SULT2A1、Bcl-2蛋白在子宮肌瘤組織中的表達及意義

(泰州市人民醫(yī)院婦科，江蘇 泰州225300)

流行病學研究顯示，子宮肌瘤的發(fā)病率在合并有相關高?；A因素的育齡期女性群體中進一步上升[1]。子宮肌瘤的發(fā)生發(fā)展，能夠?qū)е禄颊呃^發(fā)性不孕的發(fā)生，增加了遠期臨床結局惡化的風險[2]。在探討子宮肌瘤發(fā)病的基礎性生物學領域中，發(fā)現(xiàn)細胞因子的改變，能夠通過影響到子宮平滑肌細胞的異常增殖，影響到平滑肌細胞的凋亡，進而參與到子宮肌瘤的發(fā)生過程。硫酸基轉移酶2A1(Sulfate transferase 2A1,SULT2A1)的表達下降，能夠通過誘導雌激素的磷酸化障礙，提高游離的雌激素水平，進而促進子宮平滑肌細胞膜上雌激素受體敏感性的上升，促進了平滑肌細胞的持續(xù)性增殖[3]；B淋巴細胞瘤-2基因(B lymphocytoma-2 gene,Bcl-2)的表達上升，能夠通過抑制平滑肌細胞的凋亡，降低平滑肌細胞的分解破壞速度，進而促進早期平滑肌細胞的異常分裂[4]。為了揭示SULT2A1、Bcl-2的表達與子宮肌瘤的病情關系，從而為臨床上子宮肌瘤的診療及預后隨訪提供參考，本次研究選取2017年1月至2018年9月我院保存的子宮肌瘤標本110例，探討了SULT2A1、Bcl-2的表達與子宮肌瘤的病情關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2018年9月我院保存的子宮肌瘤標本110例(子宮肌瘤組)，同時選取正常子宮肌層組織70例(正常子宮肌層組)，兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表1。納入標準：(1)均經(jīng)病理學確診；(2)術前3個月內(nèi)未使用過激素類藥物；(3)臨床資料保存完整。排除標準：合并有甲狀腺疾病、惡性腫瘤、糖尿病等嚴重基礎性疾病。

表1 兩組一般資料比較 (例)

1.2 實驗方法

石蠟包埋，連續(xù)性切片厚度3 μm，60 ℃烤片60 min，常規(guī)脫水后，采用EDTA進行抗原修復，加入10 μL蒸餾水，加入10%過氧化氫5il，室溫下孵育30 min,磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌3次*3 min，加入SULT2A1、Bcl-2蛋白的單克隆抗體(1∶1 000購自羅氏檢測公司)，37 ℃孵育60 min，PBS洗滌3次*3 min，加入HRP標記的SULT2A1、Bcl-2蛋白二抗(1∶2 000購自羅氏公司)，37 ℃孵育20 min，PBS洗滌3次*3 min，加入DAB后，PBS沖洗和復染，脫水后在顯微鏡下進行觀察。

1.3 結果判斷

細胞核內(nèi)或胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細胞，根據(jù)半定量積分法，對染色強度和陽性細胞比例進行評分，染色強度：無著色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；陽性細胞比例：<5%為0分，5%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，>75%為4分。最終得分為染色強度和陽性細胞比例得分之積，分數(shù)<4分為陰性表達，≥4分為陽性表達。

1.4 統(tǒng)計學處理

采用SPSS19.0進行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料比較使用χ2檢驗，相關性采用Spearman秩相關分析，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 子宮肌瘤組和正常子宮肌層組SULT2A1、Bcl-2蛋白表達

子宮肌瘤組SULT2A1陽性表達率明顯低于正常子宮肌層組(P<0.05)，而Bcl-2蛋白陽性表達率明顯高于正常子宮肌層組(P<0.05)，見表2。

表2 子宮肌瘤組和正常子宮肌層組SULT2A1、Bcl-2蛋白表達 (例,%)

2.2 子宮肌瘤組不同分期SULT2A1、Bcl-2蛋白表達

子宮肌瘤組分泌期Bcl-2蛋白陽性表達率明顯高于增生期(P<0.05)；子宮肌瘤組分泌期和增生期SULT2A1蛋白陽性表達率比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表3。

表3 子宮肌瘤組不同分期SULT2A1、Bcl-2蛋白表達 (例,%)

2.3 不同大小子宮肌瘤SULT2A1、Bcl-2蛋白表達

直徑<2 cm和≥2 cm子宮肌瘤組織SULT2A1、Bcl-2蛋白陽性表達率比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表4。

表4 不同大小子宮肌瘤SULT2A1、Bcl-2蛋白表達 (例,%)

2.4 相關性分析

子宮肌瘤組織SULT2A1和Bcl-2蛋白表達無相關性(rs=-0.008，P>0.05)，見表5。

表4 相關性分析

3 討 論

遺傳易感性因素、雌激素受體敏感性的改變，均能夠促進子宮肌瘤的發(fā)生，在年齡大于35歲的育齡期女性人群中，子宮肌瘤的發(fā)病率可進一步的上升[5]。臨床上子宮肌瘤的發(fā)生，不僅能夠嚴重影響到患者的工作學習，同時還能夠增加子宮肌瘤交界性或者惡性病變的風險，增加子宮肌瘤肉瘤樣變的可能[6-7]。現(xiàn)階段缺乏對于子宮肌瘤發(fā)病或者預后評估的生物學因子，而通過對于相關蛋白的分析，能夠為臨床上子宮肌瘤的預防、治療后復發(fā)的隨訪提供依據(jù)。部分研究者認為，雌激素受體a的表達，能夠在子宮肌瘤的發(fā)生過程中發(fā)揮作用。但雌激素受體a的表達與子宮肌瘤患者的臨床病理特征并無明顯的關系。本次研究通過對于子宮肌瘤患者體內(nèi)SULT2A1、Bcl-2的表達分析研究，不僅能夠揭示子宮肌瘤的發(fā)病機理，同時能夠為臨床上子宮肌瘤的診療提供理論方面的參考。

SULT2A1是磷酸基團轉移酶，其能夠通過對于雌激素及睪酮等激素受體的修飾，進而影響到雌激素的作用效果，干預到雌激素下游信號通路的激活程度。SULT2A1結構上含有的多重絲氨酸結構，能夠通過磷酸修飾平滑肌細胞膜上的糖蛋白，進而導致雌激素敏感性的改變[8]；Bcl-2是凋亡相關調(diào)控因子，其能夠通過抑制上皮細胞的凋亡，降低子宮平滑肌細胞的凋亡比例，促進平滑肌細胞間質(zhì)成分的纖維化，進而導致肌瘤的發(fā)生發(fā)展。相關臨床研究還認為，Bcl-2能夠影響到子宮肌瘤的新生血管的形成，促進平滑肌組織的血流灌注[9]。相關研究已經(jīng)探討了SULT2A1的表達與子宮肌瘤的關系，認為在子宮肌瘤患者中，SULT2A1的表達下降與肌瘤的早期發(fā)生密切相關[10]，但缺乏對于SULT2A1和Bcl-2在子宮肌瘤患者不同月經(jīng)周期中的分析。

本次研究通過免疫組化研究了SULT2A1和Bcl-2在子宮肌瘤病灶組織中的表達情況，發(fā)現(xiàn)在子宮肌瘤病例組患者中，SULT2A1蛋白的表達陽性率明顯的下降，而Bcl-2蛋白的表達陽性率明顯的上升，提示了SULT2A1和Bcl-2的差異性表達均能夠顯著影響到子宮肌瘤的發(fā)生發(fā)展過程。分析其內(nèi)在的原因，考慮由于SULT2A1和Bcl-2的下列幾個方面的病理性改變有關[11-14]：(1)SULT2A1的表達下降，失去了其對于雌激素下游NF-KB信號通路的修飾調(diào)控作用，導致平滑肌細胞核DNA的分裂速度明顯加快；(2)Bcl-2的表達上升，能夠提高平滑肌細胞周期中G1/S期的比例，提高了平滑肌細胞的持續(xù)性擴增能力，最終促進了肌瘤瘤體的形成。王隨鄖等[15]研究者也發(fā)現(xiàn)，在子宮肌瘤病灶組織中，Bcl-2蛋白的表達陽性率可平均上升45%以上，在多發(fā)性子宮肌瘤或者子宮肌瘤病程較長的患者中，Bcl-2蛋白的表達陽性率可進一步的上升。本次研究還探討了不同月經(jīng)周期中SULT2A1和Bcl-2的表達，發(fā)現(xiàn)在分泌期患者中，Bcl-2蛋白的表達陽性率明顯的上升，高于增生期患者，統(tǒng)計學差異顯著，提示了月經(jīng)周期可能影響到了Bcl-2蛋白的表達，這主要由于不同月經(jīng)周期的肌瘤組織，其瘤體細胞膜受到周期性雌孕激素的調(diào)控，導致凋亡相關蛋白Bcl-2的轉錄活性明顯上升，最終促進了Bcl-2蛋白的合成和釋放。但本次研究并未發(fā)現(xiàn)SULT2A1的表達與月經(jīng)周期的關系，提示SULT2A1蛋白的表達具有一定的穩(wěn)定性。在不同子宮肌瘤病灶直徑的患者中，并未發(fā)現(xiàn)SULT2A1和Bcl-2的表達差異，提示SULT2A1和Bcl-2的表達與子宮肌瘤患者的一般性臨床特征并無明顯的關系。

綜上所述，在子宮肌瘤患者病灶組織中，SULT2A1蛋白的表達明顯下降，而Bcl-2蛋白的表達明顯上升，說明SULT2A1和Bcl-2與子宮肌瘤發(fā)生發(fā)展有密切關系。