一例犬耐甲氧西林金黃色葡萄球菌感染的診斷

趙景利/遼寧省大連市長海縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所

劉華勇/遼寧省大連博愛動物醫(yī)院

2018年7月，大連市某動物醫(yī)院接診皮膚病患犬一例，初診為蠕形螨與細菌混合感染，用多拉菌素與頭孢噻肟治療一段時間后，皮膚仍不斷出現(xiàn)膿皰，采集皮膚病料進行實驗室檢驗，分離到一株耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA），根據(jù)藥敏試驗結果采用磷霉素配合萬古霉素治療后治愈，對該犬的診治過程報告如下。

一、發(fā)病情況及早期治療

一只6月齡臘腸犬，皮膚多處可見數(shù)量不等的丘疹、紅斑、膿皰，嚴重的部位伴有脫毛、液體滲出。初步診斷為蠕形螨和細菌混合感染。皮下注射多拉菌素，同時靜脈滴注頭孢噻肟，一周后皮膚紅斑、丘疹有消退，但皮膚膿皰仍有蔓延。

二、實驗室檢驗

1.樣本采集與鏡檢。用無菌棉棒擦拭皮膚膿皰液及滲出液獲取樣本數(shù)份，首先將樣本涂片，革蘭氏染色鏡檢，可見G+球菌，散在或三兩個聚集，鏡檢細菌種類單一。

2.細菌分離培養(yǎng)。將樣本在含5%綿羊血的TSA上劃線，37℃培養(yǎng)24h后，可見直徑2mm左右、扁平、黃白色、邊緣整齊的圓形菌落，菌落周圍有β溶血環(huán)。菌株在血平板上的形態(tài)見圖1。將分離培養(yǎng)的細菌涂片，革蘭氏染色鏡檢，可見G+排列成葡萄狀的球菌。根據(jù)細菌培養(yǎng)特征和形態(tài)特征疑似金黃色葡萄球菌。

3.細菌鑒定。將分離到的細菌在TSA上純化一代，將純化的細菌接種7.5%NaCl肉湯，37℃培養(yǎng)24h后肉湯呈均勻混濁。取商品化凍干兔血漿一支，用0.5mL滅菌生理鹽水完全溶解，加入肉湯培養(yǎng)物0.3mL，混勻，37℃培養(yǎng)2h后兔血漿呈凝固狀。根據(jù)7.5%NaCl肉湯生長特征和血漿凝固酶試驗陽性初步鑒定為金黃色葡萄球菌。挑取18～24h培養(yǎng)的新鮮菌落用0.45%NaCl溶液配成0.5個麥氏單位的菌懸液，將菌懸液灌注到梅里埃VITEK2革蘭氏陽性菌生化鑒定卡中，經(jīng)梅里埃VITEK2全自動細菌鑒定系統(tǒng)鑒定為金黃色葡萄球菌。

4.藥敏試驗。先進行耐甲氧西林/苯唑西林的金黃色葡萄球菌（MRSA）的測定：將純化的金黃色葡萄球菌用滅菌生理鹽水制成0.5個麥氏單位的菌懸液，用滅菌棉棒蘸取菌懸液涂布在含4%NaCl（W/V）的MH瓊脂平板上，貼上青霉素（含藥量為10IU）和苯唑西林（含藥量為1μg）藥敏紙片，35℃培養(yǎng)24h，結果兩種藥敏紙片的抑菌圈均為0。分離菌鑒定為耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）。MRSA測定試驗如圖2所示。選用β-內酰胺類和頭孢類抗生素以外的其他抗生素繼續(xù)做藥敏試驗，結果僅美羅培南、磷霉素、萬古霉素表現(xiàn)為敏感。

三、更換抗生素治療

MRSA具有廣譜耐藥性，對β-內酰胺類和頭孢類抗生素均耐藥，已知碳青霉烯類對MRSA抗菌作用也較差，因此雖然本次試驗美羅培南表現(xiàn)敏感，仍不宜選用。最終選用磷霉素鈉配合萬古霉素靜脈滴注，1周后患犬痊愈。

圖1 分離菌在5%綿羊血TSA上的形態(tài)

圖2 MRSA測定試驗

四、小結

犬感染螨蟲后，被螨蟲寄生的毛囊膨脹，破潰，易引起細菌感染，螨蟲也產生免疫抑制性血清因子助長細菌感染。本病例早期采用抗蠕蟲藥與抗菌素的聯(lián)合治療方案是正確的，但由于患犬感染了MRSA，導致頭孢類抗菌素治療失敗。

MRSA是我國人醫(yī)臨床重要的致病菌之一，MRSA具有多重耐藥性，對青霉素類、頭孢菌素類、氯霉素類、氨基糖苷類、四環(huán)素類、大環(huán)內酯類、喹諾酮類以及林可霉素都不敏感，不僅能引起嚴重的臨床感染，還可能引發(fā)公共衛(wèi)生問題。獸醫(yī)臨床對MRSA報道較少。近年來動物疫控部門對細菌耐藥性監(jiān)測發(fā)現(xiàn)動物源細菌耐藥性逐漸增強，新的耐藥菌株不斷出現(xiàn)，因此廣大獸醫(yī)臨床工作者要重視動物細菌學檢驗，必要時運用藥敏試驗篩選敏感藥物用于臨床治療，避免盲目、超量使用抗菌藥物，以免加劇細菌的耐藥性，發(fā)現(xiàn)耐藥菌株要做好患病動物的隔離及飼養(yǎng)場所、用具的消毒工作，避免動物源耐藥菌株向人類傳播。