2019 年江蘇省獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測能力比對

徐小艷，陳昌海，王相子，開 妍，邱 冬

（江蘇省動物疫病預(yù)防控制中心，江蘇南京 210036）

2019 年6 月，根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部辦公廳和江蘇省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳有關(guān)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測能力比對的文件要求，江蘇省動物疫病預(yù)防控制中心組織實(shí)施了2019 年度江蘇省獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測能力比對。全省12 個(gè)市級、65 個(gè)縣級實(shí)驗(yàn)室參加了比對，均在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成了各項(xiàng)比對任務(wù)，比對結(jié)果較客觀地反映了江蘇省獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室的檢測能力現(xiàn)狀。為更好地發(fā)揮比對結(jié)果作用，本文對此次比對結(jié)果進(jìn)行了分析和討論，旨在進(jìn)一步做好獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室管理工作，促進(jìn)全省獸醫(yī)系統(tǒng)檢測能力提升。

1 材料與方法

1.1 比對項(xiàng)目

根據(jù)市級和縣級實(shí)驗(yàn)室檢測能力的不同，本次比對設(shè)置了市級比對項(xiàng)目和縣級比對項(xiàng)目兩大類。市級設(shè)置了高致病性豬藍(lán)耳病病毒檢測、非洲豬瘟病毒檢測、豬偽狂犬病gE 抗體檢測和新城疫抗體檢測4 個(gè)項(xiàng)目；縣級設(shè)置了新城疫抗體檢測、非洲豬瘟病毒檢測、豬偽狂犬病gB 抗體檢測和小反芻獸疫抗體檢測4 個(gè)項(xiàng)目。

1.2 比對方法、標(biāo)準(zhǔn)和試劑

針對不同的比對項(xiàng)目，明確了各自檢測方法，采用國家標(biāo)準(zhǔn)或國家參考實(shí)驗(yàn)室推薦的方法進(jìn)行比對，涉及5 種動物疫病、5 種檢測方法。所用試劑由參加比對的實(shí)驗(yàn)室自行準(zhǔn)備（表1）。

1.3 比對樣品

由江蘇省動物疫病預(yù)防控制中心完成所有比對項(xiàng)目樣品的制備、標(biāo)定、分裝、編號和保存。分發(fā)時(shí)將樣品用裝有冰袋的冷藏箱運(yùn)送，由各個(gè)市級實(shí)驗(yàn)室派專人在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)統(tǒng)一領(lǐng)取本市所有樣品，并在當(dāng)日分發(fā)到轄區(qū)內(nèi)各個(gè)實(shí)驗(yàn)室。

1.3.1 高致病性豬藍(lán)耳病病毒檢測樣品 參考值為陽性和陰性的高致病性豬藍(lán)耳病疫苗稀釋物樣品中隨機(jī)抽取5 份，組成1 組樣品。

1.3.2 非洲豬瘟病毒檢測樣品 參考值為陽性和陰性的盲樣中隨機(jī)抽取5 份，組成1 組樣品。

1.3.3 豬偽狂犬病gE 抗體檢測樣品 參考值為陽性和陰性的豬血清樣品中隨機(jī)抽取5 份，組成1組樣品。

1.3.4 豬偽狂犬病gB 抗體檢測樣品 參考值為陽性和陰性的豬血清樣品中隨機(jī)抽取5 份，組成1組樣品。

1.3.5 新城疫抗體檢測樣品 參考值為3log2、6log2、9log2 的雞血清樣品中隨機(jī)抽取5 份，組成1 組樣品。

1.3.6 小反芻獸疫抗體檢測樣品 參考值為陽性和陰性的羊血清樣品中隨機(jī)抽取5 份，組成1 組樣品。

1.4 結(jié)果評判標(biāo)準(zhǔn)

高致病性豬藍(lán)耳病病毒檢測、非洲豬瘟病毒檢測、豬偽狂犬病gE 抗體檢測、豬偽狂犬病gB抗體檢測和小反芻獸疫抗體檢測項(xiàng)目的評判標(biāo)準(zhǔn)：樣品檢測值與參考值完全一致判為正確，即陽性樣品的檢測值應(yīng)為“陽性”，陰性樣品的檢測值應(yīng)為“陰性”，否則判為錯(cuò)誤；新城疫抗體檢測項(xiàng)目的評判標(biāo)準(zhǔn)：檢測值與參考值的偏差不超過1log2，判為正確，否則判為錯(cuò)誤。

2 比對結(jié)果

2.1 總體情況

根據(jù)比對結(jié)果評判標(biāo)準(zhǔn)，在12 個(gè)市級、65個(gè)縣級實(shí)驗(yàn)室中，有12 個(gè)市級和60 個(gè)縣級實(shí)驗(yàn)室所有比對項(xiàng)目檢測結(jié)果全部正確，其余5 個(gè)縣級實(shí)驗(yàn)室部分比對項(xiàng)目檢測值存在較大偏差；整體樣品正確率為99.32%，實(shí)驗(yàn)室正確率為93.51%（表2）。

2.2 市級實(shí)驗(yàn)室比對

12 個(gè)市級實(shí)驗(yàn)室分別進(jìn)行了高致病性豬藍(lán)耳病病毒檢測、非洲豬瘟病毒檢測、豬偽狂犬病gE抗體檢測和新城疫抗體檢測4 個(gè)項(xiàng)目的比對，所有檢測值全部正確，樣品正確率為100%，實(shí)驗(yàn)室正確率為100%。

2.3 縣級實(shí)驗(yàn)室比對結(jié)果

65 個(gè)縣級實(shí)驗(yàn)室參加了豬偽狂犬病gB 抗體檢測、新城疫抗體檢測和小反芻獸疫抗體檢測比對，21 個(gè)縣級實(shí)驗(yàn)室參加了非洲豬瘟病毒檢測比對。有60 個(gè)實(shí)驗(yàn)室各個(gè)比對項(xiàng)目檢測值均正確，實(shí)驗(yàn)室正確率為92.31%。個(gè)別實(shí)驗(yàn)室檢測值出現(xiàn)較大偏差，1 個(gè)實(shí)驗(yàn)室非洲豬瘟病毒、3 個(gè)實(shí)驗(yàn)室豬偽狂犬病gB 抗體、1 個(gè)實(shí)驗(yàn)室新城疫抗體檢測值出現(xiàn)較大偏差，樣品正確率為99.17%（表3）。

表3 縣級實(shí)驗(yàn)室檢測能力比對結(jié)果

3 討論

從比對結(jié)果來看，整體樣品正確率為99.32%，實(shí)驗(yàn)室正確率為93.51%，說明參加比對的實(shí)驗(yàn)室均具備正常開展主要?jiǎng)游镆卟”O(jiān)測和檢測的能力與條件，對實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理較為重視，其檢測能力與技術(shù)水平可以滿足工作需要。需要關(guān)注的是，仍有個(gè)別縣級實(shí)驗(yàn)室個(gè)別比對項(xiàng)目檢測值存在較大偏差，說明這些實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理和檢測能力水平有待進(jìn)一步提高。

在比對項(xiàng)目的設(shè)置上，根據(jù)當(dāng)前非洲豬瘟疫情流行現(xiàn)狀，首次在全省獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測能力比對中設(shè)置非洲豬瘟病毒檢測項(xiàng)目。在參加該項(xiàng)目比對的33 個(gè)實(shí)驗(yàn)室中，有32 個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢測值全部正確，實(shí)驗(yàn)室正確率為96.97%（32/33），有兩份樣品檢測值出現(xiàn)較大偏差，樣品正確率為98.79%（163/165）。同時(shí)，密切關(guān)注常見動物疫病檢測能力，設(shè)置了高致病性豬藍(lán)耳病病毒檢測、新城疫抗體檢測、小反芻獸疫抗體檢測比對項(xiàng)目；著力推進(jìn)動物疫病凈化工作，設(shè)置了豬偽狂犬病gE 抗體檢測、豬偽狂犬病gB 抗體檢測項(xiàng)目，提高了檢測能力比對工作的科學(xué)性、實(shí)用性和創(chuàng)造性，也取得了較滿意的效果。

按市級和縣級兩類實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，本次比對涉及12 個(gè)市級和65 個(gè)縣級實(shí)驗(yàn)室。12 個(gè)市級實(shí)驗(yàn)室各個(gè)比對項(xiàng)目檢測值均正確，樣品正確率為100%，實(shí)驗(yàn)室正確率為100%；65 個(gè)縣級實(shí)驗(yàn)室在4 個(gè)比對項(xiàng)目中，只有小反芻獸疫抗體檢測項(xiàng)目的檢測值全部正確，在非洲豬瘟病毒檢測、豬偽狂犬病gB 抗體檢測和新城疫抗體檢測3 個(gè)項(xiàng)目中，均出現(xiàn)個(gè)別實(shí)驗(yàn)室個(gè)別檢測值出現(xiàn)較大偏差的情況，樣品正確率為99.17%，實(shí)驗(yàn)室正確率為92.31%。結(jié)果表明：市級和縣級實(shí)驗(yàn)室檢測能力均達(dá)到較高水平，但市級實(shí)驗(yàn)室整體檢測能力高于縣級。這與之前的分析結(jié)果一致[1-2]，也進(jìn)一步說明持續(xù)加強(qiáng)縣級實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的重要性和必要性。

按不同檢測方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，將高致病性豬藍(lán)耳病病毒檢測和非洲豬瘟病毒檢測歸為PCR方法，將豬偽狂犬病gE 抗體檢測、豬偽狂犬病gB 抗體檢測和小反芻獸疫抗體檢測歸為ELISA 方法，將新城疫抗體檢測歸為HI 方法。三類方法的樣品正確率分別為99.11%、99.15%和99.69%，均處于較高水平。但65 個(gè)縣級實(shí)驗(yàn)室中，有44 個(gè)尚不能正常開展熒光PCR 檢測，且大多數(shù)縣級實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員對于分子生物學(xué)檢測比較陌生，其操作水平和理論知識儲備都存在很大上升空間，需要在完善分子生物學(xué)相關(guān)儀器設(shè)備配置的基礎(chǔ)上，通過理論培訓(xùn)、實(shí)際操作等形式，進(jìn)一步提高學(xué)習(xí)能力。

本次比對，各實(shí)驗(yàn)室自行準(zhǔn)備的檢測試劑涉及不同生產(chǎn)廠家，不同批次，但檢測結(jié)果整體情況較好，各比對項(xiàng)目樣品正確率均高于98%，說明目前的高致病性豬藍(lán)耳病病毒檢測、非洲豬瘟病毒檢測、豬偽狂犬病gE 抗體檢測、豬偽狂犬病gB抗體檢測、新城疫抗體檢測和小反芻獸疫抗體檢測試劑質(zhì)量較好。個(gè)別縣級實(shí)驗(yàn)室的個(gè)別比對項(xiàng)目檢測值出現(xiàn)較大偏差，可能是因?yàn)閮x器設(shè)備配置不到位、理論知識學(xué)習(xí)不充分、技術(shù)人員操作不熟練等原因造成。

為進(jìn)一步有效提升獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測能力，發(fā)揮其在動物疫病防控中的重要作用，應(yīng)加強(qiáng)以下工作：

一要高度重視檢測能力比對工作。切實(shí)加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)管理，落實(shí)相對穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)室人員，保證實(shí)驗(yàn)室工作的連續(xù)性，采取各種措施減少拆遷、搬遷等不利因素的影響，保證實(shí)驗(yàn)室工作正常有序開展。本次比對中，個(gè)別市級和少量縣級實(shí)驗(yàn)室由于拆遷、搬遷等原因未參加比對，或未按有關(guān)要求開展非洲豬瘟病毒檢測工作，這些市、縣要高度重視，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)、儀器設(shè)備配置、人員配備，切實(shí)提高動物疫病防控能力。

二要強(qiáng)化整改完善。結(jié)合檢測能力比對工作開展情況，認(rèn)真總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，比對結(jié)果偏差較大的要深入分析，查找原因，研究制定改進(jìn)和提高檢測能力的措施，并狠抓落實(shí)，切實(shí)提高獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的能力和水平。

三要強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理。對照有關(guān)要求，采取針對性措施，進(jìn)一步健全完善實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系。

四要強(qiáng)化培訓(xùn)指導(dǎo)。定期組織開展業(yè)務(wù)培訓(xùn)，提高實(shí)驗(yàn)室人員專業(yè)理論知識水平、設(shè)備維護(hù)使用能力、實(shí)驗(yàn)操作技能，全面提升實(shí)驗(yàn)室管理和運(yùn)行水平。