液相色譜-三重串聯(lián)四級桿質(zhì)譜法測定茶葉（金駿眉）中檸檬黃含量的研究

□ 黃 穎 贛州市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗所

1 前言

對于市面上非常受歡迎的茶葉金駿眉，一些不良商家抓住一般消費者誤認(rèn)為“金駿眉”就應(yīng)該是金色為主的心理誤區(qū)，添加檸檬黃著色，嚴(yán)重傷害了消費者的健康，以及茶葉的品質(zhì)口感。在社會上造成了極大的影響。

目前檢測檸檬黃的常用方法有薄層色譜法、液相色譜法等方法，但在實際工作中，由于復(fù)雜的基質(zhì)對方法和儀器的干擾，導(dǎo)致薄層色譜法、液相色譜法在測量一些低含量的樣本時有很大的不確定性，容易出現(xiàn)假陽性的事例。為了能夠精準(zhǔn)測量低含量的樣本，本文采用目前最前沿的檢測技術(shù)——液相色譜-三重四級桿串聯(lián)質(zhì)譜測定法進行檢測。利用碎片離子和多重反應(yīng)監(jiān)測手段進行精準(zhǔn)的定性和準(zhǔn)確的定量。

2 材料與方法

2.1 儀器與試劑

安捷倫1260液相色譜-G6400質(zhì)譜聯(lián)用儀器（美國Agilent公司）；分析天平（梅特勒-托利公司）；Milli-Referrence超純水機（密理博中國有限公司）；TG16離心機（長沙英泰儀器有限公司）；檸檬黃標(biāo)準(zhǔn)品（純度≥99%）；甲醇（色譜純，美國Fisher公司）；甲酸（色譜純，美國Fisher公司）乙酸銨（優(yōu)級純，百靈頓威化學(xué)科技有限公司）0.45 μm微孔過濾膜（天津津藤公司）。

2.2 實驗方法

2.2.1 樣品處理

取粉碎的茶葉金駿眉樣品3 g于100 mL燒杯中，加水25 mL，超聲30 min，轉(zhuǎn)移至離心管中，定容至50 mL，5 000 r/min離心5 min，取上清液經(jīng)微孔濾膜過濾后檢測。

2.2.2 液相色譜-三重四級桿串聯(lián)質(zhì)譜條件

（1）色譜條件

色譜柱：Agilent C18柱（2.1 mm×150 mm，5 μm）柱溫：30 ℃；進樣量：10 μL；流動相：A甲醇+B乙酸銨溶液（10 mmol/L）梯度洗脫程序見表1。

（2）質(zhì)譜條件

離子源：電噴霧離子源（ESI）；掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）掃描；霧化氣：高純氮10 L/min；碰撞氣：高純氮，流量為6 psi；離子源溫度：350 ℃。

2.2.3 結(jié)果計算

結(jié)果的計算公式見式（1）。

式（1）中：W—試樣中檸檬黃含量，單位為微克每千克（μg/kg）；C—進樣液中檸檬黃的質(zhì)量濃度，單位為微克每升（μg/L）；M—試樣質(zhì)量，單位為克（g）；V—試樣定容體積，單位為毫升（mL）。

3 條件優(yōu)化與結(jié)果計算

3.1 定性定量離子的確定

首先確定母離子，通過二級掃描選定定性和定量離子，通過優(yōu)化碰撞能、Fragmengter電壓等參數(shù)確保所選定性和定量離子的豐度較強。具體質(zhì)譜參數(shù)見表2。

3.2 線性范圍與檢出限

在5～500 μg/kg線性范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)為0.999 5，檢出限為1.0 μg/kg。

表1 梯度洗脫表

表2 檸檬黃質(zhì)譜定性定量離子對

3.3 檢測結(jié)果及回收率

對加標(biāo)10、50、100 μg/kg樣本的檢測結(jié)果分別為9.8、49、102 μg/kg，計算回收率分別為98%、98%、102%。回收率在合理區(qū)間。

4 結(jié)論

通過對質(zhì)譜條件的優(yōu)化，加標(biāo)樣品回收率為98%～102%，檢測結(jié)果準(zhǔn)確，該方法前處理簡單、快速，檢出限低，抗干擾能力強，在復(fù)雜的基質(zhì)中能夠得到良好的結(jié)果。