免疫組化病理技術(shù)質(zhì)量控制管理的應(yīng)用效果觀察

林雪松

（遼寧省錦州市中心醫(yī)院放療科，遼寧 錦州 121001）

免疫組化病理技術(shù)在醫(yī)院檢驗(yàn)科中極其常見，其是對(duì)病理組織進(jìn)行檢查的一項(xiàng)重要技術(shù)。其能夠?yàn)榕R床診斷以及治療提供準(zhǔn)確的參考依據(jù)，對(duì)提高臨床診斷的準(zhǔn)確率以及臨床治療效果等均有著非常重要的意義[1]。本次選取了160例2018年2月至2019年1月在我院治療的患者，取其胃腸組織病理化分析的樣本，對(duì)其中80例患者的病理組織樣本采用質(zhì)量控制管理后制作病理切片，對(duì)免疫組化病理技術(shù)質(zhì)量控制中存在的問題，并提出相應(yīng)的對(duì)策。具體如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取160例2018年2月至2019年1月在我院治療的患者，取其胃腸組織病理化分析的樣本，本次選取的所有病理組織樣本均來自于我院病理活檢室，按照制片質(zhì)量控制的情況將其分成了觀察組和對(duì)照組，每組均有病理組織樣本80份。對(duì)兩組病理組織的狀態(tài)進(jìn)行比較后發(fā)現(xiàn)其沒有明顯差異（P＞0.05），有可比性。

1.2 試劑及儀器：本次研究中所使用的甲醛、蘇木精、二甲苯、無水乙醇、硫酸鋁、碘酸鈉、石蠟以及與本次免疫組化試驗(yàn)相關(guān)的試劑均為市場上常見的試劑，本次研究的儀器包括轉(zhuǎn)輪式組織切片機(jī)【型號(hào)：徠卡RM2235】、全自動(dòng)組織脫水機(jī)、生物組織攤烤片機(jī)、包埋機(jī)、干燥箱【生產(chǎn)企業(yè)：天津市泰斯特儀器生產(chǎn)公司；型號(hào)：202-1AB型恒溫干燥箱】、圖像分析儀【型號(hào)：日本OLYMPUS BX41+Imagepro plus】等。

1.3 方法：對(duì)照組給對(duì)照組組織樣本采用常規(guī)方法制作病理組織切片。具體如下：①固定標(biāo)本。在組織標(biāo)本采集后的30 min內(nèi)將其放置在固定液中保存，再取體積是此固定液體積4～10倍的濃度為10%的甲醛溶液，將組織標(biāo)本放入其中固定8～24 h。②將經(jīng)過固定的組織標(biāo)本進(jìn)行抗原修復(fù)，本次采用了熱修復(fù)法，將抗原修復(fù)中的溫度控制在100 ℃及以上，將修復(fù)的時(shí)間控制在3～15 min，將修復(fù)液的pH值控制在7.5～8.5。③對(duì)經(jīng)過修復(fù)的本組病理組織標(biāo)本進(jìn)行脫蠟處理，均勻的增加試劑，為了避免邊緣效應(yīng)的發(fā)生，要控制好試劑的面積，使其比切片組織的界線寬出0.05～0.35 cm。對(duì)組織標(biāo)本在浸液時(shí)的溫度以及烘烤切片時(shí)的溫度要合理的控制。

觀察組給觀察組組織樣本采用質(zhì)量控制管理后制作病理切片。具體如下：①在室溫下，將本組組織標(biāo)本進(jìn)行脫蠟切片，并將其浸泡在濃度為3%雙氧水中20 min，取出后用磷酸鹽緩沖液進(jìn)行沖洗，5 min/次，連續(xù)沖洗3次。②取pH值為6.0的檸檬酸緩沖液700 mL，將其放入1000 mL的燒杯中加熱，然后將做好標(biāo)記的CK19抗體、Ki-67抗體、HBcAg抗體、HBsAg抗體的切片放在加熱至沸騰的燒杯中，15 min后，在每一個(gè)切片上滴加一抗后，將其放在40 ℃的冰箱中孵育。③取pH值為7.4的PBS沖洗液，對(duì)切片進(jìn)行沖洗，5 min/次，持續(xù)沖洗3次。④在室溫下，取二抗溶液分別滴加在每一個(gè)切片上孵育15 min，取pH值為7.4的PBS沖洗液，對(duì)切片進(jìn)行沖洗，5 min/次，持續(xù)沖洗3次。⑤取DAB顯色劑，將切片放入5～10 min后，取蘇木精對(duì)切片進(jìn)行襯染、水洗，最后進(jìn)行封固。

1.4 觀察指標(biāo)：觀察并比較兩組病理組織切片的有效制片率。評(píng)價(jià)：當(dāng)切片編號(hào)清晰、薄厚度適宜、色彩鮮亮、對(duì)比明確則判斷為優(yōu)質(zhì)片；當(dāng)切片編號(hào)清晰、但是出現(xiàn)較少的褶皺，沒有出現(xiàn)污染和活氣泡、色彩比較鮮亮則判斷為良質(zhì)片；當(dāng)切片編號(hào)不清晰、褶皺或者氣泡比較多，不利于臨床觀察則判斷為差質(zhì)片。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)，用%表示，當(dāng)P＜0.05時(shí)，表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

2 結(jié)果

對(duì)兩組病理組織切片的有效制片率進(jìn)行比較。經(jīng)過不同的制片技術(shù)質(zhì)量管理后，在有效制片率方面，觀察組（97.50%）優(yōu)于對(duì)照組（78.78%），差異明顯（P＜0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。

表1 兩組病理組織切片的有效制片率比較

3 討 論

免疫組織化學(xué)技術(shù)在檢驗(yàn)科比較常見，其是檢驗(yàn)科進(jìn)行病理學(xué)組織檢查的一項(xiàng)重要技術(shù)[2]。其能夠有效的對(duì)病理組織切片的制作質(zhì)量進(jìn)行嚴(yán)格的控制，同時(shí)也是提高臨床病理學(xué)組織檢查結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵因素[3]。本次研究結(jié)果顯示，觀察組病理組織切片的有效制片率（97.50%）優(yōu)于對(duì)照組（78.78%），差異明顯（P＜0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這與李楣[2]的研究結(jié)果是一致的。但是目前，臨床上在進(jìn)行免疫組織化病理技時(shí)，就遇到一些問題，如選材、切片、試劑盒的染色等，任何一種問題都會(huì)導(dǎo)致免疫組織化病理檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)差異。總之，在對(duì)病理組織進(jìn)行檢查時(shí)，采用有針對(duì)性的質(zhì)量控制管理，能夠?yàn)榕R床診斷和治療均提供準(zhǔn)確的依據(jù)，建議將其推廣在更多的臨床上。