中藥復方對小鼠抗疲勞作用研究※

張玉峰 王 凱 陳靠山*

（山東大學生命科學院，山東 濟南 250100）

現(xiàn)代中醫(yī)認為，疲勞是臨床上常見病、多發(fā)病，涉及五臟六腑，為心理變化（或不暢）與元氣耗傷之虛證雙重因素所致。治療上不僅要祛疲安神，也應補虛扶正。一方面，調(diào)暢心志，舒心暢意，神得安，心則寧，疲勞可消；另一方面，補虛固元，滋養(yǎng)機體，虛得補，正則旺，疲勞自除［1］。

牛蒡，屬菊科2 年生草本，可藥食兩用，眾多研究表明于牛蒡中提取的活性物質(zhì)可通過刺激細胞增生，增強細胞活力，促進機體生長，提高耐力和體力［2］；葛根為豆科植物野葛的干燥根，性涼，味甘、辛，具有解表退熱、生津、透疹、升陽止瀉等功效［3］，大量的研究顯示葛根總黃酮除了廣泛的藥理作用外，對于抗疲勞提高運動能力、促進疲勞恢復有著積極的作用［4］。黃精為百合科黃精屬多年生草本植物，為藥食兩用中藥［5］，相關(guān)研究表明黃精粗多糖對小鼠疲勞和溴苯誘導小鼠肝氧化損傷具有一定的拮抗作用，眾多研究為黃精有效部位在醫(yī)藥、保健等領(lǐng)域的應用奠定了科研基礎(chǔ)［6］。

基于中醫(yī)理論，我們擬定牛蒡根提取物、葛根提取物及黃精提取物組方，研究其抗疲勞的作用，本研究采用小鼠負重游泳持續(xù)時間來觀察該復方對小鼠的抗疲勞作用。結(jié)果表明該中藥復方具有良好的抗疲勞作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 昆明種小鼠，體質(zhì)量（20g±2）g，購買于山東大學醫(yī)學院，鼠房適應性飼養(yǎng)1 周后，將小鼠隨機分為4 組，對照組、低劑量、中劑量組和高劑量組，每組20 只（雄雌各半），組間體質(zhì)量經(jīng)t 檢驗差異無統(tǒng)計學意義。

1.2 試劑與儀器 牛蒡根提取物、黃精提取物、葛根提取物等中藥提取物經(jīng)粉碎，干燥、過篩、總混得到該復方粉劑。溫度計、游泳箱、注射器、電子天平、全自動生化分析儀、離心機、紫外可見分光光度計。

1.3 給藥干預 實驗組低、中、高劑量組給藥濃度分別為200 mg/kg、400 mg/kg、600 mg/kg，采取灌胃法，小鼠每10 g 體質(zhì)量給予受試物0.1 mL，對照組給予同體積的生理鹽水。連續(xù)灌胃28 d。

1.4 觀察指標

1.4.1 游泳試驗 連續(xù)給藥28 d，末次給予受試物30 min后，在小鼠尾根部負以小鼠體質(zhì)量5% 的鉛絲，放入水溫（25.0±0.5）℃的游泳箱中，用秒表記錄自游泳開始至力竭（小鼠沉沒后10 s 不能浮出水面）的時間作為小鼠力竭性游泳時間［7-10］。

1.4.2 血尿素的測定 連續(xù)給藥28 d，末次給予受試物30 min 后，在小鼠尾根部負以小鼠體質(zhì)量5% 的鉛絲，放入水溫（25.0±0.5）℃的游泳箱中游泳60 min，休息60 min 后摘眼球取血，取血清用試劑盒測定［7-10］。

1.4.3 血乳酸的測定 連續(xù)給藥28 d，末次給予受試物30 min 后，在小鼠尾根部負以小鼠體質(zhì)量5% 的鉛絲，放入水溫（25.0±0.5）℃的游泳箱中游泳60 min 停止，分別于游泳前、游泳后的0、15、30、60 min 的小鼠眼眶靜脈叢取血，于5 mL 離心管中加入1% NaF 溶液0.48 mL，吸取全血20 μL 加入試管底部，再加入蛋白沉淀劑1.5 mL，振蕩混勻，3 000 r/min 離心10 min，取上清液測定［7-10］。

1.4.4 肝糖原的測定 連續(xù)給藥28 d，末次給予受試物30 min 后，在小鼠尾根部負以小鼠體質(zhì)量5% 的鉛絲，放入水溫（25.0±0.5）℃的游泳箱中游泳60 min 后停止，依據(jù)林松毅的方法［7-10］測定。

1.5 統(tǒng)計學方法 用SPSS 11.5 統(tǒng)計軟件對測量得到的數(shù)據(jù)進行處理，以（±s）表示，采用t 檢驗。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 復方中藥對小鼠負重游泳時間的影響 實驗結(jié)果表明中藥復方各劑量組與對照組在游泳時間上差異存在統(tǒng)計學意義，尤其是高劑量組相對與對照組，游泳時間提高了29.12%（P＜0.01），中劑量組游泳時間提高18.66%（P＜0.05）。見表1。

表1 復方中藥對小鼠負重游泳時間的影響（±s，min）

表1 復方中藥對小鼠負重游泳時間的影響（±s，min）

注：低、中、高劑量組與對照組相比，*P＜0.05；低、中、高劑量組與對照組相比，**P＜0.01

2.2 復方中藥對疲勞小鼠血清尿素的影響 實驗結(jié)果表明中藥復方各劑量組與對照組在血清尿素氮含量上存在顯著差異，尤其是高劑量組，高劑量組尿素氮含量較對照組降低了28.15%（P＜0.01），中劑量組降低22.71%（P＜0.05）。見表2。

表2 復方中藥對疲勞小鼠血清尿素的影響 （±s）

表2 復方中藥對疲勞小鼠血清尿素的影響 （±s）

注：低、中、高劑量組與對照組相比，*P＜0.05；低、中、高劑量組與對照組相比，**P＜0.01

2.2 復方中藥對小鼠血乳酸的影響 實驗結(jié)果表明中藥復方各劑量組與對照組在血乳酸含量上存在顯著差異，尤其是高劑量組，高劑量組乳酸含量較對照組降低了24.47%（P＜0.01），中劑量組降低20.15%（P＜0.05）。見表3。

表3 復方中藥對小鼠血乳酸的影響 （±s）

表3 復方中藥對小鼠血乳酸的影響 （±s）

注：低、中、高劑量組與對照組相比，*P＜0.05；低、中、高劑量組與對照組相比，**P＜0.01

2.4 復方中藥對小鼠肝糖原的影響 實驗結(jié)果表明中藥復方高各劑量組與對照組在肝糖原含量上存在顯著差異，尤其是高劑量組，高劑量組肝糖原含量較對照組提高了106.77%（P＜0.01），中劑量組提高了87.66%（P＜0.05）。見表4。

表4 復方中藥對小鼠肝糖原的影響 （±s）

表4 復方中藥對小鼠肝糖原的影響 （±s）

注：低、中、高劑量組與對照組相比，*P＜0.05；低、中、高劑量組與對照組相比，**P＜0.01

3 討論

機體在高強度運動下，會破壞能量平衡，大量消耗存儲的糖原，蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝也會加強，尿素的生成量增加，體內(nèi)的糖儲存量下降或過度消耗，血液中乳酸值增加，影響中樞系統(tǒng)能量供應，這是引起疲勞的重要因素。當機體長時間活動不能通過糖和脂肪分解代謝得到足夠的能量時，機體蛋白質(zhì)和氨基酸分解代謝隨之增強，機體血清尿素氮含量隨運動負荷的增加而增加。由于血清尿素氮的含量反應體內(nèi)肌肉蛋白質(zhì)的分解與合成代謝狀況以及肌肉細胞大強度訓練后的損傷及恢復狀況，所以血清尿素氮對評價機體在體力負荷時的承受力是一個靈敏的指標［11-12］，運動后血清尿素氮含量增加越多，表明機體對負荷運動適應能力越差。

本研究中以生理鹽水作為對照，研究牛蒡根提取物、葛根提取物及黃精提取物中藥復方各劑量組對小鼠疲勞相關(guān)指數(shù)的調(diào)節(jié)作用。相關(guān)數(shù)據(jù)表明小鼠負重游泳持續(xù)時間明顯長于生理鹽水組，顯著提高了小鼠運動耐力；高、中劑量組均能顯著提高疲勞小鼠的對肝糖原儲存的作用。高、中劑量組均能顯著降低疲勞小鼠的血清尿素及血乳酸含量，表明高劑量組及中劑量組具有提高小鼠對負荷運動的適應能力，延緩小鼠疲勞產(chǎn)生的作用。

綜上所述，牛蒡根提取物、葛根提取物及黃精提取物中藥復方可顯著提高疲勞小鼠耐力，明顯降低疲勞小鼠的血清尿素及血乳酸含量，以上結(jié)果足以表明該中藥復方具有抗疲勞的作用，其抗疲勞機制在進一步的研究中。