核酸檢驗(yàn)與酶聯(lián)免疫檢測(cè)血液病毒的應(yīng)用及檢驗(yàn)準(zhǔn)確率分析

侯敖雪

（營(yíng)口經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)中心醫(yī)院（營(yíng)口市第六人民醫(yī)院），遼寧 營(yíng)口 115007）

輸血為HBV、HCV感染的主要途徑，因此強(qiáng)化抗原、抗體的檢驗(yàn)，可顯著降低血液輸血中的病毒感染。隨著醫(yī)療水平的不斷提高，病毒核酸提取技術(shù)的持續(xù)性完善，促使血液篩查的核酸檢測(cè)措施廣泛應(yīng)用，核酸檢測(cè)技術(shù)相對(duì)于酶聯(lián)免疫檢測(cè)的具有更短的窗口期，可將血液檢測(cè)工作更好的落實(shí)，亦降低了檢驗(yàn)的假陽性率[1]。本研究為探討分析核酸檢驗(yàn)與酶聯(lián)免疫檢測(cè)血液病毒的應(yīng)用及檢驗(yàn)準(zhǔn)確率，回顧性本院2015年3月至2016年2月的1000例血液標(biāo)本，分別對(duì)其實(shí)施核酸檢驗(yàn)與酶聯(lián)免疫檢測(cè)檢測(cè)，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取本院收治的1000例血液標(biāo)本進(jìn)行研究（2015年3月至2016年2月），分別對(duì)其實(shí)施核酸檢驗(yàn)與酶聯(lián)免疫檢測(cè)法檢測(cè)，其中男性患者、女性患者各為658例，342例，最大年齡值為61歲，最小年齡值20歲，平均年齡值為（42.64±10.25）歲；每份血液樣品分別放置在7、5 mL真空抗凝管內(nèi)，于2～8 ℃下的環(huán)境下進(jìn)行保存。真空抗凝管（5、7 mL）的血液樣品需在3 h內(nèi)進(jìn)行血漿分離，之后予以核酸檢測(cè)措施。真空抗凝管（5、7 mL）的血液樣品需在24 h內(nèi)進(jìn)行血漿分離，之后予以酶聯(lián)免疫檢測(cè)措施。

1.2 方法：核酸檢測(cè)：在25 ℃的室溫下，對(duì)于真空抗凝管（5 mL）的血液樣本予以離心處理，時(shí)間為20 min，在2～8 ℃的冰箱內(nèi)保存[2]。在常規(guī)檢測(cè)合格后，放置儀樣品條架上，依據(jù)分配試劑程序進(jìn)行操作；加600 μL結(jié)合液及50 μL的磁珠在A號(hào)96孔，加100 μL的洗脫液在B號(hào)的96孔深孔板，對(duì)于血液樣本進(jìn)行裂解，并注意污染，將樣品裂解后，采取核酸提取儀于A號(hào)96孔深孔板，B號(hào)的96孔深孔板將核酸予以提取，同時(shí)配備核酸擴(kuò)增的反應(yīng)液。依據(jù)樣本的劑量，依據(jù)4級(jí)核酸的擴(kuò)散程序措施，于八聯(lián)管中將核酸予以提取后的結(jié)合液，將其置于PCR儀器上進(jìn)行擴(kuò)增措施，并對(duì)結(jié)果詳細(xì)記錄，隨后將呈現(xiàn)陽性的血液樣本選出予以拆分試驗(yàn)，從而確定樣本的陽性率。酶聯(lián)免疫檢測(cè)：在25 ℃的室溫下，于真空抗凝管（7 mL）的血液樣本予以離心處理，時(shí)間為20 min，在2～8 ℃的冰箱內(nèi)保存。離心處理結(jié)束后，采取全自動(dòng)加樣儀進(jìn)行自動(dòng)加樣措施，并行分析，對(duì)于檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行記錄。

1.3 觀察指標(biāo)：觀察1000例血液標(biāo)本分別經(jīng)核酸檢驗(yàn)與酶聯(lián)免疫檢測(cè)法檢測(cè)的結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：實(shí)施統(tǒng)計(jì)學(xué)SPSS17.0軟件處理，當(dāng)對(duì)比值具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義時(shí)，計(jì)數(shù)資料采用例數(shù)和百分比（%）表示，組間行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

本文研究中，在對(duì)患者乙型肝炎病毒（HBV）行核酸檢測(cè)中，其檢測(cè)陽性率為3.00%（30/1000），顯著高于行酶聯(lián)免疫法檢測(cè)的陽性率為1.20%（12/1000），P＜0.05；其于丙型肝炎病毒（HCV）檢測(cè)中，其核酸檢測(cè)的陽性率為1.80%（18/1000），與酶聯(lián)免疫法檢測(cè)的陽性率為1.60%（16/1000），對(duì)比無顯著差異，P＞0.05。

表1 對(duì)比HBV的核酸檢測(cè)、酶聯(lián)免疫法檢測(cè)的結(jié)果

表2 對(duì)比HCV的核酸檢測(cè)、酶聯(lián)免疫法檢測(cè)的結(jié)果

3 討 論

近年來，病毒標(biāo)志物的檢測(cè)主要為對(duì)抗原、抗體進(jìn)行科學(xué)的檢測(cè)[3]，于病毒侵入機(jī)體至可檢測(cè)到的病毒抗原或抗體的過程，在臨床中定義為病毒感染窗口期。于血液檢測(cè)中，血清學(xué)檢測(cè)的技術(shù)具有較長(zhǎng)的窗口期[4]，于處在窗口期的血液病毒的結(jié)果完全呈現(xiàn)陰性，然而此時(shí)患者機(jī)體已存在病毒感染[5-6]，且復(fù)制能力較強(qiáng)，因此如何將患者的窗口期進(jìn)行縮短，為臨床中提高檢測(cè)陽性率的關(guān)鍵[7-8]。

在對(duì)患者的血液病毒進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，其核酸檢測(cè)技術(shù)不斷完善，且具有較高的特異度、靈敏度。本文研究數(shù)據(jù)顯示，本文研究中，在對(duì)患者乙型肝炎病毒（HBV）行核酸檢測(cè)中，其檢測(cè)陽性率為3.00%（30/1000），顯著高于行酶聯(lián)免疫法檢測(cè)的陽性率為1.20%（12/1000），P＜0.05；其于丙型肝炎病毒（HCV）檢測(cè)中，其核酸檢測(cè)的陽性率為1.80%（18/1000），與酶聯(lián)免疫法檢測(cè)的陽性率為1.60%（16/1000），對(duì)比無顯著差異，P＞0.05，表明核酸檢測(cè)的效果更佳，本研究對(duì)于出現(xiàn)漏診的原因進(jìn)行分析，其乙肝酶聯(lián)免疫檢測(cè)法具有較長(zhǎng)的窗口期，故導(dǎo)致漏檢的概率顯著提高，且HBV存在變異株及具有一定的隱匿性，亦降低了診斷的準(zhǔn)確率。

總而言之，在對(duì)患者進(jìn)行血液病毒的檢測(cè)時(shí)，其行核酸檢驗(yàn)與酶聯(lián)免疫檢測(cè)的效果均顯著，可發(fā)揮其優(yōu)勢(shì)，但臨床中建議兩種檢測(cè)方案聯(lián)合應(yīng)用，以此提高檢測(cè)的準(zhǔn)確度，值得在臨床中推廣實(shí)施。