一例水貂感染犬瘟熱病毒的診治*

王建軍，王玉茂**

(山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院，山東濱州256600)

犬瘟熱（canine distemper，CD）是由犬瘟熱病毒（canine distemper virus，CDV）引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病[1]，CDV 感染的宿主范圍非常廣泛，除食肉目的8 個(gè)科動(dòng)物均易感外，其還感染偶蹄目豬科靈長目獼猴屬內(nèi)多種動(dòng)物[2]，近年來隨著我國毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，水貂感染CDV 常有發(fā)生，CDV已成為威脅我國水貂養(yǎng)殖業(yè)的頭號(hào)傳染病，嚴(yán)重降低了我國水貂養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益，嚴(yán)重危害我國水貂養(yǎng)殖業(yè)甚至毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。2018 年7 月，某水貂場(chǎng)飼養(yǎng)的幼貂率先發(fā)生了一種以體溫升高、食欲減退、死亡前抽搐、口吐白沫為主要特征的疑似CDV 感染疫情，現(xiàn)將整個(gè)診斷和治療過程匯報(bào)如下。

1 發(fā)病情況

該水貂場(chǎng)共飼養(yǎng)水貂3，000 余只，2018 年7 月初，陸續(xù)有幼貂開始發(fā)病，發(fā)病水貂主要表現(xiàn)為體溫升高、食欲減退、死亡前抽搐、口吐白沫，曾經(jīng)使用抗生素進(jìn)行治療，但臨床癥狀不但未見好轉(zhuǎn)且逐步嚴(yán)重。

2 臨床癥狀

發(fā)病水貂體溫升高至41 ℃左右，進(jìn)食減少甚至無進(jìn)食，精神沉郁，鼻鏡干燥，鼻部黏著豆腐渣樣的干燥物，眼部具有膿性眼眵，被毛蓬亂，無光澤，病初糞便呈蛋清樣，后期糞便呈黑色煤焦油樣，一般水貂在出現(xiàn)癥狀后3～5d 內(nèi)死亡，死亡前期可見病貂運(yùn)動(dòng)失調(diào)，肌肉震顫，抽搐，口吐白沫，上吐下瀉，口咬籠網(wǎng)并發(fā)出刺耳的怪叫聲。

3 剖檢病變

對(duì)病死水貂進(jìn)行解剖，可見內(nèi)臟器官廣泛性出血，肺臟出血、肺泡塌陷，肝臟腫大、質(zhì)脆、表面有出血斑，脾臟腫大、壞死、具有出血點(diǎn)，腸道呈出血性炎癥，腸粘膜脫落，喉頭和氣管環(huán)出血、充血。

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

根據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀和剖檢病變特征初步診斷懷疑為CDV 感染，無菌采集病死水貂的肺臟、肝臟、脾臟等病變組織進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室PCR 檢測(cè)。根據(jù)于紅鴿等[3]建立的水貂犬瘟熱病毒RT-PCR檢測(cè)方法設(shè)計(jì)合成1 對(duì)CDV 特異性檢測(cè)引物，該對(duì)引物可特異性擴(kuò)增片段大小為287 bp 的CDV 3N 蛋白基因。將采集的病料樣品加入3 倍體積滅菌生理鹽水中，利用勻漿機(jī)以1，000 rpm 搗碎1 min，取混懸液以12，000 rpm 離心5 min，吸取上清液。利用病毒基因組RNA 提取試劑盒（購自北京百泰克生物科技有限公司）提取病料上清液的基因組RNA。利用合成的CDV 特異性檢測(cè)引物對(duì)基因組RNA 進(jìn)行一步法RT-PCR 擴(kuò)增。一步法RT-PCR 反應(yīng)體系為：2×Buffer 12.5 μL、上下游引物各0.5 μL、酶0.5 μL、RNA 5 μL、補(bǔ)水至25 μL。一步RT-PCR 反應(yīng)程序?yàn)椋?0 ℃30 min；95℃5 min；95 ℃30 s，51 ℃30 s，72 ℃30 s，30 個(gè)循環(huán)；72 ℃8 min。RT-PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)顯示，擴(kuò)增產(chǎn)物在大小約為287 bp 處具有一條特異性條帶，與預(yù)期擴(kuò)增的片段大小完全一致，表明臨床病料樣品經(jīng)CDV 特異性檢測(cè)為陽性。根據(jù)該水貂場(chǎng)的臨床發(fā)病特征以及實(shí)驗(yàn)室PCR 檢測(cè)結(jié)果，綜合判定發(fā)病水貂感染了CDV。

5 治療措施

致病原確定為CDV 后，立即對(duì)病死水貂及其污染物進(jìn)行無害化處理；對(duì)發(fā)病水貂隔離飼養(yǎng)；利用戊二醛消毒液對(duì)水貂及飼養(yǎng)環(huán)境進(jìn)行徹底噴霧消毒；發(fā)病水貂立即注射CDV 單克隆抗體，注射劑量為2 mL/kg·bw，連續(xù)注射3d；對(duì)發(fā)病水貂靜脈注射白介素營養(yǎng)液（含5%葡萄糖），注射劑量為3 mL/kg·bw，連續(xù)注射7d；對(duì)未發(fā)病水貂緊急免疫接種二倍劑量的CDV 疫苗；對(duì)全場(chǎng)水貂大群投喂黃芪多糖，提高全場(chǎng)水貂的免疫力和抗病力；對(duì)全場(chǎng)水貂注射硫酸慶大霉素，防止發(fā)生繼發(fā)感染。經(jīng)過采取上述綜合性治療措施，水貂死亡數(shù)量急劇下降，癥狀較輕的發(fā)病水貂逐漸好轉(zhuǎn)，更重要的是沒有新發(fā)病例，三天后無死亡水貂出現(xiàn)，一周后水貂基本全部恢復(fù)健康，此次疫情最終得到了有效控制。

6 討論

近幾年，隨著人們生活質(zhì)量和消費(fèi)觀念的逐步提高以及我國政府對(duì)特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物養(yǎng)殖優(yōu)惠政策的不斷落地，我國毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)得到了前所未有的快速發(fā)展，水貂的養(yǎng)殖規(guī)模與養(yǎng)殖密度穩(wěn)定增長，但隨之而來的傳染病流行發(fā)生率亦隨之提高，素有"毀滅性傳染病"之稱的水貂犬瘟熱病毒的感染亦不斷增加。雖然我國大多數(shù)水貂養(yǎng)殖場(chǎng)均將水貂犬瘟熱列為主要疫病進(jìn)行了疫苗免疫接種，但受到病毒潛伏期、水貂體況、免疫耐受、疫苗質(zhì)量、免疫程序等方面的限制，水貂犬瘟熱疫苗的免疫接種常常出現(xiàn)免疫失敗[4]。本病例中，雖然該養(yǎng)殖場(chǎng)的種水貂已免疫接種過水貂犬瘟熱疫苗，但在幼貂母源抗體水平逐漸下降的時(shí)間點(diǎn)，未能及時(shí)對(duì)其進(jìn)行疫苗的再次免疫接種，屬于免疫程序不合理導(dǎo)致了以往犬瘟熱疫苗的免疫失敗，最終導(dǎo)致了此次犬瘟熱疫病的爆發(fā)。根據(jù)當(dāng)前我國疫病防控能力，疫苗免疫接種仍是控制犬瘟熱等烈性傳染病的重要法寶，故對(duì)于水貂犬瘟熱的綜合防控應(yīng)該采取以加強(qiáng)生物安全和疫苗免疫接種為主的防控措施，同時(shí)加強(qiáng)母源抗體和疫苗免疫抗體的監(jiān)測(cè)，科學(xué)合理的調(diào)整免疫程序，確保疫苗的免疫效果，避免免疫失敗。█