糙米中嘧啶肟草醚的農(nóng)藥殘留測(cè)定

賈 璇， 汪 元， 鐘祝濤， 翟夢(mèng)穎， 楊俊柱

(1.南陵縣市場(chǎng)監(jiān)督檢驗(yàn)所，安徽 蕪湖 242400；2.安徽省化工研究院，安徽 合肥 230041)

嘧啶肟草醚是由韓國(guó)LG化學(xué)集團(tuán)開(kāi)發(fā)的嘧啶水楊酸類、廣譜選擇性芽后除草劑，其可被植物的莖葉吸收，在體內(nèi)傳導(dǎo)，抑制敏感植物氨基酸的合成?？捎糜诜莱?、小麥等田地的禾本科雜草和闊葉雜草[1]。

關(guān)于嘧啶肟草醚在糙米中的殘留分析方法，陳曉琳等[2]利用石油醚液-液分配，固相萃取小柱方法進(jìn)行凈化，操作復(fù)雜、繁瑣且費(fèi)時(shí)；潘金菊等[3]采用改良的固相萃取凈化方法、配合超高效液相色譜-質(zhì)譜儀，步驟較多，且儀器昂貴、使用成本較高。本文采用乙腈超聲提取，鹽析凈化和HPLC-UVD，建立了糙米中嘧啶肟草醚的殘留檢測(cè)方法，該方法不僅前處理簡(jiǎn)單、快速、易操作，雜質(zhì)干擾少，且準(zhǔn)確度、精密度和靈敏度均能達(dá)到農(nóng)藥殘留分析的要求。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

Agilent 1200 Series高效液相色譜儀：具可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器，美國(guó)安捷倫公司；XBLL-25多功能食品加工機(jī)，上海帥佳電子科技有限公司；AL104電子天平，梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司；Vortex Genie2渦旋儀，Scientific Industries；JP-100超聲波清洗器，深圳市潔盟清洗設(shè)備有限公司；TDL-40B高速離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠。

乙腈、冰乙酸，色譜純，美國(guó)TEDIA公司；氯化鈉，分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；MilliQ超純水。嘧啶肟草醚標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%，由沈陽(yáng)化工研究院提供；過(guò)濾器，有機(jī)濾膜孔徑為0.22 μm。

1.2 高效液相色譜條件

色譜柱：Hypersil C18不銹鋼柱,250 mm×4.6 mm(id)×5 μm；柱溫：35 ℃室溫(溫差變化不大于20 ℃)；流動(dòng)相：V(乙腈)∶V(水)=70∶30，經(jīng)0.22 μm孔徑的濾膜過(guò)濾，并在超聲波浴槽中超聲脫氣10 min；流速：1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm；進(jìn)樣體積：20 μL。在上述條件下，嘧啶肟草醚的保留時(shí)間為8.5 min。

1.3 實(shí)驗(yàn)步驟

1.3.1 樣品制備

將糙米樣品用食品加工機(jī)粉碎，用四分法縮分，取1 000 g試樣，于-20 ℃儲(chǔ)存，以備實(shí)驗(yàn)需要。

1.3.2 樣品前處理

稱取上述制備好的糙米樣品40 g(精確至0.01 g)于50 mL具塞塑料離心管中，依次加入10 mL水和10 mL乙腈，渦旋30 s，在(30±1)℃下超聲10 min,取出過(guò)濾，于濾液中加入5 g氯化鈉，渦旋30 s后以3 000 r/min離心5 min，取上清液過(guò)0.22 μm有機(jī)濾膜，待HPLC-UVD檢測(cè)。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件的選擇

2.1.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

運(yùn)用紫外分光光度計(jì)，對(duì)某一濃度的嘧啶肟草醚標(biāo)準(zhǔn)溶液作全波長(zhǎng)掃描，其最大吸收波長(zhǎng)在200 nm左右。而水的紫外截止波長(zhǎng)亦為200 nm,因此，綜合考慮多種因素，最終選定210 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)，此時(shí)嘧啶肟草醚有較強(qiáng)吸收峰，同時(shí)，雜質(zhì)響應(yīng)值小，也避免了溶劑和流動(dòng)相的干擾。

2.1.2 流動(dòng)相的選擇

流動(dòng)相選擇是決定高效液相色譜分離效果好壞的關(guān)鍵。在分析過(guò)程中，為了得到較好的峰形，又要達(dá)到簡(jiǎn)便、快捷的要求，故選用甲醇、乙腈、四氫呋喃、水等各種體系和配比進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明，以V(乙腈)∶V(水)=70∶30為流動(dòng)相，流速為1.0 mL/min時(shí),分析時(shí)間較短,保留時(shí)間適中，色譜峰形尖銳、對(duì)稱,基線平穩(wěn)，且空白中無(wú)雜質(zhì)干擾，可使復(fù)雜樣品中微量的目標(biāo)分析物與雜質(zhì)得到較好的分離,見(jiàn)圖1。

2.2 提取溶劑的選擇

采用丙酮、甲醇和乙腈等作為提取溶劑，結(jié)果表明,以乙腈提取效果最佳。因?yàn)橐译鎸?duì)大多數(shù)農(nóng)藥具有良好的溶解性，不僅可以高效率地提取目標(biāo)化合物，且雜質(zhì)較少，并可以通過(guò)鹽析除去水分，為樣品凈化和提高回收率提供了便利。

2.3 方法的線性關(guān)系

稱取一定量的嘧啶肟草醚標(biāo)準(zhǔn)品于50 mL容量瓶中，用乙腈稀釋配成0.02、0.05、0.20、0.50、2.00 mg/L系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，在1.2的儀器條件下進(jìn)行測(cè)定，以嘧啶肟草醚標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)和峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，嘧啶肟草醚線性方程:y=508 448x-8 714.3，相關(guān)系數(shù)r=0.999 1，在0.020 mg/L～2.00 mg/L的范圍內(nèi)，說(shuō)明嘧啶肟草醚有良好的線性關(guān)系。

2.4 方法的準(zhǔn)確度與精密度

取空白糙米樣品，添加水平為0.02、0.05、0.5 mg/kg，每個(gè)水平重復(fù)5次，按1.3.2和1.2做添加回收率實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表1。結(jié)果表明，嘧啶肟草醚在糙米中的平均回收率為77.2～92.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為3.0～9.3%，均符合農(nóng)藥殘留分析要求[4]。

2.5 方法的靈敏度

我國(guó)現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定了糙米中嘧啶肟草醚的最大殘留限量為0.05 mg/kg[5]。在上述儀器條件下，嘧啶肟草醚在糙米中的最小檢出量為4.0×10-10g，最低檢出值為0.02 mg/kg，低于規(guī)定的最大殘留限量，完全滿足于糙米中嘧啶肟草醚農(nóng)藥殘留檢測(cè)的要求。

圖1 嘧啶肟草醚樣品色譜圖表1 嘧啶肟草醚在糙米中的準(zhǔn)確度與精密度實(shí)驗(yàn)

樣品添加含量/mg·kg-1回收率/%12345平均值RSD/%糙米0.5094.087.794.593.591.392.23.00.0571.573.776.389.675.077.29.30.0283.686.682.780.378.482.33.8

3 結(jié)論

本文建立了反相高效液相色譜檢測(cè)嘧啶肟草醚在糙米樣品中的殘留分析方法。該方法前處理簡(jiǎn)單、快速、易操作，準(zhǔn)確度，精密度、靈敏度均符合農(nóng)藥殘留分析的要求，為大米及其制品中嘧啶肟草醚的快速檢測(cè)提供了參考依據(jù)。