yán)重威脅人類健康，其發(fā)病率和死亡率在近幾年呈持續(xù)上升的趨勢(shì)，我國的癌癥防控形勢(shì)依然嚴(yán)峻[1]。盡管近年來免疫治療取得了突破性進(jìn)展，手術(shù)、放療和化療仍然是臨床上普遍采用的腫瘤治療方法，尋找安全、合理、有效的腫瘤治療方法是目前腫瘤治療領(lǐng)域亟待解決的問題。多肽由幾個(gè)到幾十個(gè)天然或非天然氨基酸縮合而成，能夠通過天然產(chǎn)物提取、基因重組和化學(xué)合成等方式獲得。多肽藥物具有免疫原性低、組織滲透性好、易于合成和改造、安全性好、不易在組織中蓄積等優(yōu)點(diǎn)，在抗腫瘤、抗菌、慢性代謝性疾病、心血管疾病、免疫疾病等方面都表現(xiàn)出顯著的療效，目前有80余種多肽藥物上市，150余種多肽藥物正在開展臨床試驗(yàn)。多肽藥物的抗腫瘤機(jī)制具有多樣性，它們可通過促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤新生血管形成、激活機(jī)體抗腫瘤免疫反應(yīng)等機(jī)制抑制腫瘤的發(fā)生發(fā)展。由于多肽藥物易于改造，人們通常將其進(jìn)行修飾或融合以增加其腫瘤靶向性和口服給藥的順應(yīng)性，延長體內(nèi)作用時(shí)間；腫瘤歸巢肽（tumor homing peptide，THP）、細(xì)胞穿膜肽（cell penetrating peptide，CPP）、自組裝多肽、納米顆粒等可作為優(yōu)良載體參與抗腫瘤藥物遞送；此外，多肽藥物還可作為分子探針監(jiān)測(cè)體內(nèi)腫瘤的轉(zhuǎn)移。本文主要從抗腫瘤多肽藥物的抗腫瘤作用機(jī)制、結(jié)構(gòu)優(yōu)化、靶向多肽和自組裝，以及未來的發(fā)展趨勢(shì)等方面展開綜述。

1 多肽藥物的抗腫瘤作用機(jī)制

1.1 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡

細(xì)胞凋亡又稱程序性細(xì)胞凋亡，是一種細(xì)胞正常死亡的方式，在維持機(jī)體穩(wěn)態(tài)方面發(fā)揮著重要作用。靶向腫瘤細(xì)胞的凋亡途徑是癌癥預(yù)防和治療的有效策略，能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的多肽是開發(fā)新型抗癌藥物的重要候選者。景奕文等[2]發(fā)現(xiàn)烏賊墨多肽SHP可通過激活P53基因，調(diào)節(jié)Bcl-2等細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的蛋白表達(dá)，從而抑制人前列腺癌細(xì)胞DU-145的增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。齊玲等[3]發(fā)現(xiàn)西蘭花多肽組分Ⅱ可提高細(xì)胞Bax/Bcl-2蛋白比值，進(jìn)而促進(jìn)Caspase-3活化，誘導(dǎo)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡。Valiyari等[4]發(fā)現(xiàn)人白細(xì)胞介素24（interleukin-24，IL-24）的最小重組體多肽sIL-24能夠很好地抑制前列腺癌細(xì)胞（PC-3）、組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞（U937）和Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞（Raji）等腫瘤細(xì)胞的增殖，對(duì)正常成纖維細(xì)胞（MRC-5）無影響，且sIL-24能夠提高癌細(xì)胞中Bax/Bcl-2蛋白比值，促進(jìn)細(xì)胞色素C釋放增多且Caspase-3表達(dá)上調(diào)。靶向腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡和細(xì)胞周期相關(guān)的通路和靶點(diǎn)通?？梢詫?dǎo)致腫瘤細(xì)胞的凋亡，其難點(diǎn)在于大多數(shù)此類靶點(diǎn)位于細(xì)胞的內(nèi)部，大多數(shù)多肽難以透過細(xì)胞膜而實(shí)現(xiàn)有效的靶向，往往需要穿膜肽等序列的輔助。

1.2 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞壞死

細(xì)胞壞死是細(xì)胞由于受到物理或化學(xué)性的損害、缺氧與營養(yǎng)不良等因素而產(chǎn)生的一種被動(dòng)死亡，壞死細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)膜通透性增高、細(xì)胞器變形或膨大等現(xiàn)象。能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞壞死的多肽通常能夠破壞腫瘤細(xì)胞膜，其比傳統(tǒng)的化療藥物有著更高的選擇性，且不會(huì)誘導(dǎo)多藥耐藥現(xiàn)象。研究發(fā)現(xiàn)，一種源自人類乳鐵蛋白的PFR九肽（PFWRIRIRR-NH2）體外能夠抑制白血病細(xì)胞MEL和HL-60的增殖、上調(diào)細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平和誘導(dǎo)細(xì)胞膜的破壞，誘導(dǎo)腫瘤壞死現(xiàn)象的發(fā)生，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果也表明PFR肽有著較好的抗腫瘤效果和耐受性[5]。Wang等[6]發(fā)現(xiàn)，Polybia-MPI陽離子兩親性α-螺旋短肽能夠選擇性破壞癌細(xì)胞膜或形成跨膜孔導(dǎo)致各種白血病細(xì)胞壞死。靶向腫瘤細(xì)胞膜的優(yōu)點(diǎn)是能克服耐藥現(xiàn)象的發(fā)生，缺點(diǎn)是由于不同細(xì)胞的細(xì)胞膜之間存在相似性，僅僅依賴電荷或二級(jí)結(jié)構(gòu)等特性難以得到高選擇性靶向腫瘤細(xì)胞膜的多肽。

1.3 抑制腫瘤血管形成

實(shí)體瘤的生長必須依賴血管生成，新生的血管為腫瘤組織提供了營養(yǎng)和轉(zhuǎn)移的通道，盡管目前對(duì)于血管生成抑制藥物的作用機(jī)制（破壞血管或使血管正常化）尚存爭(zhēng)議，但抑制腫瘤血管生成已被證明是一種有效的治療手段。血管生成素2（angiopoietin 2，Ang2）/TEK受體酪氨酸激酶（TEK receptor tyrosine kinase，Tie2）和血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）/血管內(nèi)皮生長因子受體 2（vascular endothelial growth factor receptor 2，VEGFR2）等信號(hào)通路均能夠促進(jìn)腫瘤血管生成，其中Ang2/Tie2可介導(dǎo)血管的不穩(wěn)定性，VEGF/VEGFR2與內(nèi)皮細(xì)胞增殖和血管形成密切相關(guān)[7]，單獨(dú)阻斷任意一條途徑即可顯著抑制腫瘤生長，同時(shí)干擾或阻斷這2條途徑引起的抑制效應(yīng)亦可疊加[8]。Binétruy-Tournaire等[9]利用噬菌體展示肽庫技術(shù)得到了能夠特異性與人神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白1（neuropilin 1，NRP1） 結(jié) 合， 阻 礙 VEGF165和VEGFR2相互作用的多肽AR7，體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)均顯示AR7具有較好的抗血管生成及抑瘤活性。Tournaire等[10]以Tie2胞外區(qū)為靶標(biāo)，利用噬菌體展示肽庫技術(shù)得到能夠特異性阻斷Tie2信號(hào)的NS7肽，NS7肽能夠顯著抑制人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）的遷移及雞胚尿囊膜中血管的形成。Wu等[11]將上述AR7和NS7肽通過柔性連接子Ala-Ala連接起來，得到一種能夠同時(shí)抑制Ang2/Tie2和VEGF/VEGFR2的新型多肽，該新型嵌合多肽在抑制腫瘤生長和血管生成方面比AR7和NS7單獨(dú)使用及聯(lián)合應(yīng)用更有效。在后續(xù)的研究中，Zhu等[12]通過Fc片段修飾該嵌合多肽，能明顯延長其半衰期，修飾后的多肽不僅可以阻斷血管生成，而且可以抑制巨噬細(xì)胞的極化從而起到抗腫瘤作用。Choi等[13]開發(fā)并合成了一種具有肝素結(jié)合活性的多肽HBP，其能夠抑制血管生成相關(guān)因子ERK、FAK和Akt的表達(dá)水平，同時(shí)削弱HUVEC分泌侵襲因子MMP2和MMP9的水平，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中多肽HBP對(duì)乳腺癌移植瘤的生長也有顯著的抑制作用，這些結(jié)果均表明多肽HBP可作為抗血管生成類抑瘤候選藥物進(jìn)行后續(xù)研發(fā)和臨床推進(jìn)。Jang等[14]從微生物土壤真菌青霉菌中分離得到2種環(huán)肽PF1171A和PF1171C，發(fā)現(xiàn)兩者均能夠顯著抑制VEGF誘導(dǎo)的HUVEC的遷移、侵襲、增殖和管狀形成以及雞胚尿囊膜的新生血管形成，說明這2條環(huán)肽均可作為血管生成抑制劑進(jìn)行后續(xù)研究。

1.4 激活抗腫瘤免疫應(yīng)答

近年來，腫瘤免疫治療以其卓越的療效和創(chuàng)新性受到了廣泛關(guān)注，2018年的諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予了腫瘤免疫治療領(lǐng)域的美國科學(xué)家James P. Allison和日本科學(xué)家Tasuku Honjo。T細(xì)胞尤其是CD8+T細(xì)胞是機(jī)體抗腫瘤免疫應(yīng)答的核心，其激活需要雙信號(hào)：第一信號(hào)為T細(xì)胞受體（T cell receptor，TCR）識(shí)別抗原肽與主要組織相容性復(fù)合體（major histocompatibility complex，MHC）分子的復(fù)合物；第二信號(hào)是T細(xì)胞表面相應(yīng)受體與抗原提呈細(xì)胞上共刺激分子相結(jié)合。所以激活腫瘤特異性免疫應(yīng)答，主要從增強(qiáng)以上2個(gè)信號(hào)著手?？鼓[瘤多肽疫苗可加強(qiáng)T細(xì)胞激活的第一信號(hào)，它通過抗原提呈細(xì)胞識(shí)別腫瘤抗原并將其呈遞給CD8+T細(xì)胞，進(jìn)而引起相應(yīng)細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞增殖并特異性殺傷腫瘤?？鼓[瘤多肽疫苗研發(fā)的關(guān)鍵在于找到腫瘤特異性的抗原，腫瘤抗原包括過表達(dá)抗原、癌-睪抗原、癌胚抗原、分化抗原等腫瘤相關(guān)抗原和病毒抗原、突變抗原等腫瘤特異性抗原。這些抗原發(fā)揮抗腫瘤免疫功能的成分是8～17個(gè)氨基酸左右的抗原肽片段。

隨著高通量測(cè)序技術(shù)的發(fā)展，基于腫瘤組織突變的腫瘤新抗原相關(guān)免疫療法是一種真正個(gè)性化的療法，因?yàn)榇蠖鄶?shù)新抗原來源于每個(gè)腫瘤基因組中的獨(dú)特突變[15]。Ott等[16]通過測(cè)序和分析患者腫瘤組織中的DNA和RNA序列，得到了含有20種腫瘤新抗原疫苗庫，疫苗誘導(dǎo)的抗原特異性CD4+和CD8+T細(xì)胞能夠引起患者的特異性免疫應(yīng)答，并成功應(yīng)用于黑色素瘤病人的治療。Quandt等[17]設(shè)計(jì)了同時(shí)包含TP53和Kras驅(qū)動(dòng)基因突變的一組含有28～35個(gè)氨基酸的長肽LPs，各突變肽在攜帶相應(yīng)突變的腫瘤患者中誘導(dǎo)T細(xì)胞的響應(yīng)率高于野生型多肽，利用含有對(duì)應(yīng)突變的長肽LPs免疫HLA（-A2/DR1）人源化小鼠，產(chǎn)生了針對(duì)大多數(shù)肽的CD8+/CD4+T細(xì)胞的免疫應(yīng)答。目前國內(nèi)外有大量的臨床試驗(yàn)集中在該領(lǐng)域。

T細(xì)胞激活的第二信號(hào)是協(xié)同刺激信號(hào)，這些信號(hào)分子根據(jù)其功能分為共刺激和共抑制分子，共抑制分子又被稱為免疫檢查點(diǎn)分子，腫瘤微環(huán)境中免疫細(xì)胞表達(dá)的抑制性分子如程序性死亡分子-1（programmed death-1，PD-1）、細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原-4（cytotoxic T lymphocyte antigen-4,CTLA-4）、T細(xì)胞免疫球蛋白及免疫酪氨酸樣抑制基序（T-cell immuno-globulin and ITIM domains,TIGIT）、 淋 巴 細(xì) 胞 活 化 基 因-3（lymphocyte activation gene-3, LAG-3）、T細(xì)胞免疫球蛋白及黏蛋白分子-3（T cell immuno-globulin and mucin domain-3, TIM-3）等[18]，通過與T細(xì)胞或抗原提呈細(xì)胞表面配體互相作用使T細(xì)胞發(fā)生功能耗竭而不能發(fā)揮抗腫瘤作用，造成免疫逃逸現(xiàn)象的發(fā)生。阻斷抑制性分子PD-1、CTLA-4、TIGIT、LAG-3、TIM-3等能夠重新激活腫瘤微環(huán)境中的腫瘤特異性T淋巴細(xì)胞，打破機(jī)體已經(jīng)建立起來的腫瘤免疫耐受機(jī)制，為腫瘤治療帶來希望。目前經(jīng)美國FDA批準(zhǔn)的針對(duì)免疫檢查點(diǎn)分子的阻斷劑主要是抗體類藥物，但抗體生產(chǎn)成本高且半衰期長，一旦出現(xiàn)免疫不良事件不能及時(shí)撤藥，所以多肽類免疫檢查點(diǎn)抑制劑藥物的研發(fā)十分必要。Chang等[19]以全化學(xué)合成的D構(gòu)型PD-L1 IgV為靶標(biāo)，通過噬菌體鏡像展示肽庫得到了能夠在體外細(xì)胞水平阻斷PD-1/PD-L1結(jié)合、體內(nèi)具有抑瘤效果的抗酶解多肽DPPA-1，為腫瘤免疫治療提供了小分子多肽候選物。Magiera-Mularz等[20]報(bào)道的大環(huán)肽抑制劑能夠通過直接結(jié)合PD-L1來阻斷PD-1/PD-L1通路，同時(shí)恢復(fù)T細(xì)胞的功能。Li等[21]通過細(xì)菌表面展示肽庫得到了能夠特異性結(jié)合PD-L1的多肽TPP-1，T細(xì)胞活化實(shí)驗(yàn)和混合淋巴細(xì)胞實(shí)驗(yàn)均證實(shí)TPP-1能夠干擾PD-1/PD-L1相互作用，體內(nèi)抗腫瘤實(shí)驗(yàn)證明TPP-1能夠在H460移植瘤模型中減緩腫瘤生長。多肽已成為免疫檢查點(diǎn)阻斷藥物的重要候選，但目前該方面的研究還有待加強(qiáng)。

綜上，多肽藥物可以作用于腫瘤細(xì)胞自身的靶點(diǎn)，通過凋亡和壞死等機(jī)制殺傷腫瘤細(xì)胞，還可以作用于腫瘤組織微環(huán)境中的新生血管和免疫細(xì)胞，起到抗腫瘤作用。除了上述作用機(jī)制以外，理論上來說，多肽藥物可以像激素、小分子化學(xué)藥物和單抗一樣，作為激活劑或阻斷劑作用于其他抗腫瘤的靶點(diǎn)，也可以作為疫苗的重要組分激發(fā)抗腫瘤免疫反應(yīng)。

2 抗腫瘤多肽藥物的優(yōu)化

雖然多肽藥物具有良好的療效、安全性和耐受性，但批準(zhǔn)上市的抗腫瘤多肽藥物的適應(yīng)證比較有限。限制多肽藥物后續(xù)開發(fā)利用的主要原因是其易被蛋白酶水解、體內(nèi)半衰期短、理化穩(wěn)定性較差，這些缺點(diǎn)都導(dǎo)致其不能在體內(nèi)穩(wěn)定地發(fā)揮藥效。此外，目前多肽類藥物主要的給藥途徑為靜脈注射、肌肉注射、皮下注射等方式，相較于這些給藥方式，口服給藥一直是多肽藥物研究者努力的目標(biāo)，但多肽的口服給藥生物利用度低，尋找合理有效的口服遞送策略也是多肽藥物發(fā)展面臨的難題。因此，對(duì)多肽藥物進(jìn)行有效的優(yōu)化非常必要。

2.1 延長半衰期

延長多肽藥物體內(nèi)循環(huán)半衰期的主要策略有2種：增強(qiáng)多肽抗酶解能力進(jìn)而提高其體內(nèi)穩(wěn)定性；增加其流體力學(xué)半徑從而減少腎小球的濾過作用。提高多肽酶降解穩(wěn)定性的策略是對(duì)其氨基酸序列進(jìn)行改造，如乙酰化修飾、引入D構(gòu)型氨基酸兩端保護(hù)、逆序翻轉(zhuǎn)L肽為D肽、環(huán)化修飾或改善結(jié)構(gòu)為具有α-螺旋形狀的釘合肽[22]等。增加多肽流體力學(xué)半徑的常見方法為增加多肽的相對(duì)分子質(zhì)量，可通過基因工程方法將多肽與免疫球蛋白Fc片段或白蛋白融合，或通過化學(xué)法將多肽與高分子化合物聚乙二醇（polyethylene glycol, PEG）、PAS（含有Pro、Ala和Ser的多聚肽鏈重復(fù)序列）等共價(jià)連接；此外，由于人血漿白蛋白在血漿中含量豐富、相對(duì)分子質(zhì)量大、體內(nèi)循環(huán)半衰期長，可作為體內(nèi)運(yùn)輸多肽藥物的可靠載體，因此也可將多肽藥物偶聯(lián)白蛋白親和肽或脂肪酸修飾以達(dá)到延長半衰期的目的[23-24]。

2.2 改變劑型

80%左右的蛋白多肽類藥物經(jīng)注射途徑給藥，雖然注射給藥體內(nèi)分布迅速、吸收較快，但生物利用度和患者依從性都較差。注射劑藥物傳遞系統(tǒng)（drug delivery system, DDS）能夠通過改變制劑的方法將藥物在一定時(shí)間內(nèi)遞送到特定組織部位，同時(shí)提高了藥物的靶向性、減少了多肽注射給藥產(chǎn)生的毒副作用[25-26]。用于前列腺癌及乳腺癌治療的Zoladex（活性成分為醋酸戈舍瑞林）植入劑可直接注射于患者皮下或肌肉內(nèi)，且該植入劑能夠自行在體內(nèi)降解，無需通過手術(shù)取出，減少了藥物不良反應(yīng)。能夠控制緩釋和靶向的植入劑和注射劑（微球、脂質(zhì)體、納米顆粒）等均具有良好的應(yīng)用前景。

抗腫瘤多肽類藥物活性容易受到溫度和酸堿度等因素影響，多肽口服給藥順利進(jìn)行需克服胃腸道消化酶的酶解作用和腸道細(xì)胞對(duì)水溶性物質(zhì)的低通透性兩大壁壘。因此在多肽口服藥物的研發(fā)中，研究人員通常使用蛋白酶抑制劑和促吸收劑來增加多肽藥物的口服生物利用度。甘膽酸鈉、甲磺酸卡莫司他、桿菌肽、抑肽酶等能夠抑制胃腸道中消化酶的活性；促吸收劑主要包括水楊酸類、膽酸鹽類、表面活性劑、脂肪酸類、氨基酸類衍生物和金屬螯合劑等[27]。此外，將多肽藥物包裹在高分子納米微球中不但可防止胃腸道的酸性環(huán)境和消化酶對(duì)藥物的降解作用，還可以達(dá)到長效釋藥或靶向治療的目的[28]。

3 靶向多肽和自組裝

3.1 腫瘤歸巢肽和靶向肽

THP主要是一些靶向腫瘤或腫瘤微環(huán)境（如腫瘤內(nèi)皮、淋巴管或腫瘤細(xì)胞等）的包含3～10個(gè)氨基酸的小肽，由于它們的腫瘤靶向性和高滲透性，通常可作為腫瘤相關(guān)診斷試劑或作為靶向分子引導(dǎo)抗腫瘤藥物進(jìn)入腫瘤部位發(fā)揮抗腫瘤效果，這在很大程度上減少了藥物的毒副作用、增加了藥物在腫瘤部位的分布。THP可以修飾在包裹藥物的納米顆粒表面，將藥物靶向遞送至腫瘤組織[29-30]。將多肽藥物融合整合素親和肽RGD也可達(dá)到提高多肽藥物腫瘤靶向性的目的[31-33]，或利用腫瘤微環(huán)境偏酸性的特點(diǎn)，以酸響應(yīng)納米載體包裹抗腫瘤多肽[34]或直接設(shè)計(jì)腫瘤pH響應(yīng)的多肽藥物以期達(dá)到緩釋和提高多肽在腫瘤部位的利用率。此外，由于腫瘤組織高表達(dá)基質(zhì)金屬蛋白酶MMP2等，利用此特性，可設(shè)計(jì)該酶特異識(shí)別的連接子序列，使多肽前藥到達(dá)腫瘤組織后被MMP2水解，釋放出活性片段[35-36]。

3.2 穿膜肽

大多數(shù)CPP是一類富含精氨酸和賴氨酸（大多數(shù)帶有正電荷、pH接近中性）的小分子多肽，人們通常將其與納米顆粒、蛋白、核酸等需進(jìn)入胞內(nèi)發(fā)揮活性的抗腫瘤藥物以共價(jià)或非共價(jià)形式連接，通過細(xì)胞內(nèi)吞作用或跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)等方式到達(dá)胞內(nèi)發(fā)揮作用。對(duì)于腫瘤胞內(nèi)靶標(biāo)的藥物來說，設(shè)計(jì)合理的滲透策略對(duì)藥物的遞送是十分必要的，穿膜肽作為優(yōu)良的藥物遞送載體在該領(lǐng)域引起了廣泛關(guān)注。Gronewold等[37]發(fā)現(xiàn)一種具有高內(nèi)化能力、能選擇性殺死某些腫瘤細(xì)胞類型的分支穿膜肽，該多肽對(duì)癌細(xì)胞的細(xì)胞毒活性顯著高于正常成纖維細(xì)胞，在MCF-7癌細(xì)胞系中可以高效遞送抗癌藥物放線菌素D，顯示出較高的后續(xù)研究和轉(zhuǎn)化價(jià)值。Gao等[38]發(fā)現(xiàn)一種具有MCF-7癌細(xì)胞高滲透性的電中性環(huán)肽環(huán)孢菌素A（CsA），將CsA與促凋亡肽（PAD）綴合后，CsA-PAD表現(xiàn)出更高的癌細(xì)胞毒性，其作用效果類似于陽離子穿透肽TAT，但全身細(xì)胞毒性特別是心臟和肝毒性遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于TAT-PAD，這些都說明穿膜環(huán)肽CsA具有重要的應(yīng)用價(jià)值。穿膜肽可以通過受體介導(dǎo)的內(nèi)吞、膜融合、“地毯”模式、反轉(zhuǎn)微團(tuán)模式和打孔模式等不同機(jī)制進(jìn)入細(xì)胞[39]，使得多肽能夠像小分子藥物那樣作用于細(xì)胞內(nèi)的靶點(diǎn)發(fā)揮功能。

3.3 自組裝多肽

自組裝多肽是能夠利用疏水作用、氫鍵、范德華力等非共價(jià)鍵自組裝成為囊泡、納米纖維、納米粒、納米管等高度有序的納米結(jié)構(gòu)的一類多肽，這些自組裝肽可作為藥物載體用于改善藥物特性、起到緩釋和靶向的作用，基于肽納米材料的藥物遞送系統(tǒng)具有良好的生物相容性和較低的毒副作用，受到研究者們的青睞。在最近的研究中，Liu等[40]合成了一種含有48個(gè)氨基酸的能夠自組裝且具有抗腫瘤活性的多肽RADA-KLA，該活性肽包含能夠誘導(dǎo)癌細(xì)胞死亡的肽段KLA和2003年Zhang[41]開發(fā)的具有交替正負(fù)電荷氨基酸殘基的兩親性肽RADA-16肽，RADA-KLA克服了KLA多肽免疫原性強(qiáng)、細(xì)胞穿透性差、體內(nèi)快速降解的缺點(diǎn)，體外實(shí)驗(yàn)表明RADA-KLA納米纖維可抑制肝癌細(xì)胞的黏附和遷移并誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞死亡。Chen等[42]通過合理設(shè)計(jì)具有程序性自組裝功能的分枝狀兩親嵌合肽CRRK負(fù)載阿霉素，能夠達(dá)到控制藥物釋放、防止藥物過早釋放、準(zhǔn)確將藥物遞送到腫瘤細(xì)胞核的目的，該設(shè)計(jì)通過巧妙的序列排列成功實(shí)現(xiàn)了針對(duì)多藥耐藥腫瘤細(xì)胞的刺激響應(yīng)性藥物釋放。

4 多肽與分子成像

除了作為藥物用途以外，多肽還可以作為分子探針工具用于腫瘤的分子診斷和成像。分子成像技術(shù)能夠遠(yuǎn)程、非侵入性地感知和檢測(cè)活體中的細(xì)胞和分子過程，隨著信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)級(jí)聯(lián)和蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)的研究深入，人們也發(fā)現(xiàn)了越來越多的癌癥治療和成像的相關(guān)靶標(biāo)。以多肽為基礎(chǔ)的成像探針有著體內(nèi)循環(huán)半衰期短及實(shí)體腫瘤內(nèi)高滲透的優(yōu)點(diǎn)，能夠很好地滲透到靶組織中，快速地結(jié)合腫瘤或其他病變區(qū)域。de Oliveira等[43]利用锝-99m放射性標(biāo)記能夠特異性結(jié)合胃癌、結(jié)直腸癌和膠質(zhì)瘤腫瘤血管的多肽GX1，體內(nèi)研究表明大多數(shù)器官和組織在60 min內(nèi)能較好地清除該放射性多肽，該放射性標(biāo)記的GX1肽有望成為不同類型腫瘤成像的生物標(biāo)志物，為腫瘤的早期檢測(cè)提供了新的工具和方法。Chatterjee等[44]通過銅-64標(biāo)記PD-L1親和肽WL12，PET成像結(jié)果顯示[64Cu] WL12可作為放射性示蹤劑特異性檢測(cè)表達(dá)PD-L1的腫瘤，為腫瘤免疫治療策略的制定提供了依據(jù)。

5 結(jié)語與展望

多肽藥物與小分子化學(xué)藥物相比具有選擇性和特異性好、毒副作用低的優(yōu)點(diǎn)，與單抗藥物相比具有成本低、組織滲透性好、易于改造等優(yōu)點(diǎn)，因此在腫瘤治療藥物的研究中受到廣泛關(guān)注。尤其是近年來取得重要進(jìn)展的腫瘤免疫療法，也離不開多肽藥物，多肽不但可以作為腫瘤抗原激活抗腫瘤免疫，而且也可以阻斷免疫檢查點(diǎn)分子。但目前上市的抗腫瘤多肽藥物主要以激素類似物為主，而作為靶點(diǎn)阻斷性藥物還比較少，主要原因是受限于多肽藥物的半衰期短，難以達(dá)到足夠高的有效濃度；而構(gòu)象的柔性和多變又使得其難以達(dá)到單抗藥物的高親和力。未來多肽藥物的發(fā)展將繼續(xù)在現(xiàn)有多肽先導(dǎo)物的基礎(chǔ)上，結(jié)合生物信息學(xué)和高通量組合化學(xué)等方法進(jìn)行合理有效的設(shè)計(jì)和篩選，改善其在體內(nèi)存留時(shí)間、靶向性、物理化學(xué)性質(zhì)等方面存在的不足。目前多肽藥物主要通過注射（靜脈、肌肉、皮下注射）或非注射（皮膚、口腔、鼻腔等）給藥的方式到達(dá)其作用組織或靶標(biāo)，患者更傾向于口服給藥，但多肽口服生物利用度低，合理的修飾、轉(zhuǎn)變劑型和給藥方式、減少給藥頻次仍將是多肽藥物今后努力的方向。近年來，合理的結(jié)合多肽藥物、小分子化學(xué)藥物和單抗藥物的優(yōu)點(diǎn)，設(shè)計(jì)肽體和多肽-小分子藥物偶聯(lián)物為多肽藥物的研發(fā)開辟了新的方向[45-46]。而腫瘤免疫療法的重新興起，使得合理利用腫瘤患者的個(gè)體化差異，發(fā)掘腫瘤組織和微環(huán)境中潛在的靶點(diǎn)和突變表位成為腫瘤的個(gè)體化治療和抗腫瘤多肽藥物開發(fā)的重點(diǎn)方向。