抑制素α、A103、鈣網(wǎng)膜蛋白聯(lián)合檢測在腎上腺皮質(zhì)腺瘤與腎上腺良性嗜鉻細胞瘤鑒別診斷中的應(yīng)用價值

霍亞杰，康志強，何麗，羅方，許玲玉,毛雨

(鄭州大學(xué)附屬鄭州中心醫(yī)院內(nèi)分泌科，河南 鄭州 450000)

腎上腺腫瘤為臨床常見腫瘤類型，根據(jù)其組織起源可分為腎上腺髓質(zhì)腫瘤與腎上腺皮質(zhì)腫瘤[1-3]。 腎上腺皮質(zhì)腺瘤(Adrenal cortical adenoma，ACA)是一種腎上腺皮質(zhì)良性上皮性腫瘤，按照有無分泌功能可分為功能性與非功能性腫瘤，具有較高發(fā)病率，病變特點為瘤細胞細胞質(zhì)內(nèi)脂質(zhì)較為豐富，形成索狀、巢狀并伴有竇隙樣結(jié)構(gòu)及豐富血管[4-6]。腎上腺良性嗜鉻細胞瘤 (Adrenal benign phaeochromocytoma，ABP)為臨床常見腎上腺髓質(zhì)良性腫瘤，瘤組織形態(tài)類似ACA，尤其是瘤細胞脂質(zhì)變性時，細胞外觀呈透明狀，與ACA相似，二者鑒別診斷難度較大[7-9]?，F(xiàn)階段臨床鑒別ACA、ABP仍以組織化學(xué)技術(shù)為主，但傳統(tǒng)組化方法銀染、嗜鉻反應(yīng)缺乏特異性，多已棄用。隨著免疫組化技術(shù)的廣泛應(yīng)用，用于腎上腺腫瘤的免疫標(biāo)記種類較多，臨床上通常聯(lián)合采用多種免疫標(biāo)記診斷鑒別ACA、ABP[10-12]。本研究通過測定腎上腺髓質(zhì)、皮質(zhì)腫瘤組織中抑制素α(Inhibin α)、抗黑色素抗原單克隆抗體(A103)、鈣網(wǎng)膜蛋白(Calretinin)表達情況，旨在探究其在ACA、ABP鑒別診斷中的應(yīng)用價值?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2010年4月-2017年8月我院病理科62例手術(shù)存檔腎上腺標(biāo)本，其中ACA標(biāo)本28例，男10例，女18例；年齡12～70歲，平均48.62±9.12 歲；腫瘤最大直徑 1～10 cm，平均 3.89±0.56cm；其中8例伴Cushing綜合征，17例伴Conn綜合征；3例無功能者；ABP標(biāo)本28例，男12例，女 16例；年齡 12～71 歲，平均 48.96±9.47 歲；腫瘤最大直徑 8～13 cm，平均 10.69±2.30cm；正常腎上腺標(biāo)本6例，男2例，女4例；年齡15～68歲，平均48.96±9.47歲。本研究經(jīng)我院倫理協(xié)會審核同意。

1.2 免疫組化法 62例手術(shù)存檔腎上腺標(biāo)本均通過中性福爾馬林固定 (體積分數(shù)為10%)，石蠟包埋，連續(xù)切成3 μm厚薄片，采用MaxVision兩步法進行免疫組化操作，操作步驟均按照說明書進行；陽性對照選擇已知陽性切片，選擇PBS代替一抗作陰性對照，研究標(biāo)本、對照切片均于同一條件下染色。 結(jié)果判定：Inhibin α、A103、Calretinin 均表達于細胞質(zhì)。綜合判斷染色強度及高倍鏡下陽性細胞百分率。(1)染色陽性為細胞質(zhì)呈現(xiàn)為淺黃色至棕褐色，按染色強度評分：0分：無染色；1分：淺黃色；2分：棕黃色；3分：棕褐色。(2)高倍鏡下隨機選取5個視野陽性細胞數(shù)之平均數(shù)即為該例標(biāo)本陽性細胞數(shù)結(jié)果，根據(jù)陽性細胞百分比評分：0分：≤5%；1分：5%＜陽性細胞百分比≤25%；2分：25%＜陽性細胞百分比≤50%；3分：50%＜陽性細胞百分比≤75%；4分：＞75%。根據(jù)染色強度與陽性細胞百分率評分之和判定陽性，陰性(-)：0分；弱陽性(+)：2～3 分；陽性(++)：4～5 分；強陽性(+++)：6～7 分，其中弱陽性、陽性及強陽性均按照陽性計數(shù)。

2 結(jié)果

2.1 不同腎上腺組織中 Inhibin α、A103、Calretinin表達情況 ACA組織中 Inhibin α、A103、 Calretinin陽性表達率均較ABP高(P＜0.05)；腎上腺組織中 Inhibin α、A103、Calretinin 陽性表達與 ACA 患者臨床特征無關(guān)(P＞0.05)。見表1、表2。

表1 不同腎上腺組織中Inhibin α、A103、Calretinin表達情況

續(xù)表1

表2 Inhibin α、A103、Calretinin表達情況與ACA患者臨床特征關(guān)系

2.2 Inhibin α、A103、Calretinin 單一及聯(lián)合診斷價值 Inhibin α、A103、Calretinin 聯(lián)合鑒別診斷 ACA、ABP敏感性 96.43%、準確度 92.86%均較A103、Calretinin 單獨鑒別診斷高，P＜0.05。 見表 3。

3 討論

Inhibin α 系轉(zhuǎn)化生長因子 β(TGF-β)超家族成員，是一種二聚體蛋白質(zhì)激素，由α、β兩個亞單位組成，其中Inhibin α僅一種分子結(jié)構(gòu)，位于人體染色體2q33，相對分子量18000，多由睪丸Sertoli細胞、卵巢粒層細胞合成，對垂體促性腺激素合成、分泌具有明顯抑制作用，以往多用于鑒別診斷卵巢顆粒細胞瘤和癌[13-15]。近年來，隨著臨床研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)Inhibin α可表達于正常腎上腺皮質(zhì)、皮質(zhì)腫瘤及皮質(zhì)結(jié)狀增生中，且腎上腺皮質(zhì)中可檢測出該激素mRNA。本研究中，Inhibin α在正常腎上腺皮質(zhì)中陽性表達率高達100%，且正常腎上腺皮質(zhì)中Inhibin α表達多以束狀帶內(nèi)側(cè)、網(wǎng)狀帶為主，而束狀帶外側(cè)及球狀帶基本不表達。ACA組織中Inhibin α陽性率85.71%，多表現(xiàn)為中等強度，而在ABP組織中陽性率僅3.57%，與孔璐璐等學(xué)者[16]研究結(jié)果基本一致。A103為抗黑色素原單克隆抗體，多用于伴有黑色素細胞分化的腫瘤與惡性黑色素瘤診斷中，同時還可用于產(chǎn)生類固醇激素腫瘤及具有血管周上皮樣細胞分化腫瘤的鑒別診斷。早在1998年，國外學(xué)者Busam K J等[17]即報道了A103在類固醇細胞及腎上腺皮質(zhì)腫瘤中的免疫反應(yīng)，同時還表示，其在腎上腺皮質(zhì)腫瘤中陽性表達率較高，而在ABP及其他上皮性腫瘤中均為陰性，提示A103可用于診斷腎上腺皮質(zhì)腫瘤。隨著臨床上對A103研究的不斷深入，孔璐璐等學(xué)者表明ACA組織中A103陽性表達率僅58.3%，僅可作為ACA輔助診斷指標(biāo)。本研究中，ACA組織中A103陽性表達率雖為50.00%，但A103在ABP組織中均無表達，可見A103在ACA、ABP鑒別診斷中仍具有較高價值。此外，A103陽性表達與ACA患者臨床特征并無相關(guān)性。Calretinin系激動蛋白C超家族，是一種具有EF手型結(jié)構(gòu)的細胞內(nèi)鈣結(jié)合蛋白，通常用于標(biāo)記卵巢性索間質(zhì)、間皮、神經(jīng)的腫瘤，隨著臨床研究的不斷深入，國外學(xué)者指出，Calretinin在腎上腺皮質(zhì)腫瘤細胞中同樣處于高陽性表達狀態(tài)[18]。本研究中ACA組織中陽性表達率為71.43%，且多為陽性，而ABP組織中僅3例為陽性表達，且均為弱陽性。因此，Calretinin可用于鑒別診斷ACA、ABP。同時本研究表明，Calretinin陽性表達與患者臨床病理特征無關(guān)。 Inhibin α、A103、Calretinin 聯(lián)合鑒別診斷ACA、ABP敏感性96.43%、準確度92.86%均較A103、Calretinin單獨鑒別診斷高，提示聯(lián)合采用Inhibin α、A103、Calretinin 鑒別診斷 ACA、ABP，可進一步提高診斷敏感性及準確度。

表3 Inhibin α、A103、Calretinin單一及聯(lián)合診斷價值

綜上所述，Inhibin α、A103、Calretinin 聯(lián)合應(yīng)用于ACA、ABP鑒別診斷中，診斷敏感性及準確度較高，值得臨床推廣應(yīng)用。