發(fā)酵型扶正解毒口服液對保育豬生長性能抗氧化和免疫球蛋白含量的影響

湯法銀,史洪濤,喬宏興,于江旭,邊傳周

(1.河南牧業(yè)經(jīng)濟學(xué)院,河南 鄭州450046;2.鄭州市益生菌發(fā)酵中藥重點實驗室,河南 鄭州 450046;3.河南省益生菌生物轉(zhuǎn)化工程技術(shù)研究中心,河南 鄭州 450046;4.河南省微生物生物轉(zhuǎn)化中藥工程實驗室,河南 鄭州 450046)

保育豬生產(chǎn)是規(guī)模化養(yǎng)殖過程中的重要一環(huán),因其生長速度較快,并且受到母源抗體消失、病原微生物感染及應(yīng)激等多種因素的影響,導(dǎo)致豬只對疾病的易感性較高,容易發(fā)病死亡。利用抗生素保健是豬場生產(chǎn)中常用的疾病防控措施,但由于抗生素類藥物的濫用,易造成動物腸道菌群失調(diào)、產(chǎn)生耐藥菌株以及畜產(chǎn)品藥物殘留超標(biāo)等問題。某些中藥在增強機體免疫力、抗菌、抗病毒、抗氧化和抗應(yīng)激等方面具有良好的作用[1-2],益生菌如乳酸菌等則在改善腸道菌群平衡、維持腸道功能和結(jié)構(gòu)完整性等方面有顯著效果[3-4]。發(fā)酵中藥則是在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下,結(jié)合現(xiàn)代微生物發(fā)酵技術(shù),利用益生菌對中藥進行生物轉(zhuǎn)化制備的具有安全低毒、高效及適口性較好的中藥制劑,具備中藥和益生菌的雙重作用。扶正解毒散具有清熱解毒、扶正驅(qū)邪的功效,研究表明,發(fā)酵扶正解毒口服液能明顯提高肉雞的生長性能和免疫力,并且效果優(yōu)于普通扶正解毒口服液[5]。本試驗將發(fā)酵扶正解毒口服液應(yīng)用于保育豬,旨在研究其對保育豬生長性能、血清抗氧化能力等的影響,為發(fā)酵中藥在畜禽養(yǎng)殖業(yè)中的推廣應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 扶正解毒口服液(生藥含量1 g/mL)、發(fā)酵型扶正解毒口服液(生藥含量1 g/mL,乳酸菌含量為1.0×109CFU/mL)、乳酸菌液(活菌含量為1.0×109CFU/mL)均由河南牧業(yè)經(jīng)濟學(xué)院發(fā)酵中藥實驗室提供;谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPx)、丙二醛(MDA)、過氧化物酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、總抗氧化能力(T-AOC)、IgG 和IgM檢測試劑盒,購自南京建成生物工程研究所;超低溫冰箱(DW-HL3985),購自中科美菱低溫科技股份有限公司;電熱恒溫培養(yǎng)箱(HH-B11·360-BS-Ⅱ),購自上海躍進醫(yī)療器械有限公司;臺式離心機(KA-1000),購自上海安亭科學(xué)儀器廠;全自動酶標(biāo)儀(SILFTA),購自美國伯騰儀器有限公司。

1.2 試驗動物與分組 采用單因子試驗法,依據(jù)“胎次相近、品種相同、體重相當(dāng)、公母各半”的原則,選取斷奶仔豬180 頭,隨機分為4 組,每組3 個重復(fù),每個重復(fù)15 頭仔豬,分別為空白對照組、試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組?？瞻讓φ战M仔豬不投喂任何藥物或添加劑,試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組仔豬飼料中分別添加扶正解毒口服液、發(fā)酵型扶正解毒口服液、乳酸菌液,試驗期25 d。

1.3 生長性能指標(biāo)的測定 試驗開始時稱量每組仔豬的初重,于試驗第25 天早晨空腹稱量仔豬的末重,記錄每組每天喂料量。計算出各重復(fù)仔豬的平均初重、平均末重、平均日采食量、平均日增重、料肉比。平均日采食量=總采食量/試驗天數(shù);平均日增重=(末重-初重)/試驗天數(shù);料肉比=總采食量/總增重。

1.4 抗氧化及免疫球蛋白指標(biāo)的測定 于試驗第25 天,從每組每個重復(fù)隨機選3 頭仔豬,前腔靜脈采血5 mL,分離血清,用于總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、IgG 和IgM 指標(biāo)的測定。

1.5 數(shù)據(jù)分析 采用IBM SPSS 22.0 統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)差異性進行分析,結(jié)果以平均值方差來表示,P＜0.05 表示差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 發(fā)酵型扶正解毒口服液對保育豬生長性能的影響 結(jié)果如表1 所示,試驗Ⅱ組平均末重最高,分別比對照組、Ⅰ、Ⅲ組提高了11.35%(P＜0.05)、5.00%(P＞0.05)和8.41%(P＜0.05),試驗Ⅲ組與對照組相比差異不顯著(P＞0.05)。各試驗組平均日增重以Ⅱ組最高,比對照組提高了19.44%(P＜0.05),試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組差異不顯著(P＞0.05),試驗Ⅰ、Ⅲ組與對照組之間差異不顯著(P＞0.05)。各試驗組的平均日采食量與對照組相比差異不顯著(P＞0.05)。與對照組相比,試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組料肉比分別降低了5.61%(P＞0.05)、14.95%(P＜0.05)和3.88%(P＞0.05),試驗Ⅱ組分別比Ⅰ、Ⅲ組降低了9.90%(P＞0.05)和11.65%(P＜0.05)。

2.2 發(fā)酵型扶正解毒口服液對保育豬血清抗氧化能力的影響 結(jié)果如表2 所示,各試驗組T-AOC 以Ⅱ組最高,比對照組、Ⅰ、Ⅲ組分別提高了205.02%、26.08%和103.72%(P＜0.05),試驗Ⅲ組與對照組之間差異不顯著(P＞0.05)。與對照組相比,試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組的CAT 活力分別提高了30.73%(P＜0.05)、54.62%(P＜0.05)和12.54%(P＞0.05),試驗Ⅱ組比試驗Ⅰ、Ⅲ組分別提高了18.26%(P＞0.05)和37.40%(P＜0.05);試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組的SOD 活力均顯著高于對照組,分別提高了46.23%、49.54%、24.57%(P＜0.05),試驗Ⅱ組分別比試驗Ⅰ、Ⅲ組提高了2.26%(P＞0.05)和20.05%(P＜0.05);各試驗組GSH-Px 活力Ⅱ組最高,分別比對照 組、Ⅰ、Ⅲ組 提 高 了98.02%、32.70%、80.16%(P＜0.05),試驗Ⅰ、Ⅲ組分別比對照組提高了49.14%(P＜0.05)和9.91%(P＞0.05)。與對照組相比,試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組MDA 含量分別降低了41.62%(P＜0.05)、50.15%(P＜0.05)和17.49%(P＞0.05),試驗Ⅱ組比試驗Ⅰ、Ⅲ組分別降低了14.62%(P＞0.05)、39.59%(P＜0.05),試驗Ⅰ、Ⅲ組之間差異不顯著(P＞0.05)。

表1 發(fā)酵型扶正解毒口服液對保育豬生產(chǎn)性能的影響

表2 發(fā)酵型扶正解毒口服液對保育豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

2.3 發(fā)酵型扶正解毒口服液對保育豬血清免疫球蛋白含量的影響 結(jié)果如表3 所示,試驗Ⅰ、Ⅱ組IgG 含量均顯著高于對照組,分別提高了122.13%和143.51%(P＜0.05),試驗Ⅲ組與對照組之間差異不顯著(P＞0.05),試驗Ⅱ組分別 比Ⅰ、Ⅲ組 提 高 了9.62%(P＞0.05)和128.73%(P＜0.05)。試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組IgM 含量分別比對照組提高了35.10%(P＜0.05)、41.43%(P＜0.05)和7.07%(P＞0.05),試驗Ⅰ、Ⅱ組分別比試驗Ⅲ組提高了26.18% 和32.09%(P＜0.05),試驗Ⅰ組與Ⅱ組之間差異不顯著(P＞0.05)。

表3 發(fā)酵型扶正解毒口服液對保育豬血清免疫球蛋白的影響

3 討論

3.1 發(fā)酵型扶正解毒口服液能提高保育豬的生產(chǎn)性能 保育階段是豬只正處于母源抗體迅速衰減而自身免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完全的一個轉(zhuǎn)折階段,此時的豬只生長發(fā)育較快,再加上斷奶應(yīng)激以及轉(zhuǎn)群等因素的變化,會對保育豬的生長狀況產(chǎn)生較大的影響[6]。在現(xiàn)今整個養(yǎng)殖行業(yè)禁抗的大趨勢之下,中藥具有的多種優(yōu)勢使其逐漸作為一種較好的替抗品被應(yīng)用于養(yǎng)殖實踐中。張婷等[7]研究發(fā)現(xiàn),在保育豬基礎(chǔ)日糧中添加0.65%由黃芩、厚樸、黃芪、白芍、白術(shù)、山藥、陳皮、山楂、六曲等10 余味中藥按一定比例配制而成的中藥添加劑,與對照組相比,能顯著提高保育豬日增重及采食量(P＜0.05),并顯著降低料肉比(P＜0.05)。益生菌制劑作為一類高效、無耐藥性、無殘留、無毒副作用、低成本的綠色飼料添加劑,受到了畜禽養(yǎng)殖行業(yè)高度的重視。聞愛友等[8]用不同的益生菌制劑飼喂斷奶仔豬,試驗結(jié)果表明,與對照組相比,乳酸菌制劑組和枯草芽孢桿菌制劑組均顯著提高了仔豬日增重、降低了料肉比(P＜0.05),且以二者按照1∶1比例混合在日糧中添加0.1%劑量效果最佳。中藥在益生菌的發(fā)酵作用下可以產(chǎn)生新的活性成分,能夠增加療效,減少使用劑量,因此發(fā)酵中藥制劑作為新型飼料添加劑應(yīng)用于畜禽生產(chǎn)具有廣闊的發(fā)展前景。史洪濤等[4]研究發(fā)現(xiàn),在肉雞的基礎(chǔ)日糧中添加乳酸菌發(fā)酵中藥提取液,與對照組及未發(fā)酵組相比,發(fā)酵中藥組肉雞的平均日采食量和日增重均得到了明顯提高(P＜0.05),料肉比顯著降低(P＜0.05)。韓戰(zhàn)強等[9]報道,在圍產(chǎn)期母豬基礎(chǔ)日糧中添加生物發(fā)酵中藥翔福萊(補中益氣散),可明顯提高仔豬平均日增重和存活率,降低母豬患病率和腹瀉率(P＜0.05)。本研究的發(fā)酵型扶正解毒口服液能顯著提高保育豬生產(chǎn)性能(P＜0.05),并且效果優(yōu)于未發(fā)酵中藥組和乳酸菌組,可能是由于發(fā)酵型扶正解毒口服液具備了中藥的抗病毒、提高免疫力等方面的能力,同時又具備了益生菌改善腸道菌群平衡的功效,使其作用效果得到了提升。

3.2 發(fā)酵型扶正解毒口服液提高保育豬血清抗氧化指標(biāo) T-AOC(總抗氧化能力)是機體清除活性氧、自由基能力的綜合指標(biāo),與機體健康程度有著密切的關(guān)系,其數(shù)值的高低反映了機體抗氧化能力的強弱。CAT(過氧化氫酶)是動物機體內(nèi)分解氫氧自由基(OH-)的酶,氫氧自由基是一種可以與細胞內(nèi)多種有機物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的活性氧自由基,因此機體內(nèi)CAT 的含量與細胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定性密切相關(guān);SOD(超氧化物歧化酶)是參與機體清除自由基的重要酶,具有保護機體細胞完整性的作用;GSH-Px(谷胱甘肽過氧化物酶)是參與機體還原反應(yīng)、清除有害過氧化物的酶,其含量的高低體現(xiàn)了機體清除過氧化物的能力。丙二醛(MDA)是脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的終產(chǎn)物,具有細胞毒性,能夠使組織細胞受損,因而其在機體內(nèi)含量越高,對機體產(chǎn)生的危害越大。有研究表明,某些中藥在提高動物機體的抗氧化能力上有顯著的效果,具有良好的替代抗生素的應(yīng)用前景。徐盛明等[10]用黃芪多糖配合基礎(chǔ)日糧飼喂斷奶仔豬,試驗結(jié)果表明,與對照組相比,試驗組能顯著提高斷奶仔豬血清抗氧化能力(P＜0.05);靳錄洋等[11]研究發(fā)現(xiàn),對1 日齡雛雞連續(xù)皮下注射7 d 黃芪多糖,能明顯提高雛雞的血清抗氧化能力(P＜0.05)。本試驗的發(fā)酵型扶正解毒口服液能顯著提高保育豬T-AOC 和CAT、SOD、GSH-PX的活力(P＜0.05),并且能顯著降低保育豬血清MDA 的含量(P＜0.05)。

3.3 發(fā)酵型扶正解毒口服液提高保育豬血清免疫球蛋白水平 血清中的免疫球蛋白含量反映了動物機體免疫力的高低,大量研究表明,中藥在提高動物機體免疫力、抑菌抗病毒等方面具有良好的療效。在本試驗中,發(fā)酵中藥組的血清IgG 含量和IgM 含量與對照組相比均顯著升高(P＜0.05),且高于中藥組和乳酸菌組。周昭希等[12]研究發(fā)現(xiàn),在肉仔雞基礎(chǔ)日糧中添加菟絲子飼喂42 d 后,能顯著提高其血清球蛋白水平(P＜0.05)。王志龍等[13]將大豆異黃酮(SI)和黃芪多糖(APS)按照1∶5的比例混勻后添加到哺乳母豬飼糧中,發(fā)現(xiàn)與對照組相比能顯著提高血清中IgA、IgG 的含量以及血清總蛋白含量(P＜0.05),且以按照200 mg/kg 的用量添加時效果最好。而本研究的發(fā)酵型扶正解毒口服液能顯著提高保育豬血清免疫球蛋白水平,且效果優(yōu)于未發(fā)酵扶正解毒口服液和乳酸菌,說明扶正解毒口服液具有提高動物機體免疫力的功效,同時因發(fā)酵型扶正解毒口服液富含乳酸菌等活性菌種,促進了保育豬機體的體液免疫反應(yīng),從而提高了機體的免疫力。

4 結(jié)論

由試驗結(jié)果可知,發(fā)酵型扶正解毒口服液的臨床應(yīng)用效果優(yōu)于未發(fā)酵扶正解毒口服液和乳酸菌,能顯著提高保育豬的生產(chǎn)性能、血清免疫指標(biāo)和血清抗氧化能力,進而改善保育豬健康水平,適合作為飼料添加劑應(yīng)用于動物生產(chǎn)。